运动防治绝经后骨质疏松症机制的实验研究 被引量：27

1

作者 冷文川 于长隆 +1 位作者 张继英 张美荣 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期352-356,共5页

目的 :观察运动防治绝经后骨质疏松的作用和机理。方法 :对卵巢切除后的大鼠实施跑台训练 ,并与不训练组、补充雌二醇组和补充中药组作比较 ,观察骨质疏松的发病特点。结果 :运动对涉及运动部位的骨骼有减轻骨质疏松的作用 ,但不能逆转... 目的 :观察运动防治绝经后骨质疏松的作用和机理。方法 :对卵巢切除后的大鼠实施跑台训练 ,并与不训练组、补充雌二醇组和补充中药组作比较 ,观察骨质疏松的发病特点。结果 :运动对涉及运动部位的骨骼有减轻骨质疏松的作用 ,但不能逆转由于雌激素缺乏而产生的全身性的骨质疏松。研究表明 。 展开更多

关键词 绝经后骨质疏松 防治 运动 实验研究

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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒核蛋白的鉴定与分析 被引量：7

2

作者 周世力 卫灿东 +7 位作者 熊朝晖 段淑敏 李德新 王建伟 冷文川 梁米芳 金奇 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期100-103,共4页

利用蛋白质组学技术,对纯化的严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒颗粒所含核蛋白进行初步分离与鉴定。质谱分析结果最终表明,SARS冠状病毒核蛋白的分子量位于47kD与52kD之间,所获得的SARS冠状病毒核蛋白的质谱分析数据覆盖了所预测病毒... 利用蛋白质组学技术,对纯化的严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒颗粒所含核蛋白进行初步分离与鉴定。质谱分析结果最终表明,SARS冠状病毒核蛋白的分子量位于47kD与52kD之间,所获得的SARS冠状病毒核蛋白的质谱分析数据覆盖了所预测病毒核蛋白氨基酸序列的87%,且符合率为100%。从而首次从蛋白质水平对SARS冠状病毒核蛋白的氨基酸序列进行了证实。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 SARS 冠状病毒 核蛋白 鉴定 蛋白质组学

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红色毛癣菌部分表达序列标签的分析 被引量：8

3

作者 马骊 王玲玲 +7 位作者 冷文川 杨剑 朱俊萍 董杰 薛颖 万哲 李若瑜 金奇 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2004年第2期150-155,共6页

红色毛癣菌是最常见和流行范围最广的一种浅部致病真菌.在构建红色毛癣菌cDNA文库的基础上,获得4002条ESTs.与GenBank数据库中的序列同源性比较表明,其中30%(1226条)与其他生物已知功能的基因产物具有不同程度的同源性,24.81%(989条)仅... 红色毛癣菌是最常见和流行范围最广的一种浅部致病真菌.在构建红色毛癣菌cDNA文库的基础上,获得4002条ESTs.与GenBank数据库中的序列同源性比较表明,其中30%(1226条)与其他生物已知功能的基因产物具有不同程度的同源性,24.81%(989条)仅得到简单的功能提示,45.19%(1787条)与目前已知的任何蛋白质都没有显著同源性,为全新的未知功能基因.对一些与红色毛癣菌生长代谢、信号传导、致病和耐药相关的重要功能基因做了初步分析,阐明了红色毛癣菌的部分重要代谢途径,为进一步探索其生理过程、致病和耐药机理,寻找新的药物靶标提供了重要的分子基础和线索. 展开更多

关键词 红色毛癣菌 功能基因组 CDNA文库 表达序列标签 药物靶标 致病真菌

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红色毛癣菌不同生长阶段的基因表达谱分析 被引量：3

4

作者 徐星晔 刘涛 +4 位作者 冷文川 董杰 薛颖 杨汉春 金奇 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第5期414-421,共8页

红色毛癣菌是最重要的浅表感染真菌.目前对红色毛癣菌分子和遗传学方面的研究还比较有限.应用cDNA芯片技术对红色毛癣菌不同生长阶段的基因表达谱进行了分析,获得了2044个在不同生长阶段差异表达的基因.聚类分析表明,这些基因可以分为3... 红色毛癣菌是最重要的浅表感染真菌.目前对红色毛癣菌分子和遗传学方面的研究还比较有限.应用cDNA芯片技术对红色毛癣菌不同生长阶段的基因表达谱进行了分析,获得了2044个在不同生长阶段差异表达的基因.聚类分析表明,这些基因可以分为3种不同的表达模式.本研究验证了先前的结论,即在红色毛癣菌中存在预储存的mRNA.对不同生长状态下转录谱和基因功能分析表明,糖酵解过程中的一些重要的酶具有相似的表达模式,说明在红色毛癣菌的生长过程中,这些酶可能具有共同的调控模式.同时,在红色毛癣菌生长过程中,一些参与诸如小GTPase调控、cAMP依赖的调控途径以及MAPK信号传导途径的基因表达也发生了变化.尽管这些基因和相关的调控途径在红色毛癣菌中的具体生物学功能还不清楚,但它们可能在其生长过程中起了调控作用. 展开更多

