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药用蛇及其水提物的DNA微型条形码鉴别研究 被引量：1
1
作者 冼乐尧 罗宇琴 +4 位作者 宋叶 魏梅 孙冬梅 李国卫 胡绮萍 《中药材》 CAS 北大核心 2024年第1期51-56,共6页
目的:建立药用蛇及其水提物的DNA微型条形码鉴别方法。方法:通过比对药用蛇及常见11种混伪品的16S rRNA序列,建立约220 bp的蛇类DNA微型条形码,并与16S rRNA标准条形码比较,对药用蛇原料及水提物进行测序鉴定。采用MEGA-X软件分析遗传... 目的:建立药用蛇及其水提物的DNA微型条形码鉴别方法。方法:通过比对药用蛇及常见11种混伪品的16S rRNA序列,建立约220 bp的蛇类DNA微型条形码,并与16S rRNA标准条形码比较,对药用蛇原料及水提物进行测序鉴定。采用MEGA-X软件分析遗传距离并以邻接法(NJ)构建系统发育树。结果:DNA微型条形码引物对药用蛇原料及水提物的扩增率为100%,鉴定率为100%。药用蛇及其混伪品的种内平均遗传距离均小于种间平均遗传距离,且各物种在NJ系统发育树中具有良好的单系性,并与16S rRNA标准条形码原料的鉴定结果一致。结论:该研究建立的蛇类DNA微型条形码可有效实现药用蛇原料及水提物等制品的物种鉴别,为保障蛇类原料、临床汤剂及配方颗粒等药品的安全性和有效性提供了技术支撑。 展开更多
关键词 乌梢蛇 金钱白花蛇 蕲蛇 水提物 DNA微型条形码 16S rRNA
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乌梢蛇配方颗粒与常见三种伪品的多重PCR鉴别研究
2
作者 宋叶 罗宇琴 +6 位作者 李国卫 冼乐尧 谭斯尹 范耀耀 罗怡靖 陈向东 孙冬梅 《中国药品标准》 CAS 2024年第4期321-329,共9页
目的:建立乌梢蛇、王锦蛇、百花锦蛇、灰鼠蛇药材及水提物四重位点特异性聚合酶链反应(PCR)鉴别方法,为配方颗粒的掺伪鉴别提供依据。方法:以线粒体细胞色素C氧化酶1号(CO1)基因为靶基因,设计特异性引物,优化引物最适退火温度、循环次... 目的:建立乌梢蛇、王锦蛇、百花锦蛇、灰鼠蛇药材及水提物四重位点特异性聚合酶链反应(PCR)鉴别方法,为配方颗粒的掺伪鉴别提供依据。方法:以线粒体细胞色素C氧化酶1号(CO1)基因为靶基因,设计特异性引物,优化引物最适退火温度、循环次数、聚合酶种类,并用该方法进行混合样品的检测。结果:乌梢蛇、王锦蛇、百花锦蛇、灰鼠蛇聚合酶为Multiplex PCR 5×Master Mix,退火温度为60℃,循环次数为35次时分别扩增出133、180、247、197 bp的特异性条带,空白对照无条带。该方法能同时、准确地鉴定出混合样品的蛇源成分。结论:本方法可同时、准确、快速地鉴定乌梢蛇、王锦蛇、百花锦蛇、灰鼠蛇样品,并适合标准汤剂和配方颗粒样品鉴别。 展开更多
关键词 乌梢蛇 王锦蛇 百花锦蛇 灰鼠蛇 配方颗粒 多重位点特异性聚合酶链反应法
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