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自噬抑制剂巴弗洛霉素A1对巨噬细胞极化的影响 被引量：2
1
作者 王帆 王豪 +4 位作者 宋雪斌 孙慧珍 光姣娜 南文滨 张其清 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1023-1028,共6页
目的:探讨自噬下游抑制剂巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1,Baf A1)对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7极化的影响。方法:用Baf A1作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,酶联免疫吸附实验检测M1/M2极化相关细胞因子的含量;流式细胞术检测细胞表面M1/M2... 目的:探讨自噬下游抑制剂巴弗洛霉素A1(bafilomycin A1,Baf A1)对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7极化的影响。方法:用Baf A1作用于小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,酶联免疫吸附实验检测M1/M2极化相关细胞因子的含量;流式细胞术检测细胞表面M1/M2极化相关标志物;免疫荧光观察自噬小体形成情况;Western blot检测自噬相关蛋白水平变化。结果:Baf A1处理后,RAW264.7细胞分泌的促炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)显著增高(P<0.01),而抑炎性细胞因子IL-10和IL-13的含量变化无显著差异。Baf A1处理的细胞表面标志物中CD197和HLA-DR(M1标志物)双阳性率与对照组相比显著升高(P<0.05),说明Baf A1可以诱导巨噬细胞向M1方向极化。免疫荧光结果显示,Baf A1处理后细胞自噬小体显著增多(P<0.05)。Western blot结果显示Baf A1处理后,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达显著升高(P<0.05),而P62蛋白表达无显著差异。在自噬激活剂雷帕霉素处理组中,自噬体同样显著增多(P<0.05),但P62蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:巴弗洛霉素A1可以诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7向M1方向极化,可能与其抑制自噬下游自噬溶酶体的形成有关。 展开更多
关键词 自噬 巨噬细胞 极化 炎症
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应用24个微卫星标记分析SD和Wistar大鼠的遗传多样性 被引量：1
2
作者 李欢 魏杰 +7 位作者 左琴 王洪 周佳琪 光姣娜 范涛 付瑞 刘佐民 岳秉飞 《实验动物科学》 2022年第6期32-38,共7页
目的 通过SD和Wistar大鼠群体遗传多样性分析,为其质量控制提供基础数据。方法 采用微卫星DNA标记技术,选取分布于21条染色体上的24个微卫星位点分别对12对SD大鼠和Wistar大鼠的DNA样本进行PCR扩增,所得扩增产物经二代测序分型,再利用Po... 目的 通过SD和Wistar大鼠群体遗传多样性分析,为其质量控制提供基础数据。方法 采用微卫星DNA标记技术,选取分布于21条染色体上的24个微卫星位点分别对12对SD大鼠和Wistar大鼠的DNA样本进行PCR扩增,所得扩增产物经二代测序分型,再利用PopGen32软件、Littleprogram0.6和GenePop分别进行等位基因、平均杂合度、多态信息含量及遗传平衡检验参数的计算。结果 SD和Wistar大鼠群体分别在24个微卫星位点检测到平均等位基因数3、2.95个,平均杂合度为0.434 4、0.426 1,平均多态信息含量分别为0.38、0.37,分别有10、9个位点偏离了Hardy-Weinberg遗传平衡,其中7、4个位点表现为杂合子缺失。结论 SD和Wistar大鼠封闭群遗传多样性略低于理想封闭群水平,需要在种群繁育中注重科学管理监测,避免近交。 展开更多
关键词 微卫星 封闭群 WISTAR大鼠 SD大鼠 遗传多样性
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能力验证计划中酯酶-1血清样本稳定性研究 被引量：2
3
作者 王洪 魏杰 +3 位作者 光姣娜 周佳琪 肖镜 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期64-69,共6页
