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弓形虫ROP2核酸疫苗免疫保护作用的研究 被引量：22
1
作者 魏庆宽 李瑾 +10 位作者 傅婷霞 柏雪莲 崔勇 张佃波 王洪法 刘玉冰 付斌 宰德福 黄炳成 刘克义 韩广东 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期337-341,共5页
目的研究ROP2核酸疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护作用。方法42只BALB/c小鼠随机分为3组:实验组、空质粒组和PBS对照组,各组小鼠分别肌注pc-DNA3-ROP2重组质粒50μg、pc-DNA3空质粒50μg和PBS50μl,共免疫3次,每次间隔3周,末次接种量均加倍... 目的研究ROP2核酸疫苗对BALB/c小鼠的免疫保护作用。方法42只BALB/c小鼠随机分为3组:实验组、空质粒组和PBS对照组,各组小鼠分别肌注pc-DNA3-ROP2重组质粒50μg、pc-DNA3空质粒50μg和PBS50μl,共免疫3次,每次间隔3周,末次接种量均加倍。末次免疫后2周,各组分别取4只小鼠的血清、脾和淋巴组织,检测CD4+、CD8+及各细胞因子。其余各组每鼠腹腔攻击感染RH株弓形虫速殖子500个,观察其存活时间等。结果ROP2核酸疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应,小鼠血清抗体滴度高并能识别由基因重组体外诱导表达的ROP2蛋白抗原;实验组小鼠的CD4+T细胞增殖明显(69.5±3.4)%、CD4+/CD8+比值显著升高(4.69±1.32)%(P<0.01);其脾、淋巴结细胞培养液及血清中白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-12、γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子(TNF)均有不同程度的升高,尤其是血清中升高最为显著。弓形虫攻击感染180h后,实验组小鼠免疫保护率为88.9%,与对照组相比,小鼠存活时间明显延长、初始死亡时间明显推迟(P<0.01)。结论ROP2核酸疫苗具有较强的免疫原性,能产生良好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 棒状体蛋白2 核酸疫苗 免疫保护
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结核分枝杆菌感染中一些重要免疫细胞和细胞因子作用的研究进展 被引量：8
2
作者 柏雪莲 傅斌 刘克义 《中国防痨杂志》 CAS 2006年第3期178-182,共5页
关键词 结核分枝杆菌感染 细胞因子 免疫细胞 TUBERCULOSIS 自然杀伤细胞 CD8T细胞 巨噬细胞 慢性传染病 中性粒细胞 IFN-γ
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弓形虫重组耻垢分枝杆菌M.S-P30-ROP2载体活疫苗构建及鉴定 被引量：10
3
作者 高红刚 张佃波 +1 位作者 卞传秀 刘克义 《中国热带医学》 CAS 2007年第4期489-491,503,共4页
目的构建和鉴定弓形虫P30-ROP2复合基因重组耻垢分枝杆菌M.S载体活疫苗。方法用亚克隆技术把P30-ROP2复合基因克隆入大肠杆菌/分枝杆菌穿梭质粒pSTM3,构建重组质粒pSTM3-P30-ROP2,电穿孔法导入耻垢分枝杆菌中,潮霉素筛选、PCR法鉴定阳... 目的构建和鉴定弓形虫P30-ROP2复合基因重组耻垢分枝杆菌M.S载体活疫苗。方法用亚克隆技术把P30-ROP2复合基因克隆入大肠杆菌/分枝杆菌穿梭质粒pSTM3,构建重组质粒pSTM3-P30-ROP2,电穿孔法导入耻垢分枝杆菌中,潮霉素筛选、PCR法鉴定阳性转化子,温度诱导表达鉴定。结果获得pSTM3-P30-ROP2重组穿梭表达载体,SDS-PAGE结果显示P30-ROP2复合基因表达蛋白产物分子量约为66kDa。结论成功构建弓形虫复合抗原基因P30-ROP2重组耻垢分枝杆菌疫苗,为弓形虫病的防治提供了一种新方法。 展开更多
关键词 弓形虫 P30-ROP2复合基因 耻垢分枝杆菌M.S 穿梭表达载体
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刚地弓形虫P30(SAG1)基因的克隆与表达 被引量：9
4
作者 张佃波 公茂庆 +3 位作者 魏庆宽 李谨 黄炳成 刘克义 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 2005年第2期92-95,共4页