关键词 红色毛癣菌 基因表达谱 CDNA 芯片 生长阶段

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腰椎侧位骨密度测定的应用价值研究 被引量：3

5

作者 冷文川 张美荣 +1 位作者 刘燕 于长隆 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期235-238,共4页

目的 :观察应用双能X线测定腰椎椎体骨密度时正位和侧位结果的差别 ,探讨腰椎侧位测定骨密度辅助诊断骨质疏松症的价值。方法 :以 16 6名平均年龄为 6 4 .7岁的老年女性骨质疏松症患者为对象 ,测试其腰椎骨密度值 ,观察不同年龄受试者... 目的 :观察应用双能X线测定腰椎椎体骨密度时正位和侧位结果的差别 ,探讨腰椎侧位测定骨密度辅助诊断骨质疏松症的价值。方法 :以 16 6名平均年龄为 6 4 .7岁的老年女性骨质疏松症患者为对象 ,测试其腰椎骨密度值 ,观察不同年龄受试者腰椎正、侧位骨密度的差别 ,以及由此测试结果得到的诊断骨质疏松结论的差别。结果 :全部受试者的椎体正位骨密度检测均高于侧位(P <0 0 1) ,但在 113名年龄小于 6 5岁的受试者中 ,以此诊断骨质疏松症的结果并无显著性差异(P >0 0 5 ) ;5 3名年龄大于 6 5岁的受试者中 ,根据正、侧位骨密度的变化得到的骨质疏松症诊断出现较大偏差 (P <0 0 5 )。根据正位骨密度测定诊断骨质疏松症约有三分之一漏诊率。结论 :对绝经期骨质疏松患者可以用传统的正位腰椎骨密度测定的方法来诊断 ,不需另作侧位测定 ,对老年性骨质疏松症患者 ,则应加作腰椎侧位骨密度测定 。 展开更多

关键词 骨质疏松 双能X线测定 骨密度 腰椎 诊断

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红色毛癣菌孢子期与萌芽期基因表达比较分析 被引量：3

6

作者 杨莉 王玲玲 +9 位作者 彭俊平 于录 刘涛 冷文川 杨剑 陈立宏 张文亮 张骞 齐义鹏 金奇 《中国科学（C辑）》 CSCD 北大核心 2007年第2期227-233,共7页

红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)是最常见和流行范围最广的一种浅部感染真菌,它的孢子萌发是和致病密切相关且非常重要的发育过程.为研究出芽时生理、生化以及细胞学方面的改变,从红色毛癣菌cDNA文库中选取了3364条有明确功能注释的表... 红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)是最常见和流行范围最广的一种浅部感染真菌,它的孢子萌发是和致病密切相关且非常重要的发育过程.为研究出芽时生理、生化以及细胞学方面的改变,从红色毛癣菌cDNA文库中选取了3364条有明确功能注释的表达序列标签(ESTs)制备了cDNA芯片,对孢子期及萌芽期进行了基因表达变化的研究.数据分析表明,孢子萌发过程中有335个基因表达上调,主要是翻译、修饰蛋白及结构蛋白.细胞壁和细胞膜组分大量合成,暗示它们是细胞形态发生的基础.二组分信号转导系统的组成部分表达上调,推测它可能在红色毛癣菌孢子萌发过程中起着重要作用.各种代谢途径表达旺盛,特别是参与糖酵解和氧化磷酸化的基因基本都上调,说明在氧气和葡萄糖充足的环境下,孢子主要通过有氧呼吸获得能量.本研究对了解红色毛癣菌孢子萌发过程中基因表达的变化及其信号转导和代谢特点提供了重要线索,对其他浅部真菌的研究也具有重要意义. 展开更多

关键词 红色毛癣菌(Trichophyton rubrum) 孢子 萌发 CDNA芯片 表达序列标签(EST) 基因表达

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严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒S蛋白的鉴定与分析 被引量：1

7

作者 周世力 熊朝晖 +8 位作者 冷文川 段淑敏 李德新 王健伟 梁米芳 卫灿东 喻子牛 金奇 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期320-323,共4页

利用293细胞对SARS病人样品进行病毒扩增,培养上清中病毒颗粒经过纯化后,利用蛋白质组学技术,对纯化得到的SARS冠状病毒颗粒蛋白进行初步分离与鉴定。其中质谱分析结果最终表明,分子量约150kD的蛋白质的氨基酸序列与SARS-CoV基因组所预... 利用293细胞对SARS病人样品进行病毒扩增,培养上清中病毒颗粒经过纯化后,利用蛋白质组学技术,对纯化得到的SARS冠状病毒颗粒蛋白进行初步分离与鉴定。其中质谱分析结果最终表明,分子量约150kD的蛋白质的氨基酸序列与SARS-CoV基因组所预测S蛋白质序列高度吻合,从而首次从蛋白质水平对SARS冠状病毒S蛋白的氨基酸序列进行了证实。 展开更多

关键词 严重急性呼吸综合征 冠状病毒 S蛋白 蛋白质组学 SARS

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红色毛癣菌分泌性蛋白酶的分析 被引量：1

8

作者 冷文川 王玲玲 +2 位作者 卫灿东 杨剑 金奇 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期601-605,共5页