目的对能力验证计划中的血清样本进行稳定性检验。方法依据CNAS-CL04,对样本进行保藏稳定性检验,加速稳定性检验,运输稳定性检验以及最终稳定性验证。结果该样本在-20℃和4℃条件下可以稳定保存50 d;该样本在37℃和室温(19.5℃~21.5℃)... 目的对能力验证计划中的血清样本进行稳定性检验。方法依据CNAS-CL04,对样本进行保藏稳定性检验,加速稳定性检验,运输稳定性检验以及最终稳定性验证。结果该样本在-20℃和4℃条件下可以稳定保存50 d;该样本在37℃和室温(19.5℃~21.5℃)条件下可以稳定保存27 d;在运输条件下,样本可以稳定保存;样本通过最终稳定性验证。结论该样本能够满足能力验证计划的要求,酯酶-1血清样本是开展能力验证计划的理想样本。 展开更多
关键词 能力验证 实验动物 生化标记 稳定性 酯酶-1
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实验动物质控能力验证中酯酶-1和转铁蛋白检测能力评价
4
作者 王洪 魏杰 +2 位作者 光姣娜 周佳琪 岳秉飞 《实验动物科学》 2022年第3期11-15,共5页
目的通过组织实施能力验证计划,帮助实验动物质量控制实验室发现问题,提高实验室质量控制水平。方法依据CNAS-CL03能力验证提供者认可准则组织实施能力验证计划,样品通过均匀性和稳定性检验。参加单位在规定时限内提交检测结果和相关原... 目的通过组织实施能力验证计划,帮助实验动物质量控制实验室发现问题,提高实验室质量控制水平。方法依据CNAS-CL03能力验证提供者认可准则组织实施能力验证计划,样品通过均匀性和稳定性检验。参加单位在规定时限内提交检测结果和相关原始记录,将实验室结果与标准结果进行对比分析。结果共有9家实验室参加本次能力验证计划,其中7家实验室提交了满意结果,本次能力验证计划的满意率为77.78%。结论实验动物质量控制实验室在酯酶-1和转铁蛋白的整体检测水平较高,少数实验室存在提升空间。 展开更多
关键词 能力验证 实验动物 酯酶-1 转铁蛋白 实验室质量控制
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不同因素对苹果酸酶-1和异柠檬酸脱氢酶-1标准样品的影响分析
5
作者 魏杰 王洪 +3 位作者 光姣娜 周佳琪 付瑞 岳秉飞 《实验动物科学》 2022年第3期40-44,共5页
目的分析温度-时间、浓度、冻融、运输条件和不同品系来源对苹果酸酶-1(malic enzyme-1,ME-1)和异柠檬酸脱氢酶-1(isocitrate dehydorgenase-1,IDH-1)标准样品的影响。方法制备C57BL/6、BALB/c和CBA三种近交系小鼠来源的标准样品,经均... 目的分析温度-时间、浓度、冻融、运输条件和不同品系来源对苹果酸酶-1(malic enzyme-1,ME-1)和异柠檬酸脱氢酶-1(isocitrate dehydorgenase-1,IDH-1)标准样品的影响。方法制备C57BL/6、BALB/c和CBA三种近交系小鼠来源的标准样品,经均匀性测定后,随机抽样按照GB/T 14927.1—2008中的检测方法进行测试。温度-时间因素以4℃、室温(RT)和37℃这3个温度为观测纵坐标,1、2、3、7、14和21 d为观测纵坐标。在每个坐标交点,每品系分别随机抽取两管。浓度因素按照每品系一管进行原倍、1/2、1/4和1/8倍进行梯度测试。冻融因素,每品系3管,-20℃冻存2 h至室温融化3次为条件测试。所有实验均为相同的运输条件、干冰冷链及北京往返沈阳、西安、成都三地测试。结果不同品系来源标准样品在温度-时间、浓度、冻融和运输条件下无显著差异。各标准样品21 d内在4℃及室温(RT)条件下,均能稳定存在,但37℃仅能稳定存在2 d。原倍稀释至1/8浓度、3次冻融和干冰运输三地往返后,样品检测结果显示稳定。结论制备的ME-1和IDH-1标准样品具备均一性、稳定性和可比性,满足能力验证计划需求。 展开更多
关键词 苹果酸酶-1 异柠檬酸脱氢酶-1 均匀性 稳定性 影响因素
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hACE2-KI/NIFDC小鼠主要生物学特性指标测定 被引量：1
6
作者 魏杰 王洪 +8 位作者 刘甦苏 光姣娜 周佳琪 冯育芳 秦骁 王莎莎 范昌发 付瑞 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第9期39-42,共4页