目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中。菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性... 目的构建弓形虫P30基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法将弓形虫P30基因的开读框用PCR扩增,NcoⅠ和HindⅢ酶切后,与同样酶切的表达质粒pET30a(+)经T4连接酶连接,然后转化到DH5α中。菌液经PCR扩增和质粒酶切及基因测序鉴定后,将阳性重组质粒转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE和Westernblot进行鉴定。结果扩增的P30基因片段为750bp,重组质粒诱导表达产物分子质量单位为30ku,与理论值相符。Westernblot确认重组质粒表达蛋白与小鼠抗弓形虫单克隆抗体(P30McAb)发生特异性反应。结论成功构建重组体并获得弓形虫主要表面抗原P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 P30基因 蛋白表达
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刚地弓形虫ROP2-P30复合基因在E.coliBL21中的表达和鉴定(英文) 被引量：9
5
作者 张佃波 魏庆宽 +7 位作者 宰德富 崔勇 李瑾 高红刚 柏雪莲 赵立江 韩广东 刘克义 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期538-543,共6页
目的获得编码弓形虫RH株棒状体蛋白2和主要表面抗原1重组复合蛋白为弓形虫病快速诊断试剂盒及蛋白质疫苗的研制作准备。方法用PCR技术从弓形虫基因组DNA中扩增出ROP2和P30基因片段,分别克隆入pMD18T载体,并对重组入外源基因的质粒通过PC... 目的获得编码弓形虫RH株棒状体蛋白2和主要表面抗原1重组复合蛋白为弓形虫病快速诊断试剂盒及蛋白质疫苗的研制作准备。方法用PCR技术从弓形虫基因组DNA中扩增出ROP2和P30基因片段,分别克隆入pMD18T载体,并对重组入外源基因的质粒通过PCR.,双酶切和测序鉴定,将pMD ROP2中的ROP2基因片段经EcoRⅠ和HindⅢ酶切,连接等反应,亚克隆入pET30a(+)原核表达载体构建pET ROP2载体,然后再将pMD P30中的P30基因片段与经BglⅡandEcoRⅠ酶切的pET ROP2载体连接,构建pET ROP2P30载体,经含卡那霉素的LB平板筛选,酶切和PCR鉴定。阳性重组质粒转化到大肠埃氏菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,表达产物用SDS PAGE进行鉴定。大量的表达融合蛋白经纯化和复性后,用Westernblot分析。结果从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出特异的ROP2和P30基因片段,成功构建成pET ROP2和pET ROP2P30载体,成功表达了弓形虫棒状体蛋白2和弓形虫棒状体蛋白与主要表面抗原1的融合复合蛋白,表达出的蛋白经纯化复性后具有免疫反应性。结论ROP2和P30基因重组后,在原核表达载体中表达出的蛋白经纯化复性后具有活性,获得纯化和复性的弓形虫ROP2和ROP2P30的高效表达产物,为弓形虫病的诊断和疫苗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 P30和ROP2基因 融合蛋白 WESTERN blot.
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斑点免疫金染色法检测恶性疟原虫循环抗原 被引量：4
6
作者 王福勇 刘克义 +2 位作者 程义亮 黄炳成 于振华 《中华医学检验杂志》 CSCD 1994年第1期43-44,共2页
应用胶体金探针建立了斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）。以捕捉法Ｄｏｔ－ＩＧＳ检测３０份海南恶性疟病人全血，循环抗原阳性者２７份，阳性率为９０．０％；４０份其他寄生虫病人血样全为阴性。结果表明，捕捉法Ｄｏｔ－ＩＧＳ在... 应用胶体金探针建立了斑点免疫金染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳ）。以捕捉法Ｄｏｔ－ＩＧＳ检测３０份海南恶性疟病人全血，循环抗原阳性者２７份，阳性率为９０．０％；４０份其他寄生虫病人血样全为阴性。结果表明，捕捉法Ｄｏｔ－ＩＧＳ在敏感性和特异性方面都优于间接法Ｄｏｔ－ＩＧＳ和斑点酶联免疫吸附测定，是检测疟疾循环抗原的理想方法。 展开更多
