期刊导航
期刊开放获取
cqvip
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
3
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体
被引量：
3
1
作者
耿晓姗
刘秦
+2 位作者
党
会
杰
武军政
罗丽娟
《热带生物学报》
2016年第2期232-236,共5页
高效低背景T-载体的构建可显著提高克隆PCR产物的效率。笔者介绍1种在实验室常规条件下简单快捷制备高效低背景T载体的方法。将含有限制酶Xcm I酶切位点的ccd B致死基因作为插入DNA片段连接到p MD19-T Simple Vector骨架上得到重组质粒...
高效低背景T-载体的构建可显著提高克隆PCR产物的效率。笔者介绍1种在实验室常规条件下简单快捷制备高效低背景T载体的方法。将含有限制酶Xcm I酶切位点的ccd B致死基因作为插入DNA片段连接到p MD19-T Simple Vector骨架上得到重组质粒,通过菌落PCR、酶切分析及测序验证正确的重组质粒经限制酶Xcm I酶切即得到T-载体。该T-载体含有的ccd B致死基因可以降低载体自连的背景干扰,提高了T-A克隆效率,具有较高的阳性克隆率,继承了p MD19-T Simple Vector的优点,与普通T-载体相比,还具有高效、低背景的优越性。整个操作过程简易可行,具备一定的应用前景。
展开更多
关键词
高效
低背景
ccdB基因
pMD19-T
SIMPLE
VECTOR
T-载体
下载PDF
职称材料
木薯己糖载体基因MeSTP7的克隆与功能验证
被引量：
4
2
作者
武军政
刘秦
+2 位作者
党
会
杰
吴远航
罗丽娟
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期2032-2039,共8页
己糖载体属于单糖转运蛋白家族,具有转运单糖类物质的作用,广泛存在于植物体各组织中并参与植物体的生长与发育。为了研究木薯己糖载体转运单糖的能力与对木薯生长发育的影响,本试验利用木薯全基因组数据库,通过RT-PCR方法从木薯KU50中...
己糖载体属于单糖转运蛋白家族,具有转运单糖类物质的作用,广泛存在于植物体各组织中并参与植物体的生长与发育。为了研究木薯己糖载体转运单糖的能力与对木薯生长发育的影响,本试验利用木薯全基因组数据库,通过RT-PCR方法从木薯KU50中克隆得到了木薯己糖载体基因MeSTP7,酵母异源表达与亚细胞定位实验结果表明MeSTP7具有转运葡萄糖、果糖、甘露糖和半乳糖的能力,定位在细胞膜上;qRT-PCR结果表明MeSTP7在高淀粉木薯品种KU50和低淀粉木薯品种CAS36根发育过程中的表达量均呈现逐渐降低的趋势,MeSTP7在KU50和CAS36的叶片中的表达量均为最高。本研究克隆得到了木薯己糖载体基因MeSTP7,并验证了MeSTP7的功能,为木薯己糖载体的研究提供了理论参考。
展开更多
关键词
木薯
己糖载体
酵母异源功能验证
亚细胞定位
表达分析
原文传递
一种快速高效的基于CcdB致死基因和SmaⅠ酶切位点的克隆体系构建
被引量：
3
3
作者
党
会
杰
刘秦
+4 位作者
许文茸
张传玲
王森
涂鲁迪
牛晓磊
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期2874-2879,共6页
PCR片段快速准确的构建到克隆载体是分子生物学实验的关键技术之一。快速高效低背景克隆体系的建立可以显著提高PCR产物的克隆效率及大大缩短克隆时间。本实验室开发出一种在常规条件下进行快速高效PCR连接的克隆体系。本研究将含有ccd ...