目的测定自培育hACE2-KI/NIFDC转基因小鼠的生物学特性指标。方法分别测定4周龄和8周龄各10只雌性hACE2-KI/NIFDC小鼠的11项脏器系数、22项血液生理指标和13项血液生化指标,利用统计学方法分析组间差异。结果 4周龄组的5项脏器系数(脾... 目的测定自培育hACE2-KI/NIFDC转基因小鼠的生物学特性指标。方法分别测定4周龄和8周龄各10只雌性hACE2-KI/NIFDC小鼠的11项脏器系数、22项血液生理指标和13项血液生化指标,利用统计学方法分析组间差异。结果 4周龄组的5项脏器系数(脾、肺、胸腺、左肾、右肾,P<0.01)和3项血液生理指标(MCV、MCH、EOS,P<0.05)高于8周龄组,5项指标(MON%、ALP,P<0.05;心脏脏器系数、AST、P,P<0.01)低于8周龄组。结论 hACE2-KI/NIFDC小鼠生物学特性指标的测定为其应用研究提供了基础数据。 展开更多
关键词 血管紧张素转化酶2 转基因小鼠 脏器系数 血液生理 生化指标
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基于团体标准T/CALAS 21-2017的Wistar大鼠微卫星DNA群体遗传质量分析 被引量：1
7
作者 魏杰 左琴 +7 位作者 王洪 李欢 周佳琪 光姣娜 范涛 刘佐民 付瑞 岳秉飞 《实验动物与比较医学》 CAS 2021年第6期528-534,共7页
目的利用团体标准T/CALAS 21—2017推荐的方法对不同时期封闭群Wistar大鼠的遗传质量进行分析,同时进行团体标准T/CALAS 21—2017的适用性评价。方法2015年、2019年选测的Wistar大鼠分别命名为A组和B组。按团体标准T/CALAS 21—2017要求... 目的利用团体标准T/CALAS 21—2017推荐的方法对不同时期封闭群Wistar大鼠的遗传质量进行分析,同时进行团体标准T/CALAS 21—2017的适用性评价。方法2015年、2019年选测的Wistar大鼠分别命名为A组和B组。按团体标准T/CALAS 21—2017要求,使用25对微卫星引物获取两组封闭群Wistar大鼠的遗传参数进行质量分析,利用多态性信息含量(polymorphism information content,PIC)分析位点多态性。结果A组和B组大鼠中分别检测到100个和69个等位基因。两群体平均杂合度分别为0.574和0.447,平均PIC分别为0.541和0.393。结论团体标准T/CALAS 21—2017在封闭群大鼠遗传质量分析中具有良好的适用性,A组Wistar大鼠的遗传多样性优于B组。 展开更多
关键词 WISTAR大鼠 T/CALAS 21-2017 封闭群 微卫星DNA 遗传多样性
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hVEGFR2-KI小鼠血液生理生化参数的测定与分析
8
作者 光姣娜 魏杰 +5 位作者 王洪 刘甦苏 熊芮 贾松华 范昌发 岳秉飞 《实验动物科学》 2020年第1期15-21,共7页
目的对不同性别的4周龄、8周龄C57BL/6-Kdrem1(h KDR)/NIFDC(以下简称hVEGFR2-KI)小鼠的血液参数进行测定,分析性别以及年龄对于该品系小鼠血液参数的影响。方法分别取20只4周龄、8周龄小鼠雌雄各半,采静脉血。用日本光电Mek7222血细胞... 目的对不同性别的4周龄、8周龄C57BL/6-Kdrem1(h KDR)/NIFDC(以下简称hVEGFR2-KI)小鼠的血液参数进行测定,分析性别以及年龄对于该品系小鼠血液参数的影响。方法分别取20只4周龄、8周龄小鼠雌雄各半,采静脉血。用日本光电Mek7222血细胞分析仪测定hVEGFR2-KI小鼠的生理指标,奥林巴斯AU400全自动生化分析仪测定生化指标。结果在所测得的生理生化指标中,4周龄的hVEGFR2-KI小鼠雌雄之间于血红蛋白浓度(HGB)、总蛋白(TP)、总胆固醇(CHO)3项指标有显著差异(P<0.05),在红细胞计数(RBC)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)4项指标上有极显著差异(P<0.01)。8周龄的hVEGFR2-KI小鼠雌雄之间共有11项生理生化指标有极显著差异(P<0.01),分别是RBC、HCT、HGB、血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、中性粒细胞绝对值(NEUT)、单核细胞百分率(MON%)7项血液生理指标和CHO、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)4项血液生化指标;有5项具有显著差异(P<0.05)的指标,包括淋巴细胞百分率(LYM%)、中性粒细胞百分率(NEUT%)、TP、尿素(BUN)和磷(P)。不同周龄hVEGFR2-KI小鼠之间的差异分布更广,其中具有极显著差异(P<0.01)的有RBC、HCT、MCH、HGB、白细胞计数(WBC)、平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度(RDW)、平均血小板体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、淋巴细胞绝对值(LYM)、单核细胞百分率(MON%)、TP、CHO、白蛋白(ALB)、ALP、肌酐(CREA)、GLU、P共18项指标;具有显著差异的为PLT、LYM%、NEUT%、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、TG共5项指标。结论本次研究测定了不同性别的4周龄、8周龄的hVEGFR2-KI小鼠的生理生化指标,为hVEGFR2-KI小鼠的应用以及正常血液参数标准提供一定参考。 展开更多