关键词 抗原 恶性疟原虫 染剂和染色法
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应用DNA探针检测蚊体内疟原虫的研究 被引量：7
7
作者 刘克义 陈锡欣 +4 位作者 黄炳成 程义亮 蔡贤铮 梁泽堂 林世干 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1994年第2期88-90,共3页
本文用生物素标记的克隆ＤＮＡ探针，以斑点杂交法检测蚊体内恶性疟原虫。将一组蚊虫在还原性缓冲液中研磨后集体检测时，在２５只蚊中有１只感染蚊即可检出，亦可将单个蚊虫直接压在硝酸纤维素膜上进行检测。本技术的高特异性、敏感性... 本文用生物素标记的克隆ＤＮＡ探针，以斑点杂交法检测蚊体内恶性疟原虫。将一组蚊虫在还原性缓冲液中研磨后集体检测时，在２５只蚊中有１只感染蚊即可检出，亦可将单个蚊虫直接压在硝酸纤维素膜上进行检测。本技术的高特异性、敏感性以及试剂的稳定性等表明，它可作为一个适用的流行病学调查工具。 展开更多
关键词 恶性疟 DNA探针 按蚊 疟原虫
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巢式PCR法检测弓形虫的应用研究 被引量：6
8
作者 傅斌 刘克义 +3 位作者 韩广东 魏庆宽 李瑾 崔勇 《中国热带医学》 CAS 2005年第5期929-931,共3页
目的调查山东省商品肉弓形虫污染和动物弓形虫感染情况,并进行SAG2分型研究,分析商业肉制品在弓形虫传播中的作用。方法自由市场采集商品肉,用巢式PCR方法检测弓形虫DNA,阳性者经纯化PCR产物,进行SAG2临床分型研究。结果共检测商品肉89... 目的调查山东省商品肉弓形虫污染和动物弓形虫感染情况,并进行SAG2分型研究,分析商业肉制品在弓形虫传播中的作用。方法自由市场采集商品肉,用巢式PCR方法检测弓形虫DNA,阳性者经纯化PCR产物,进行SAG2临床分型研究。结果共检测商品肉89份,阳性22份,阳性率为24·72%。其中,猪肉标本56份,16份阳性,阳性率为28·57%,Ⅰ型13份,Ⅱ型1份,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染1份,未能定型1份;羊肉标本33份,6份阳性,阳性率为18·18%,Ⅰ型5份,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染1份。22份阳性标本中单纯Ⅰ型占81·82%,Ⅱ型与Ⅰ型混合感染占9·09%,Ⅲ型未能检测到。1份可疑病人血标本阳性,为Ⅰ型。结论肉类弓形虫污染率很高,以Ⅰ型为主,是人类感染的重要来源。家庭食品加工过程中生熟不分与人们对食品鲜美的追求造成误食包囊感染,可能是造成人类弓形虫感染率大幅升高的最为重要的原因之一。 展开更多
关键词 弓形虫病 巢式多聚酶链反应 SAG2基因分型
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隐孢子虫分类研究进展 被引量：5
9
作者 赵立江 张佃波 刘克义 《中国热带医学》 CAS 2006年第3期520-522,共3页
隐孢子虫为体积微小的球虫类寄生虫,广泛寄生于多种脊椎动物体内,可引起一种以腹泻为主要临床表现的人兽共惠性原虫病。近年皋,隐孢子虫病的检出率逐年增高,已被列为世界最常见的6种腹泻病之一。在国外,隐孢子虫已被列为艾滋病患者的常... 隐孢子虫为体积微小的球虫类寄生虫,广泛寄生于多种脊椎动物体内,可引起一种以腹泻为主要临床表现的人兽共惠性原虫病。近年皋,隐孢子虫病的检出率逐年增高,已被列为世界最常见的6种腹泻病之一。在国外,隐孢子虫已被列为艾滋病患者的常规检查项目。本文主要介绍近年来隐孢子虫在形态学、分子生物学等方面分类学研究的进展。 展开更多
关键词 隐孢子虫 分类学 基因
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融合蛋白斑点ELISA检测恶性疟抗体 被引量：6
10
作者 刘克义 C.Kidson 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期43-45,共3页
