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哺乳期双酚A暴露致小鼠睾丸生精细胞减数分裂阻滞的机制研究
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作者 黄晓迪 +4 位作者 赵程 陈建美 张金枝 刘雅楠 解美娜 《环境与职业医学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期769-774,共6页
[背景]双酚A(BPA)作为环境内分泌干扰物的一种,能够干扰生精细胞减数分裂进程,进而影响睾丸发育和精子发生,但其影响生精细胞减数分裂的机制仍不清楚。[目的]探讨哺乳期小鼠BPA暴露对睾丸内调控生精细胞减数分裂和细胞周期相关因子表达... [背景]双酚A(BPA)作为环境内分泌干扰物的一种,能够干扰生精细胞减数分裂进程,进而影响睾丸发育和精子发生,但其影响生精细胞减数分裂的机制仍不清楚。[目的]探讨哺乳期小鼠BPA暴露对睾丸内调控生精细胞减数分裂和细胞周期相关因子表达的影响。[方法]新生ICR雄性仔鼠随机分为3组:对照组(玉米油)、BPA低剂量组(0.1 mg·kg^(-1))、BPA高剂量组(5 mg·kg^(-1)),每组10只。仔鼠于出生后第1天(PND1)开始每天颈背部皮下注射药物持续到PND21断奶。PND22颈椎脱臼处死小鼠后记录小鼠体重,剥取睾丸并称取睾丸重量。流式细胞术DNA倍体分析法检测哺乳期BPA暴露对睾丸生精细胞DNA含量的影响。Western blotting检测睾丸中细胞周期相关蛋白Cdc25A、Cdc25C、Wee1、p-Tyr15 Cdc2、CDK1表达量的变化情况,RT-PCR检测睾丸中细胞周期相关基因Cdc25A、Cdc25C、Wee1、CDK1mRNA水平的变化。[结果]BPA低、高剂量组小鼠体重、睾丸重量及睾丸系数与对照组的差异无统计学意义(均P>0.05)。流式细胞术分析结果显示:低、高剂量组二倍体细胞所占比例分别为(25.05±1.62)%、(25.25±6.67)%,较对照组[(49.33±6.91)%]减少(均P<0.01);低、高剂量组四倍体细胞所占比例分别为(45.89±1.95)%、(51.11±8.89)%,较对照组[(24.72±6.44)%]增多(均P<0.01);低、高剂量组间单倍体细胞和S期细胞所占比例与对照组相比,差异无统计学意义(均P>0.05)。Western blotting结果显示:与对照组相比,BPA高、低剂量染毒组睾丸组织Cdc25A、Cdc25C、Wee1、p-Tyr15 Cdc2蛋白表达水平均降低(均P<0.05);CDK1蛋白表达无明显变化(P>0.05)。RT-PCR结果显示:与对照组相比,BPA染毒组睾丸组织Cdc25A、Cdc25C、Wee1、CDK1的mRNA表达水平差异均无统计学意义(均P>0.05)。[结论]哺乳期BPA暴露能够改变小鼠睾丸内生精细胞的周期分布。BPA可能通过下调细胞周期调控因子Cdc25A、Cdc25C、Wee1的翻译水平使初级� 展开更多
关键词 双酚A 减数分裂 Cdc25 Wee1 p-Tyr15 Cdc2
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发育期邻苯二甲酸二丁酯暴露对小鼠睾丸Tnp2与Prm2的影响
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作者 杨博文 李安龙 +5 位作者 董现龙 陈建美 黄晓迪 赵程 解美娜 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期16-20,2,共6页
目的研究邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)染毒对雄性小鼠精子发生中染色质包装质量以及过渡蛋白2(transition nuclear protein 2,Tnp2)与鱼精蛋白2(protamine 2,Prm2)表达的长期影响。方法8只ICR妊娠期母鼠分娩后,随机将仔鼠... 目的研究邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)染毒对雄性小鼠精子发生中染色质包装质量以及过渡蛋白2(transition nuclear protein 2,Tnp2)与鱼精蛋白2(protamine 2,Prm2)表达的长期影响。方法8只ICR妊娠期母鼠分娩后,随机将仔鼠分为对照组(玉米油)和DBP组,自出生后第1天(posnatal day 1,PND1)到第35天,仔鼠每天皮下注射玉米油或DBP(100 mg/kg)。分别于35和70日龄时每组处死半数小鼠,剥取睾丸组织。通过CMA3试剂盒染色法检测精子染色质包装质量,以RT-PCR、免疫荧光和Western blot检测睾丸中Tnp2与Prm2的转录和翻译水平的变化。结果PND70DBP组小鼠精子CMA3试剂盒染色阳性率明显高于对照组;PND35 DBP组睾丸组织中Tnp2和Prm2 mRNA表达产物均明显上升(P<0.01),Tnp2蛋白表达水平明显上升(P<0.05),Prm2蛋白表达水平明显下降(P<0.05);而PND70 DBP组Tnp2和Prm2 mRNA表达产物均明显下降(P<0.01),Tnp2蛋白表达水平明显上升(P<0.01),Prm2蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。结论发育期仔鼠DBP暴露干扰雄鼠睾丸组织过渡蛋白2和鱼精蛋白2的正常表达,导致成年小鼠精子细胞染色质包装异常,进而影响精子发生。 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二丁酯 精子发生 过渡蛋白2 鱼精蛋白2
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