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CIK细胞联合西妥昔单抗对结直肠癌细胞的杀伤效应 被引量：3
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作者 孔娟 龙世棋 +3 位作者 王念雪 刘尧翠 王代琴 赵星 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第5期503-507,522,共6页
目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合西妥昔单抗对KRAS突变(DLD-1)及野生型(Caco-2)结直肠癌细胞的杀伤效应。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离正常外周血的单个核细胞(PBMC),在体外经抗-CD3单抗及多种细胞因子联合诱导生成CIK... 目的:探讨细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合西妥昔单抗对KRAS突变(DLD-1)及野生型(Caco-2)结直肠癌细胞的杀伤效应。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离正常外周血的单个核细胞(PBMC),在体外经抗-CD3单抗及多种细胞因子联合诱导生成CIK细胞;ELISA实验检测CIK细胞培养前后上清中干扰素-γ(IFN-γ)及转化生长因子-β(TGF-β)的水平,流式细胞检测DLD-1及Caco-2细胞表面表皮生长因子受体(EGFR)及CIK细胞表面分子的表达,采用实时无标记细胞分析仪(RTCA)检查CIK细胞联合西妥昔单抗对DLD-1及Caco-2细胞的杀伤作用。结果:DLD-1及Caco-2肿瘤细胞表面均高表达EGFR,培养前后CIK细胞亚群可见培养后CD8^+T、CD3^+CD56^+NKT及CD16^+CD56^+NK细胞比例均较培养前显著增高;与培养第一天比较,培养至第14天,CIK细胞培养基上清中细胞因子IFN-γ水平显著增高(P<0.01),而同时TGF-β的水平显著降低(P<0.01);RTCA检测发现CIK细胞联合西妥昔单抗对DLD-1及Caco-2杀伤作用明显高于单一的CIK细胞组。结论:CIK联合西妥昔单抗对EGFR受体阳性的野生型结直肠癌细胞与突变型结直肠癌细胞均有杀伤效果。 展开更多
关键词 结直肠癌 西妥昔单抗 细胞因子诱导的杀伤细胞 联合治疗
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RTCA技术检测NK细胞联合西妥昔单抗对结直肠癌细胞的杀伤效应 被引量：1
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作者 孔娟 龙世棋 +3 位作者 王念雪 王代琴 刘尧翠 赵星 《贵州医科大学学报》 CAS 2017年第5期497-502,共6页
目的:利用实时无标记细胞分析技术(RTCA)检测NK细胞介导的抗体依赖细胞介导的细胞毒(ADCC)作用。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离正常外周血的单个核细胞(PBMC),PBMC在体外经K562工程细胞及细胞因子诱导活化扩增为NK细胞(14 d),采用... 目的:利用实时无标记细胞分析技术(RTCA)检测NK细胞介导的抗体依赖细胞介导的细胞毒(ADCC)作用。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离正常外周血的单个核细胞(PBMC),PBMC在体外经K562工程细胞及细胞因子诱导活化扩增为NK细胞(14 d),采用流式细胞仪检测NK细胞表面分子及分析其纯度,采用RTCA技术及乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测NK细胞毒作用,RTCA检测NK细胞联合西妥昔单抗对结直肠癌细胞株杀伤作用。结果:流式细胞结果显示,经过14 d体外扩增培养后NK细胞的纯度可达86.2%;NK细胞毒作用结果显示,随着效靶比的增加(1∶1、5∶1、10∶1),LDH和RTCA检测NK细胞的杀伤作用趋势基本一致;RTCA结果显示NK细胞联合西妥昔单抗对结直肠癌细胞株杀伤作用明显高于单一的NK细胞组。结论:RTCA技术为检测NK细胞介导的ADCC作用提供了一种简便、动态及灵敏的新方法。 展开更多
关键词 实时无标记细胞分析 自然杀伤细胞 细胞毒性 西妥昔单抗 结直肠肿瘤
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