利用基因工程技术将恶性疟原虫基因组DNA与噬菌体λgt11重组,并在宿主菌E.Coli Y1090中表达出融合蛋白,以此蛋白作为抗原,用斑点ELISA法检测恶性疟抗体。当血清1:100稀释时,46份病人血清全为阳性,20份正常人血清全为阴性,与IFA检查结果... 利用基因工程技术将恶性疟原虫基因组DNA与噬菌体λgt11重组,并在宿主菌E.Coli Y1090中表达出融合蛋白,以此蛋白作为抗原,用斑点ELISA法检测恶性疟抗体。当血清1:100稀释时,46份病人血清全为阳性,20份正常人血清全为阴性,与IFA检查结果一致。研究表明此种融合蛋白可替代疟疾全虫抗原,可解决抗原来源和纯化问题。 展开更多
关键词 融合蛋白 恶性疟原虫 斑点ELISA
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替普瑞酮治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效观察 被引量：5
11
作者 李雪萍 刘克义 丁学文 《中国煤炭工业医学杂志》 2008年第9期1374-1375,共2页
关键词 胃炎 萎缩性 替普瑞酮 叶酸
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微小隐孢子虫表面抗原CP23基因的克隆及表达 被引量：6
12
作者 宰德富 张佃波 +3 位作者 魏庆宽 韩广东 李瑾 刘克义 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2006年第3期193-197,共5页
目的构建微小隐孢子虫表面抗原CP23基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法用微小隐孢子虫卵囊感染免疫抑制BALB/c小鼠,用不连续蔗糖密度梯度离心法纯化微小隐孢子虫卵囊,用酚-氯仿抽提法提取微小隐孢子虫基因组DNA,PCR扩增CP23基因片段... 目的构建微小隐孢子虫表面抗原CP23基因表达载体并获得重组表达蛋白。方法用微小隐孢子虫卵囊感染免疫抑制BALB/c小鼠,用不连续蔗糖密度梯度离心法纯化微小隐孢子虫卵囊,用酚-氯仿抽提法提取微小隐孢子虫基因组DNA,PCR扩增CP23基因片段,然后克隆至TA载体;通过酶切、测序鉴定后,将CP23基因片段用限制性内切酶切下克隆至pET-30a(+)载体,构建pET-30a-23质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达蛋白用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定。结果扩增出约340bp的微小隐孢子虫CP23基因片段并成功构建pET-30a-23质粒,表达出分子质量单位为27ku的融合蛋白,Western blot显示该蛋白能被抗微小隐孢子虫血清识别。结论成功构建pET-30a-23质粒,表达产物具有免疫反应性,为微小隐孢子虫的免疫学诊断及疫苗研制打下了基础。 展开更多
关键词 微小隐孢子虫 CP23基因 克隆 表达 WESTERN BLOT
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抗弓形虫感染ROP2核酸疫苗的研究 被引量：3
13
作者 韩广东 魏庆宽 +6 位作者 张佃波 李瑾 崔勇 李桂萍 王洪法 刘玉冰 刘克义 《中国热带医学》 CAS 2005年第6期1161-1167,共7页
目的研究弓形虫核酸疫苗,以用于弓形虫病的防治。方法根据ROP2基因序列,设计合成能表达ROP2完整蛋白基因的扩增引物,扩增ROP2靶基因并克隆于PUCm-T载体,然后再亚克隆于真核表达载体pc-DNA3质粒中,制备弓形虫pc-DNA3-ROP2核酸疫苗;应用裸... 目的研究弓形虫核酸疫苗,以用于弓形虫病的防治。方法根据ROP2基因序列,设计合成能表达ROP2完整蛋白基因的扩增引物,扩增ROP2靶基因并克隆于PUCm-T载体,然后再亚克隆于真核表达载体pc-DNA3质粒中,制备弓形虫pc-DNA3-ROP2核酸疫苗;应用裸pc-DNA3-ROP2免疫小鼠,通过免疫学指标的检测,评价小鼠的免疫应答反应,最后应用弓形虫RH株攻击实验,评价出该疫苗的有效保护率、安全性和在人类及畜类的应用价值。结果以ROP2基因为模板,PCR扩增出1.7kbDNA条带,与预想结果一致;将扩增DNA回收并成功的克隆了ROP2(PUCm-T-ROP2),然后亚克隆并构建了pc-DNA-ROP2重组体,通过酶切、PCR扩增和基因测序证明亚克隆的重组子正确,ROP2扩增基因包含了ROP2蛋白基因读码框内的完整序列;在应用疫苗免疫接种小鼠结果显示,疫苗接种能使小鼠产生强烈的细胞、体液免疫反应;攻击实验结果显示,实验组小鼠的存活时间明显延长,并且开始死亡时间明显延迟(P<0.001),实验组9只小鼠中有1只长期存活;在实验的整个过程中,没有发现小鼠对免疫接种的毒性和异常反应。结论该疫苗免疫原作用强,具有很好的开发应用价值,目前可在动物群体中试验应用。 展开更多
