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美国的人才工作及其借鉴
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作者 冯雪 《人事天地》 2013年第5期33-35,共3页
二战以来,美国是世界上移民的首选国家,对世界上包含技术人才在内的移民产生强大的吸引力。那么,美国是如何做到这一点的呢?2012年12月2日至12月24日笔者随人力资源和社会保障部“国际人才交流运作模式与方法培训团”赴美学习,期... 二战以来,美国是世界上移民的首选国家,对世界上包含技术人才在内的移民产生强大的吸引力。那么,美国是如何做到这一点的呢?2012年12月2日至12月24日笔者随人力资源和社会保障部“国际人才交流运作模式与方法培训团”赴美学习,期间对美国旧金山、洛杉矶和纽约三地的企业、大学和市、县政府进行了考察,侧重对美国人才工作进行了解,并对此进行了一些思考。 展开更多
关键词 人才工作 美国 借鉴 国际人才交流 社会保障部 技术人才 人力资源 吸引力
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新型抗原递送载体:细胞溶素A融合目的蛋白整合的重组外膜囊泡的构建与鉴定 被引量:1
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作者 王世杰 黄惟巍 +12 位作者 舒聪妍 黎奎 夏烨 李扬 李慧 孙鹏艳 杨旭 白红妹 孙文佳 刘存宝 褚晓杰 冯雪 马雁冰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1272-1278,共7页
细菌外膜囊泡(OMVs)是革兰氏阴性菌以出芽方式分泌的一种蛋白脂质体,可通过基因工程改造成为外源大分子抗原蛋白的载体。成孔蛋白细胞溶素A(Cly A)可作为引导序列将C-端融合的外源蛋白质定位在菌体及其所分泌的OMVs外膜上。利用Cly A融... 细菌外膜囊泡(OMVs)是革兰氏阴性菌以出芽方式分泌的一种蛋白脂质体,可通过基因工程改造成为外源大分子抗原蛋白的载体。成孔蛋白细胞溶素A(Cly A)可作为引导序列将C-端融合的外源蛋白质定位在菌体及其所分泌的OMVs外膜上。利用Cly A融合蛋白重组的OMVs可介导抗原呈递,制备疫苗。为验证这一假说,本研究拟以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为目的蛋白,采用重组技术,构建Cly A-EGFP融合蛋白表达载体,转化E.coli DH5α,获得Cly A-EGFP融合蛋白整合的重组细菌OMVs,探索Cly A/EGFP融合蛋白整合的OMVs作为一种制备新型疫苗载体的可行性。重组OMVs分别经蛋白酶K和/或EDTA处理后,蛋白质印迹分析显示,Cly A-EGFP融合蛋白有效地整合在重组的OMVs中,且EGFP呈现于表面。重组OMVs与小鼠巨噬细胞Raw264.7共同孵育后,以EGFP作为标记,荧光显微镜观察显示,OMVs可被巨噬细胞吞噬、摄取。进而,荧光显微镜及流式细胞术分析证明,重组的OMVs可被骨髓来源的树突状细胞(BMDCs)有效摄取,并促进BMDCs表达CD86和CD80,说明重组的OMVs可激活树突状细胞,促进其成熟。本研究结果提示,利用Cly A融合特异目的蛋白整合的重组OMVs,可作为外源蛋白质的载体,介导抗原呈递作用,在设计与制备疫苗中具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 外膜囊泡 疫苗 增强绿色荧光蛋白 抗原递呈细胞
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重组小鼠白细胞介素-33的原核表达制备及其粘膜免疫佐剂活性
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作者 冯雪 龙琼 +6 位作者 唐增华 黄惟巍 刘存宝 杨旭 孙文佳 白红妹 马雁冰 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期26-32,共7页
目的:白细胞介素(IL)-33对树突状细胞、巨噬细胞及T细胞等免疫细胞具有重要调控作用。利用大肠杆菌制备重组小鼠的IL-33,并初步考察其作为粘膜免疫佐剂应用的潜能与特点。方法:以IPTG诱导硫氧还蛋白(Trx)/IL-33融合蛋白在大肠杆菌DH5α... 目的:白细胞介素(IL)-33对树突状细胞、巨噬细胞及T细胞等免疫细胞具有重要调控作用。利用大肠杆菌制备重组小鼠的IL-33,并初步考察其作为粘膜免疫佐剂应用的潜能与特点。方法:以IPTG诱导硫氧还蛋白(Trx)/IL-33融合蛋白在大肠杆菌DH5α中的表达,并通过QSepharose离子交换和Ni^(++)金属螯合亲和层析纯化Trx/IL-33,进一步经肠激酶切割获得成熟形式的IL-33。重组HBcAg混合纯化的IL-33后经滴鼻免疫小鼠,考察HBcAg特异的IgA及IgG_1、IgG_(2a)的应答。结果:纯化的重组IL-33具有与标准品相当的促巨噬细胞RAW264.7表达TNF-α的体外细胞生物学活性。作为佐剂可显著增强滴鼻粘膜免疫激发的不同粘膜组织中HBcAg特异的IgA应答,以及血清与支气管肺泡灌洗液中特异IgG_1的应答水平,而抑制IgG_(2a)应答。结论:利用大肠杆菌可制备活性IL-33,其具有粘膜免疫佐剂的应用潜能。 展开更多
关键词 重组 白细胞介素-33 表达 粘膜免疫 佐剂
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