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虫草素的微波-超声波协同提取 被引量：17
1
作者 王陶 李文 +2 位作者 陈宏伟 陈小龙 刁进进 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第10期86-90,共5页
研究蛹虫草菌丝体中虫草素的提取工艺及检测方法。确定微波-超声波协同提取法为虫草素提取的最佳方法,依据单因素和正交试验获得最佳的提取工艺:乙醇体积分数70%、提取功率200W、提取时间110s、料液比1:240(g/mL)。此时虫草素含量达9.22... 研究蛹虫草菌丝体中虫草素的提取工艺及检测方法。确定微波-超声波协同提取法为虫草素提取的最佳方法,依据单因素和正交试验获得最佳的提取工艺:乙醇体积分数70%、提取功率200W、提取时间110s、料液比1:240(g/mL)。此时虫草素含量达9.228mg/g。采用紫外分光光度法测定样品中虫草素含量,回收率为97.41%～99.60%,RSD为1.469%,准确度和精密度都较高,是一种方便、成本较低的检测方法。 展开更多
关键词 蛹虫草 虫草素 微波-超声波协同提取 紫外分光光度法
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耐高温β-半乳糖苷酶的分离纯化与酶学性质分析 被引量：8
2
作者 高兆建 侯进慧 +1 位作者 孙会刚 刁进进 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第23期151-156,共6页
为从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)XG24发酵液中纯化到β-半乳糖苷酶,并对酶学性质进行研究,利用硫酸铵分级盐析、DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换层析和SephadexG-75分子筛凝胶过滤层析等方法进行分离纯化。结果表... 为从嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)XG24发酵液中纯化到β-半乳糖苷酶,并对酶学性质进行研究,利用硫酸铵分级盐析、DEAE-SepharoseFastFlow阴离子交换层析和SephadexG-75分子筛凝胶过滤层析等方法进行分离纯化。结果表明:经过系列步骤纯化后,酶纯度提高了54.5倍,回收率20.4%,酶比活力达32.7U/mg。以邻-硝基酚-D-半乳糖吡喃糖苷(ONPG)为底物,研究β-半乳糖苷酶的酶学性质。最适pH6.5,最适作用温度65℃。此菌株产β-半乳糖苷酶在70℃以下和pH4.0～8.0范围内具有较好的稳定性;Mg2+、Mn2+、Fe2+和Co2+对此酶有明显激活作用,而Cu2+、Ag+、Hg2+几乎完全抑制酶活性。以ONPG为底物酶的Km值为4.32mmol/L。SDS-PAGE和凝胶过滤层析测得酶蛋白为单肽链蛋白,表观分子质量64kD。因此,嗜热脂肪芽孢杆菌XG24β-半乳糖苷酶在乳制品工业中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 嗜热脂肪芽孢杆菌 Β-半乳糖苷酶 分离纯化 性质
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牛蒡菊糖酶法提取 被引量：5
3
作者 曹泽虹 卢海燕 +3 位作者 董玉玮 邵颖 杨金钰 刁进进 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第24期37-45,共9页
采用固定化酶法提取牛蒡菊糖。结果表明酶水解提取牛蒡菊糖的最佳工艺为:13.5g/100mL中性蛋白酶、pH7、固液比1:15、50℃、酶水解6h,菊糖提取率为14.57%;固定化酶制备最佳工艺为:以甲醛(40%):NaOH(2mol/L)=2:3为凝结液、pH7.5、壳聚糖2.... 采用固定化酶法提取牛蒡菊糖。结果表明酶水解提取牛蒡菊糖的最佳工艺为:13.5g/100mL中性蛋白酶、pH7、固液比1:15、50℃、酶水解6h,菊糖提取率为14.57%;固定化酶制备最佳工艺为:以甲醛(40%):NaOH(2mol/L)=2:3为凝结液、pH7.5、壳聚糖2.5g/100mL、60℃、加酶量7.5mg/mL,固定8h,酶活力回收率可达到39.13%;固定化酶提取牛蒡菊糖最适条件为:pH7、固液比1:15、60℃、固定化酶加入量13.5g/100mL、酶解5h,在此条件下菊糖提取率达到12.89%。固定化酶的稳定性与游离酶相比有显著的提高,连续反应10次后,固定化酶仍然具有良好的使用性能,此时牛蒡菊糖的提取率为9.42%。 展开更多
关键词 牛蒡 菊糖 中性蛋白酶 壳聚糖 固定化酶
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枸杞紫黄质脱环氧化酶(LcVDE)基因的克隆和分析
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作者 张旭强 季静 +5 位作者 王罡 钟影 刁进进 关春峰 吴疆 金超 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期21-27,共7页
目的:克隆枸杞VDE基因的全长cDNA,通过对基因序列的生物信息学分析预测表达产物的结构特征和功能位点并验证其功能,为研究枸杞紫黄质循环的作用机理打下基础。方法:利用cDNA末端快速扩增和RT-PCR方法克隆枸杞VDE基因全长cDNA序列,生物... 目的:克隆枸杞VDE基因的全长cDNA,通过对基因序列的生物信息学分析预测表达产物的结构特征和功能位点并验证其功能,为研究枸杞紫黄质循环的作用机理打下基础。方法:利用cDNA末端快速扩增和RT-PCR方法克隆枸杞VDE基因全长cDNA序列,生物软件分析VDE的生物学信息。构建VDE基因的原核表达载体pET-VDE,转化大肠后用IPTG诱导VDE过量表达;并构建体外反应体系对VDE表达蛋白酶功能进行验证。结果:LcVDE基因的ORF长1 413bp,编码的蛋白由470个氨基酸组成,分子量为53.61kDa,等电点为5.77。SDS-PAGE电泳结果表明,枸杞VDE基因在大肠杆菌中得到了过量表达。克隆基因表达蛋白进行紫黄质的脱环氧化反应,吸收光谱和HPLC的分析结果表明,表达蛋白催化了紫黄质的脱环氧化反应。结论:克隆得到的VDE基因编码的蛋白具有紫黄质脱环氧化酶的的功能与活性。 展开更多
关键词 枸杞 紫黄质 紫黄质脱环氧化酶(VDE)
原文传递
对两用生物技术发展现状与生物安全的思考 被引量：9
5
作者 宋馨宇 刁进进 张卫文 《微生物与感染》 2018年第6期323-329,共7页
生命科技的蓬勃发展与全球化步伐的持续加速,为人类社会带来了诸多福祉。然而,生物技术的两用特征和传染病严峻的流行趋势带来了一系列生物安全隐患,引发了世界性的生物安全问题。随着国际形势的日趋复杂,生物安全这一非传统安全问题已... 生命科技的蓬勃发展与全球化步伐的持续加速,为人类社会带来了诸多福祉。然而,生物技术的两用特征和传染病严峻的流行趋势带来了一系列生物安全隐患,引发了世界性的生物安全问题。随着国际形势的日趋复杂,生物安全这一非传统安全问题已成为国家安全体系的重要组成部分。本文通过分析典型两用生物技术的潜在威胁及新发突发传染病的发展趋势,指出我国生物安全领域面临的挑战性问题。同时结合研究发达国家在战略、政策与技术方面应对生物安全的重要举措,从战略布局、科技创新、团队建设、政策支持等方面为我国在两用生物技术的生物安全领域的发展提出建议。 展开更多
关键词 两用生物技术 新发传染病 生物安全问题 战略布局
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