文摘目的转录因子-EB(transcription factor EB,TFEB)是一种调控自噬和溶酶体生物合成的重要转录因子。课题组前期研究已证明,TFEB可作为脑缺血治疗的新靶标。拟人参皂苷F-11(PF11)具有显著的脑缺血保护作用,其机制可能与其调节ALP功能相关。为此,本研究深入探究PF11调节脑缺血后ALP功能的作用是否与其调节TFEB的核转位相关及其调节机制。方法采用大鼠永久性脑缺血(pMCAO)及原代皮质神经元氧糖剥夺(OGD)模型,结合慢病毒敲低技术等观察PF11对脑缺血后TFEB核转位的调节。结果PF11(6和12 mg·kg-1,iv)显著增加pMCAO后24 h TFEB的核蛋白水平,并提高Tfeb及其下游靶基因mRNA水平。与在体结果一致,PF11(30和100μmol·L-1)可显著增加OGD后12 h原代神经元TFEB总蛋白表达及核蛋白表达,显著促进TFEB入核,改善溶酶体功能,减少自噬小体及底物的不正常积累。此外,慢病毒敲低原代神经元中的TFEB能够逆转PF11对OGD后12 h ALP功能障碍的缓解作用。进一步研究表明,calcineurin抑制剂环孢菌素(10μmol·L-1)可显著逆转PF11对神经元OGD后TFEB核转位的促进作用及其对ALP功能的调节。结论PF11可能通过促进calcineurin介导的TFEB核转位来缓解脑缺血后ALP功能障碍,进一步明确了PF11抗脑缺血的自噬相关机制。
