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甘蓝型油菜赤霉素受体基因的克隆与表达 被引量：3
1
作者 刘洋 张艺琼 +2 位作者 刘冠财 任彩霞 王茂林 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期868-874,共7页
采用同源克隆技术从甘蓝型油菜中克隆到1个赤霉素受体基因,命名为BnGID1B(GenBank登录号为HQ589349).该基因含有1个内含子和2个外显子,其cDNA序列全长1 077 bp,编码358个氨基酸,推测蛋白质的相对分子量是40 203.4 Da,理论等电点为6.26.... 采用同源克隆技术从甘蓝型油菜中克隆到1个赤霉素受体基因,命名为BnGID1B(GenBank登录号为HQ589349).该基因含有1个内含子和2个外显子,其cDNA序列全长1 077 bp,编码358个氨基酸,推测蛋白质的相对分子量是40 203.4 Da,理论等电点为6.26.序列比对结果显示,BnGID1B基因与拟南芥GID1B基因核苷酸序列的相似性为86.3%,氨基酸序列的相似性为91.64%.实时荧光定量PCR分析表明,BnGID1B基因在苗期不同组织以及不同激素处理下的表达量有所不同,主要在根中表达,下胚轴中的表达量明显低于根,可见该基因具有一定程度的组织表达特异性. 展开更多
关键词 GID1B 甘蓝型油菜 基因克隆 表达分析
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化学发光检测系统测定总甲状腺素的正确度研究 被引量：2
2
作者 石佳 卢兴兵 +5 位作者 李勤 杨舒羽 王俊卿 刘冠财 孙可其 曾素根 《检验医学》 CAS 2018年第7期629-632,共4页
目的通过3种化学发光检测系统与参考方法[同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC-MS/MS)]的比对,了解不同检测系统测定甲状腺素(T4)的正确度。方法分别采用参考方法及3种化学发光检测系统[cobas e601全自动电化学发光免疫分析仪及配套试剂... 目的通过3种化学发光检测系统与参考方法[同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC-MS/MS)]的比对,了解不同检测系统测定甲状腺素(T4)的正确度。方法分别采用参考方法及3种化学发光检测系统[cobas e601全自动电化学发光免疫分析仪及配套试剂(简称e601)、ARCHTECT i2000SR化学发光免疫分析仪及配套试剂(简称i2000SR)、IS1200全自动化学发光测定仪及配套试剂(简称IS1200)]平行测定40例新鲜人血清样本,对结果进行线性回归和偏移分析,评价3种检测系统检测T_4的正确度。结果 e601、i2000SR、IS1200与参考方法的线性回归方程分别为Y=0.958 2X+3.76、Y=0.747 7X+11.21、Y=0.992 5X+10.59,r^2分别为0.963 9、0.967 1、0.969 0,结果均为可接受。单个样本的相对偏移e601仅有1例超出限值,平均相对偏移为-0.83%;IS1200有2例超出限值,平均相对偏移为5.83%,偏移结果均为可接受;而i2000SR有27例超出限值,平均相对偏移为-15.24%,结果为不可接受。结论 e601和IS1200的正确度良好,而i2000SR虽然与参考方法的相关性较好,但出现较明显的系统偏移。 展开更多
关键词 甲状腺素 液相色谱串联质谱 化学发光 正确度
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甘蓝型油菜Tic21基因克隆、表达及拷贝数鉴定
3
作者 刘冠财 刘洋 +2 位作者 任彩霞 张浩 王茂林 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期895-900,共6页
根据拟南芥Tic21基因编码区设计引物,在甘蓝型油菜中扩增并克隆到其cDNA同源基因,命名为BnTic21(GenBank登录号HQ613273),测序结果显示该基因含有5个外显子,4个内含子,cDNA编码区大小为885 bp,编码294个氨基酸,蛋白理论分子量约为31.24... 根据拟南芥Tic21基因编码区设计引物,在甘蓝型油菜中扩增并克隆到其cDNA同源基因,命名为BnTic21(GenBank登录号HQ613273),测序结果显示该基因含有5个外显子,4个内含子,cDNA编码区大小为885 bp,编码294个氨基酸,蛋白理论分子量约为31.24kD,等电点11.10.与拟南芥、豌豆等物种氨基酸序列相似性在60.40%～87.75%之间.实时定量PCR对其不同组织特异性表达分析表明:BnTic21在油菜不同部位均有表达,茎尖最高,子叶、真叶、下胚轴次之,根表达量最低.用实时定量PCR检测表明BnTic21在甘蓝型油菜基因组中约有2个拷贝. 展开更多
关键词 甘蓝型油菜 Tic21 REAL-TIMEPCR 拷贝数
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甘蓝型油菜短花序突变的同工酶与SSR分子标记
4
作者 张庙见 左丽娟 +3 位作者 高勇 王志君 刘冠财 王茂林 《四川大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1437-1442,共6页