关键词 hVEGFR2-KI小鼠 生理生化指标 性别 年龄
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R26-hSCARB2小鼠生理生化指标的测定与分析
9
作者 周佳琪 魏杰 +6 位作者 王洪 刘甦苏 光姣娜 熊芮 王辰飞 范昌发 岳秉飞 《实验动物科学》 2021年第4期28-32,共5页
目的测定R26-hSCARB2小鼠的血液生理生化指标,分析性别和周龄对上述指标的影响。方法分别取20只4周龄和8周龄的R26-hSCARB2小鼠,雌雄各半。取静脉血后,测定22项血液生理指标和12项血液生化指标,使用统计学方法分析各指标在性别和周龄间... 目的测定R26-hSCARB2小鼠的血液生理生化指标,分析性别和周龄对上述指标的影响。方法分别取20只4周龄和8周龄的R26-hSCARB2小鼠,雌雄各半。取静脉血后,测定22项血液生理指标和12项血液生化指标,使用统计学方法分析各指标在性别和周龄间的差异。结果检测的22项生理指标和12项生化指标中,4周龄的R26-hSCARB2小鼠雌雄之间在淋巴细胞绝对值(LYM)、中性粒细胞百分率(NEUT%)及尿素(BUN)指标上具有显著差异(P<0.05),白细胞计数(WBC)、总胆固醇(CHO)及甘油三酯(TG)指标上具有极显著差异(P<0.01)。8周龄的R26-hSCARB2小鼠雌雄之间在WBC、LYM、单核细胞百分率(MON%)、嗜碱性粒细胞百分率(BAS%)、总蛋白(TP)、磷(P)及CHO指标上具有极显著差异(P<0.01);在血小板计数(PLT)、血小板分布宽度(PDW)、中性粒细胞绝对值(NEUT)、嗜酸性粒细胞百分率(EOS%)、白蛋白(ALB)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)及TG指标上,具有显著差异(P<0.05)。不同周龄的R26-hSCARB2小鼠在WBC、红细胞分布宽度(RDW)、PLT、LYM、单核细胞绝对值(MON)、淋巴细胞百分率(LYM%)、MON%、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、TP、ALB、ALP、BUN、肌酐(CREA)、葡萄糖(GLU)、钙(Ca)、P、CHO及TG指标上具有极显著差异(P<0.01),在血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)、NEUT及NEUT%指标上具有显著差异(P<0.05)。结论性别和周龄都会影响R26-hSCARB2小鼠的血液生理生化指标,但周龄对该小鼠的血液生理生化指标的影响更显著。本实验为R26-hSCARB2小鼠的研究应用提供了基础的数据。 展开更多
关键词 R26-hSCARB2小鼠 性别 周龄 生理 生化
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应用微卫星技术比较两个实验小鼠群体遗传结构的差异
10
作者 光姣娜 左琴 +3 位作者 魏杰 周佳琪 王洪 岳秉飞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期42-49,共8页
目的应用微卫星标记比较两个实验小鼠群体的遗传结构组成。方法应用36个微卫星标记分析两个实验小鼠群体的遗传结构组成。从两个群体中各提取38份基因组DNA,进行PCR扩增和基因测序,应用统计分析软件PopGen1.32和Littleprogram0.6计算两... 目的应用微卫星标记比较两个实验小鼠群体的遗传结构组成。方法应用36个微卫星标记分析两个实验小鼠群体的遗传结构组成。从两个群体中各提取38份基因组DNA,进行PCR扩增和基因测序,应用统计分析软件PopGen1.32和Littleprogram0.6计算两个群体的遗传结构参数。结果A群的平均等位基因数为2.4839,平均杂合度为0.3376,平均多态性信息含量为0.2875。B群的平均等位基因数为3.4839,平均杂合度为0.4806,平均多态性信息含量为0.4088。结论两个实验小鼠群体的遗传结构组成存在差异,长期封闭繁育导致群体遗传结构发生改变。建议对封闭群实验动物种群进行定期的遗传结构监测,确保实验动物的遗传质量。 展开更多
关键词 实验小鼠 遗传结构监测 微卫星标记 ddY
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