PCR片段快速准确的构建到克隆载体是分子生物学实验的关键技术之一。快速高效低背景克隆体系的建立可以显著提高PCR产物的克隆效率及大大缩短克隆时间。本实验室开发出一种在常规条件下进行快速高效PCR连接的克隆体系。本研究将含有ccd B致死基因的gateway cassette片段,插入p UC18载体,成功构建p UC18-Ccd B致死载体,在此基础上结合ccd B致死基因内部的SmaⅠ酶切位点,开发出将PCR产物、SmaⅠ限制性内切酶、T4连接酶及p UC18-Ccd B致死载体一起加入离心管后共孵育10 min,即可转化大肠杆菌。对插入片段的重组质粒进行了酶切,PCR和测序验证,证实了该克隆体系高效可行,具有极高的阳性克隆率。该体系的建立具有高效低背景的特点,并且极大的减少了克隆步骤,省去了胶回收及双酶切过程,缩短了克隆时间,同时继承了p UC18载体的优点,具有很强的应用性及推广性。
展开更多
关键词
快速高效
克隆体系
ccdB基因
SmaⅠ酶切位点
原文传递
题名
利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体
被引量：
3
1
作者
耿晓姗
刘秦
党
会
杰
武军政
罗丽娟
机构
海南大学农学院
海南大学海南省热带生物资源可持续利用重点实验室/省部共建国家重点实验室培育基地
出处
《热带生物学报》
2016年第2期232-236,共5页
基金
国家自然科学基金(31360575)
海南大学优秀研究生学位论文培育计划(M8K3124001003002)
+1 种基金
"木薯和橡胶糖代谢
耐贫瘠和抗病抗理"项目(ZXBJH-XK001)
文摘
高效低背景T-载体的构建可显著提高克隆PCR产物的效率。笔者介绍1种在实验室常规条件下简单快捷制备高效低背景T载体的方法。将含有限制酶Xcm I酶切位点的ccd B致死基因作为插入DNA片段连接到p MD19-T Simple Vector骨架上得到重组质粒,通过菌落PCR、酶切分析及测序验证正确的重组质粒经限制酶Xcm I酶切即得到T-载体。该T-载体含有的ccd B致死基因可以降低载体自连的背景干扰,提高了T-A克隆效率,具有较高的阳性克隆率,继承了p MD19-T Simple Vector的优点,与普通T-载体相比,还具有高效、低背景的优越性。整个操作过程简易可行,具备一定的应用前景。
关键词
高效
低背景
ccdB基因
pMD19-T
SIMPLE
VECTOR
T-载体
Keywords
high efficiency
low background
ccdB gene
pMD19-T Simple Vector
T-vector
分类号
Q782 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
木薯己糖载体基因MeSTP7的克隆与功能验证
被引量：
4
2
作者
武军政
刘秦
党
会
杰
吴远航
罗丽娟
机构
海南大学热带农林学院
海南省热带生物资源利用重点实验室
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第5期2032-2039,共8页
基金
国家自然科学基金(31660412)资助
文摘
己糖载体属于单糖转运蛋白家族,具有转运单糖类物质的作用,广泛存在于植物体各组织中并参与植物体的生长与发育。为了研究木薯己糖载体转运单糖的能力与对木薯生长发育的影响,本试验利用木薯全基因组数据库,通过RT-PCR方法从木薯KU50中克隆得到了木薯己糖载体基因MeSTP7,酵母异源表达与亚细胞定位实验结果表明MeSTP7具有转运葡萄糖、果糖、甘露糖和半乳糖的能力,定位在细胞膜上;qRT-PCR结果表明MeSTP7在高淀粉木薯品种KU50和低淀粉木薯品种CAS36根发育过程中的表达量均呈现逐渐降低的趋势,MeSTP7在KU50和CAS36的叶片中的表达量均为最高。本研究克隆得到了木薯己糖载体基因MeSTP7,并验证了MeSTP7的功能,为木薯己糖载体的研究提供了理论参考。
关键词
木薯
己糖载体
酵母异源功能验证
亚细胞定位
表达分析
Keywords
Cassva, Hexose transporter, Heterologous expression in yeast, Subcellular location, Expression analysis
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
S533 [农业科学—作物学]
原文传递
题名
一种快速高效的基于CcdB致死基因和SmaⅠ酶切位点的克隆体系构建
被引量：
3
3
作者
党
会
杰
刘秦
许文茸
张传玲
王森
涂鲁迪
牛晓磊
机构
海南大学热带农林学院
海南省热带生物资源可持续利用重点实验室
海南大学材料与化工学院
出处
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第7期2874-2879,共6页
基金
海南省科学自然基金(20153071)
2016年度留学人员科技活动项目择优资助(人社厅函(2016)176-4)
海南大学科研启动基金(Kyqd1518)共同资助
文摘
PCR片段快速准确的构建到克隆载体是分子生物学实验的关键技术之一。快速高效低背景克隆体系的建立可以显著提高PCR产物的克隆效率及大大缩短克隆时间。本实验室开发出一种在常规条件下进行快速高效PCR连接的克隆体系。本研究将含有ccd B致死基因的gateway cassette片段,插入p UC18载体,成功构建p UC18-Ccd B致死载体,在此基础上结合ccd B致死基因内部的SmaⅠ酶切位点,开发出将PCR产物、SmaⅠ限制性内切酶、T4连接酶及p UC18-Ccd B致死载体一起加入离心管后共孵育10 min,即可转化大肠杆菌。对插入片段的重组质粒进行了酶切,PCR和测序验证,证实了该克隆体系高效可行,具有极高的阳性克隆率。该体系的建立具有高效低背景的特点,并且极大的减少了克隆步骤,省去了胶回收及双酶切过程,缩短了克隆时间,同时继承了p UC18载体的优点,具有很强的应用性及推广性。
关键词
快速高效
克隆体系
ccdB基因
SmaⅠ酶切位点
Keywords
Fast and high-efficiency, Cloning system, ccdB gene, Sma I enzyme cutting site
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
利用毒素蛋白基因ccdB构建高效低背景T-载体
耿晓姗
刘秦
党
会
杰
武军政
罗丽娟
《热带生物学报》
2016
3
下载PDF
职称材料
2
木薯己糖载体基因MeSTP7的克隆与功能验证
武军政
刘秦
党
会
杰
吴远航
罗丽娟
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017
4
原文传递
3
一种快速高效的基于CcdB致死基因和SmaⅠ酶切位点的克隆体系构建
党
会
杰
刘秦
许文茸
张传玲
王森
涂鲁迪
牛晓磊
《基因组学与应用生物学》
CAS
CSCD
北大核心
2017
3
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部