对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)短花序突变株系"M112"的不同时期野生型、突变体亲本及F_1代不同器官的过氧化物同工酶(POD)进行遗传分析,并对随机选取的60株具有突变性状的苗期F_2代群体的茎进行过氧化物同工酶(POD)分析.... 对甘蓝型油菜(Brassica napus L.)短花序突变株系"M112"的不同时期野生型、突变体亲本及F_1代不同器官的过氧化物同工酶(POD)进行遗传分析,并对随机选取的60株具有突变性状的苗期F_2代群体的茎进行过氧化物同工酶(POD)分析.结果表明:野生型和突变体亲本在茎部POD电泳图谱R_f 0.264处条带具有稳定的差异,所选的60株F_2代群体中有56株的带型与突变体亲本相同,说明短花序突变性状与上述POD特征酶谱连锁紧密,并可以稳定遗传.同时选取F_2代具有突变性状植株303株作为该突变基因的SSR分子标记分析群体,最终从分布于甘蓝型油菜19个连锁群的121个SSR标记中筛选到了标记Na12-C06,标记与该突变位点连锁较紧密,遗传距离为9.8cM. 展开更多
关键词 短花序突变 过氧化物酶同工酶 遗传分析 连锁群 SSR标记
原文传递
糖化血红蛋白检测系统的正确度研究 被引量：1
5
作者 石佳 李勤 +5 位作者 卢兴兵 杨舒羽 刘冠财 黄昌发 孙可其 曾素根 《标记免疫分析与临床》 CAS 2018年第3期429-432,共4页
目的通过两种糖化血红蛋白(HbA1C)检测系统与国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)推荐的参考方法,即高效液相色谱-电喷雾质谱分析法(HPLC-ESI/MS)进行比对,了解不同检测系统的正确度。方法 40例新鲜人血液样本分别使用参考方法、两种Hb... 目的通过两种糖化血红蛋白(HbA1C)检测系统与国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)推荐的参考方法,即高效液相色谱-电喷雾质谱分析法(HPLC-ESI/MS)进行比对,了解不同检测系统的正确度。方法 40例新鲜人血液样本分别使用参考方法、两种HbA1C检测系统进行平行测定,其结果进行线性回归和偏倚分析,评价两种HbA1C检测系统的正确度。结果东曹和迈克的HbA1C检测系统与参考方法的线性回归和偏移分析结果均可接受,表现出较好的正确度。结论离子交换高效液相色谱法和免疫法作为临床实验室常用的HbA1C检测方法,既快速又准确,可以确保病人样本检测结果准确可靠。 展开更多
关键词 糖化血红蛋白 液相色谱一电喷雾质谱 正确度
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医学参考系统在我国IVD企业的应用与思考 被引量：1
6
作者 唐利萍 刘明锦 +4 位作者 刘冠财 鄢中华 蔡华 杨涛 孙可其 《检验医学》 CAS 2021年第3期250-254,共5页
基于量值溯源的参考系统是检验医学领域重要的研究课题,也是体外诊断产品(IVD)企业提升产品质量和影响力的重要研究方向。检测结果的准确性和可靠性是临床科学诊断、治疗、预防疾病的重要保障。文章从IVD企业的角度对医学参考系统的基... 基于量值溯源的参考系统是检验医学领域重要的研究课题,也是体外诊断产品(IVD)企业提升产品质量和影响力的重要研究方向。检测结果的准确性和可靠性是临床科学诊断、治疗、预防疾病的重要保障。文章从IVD企业的角度对医学参考系统的基础情况和分类进行简要的阐述,从参考测量程序、参考物质、一致化研究3个方面介绍了参考系统在中国IVD企业中的应用;对目前参考方法和参考物质数量无法满足企业和临床应用需求、IVD行业对量值溯源和标准化的理解还不够完善、可提供参考测量服务的实验室网络缺乏等方面的问题进行归纳,期望为检验医学参考系统相关研究者提供参考。 展开更多
关键词 检验医学 体外诊断产品 参考系统 量值溯源
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洋地黄毒苷候选参考方法的建立及评价
7
作者 唐宁波 刘冠财 +3 位作者 刘晓雨 杨丰繁 龚志梅 孙可其 《检验医学》 CAS 2022年第5期456-462,共7页
目的建立一种基于同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱(ID-UPLC-MS/MS)的血清洋地黄毒苷检测候选参考方法,并对此方法进行性能评价。方法在血清中加入内标物质洋地黄毒苷-21,23,23-d_(3),采用0.5 mol/L硫酸锌溶液进行蛋白沉淀,采用叔丁... 目的建立一种基于同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱(ID-UPLC-MS/MS)的血清洋地黄毒苷检测候选参考方法,并对此方法进行性能评价。方法在血清中加入内标物质洋地黄毒苷-21,23,23-d_(3),采用0.5 mol/L硫酸锌溶液进行蛋白沉淀,采用叔丁基甲基醚对样本进行液液萃取,上清液采用氮气吹干,流动相复溶后采用ID-UPLC-MS/MS检测。采用五点包括法计算血清洋地黄毒苷水平。参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)C62-A文件和CLSI EP15-A3文件对建立的ID-UPLC-MS/MS方法进行性能评价(基质效应、特异性、携带污染、精密度、准确度),同时评估其检测洋地黄毒苷的测量不确定度。结果建立的ID-UPLCMS/MS方法检测血清洋地黄毒苷的线性范围为2.8~94.9 nmol/L,批内变异系数(CV)为0.44~1.98%、总CV为0.41%~1.06%;加标回收率为100.03%~100.48%;检测限[信噪比(R_(SN))=3]及定量限(R_(SN)=10)分别为0.032和0.095 nmol/L;检测2020 RELA-A、2020 RELA-B样本,相对偏移分别为0.62%、0.29%,其中2020 RELA-A样本的不确定度为0.35 nmol/L。结论建立了检测血清洋地黄毒苷的ID-UPLC-MS/MS方法。该方法灵敏度高,重复性好,准确度高,有望作为人血清洋地黄毒苷测定的候选参考方法。 展开更多
关键词 洋地黄毒苷 同位素稀释超高效液相色谱-串联质谱 候选参考方法 方法学评价
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