关键词 弓形虫 ROP2基因重组 核酸疫苗 免疫保护作用
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大劣按蚊人工感染恶性疟原虫的实验研究 被引量：5
14
作者 陈锡欣 梁泽堂 +3 位作者 刘克义 蔡贤铮 李承邰 黄炳成 《中国媒介生物学及控制杂志》 CAS CSCD 1994年第3期171-173,共3页
作者采用改进的人胎盘膜饲血法，以3例恶性疟患者离体肝素防凝血感染4批大劣按蚊，结果均感染成功，子孢子感染率1.7～64.0%，子孢子进腺时间为10～12天，高峰期在15～16天。
关键词 人劣按蚊 恶性疟原虫 人工感染
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隐孢子虫病免疫诊断研究进展 被引量：2
15
作者 刘克义 宰德富 《中国热带医学》 CAS 2005年第1期187-190,161,共5页
隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是一种全球性的人畜共患寄生虫病,其病原体是一种属于顶端复合物门的寄生性原虫--隐孢子虫(Cryptosporidium).隐孢子虫是Tyzzer于1907年首先在实验小鼠胃肠道内发现的,但直到80年代以后才逐渐引起重视.当... 隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是一种全球性的人畜共患寄生虫病,其病原体是一种属于顶端复合物门的寄生性原虫--隐孢子虫(Cryptosporidium).隐孢子虫是Tyzzer于1907年首先在实验小鼠胃肠道内发现的,但直到80年代以后才逐渐引起重视.当前认为有效的隐孢子虫种类有:微小隐孢子虫(C.parvum),小鼠隐孢子虫(C.muris),火鸡隐孢子虫(C.meleagridis),贝利隐孢子虫(C.baileyi),蛇隐孢子虫(C.serpntis),和鱼隐孢子虫(C.nasorum)等,对人造成感染的主要是微小隐孢子虫.隐孢子虫的生活史简单,不需要转换宿主即可完成,生活史有无性生殖、有性生殖和孢子生殖三个阶段,均在同一宿主体内进行.本虫寄生于肠粘膜,使上皮细胞表面凹陷、老化和脱落,破坏了肠绒毛的正常功能,影响消化吸收而发生腹泻. 展开更多
关键词 免疫诊断 隐孢子虫病 实验小鼠 研究进展 胃肠道 病原体 微小隐孢子虫 鼠隐孢子虫 人畜共患寄生虫病 寄生性
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抗弓形虫P30单克隆抗体的制备及其抗虫作用观察 被引量：3
16
作者 魏庆宽 李瑾 +6 位作者 付婷霞 崔勇 柏雪莲 王用斌 黄炳成 韩广东 刘克义 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期488-493,共6页
制备抗弓形虫天然P30、重组P30的单克隆抗体(mAb),并研究它们对虫体的影响,为弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定奠定基础。采用弓形虫天然P30、重组P30及全虫抗原(对照)分别免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选稳定... 制备抗弓形虫天然P30、重组P30的单克隆抗体(mAb),并研究它们对虫体的影响,为弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定奠定基础。采用弓形虫天然P30、重组P30及全虫抗原(对照)分别免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选稳定分泌高滴度mAb的杂交瘤细胞株。用ELISA法测定mAb亚类和效价;通过SDS-PAGE和West-ern blot进行特异性鉴定;Giemsa染色观察杂交瘤细胞的染色体数目;利用扫描电镜及间接荧光抗体试验(IFAT)观察mAb对弓形虫的杀伤作用及其靶抗原定位。结果表明,筛选出2株(2B3、1H6)特异性较好、能稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株。Western blot结果显示,2B3、1H6产生的mAb与弓形虫全抗原的阳性反应带均在30 000 Mr处;mAb亚类均属IgM,其效价(ELISA)分别为:2B3 1∶102 400、1H6 1∶51 200;2株细胞的染色体数均在100条以上。电镜观察与mAb作用后的弓形虫虫体聚集、肿胀,膜变厚,表面出现缺口和空洞,甚至虫体变形、破碎。抗弓形虫天然P30的mAb能识别重组体pET-30a-P30的表达蛋白。成功制备了抗弓形虫天然P30、重组P30的mAb,可进一步用于弓形虫病诊断及保护性抗原鉴定研究。 展开更多
