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血清外泌体的提取方法与鉴定 被引量：1
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作者 李雪洁 付洁 +1 位作者 冀元凯 宋海峰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1400-1406,共7页
目的:建立阴选纯化富集(NSPE)法,从血清中高效、快速提取外泌体,并对外泌体进行鉴定。方法:利用低密度脂蛋白受体与低密度脂蛋白(LDL)结合的原理,去除人血清中大量LDL干扰,再通过外泌体表面磷脂分子的磷酸盐基团与二氧化锆(ZrO_(2))双... 目的:建立阴选纯化富集(NSPE)法,从血清中高效、快速提取外泌体,并对外泌体进行鉴定。方法:利用低密度脂蛋白受体与低密度脂蛋白(LDL)结合的原理,去除人血清中大量LDL干扰,再通过外泌体表面磷脂分子的磷酸盐基团与二氧化锆(ZrO_(2))双配位结合的原理富集外泌体。使用纳米流式细胞仪、透射电子显微镜来检测外泌体的粒径分布、颗粒浓度和形态特征,蛋白免疫印迹法检测外泌体表面标志性蛋白。使用基因本体论数据库和京都基因与基因组百科全书数据库对外泌体内部的microRNAs(miRNAs)进行基因通路分析。结果:该方法可在60 min从血清中有效提取外泌体。外泌体颗粒浓度为(2.94±0.3)×10^(10)颗粒·mL^(-1),粒径大小为(88.07±2.94)nm,并呈现标志性蛋白TSG101~+、CD9~+。外泌体内部miRNAs与免疫、代谢过程等相关。结论:建立的NSPE法可从血清中高效、快速地提取外泌体,用于健康监测和医学检验。 展开更多
关键词 外泌体 医学检验 ZrO_(2) MIRNAS 阴选纯化富集法
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MATP在不同毛色羊驼皮肤中的表达、定位及与其他基因的相关性分析 被引量：1
2
作者 冀元凯 田雪 +4 位作者 范瑞文 于秀菊 赵园园 马淑慧 董常生 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期502-508,共7页
本研究旨在探索膜相关转运蛋白(MATP)与羊驼毛色形成的相关性。以白色和棕色的成年羊驼为研究对象,主要用荧光定量PCR技术分析MATP基因在不同毛色羊驼皮肤的相对表达量、免疫组织化学法和Western blot对MATP蛋白在不同毛色羊驼皮肤中的... 本研究旨在探索膜相关转运蛋白(MATP)与羊驼毛色形成的相关性。以白色和棕色的成年羊驼为研究对象,主要用荧光定量PCR技术分析MATP基因在不同毛色羊驼皮肤的相对表达量、免疫组织化学法和Western blot对MATP蛋白在不同毛色羊驼皮肤中的定位和表达进行研究。荧光定量PCR结果显示,棕色羊驼中MATP的mRNA相对表达量是白色羊驼的3.047倍(P<0.05);Western blot结果表明,羊驼皮肤组织总蛋白提取物中存在相对分子质量约53ku的产物,棕色羊驼的皮肤平均蛋白表达量显著高于白色羊驼(P<0.05);免疫组化结果显示,MATP在羊驼皮肤毛囊的表皮、根鞘及毛球部均表达。MATP与黑色素细胞分布及含量关系密切,可能通过调控黑色素生成从而参与羊驼毛色形成过程。 展开更多
关键词 MATP 羊驼 皮肤
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