目的:阐明锌指蛋白GATA6(GATA Binding Protein 6,GATA6)在骨髓间充质干细胞成骨分化作用。方法:利用基于慢病毒感染的方法建立高表达与敲低GATA6稳定的骨髓间充质干细胞系,并利用成骨诱导液进行成骨诱导,以茜素红S染色。用蛋白杂交方...目的:阐明锌指蛋白GATA6(GATA Binding Protein 6,GATA6)在骨髓间充质干细胞成骨分化作用。方法:利用基于慢病毒感染的方法建立高表达与敲低GATA6稳定的骨髓间充质干细胞系,并利用成骨诱导液进行成骨诱导,以茜素红S染色。用蛋白杂交方法检测RUNX2(Runt-related transcription factor 2,RUNX2)蛋白表达量,并利用免疫共沉淀的技术检测GATA6与RUNX2的相互作用。结果:数据表明GATA6高表达促进了骨髓间充质干细胞的成骨分化,并上调RUNX2蛋白表达量。在敲低GATA6后,RUNX2的表达量亦随之降低。免疫共沉淀检测进一步发现,GATA6与RUNX2具有相互作用。另外,GATA6在骨质疏松大鼠来源的骨髓间充质干细胞的表达量下降。结论:GATA6促进骨髓间充质干细胞成骨分化,为理解成骨作用机制提供了理论基础。展开更多
