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柠檬精油活性成分柠檬醛抑制头颈癌细胞增殖的机制研究
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作者 陈利 张亚军 +5 位作者 秦洪文 胡武静 刘俨娇 肖国生 杜慧慧 杨东林 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2364-2375,共12页
探索柠檬精油中发挥抗肿瘤作用的活性物质以及抑制头颈癌细胞SCC15和CAL33增殖的分子机制,该研究利用噻唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay,MTT]鉴定出抑制头颈癌细胞增殖的活性物质为柠檬醛,并... 探索柠檬精油中发挥抗肿瘤作用的活性物质以及抑制头颈癌细胞SCC15和CAL33增殖的分子机制,该研究利用噻唑蓝[3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay,MTT]鉴定出抑制头颈癌细胞增殖的活性物质为柠檬醛,并测定了柠檬醛抑制头颈癌细胞和正常细胞的IC50;同时,利用5-ethynyl-2′-deoxyuridine(EdU)实验检测柠檬醛对头颈癌细胞增殖率的影响,通过克隆形成实验检测柠檬醛对头颈癌细胞体外肿瘤球形成的影响。通过流式细胞术检测柠檬醛对头颈癌细胞周期阻滞和凋亡诱导情况;采用蛋白印迹检测柠檬醛对头颈癌细胞周期和凋亡相关蛋白表达水平的影响。结果表明柠檬醛可有效抑制头颈癌细胞的生长增殖,具有抗肿瘤活性,其抑制CAL33和SCC15的半数抑制浓度分别为54.78、25.23μg·mL^(-1)。进一步分析发现细胞周期相关蛋白S期激酶关联蛋白2(SKP2)、原癌基因(C-MYC)、细胞周期依赖性激酶1(CDK1)、周期蛋白B(cyclin B)均呈下调趋势,细胞周期阻滞于G2/M期。此外,柠檬醛能够促使细胞凋亡相关蛋白半胱天冬蛋白酶-3(caspase-3)、半胱天冬蛋白酶-9(caspase-9)和多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)剪切形式呈现上调趋势,而且使自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)、泛素结合蛋白(P62)、自噬效应蛋白Beclin1(Beclin1)和溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)表达呈上调趋势,暗示柠檬醛诱导头颈癌细胞发生凋亡和激活自噬。利用双标质粒系统mCherry-GFP-LC3分析发现柠檬醛阻碍自噬体和溶酶体融合,使自噬流进程受阻。因此,柠檬精油中发挥抗头颈癌细胞增殖的主要活性成分是柠檬醛,该成分对头颈癌细胞具有显著的抑制作用,其分子机制可能是柠檬醛通过阻滞细胞周期,诱导细胞发生凋亡和自噬,最终抑制肿瘤细胞增殖。 展开更多
关键词 柠檬醛 头颈癌 抗肿瘤 凋亡 自噬
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