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李树皮坏死茎痘伴随病毒RdRp蛋白介导的体外转录体系的创建
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作者 孙庆丰 刘志菲 +3 位作者 陈妮 迟胜起 原雪峰 曹欣然 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期835-842,共8页
本研究针对李树皮坏死茎痘病毒(plumbark necrosis stempitting-associated virus,PBNSPaV),一种长线型病毒科(Closteroviridae)、葡萄卷叶病毒属(Ampelovirus)的正单链植物RNA病毒,利用大肠杆菌进行异源表达和纯化其编码的RNA依赖的RN... 本研究针对李树皮坏死茎痘病毒(plumbark necrosis stempitting-associated virus,PBNSPaV),一种长线型病毒科(Closteroviridae)、葡萄卷叶病毒属(Ampelovirus)的正单链植物RNA病毒,利用大肠杆菌进行异源表达和纯化其编码的RNA依赖的RNA聚合酶(RNA dependent RNA polymerase,RdRp)。通过体外实验发现,异源表达的重组RdRp具备复制酶活性,并能够识别PBNSPaV基因组的3'UTR区域,从而建立了RdRp介导的PBNSPaV体外转录体系。樱桃上病毒病多存在复合侵染现象,同科病毒之间的RdRp能否具有通用性未见报道,本研究选取田间对产量影响较重的同科病毒樱桃小果1号病毒(little cherry virus-1,LChV-1),利用已经建立的该病毒体外转录体系探究RdRp的通用性,实验结果显示,异源表达的LChV-1RdRp无法有效识别PBNSPaV相关启动子序列,表明该两种病毒的RdRp不具有通用性。本试验所创建的体外转录体系可用于研究PBNSPaV复制调控研究。 展开更多
关键词 李树皮坏死茎痘伴随病毒 樱桃小果1号病毒 体外转录 RNA依赖的RNA聚合酶
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兼抗4种烟草病毒病弱毒疫苗的构建与效果分析
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作者 于成明 牟金泽 +6 位作者 刘志菲 宋扬 陈呈涛 刘宏 魏学军 禚照卿 原雪峰 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2024年第5期49-57,共9页
为解决单靶标疫苗无法同时防治多种烟草病毒病的现状,以黄瓜花叶病毒Fny株系(Cucumber mosaic virus Fny,CMV_(Fny))为疫苗载体,利用重叠PCR技术在CMV_(Fny) RNA2弱毒突变体基础上以不同排列顺序插入TMV、PVY和TVBMV的部分基因组保守片... 为解决单靶标疫苗无法同时防治多种烟草病毒病的现状,以黄瓜花叶病毒Fny株系(Cucumber mosaic virus Fny,CMV_(Fny))为疫苗载体,利用重叠PCR技术在CMV_(Fny) RNA2弱毒突变体基础上以不同排列顺序插入TMV、PVY和TVBMV的部分基因组保守片段,构建了6种在本氏烟中交叉保护效果好、遗传稳定,并且对CMV、TMV、PVY和TVBMV 4种病毒均具有一定抗性的重组型病毒。6种重组型病毒对CMV单独侵染的防效均超过87%,对其他3种病毒单独侵染的防效为22.2%~46.2%,对4种病毒混合侵染的防效维持在16%~37%。本研究为烟草病毒病的防治提供了疫苗材料,丰富了植物病毒弱毒疫苗创制的实践。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 弱毒疫苗 交叉保护 多价疫苗
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