分泌性蛋白酶是红色毛癣菌致病的潜在毒力因子。在构建红色毛癣菌6个不同时间段cDNA文库的基础上,共获得了9683条uniqueESTs,通过生物信息学分析从中得到了18个可能的分泌性蛋白酶的EST序列,包括4个分泌性肽酶、1个分泌性金属蛋白酶、2... 分泌性蛋白酶是红色毛癣菌致病的潜在毒力因子。在构建红色毛癣菌6个不同时间段cDNA文库的基础上,共获得了9683条uniqueESTs,通过生物信息学分析从中得到了18个可能的分泌性蛋白酶的EST序列,包括4个分泌性肽酶、1个分泌性金属蛋白酶、2个细胞外丝氨酸蛋白酶、1个分泌性天冬氨酸蛋白酶、9个分泌性枯草杆菌蛋白酶样丝氨酸蛋白酶、1个空泡丝氨酸蛋白酶。这些分泌性蛋白酶在红色毛癣菌感染过程中可能分别与其获得营养、扩大侵袭范围及激起宿主免疫应答有关,这些结果为进一步研究红色毛癣菌感染和发病机制提供了重要的分子基础和线索。 展开更多

关键词 红色毛癣菌 分泌性蛋白酶 表达序列标签

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结核分枝杆菌H37Rv ORF的高通量克隆和表达方法的建立

9

作者 刘立国 冷文川 +2 位作者 郑建华 李锐 胡仲明 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期539-543,共5页

以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,采用Gateway重组表达系统,以基因长度200～2500 bp为标准,选择目的基因（n=384）,以ORF的保守序列设计引物并加上正反向AttB,通过PCR扩增获得基因片段检测入门克隆,得到的克隆有效率为374/384。通过两... 以结核分枝杆菌H37Rv基因组为模板,采用Gateway重组表达系统,以基因长度200～2500 bp为标准,选择目的基因（n=384）,以ORF的保守序列设计引物并加上正反向AttB,通过PCR扩增获得基因片段检测入门克隆,得到的克隆有效率为374/384。通过两次同源重组,这些基因片段被克隆到表达载体中,克隆效率为350/384。随后将这些重组表达质粒分别在2个表达菌株BL21和BL21-codonplus-RP中进行诱导表达,表达得率为270/384,并对其中64个进行了纯化,16个是可溶性表达。这种大规模高效率地克隆表达技术适合各种生物的开放阅读框的克隆表达,是一种高通量的克隆表达方法。 展开更多

关键词 GATEWAY技术 结核分枝杆菌H37Rv 高通量 表达 纯化染色体

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sRP技术在微量蛋白质组学分析中的应用

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作者 杨帅 刘明伟 +2 位作者 冷文川 秦钧 徐建明 《生物技术通讯》 CAS 2016年第2期228-232,262,共6页

目的:发展一种适用于微量临床样本的简单而高效的预分离方法,实现深度覆盖蛋白质组学分析的目的。方法:以H1975细胞系和胃黏膜活检组织等复杂样本为研究对象,比较基于高p H反相色谱微柱(s RP)技术在不同浓度梯度洗脱时的蛋白鉴定数目、... 目的:发展一种适用于微量临床样本的简单而高效的预分离方法,实现深度覆盖蛋白质组学分析的目的。方法:以H1975细胞系和胃黏膜活检组织等复杂样本为研究对象,比较基于高p H反相色谱微柱(s RP)技术在不同浓度梯度洗脱时的蛋白鉴定数目、蛋白定性与定量研究的重复性及不同组分间的肽段预分离效果,并将s RP技术初步运用到微量胃黏膜活检组织的蛋白质组学分析中,进一步注释鉴定的胃黏膜蛋白的生物学功能。结果:单个复杂样本蛋白鉴定的覆盖深度达到7500左右,时间缩短到8 h之内;在生物学重复性研究中,蛋白定性检测的重复率在90%以上,无标定量检测的相关系数R2则达到0.97;各组分之间的肽段预分离效果很好,最大的重复率也只有11.6%;在胃黏膜组学分析中,累积鉴定到9000多个非冗余蛋白,实现了对人类胃黏膜蛋白质组的深度覆盖。结论:s RP技术操作简单且重复性好,联合高通量质谱技术,实现了对微量临床样品的深度覆盖蛋白质组学分析。 展开更多

关键词 高pH反相色谱微柱(sRP)技术 预分离 质谱 蛋白质组学

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基于蛋白质组学高效富集肺癌组织转录因子 被引量：1

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作者 谢辉 陈振岗 +4 位作者 邓增华 刘金波 丁琛 冷文川 王广舜 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期996-996,共1页

转录因子（TFs）影响从细胞周期、代谢到细胞分化几乎所有生物过程,与肺癌的发生发展密切相关.但由于其低丰度性,在蛋白质组水平上分析鉴定肺癌TFs有很高的挑战性.目前我们设计的转录因子富集技术（TFRE）可以高效富集肺癌组织的TFs.

关键词 蛋白质组学 肺癌组织 转录因子 富集技术 细胞周期 细胞分化

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