关键词 弓形虫 P30 单克隆抗体
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内镜下高频电凝电切治疗大肠息肉237例临床研究 被引量：4
17
作者 刘克义 孙志华 吴华清 《中国现代医生》 2008年第21期232-233,共2页
目的探讨采用内镜下高频电凝电切治疗消化道息肉的治疗效果,分析减少本疗法并发症发生的方式和降低误诊误治的方法。方法对确诊为大肠息肉者,电子结肠镜下电凝电切治疗,并发出血者给予常规止血治疗,术后将切除息肉标本行病理检查。结果... 目的探讨采用内镜下高频电凝电切治疗消化道息肉的治疗效果,分析减少本疗法并发症发生的方式和降低误诊误治的方法。方法对确诊为大肠息肉者,电子结肠镜下电凝电切治疗,并发出血者给予常规止血治疗,术后将切除息肉标本行病理检查。结果根据息肉数量给予1次或者多次治疗均成功,并发出血8例,未发生肠穿孔,术前1例病理为腺瘤样息肉,术后为腺癌。结论表明内镜下高频电凝电切疗法是根治大肠息肉安全有效的微创手术方法。 展开更多
关键词 电子内镜 高频电凝电切 息肉
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敲除pck A基因的结核杆菌引起的免疫反应的研究 被引量：4
18
作者 柏雪莲 刘克义 +5 位作者 于进芝 李桂萍 李瑾 魏庆宽 韩广东 崔勇 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第6期19-22,共4页
研究结核杆菌pckA基因编码的磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(PEPCK)诱导机体产生的保护性免疫反应。用敲除pckA基因的牛结核杆菌BCG和野生型BCG分别感染小鼠,取肝、肺、脾进行病理分析,并进行脾细胞培养,检测CD4+、CD4+/CD8+、细胞因子IFNI-γI... 研究结核杆菌pckA基因编码的磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(PEPCK)诱导机体产生的保护性免疫反应。用敲除pckA基因的牛结核杆菌BCG和野生型BCG分别感染小鼠,取肝、肺、脾进行病理分析,并进行脾细胞培养,检测CD4+、CD4+/CD8+、细胞因子IFNI-γI、L-12和TNF等。用敲除pckA基因的BCG感染的小鼠比野生型BCG感染的小鼠体内产生的结核结节少且不典型,炎性程度低。野生型BCG感染的小鼠脾脏内的CD4+T细胞和CD4+/CD8+、细胞因子IFN-γ、IL-12、TNF均明显高于敲除pckA基因BCG感染的小鼠。pckA基因为结核杆菌生长所必需,其编码产物PEPCK能够刺激机体产生免疫反应,是一种很好的疫苗候选分子。 展开更多
关键词 结核杆菌 pckA基因 磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(PEPCK) 细胞因子 免疫反应
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光敏生物素DNA探针用于血内和蚊体内疟原虫的检测 被引量：3
19
作者 黄炳成 陈锡欣 +4 位作者 刘玉冰 王金祥 寇景轩 赵长磊 刘克义 《实用寄生虫病杂志》 1999年第4期159-161,共3页
从恶性疟原虫（Ｐ．ｆ） 基因文库中筛选的具有Ｐ．ｆ 种特异的质粒型ｐＢＦ２ 克隆ＤＮＡ 经光敏生物素标记后作探针，用核酸杂交方法检测不同疟区病人血内和蚊体内的疟原虫，敏感性和特异性均达应用水平，显示该探针在疟疾监测中具有... 从恶性疟原虫（Ｐ．ｆ） 基因文库中筛选的具有Ｐ．ｆ 种特异的质粒型ｐＢＦ２ 克隆ＤＮＡ 经光敏生物素标记后作探针，用核酸杂交方法检测不同疟区病人血内和蚊体内的疟原虫，敏感性和特异性均达应用水平，显示该探针在疟疾监测中具有良好的应用前景。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 光敏生物素 DNA探针 疟疾
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商品混凝土结算初步分析 被引量：5
20
作者 刘克义 刘玉萍 《商品混凝土》 2012年第2期3-4,17,共3页
本文简要分析商品混凝土结算的内容、程序和管理要点。
关键词 结算 程序 注意点
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