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非洲猪瘟病毒解旋酶D1133L基因序列分析、蛋白结构预测及亚细胞定位 被引量：10
1
作者 侯景 申超超 +10 位作者 张大俊 杨博 史喜绢 张婷 崔卉梅 袁兴国 赵登率 陈学辉 张克山 郑海学 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期1953-1962,共10页
旨在通过预测分析和亚细胞定位研究非洲猪瘟病毒(ASFV)D1133L基因结构、亚细胞定位与功能间的关系。作者使用Mega6.0软件绘制了7株不同基因型的D1133L解旋酶和ASFV编码的其他5个解旋酶基因的系统进化树,使用EXPASY、PRABI和SWISS-MODEL... 旨在通过预测分析和亚细胞定位研究非洲猪瘟病毒(ASFV)D1133L基因结构、亚细胞定位与功能间的关系。作者使用Mega6.0软件绘制了7株不同基因型的D1133L解旋酶和ASFV编码的其他5个解旋酶基因的系统进化树,使用EXPASY、PRABI和SWISS-MODEL软件预测了该基因所编码蛋白序列的二、三级结构;根据GenBank公布的ASFV序列(LR743116.1),合成D1133L基因并构建其重组真核表达质粒pCMV-D1133L,蛋白免疫印迹(Western blot,WB)验证该基因表达后,将重组质粒转染至PK-15细胞,应用间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)研究了该蛋白的亚细胞定位。结果表明,通过ASFV解旋酶的基因系统进化树,发现5种解旋酶基因均相对保守。D1133L基因全长3402 bp,表达的蛋白为124.63 ku,G+C含量为6.1%,A+T含量为10.6%;二级结构分析表明α螺旋占48.90%,扩展链占13.50%,无规卷曲为33.27%;三级结构分析表明六自由度结构(six degree of freedom,QMQE)为0.20,覆盖率84%,且预测以α螺旋为主的高级结构;通过LOCSVMPSI分析预测,显示D1133L蛋白定位于细胞核内与细胞质内的概率是相同的。WB结果显示pCMV-D1133L质粒正常表达,IFA试验证明ASFV编码的解旋酶D1133L同时分布于细胞核和细胞质。本研究通过对D1133L基因序列、结构功能预测,并通过IFA验证了D1133L亚细胞分布,为进一步揭示D1133L基因功能奠定了一定基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 解旋酶 D1133L基因 序列分析 结构预测 亚细胞定位
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不同调控元件驱动下菊欧氏杆菌纤维素酶celY基因在大肠杆菌中表达的研究 被引量：7
2
作者 陈科 黄潇 +4 位作者 路蕾 邢芸 侯景 吴洁 刘景晶 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期24-28,共5页
目的:以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法找到了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。为提高纤维素酶celY基因在原核细胞中的分泌表达量,比较了由不同启动子和信号肽调控的c... 目的:以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法找到了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。为提高纤维素酶celY基因在原核细胞中的分泌表达量,比较了由不同启动子和信号肽调控的celY基因在大肠杆菌中的表达水平。方法:分别构建了由脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽调控的多种表达载体与由纤维素酶celY基因自身的启动子和信号肽调控的表达载体相比较。结果:由脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽调控的表达载体都不同程度提高了celY基因的分泌表达量。结论:脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽都不失为构建强分泌表达载体的可选元件。 展开更多
关键词 菊欧氏杆菌 纤维素酶 启动子 信号肽 分泌表达
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非洲猪瘟病毒MGF 360-9L基因序列分析、蛋白结构预测及亚细胞定位 被引量：8
3
作者 申超超 李国丽 +7 位作者 张大俊 徐国伟 侯景 李丹 党文 张克山 郑海学 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1371-1381,共11页
前期研究结果表明,非洲猪瘟病毒(ASFV)MGF 360-9L能显著抑制宿主天然免疫应答,故通过比较、分析ASFV中MGF 360基因序列,进一步研究MGF 360-9L基因结构和功能间的关系。本研究采用生物信息学方法,分析该基因的一级结构并预测该基因的表... 前期研究结果表明,非洲猪瘟病毒(ASFV)MGF 360-9L能显著抑制宿主天然免疫应答,故通过比较、分析ASFV中MGF 360基因序列,进一步研究MGF 360-9L基因结构和功能间的关系。本研究采用生物信息学方法,分析该基因的一级结构并预测该基因的表达蛋白二、三级结构;根据GenBank公布的Georgia 2007/1(FR682468.1)序列,合成MGF 360-9L基因并构建其重组真核表达质粒,Western blot验证该基因表达后,将重组质粒转染至PK-15细胞,经染色后观察其蛋白的亚细胞定位。结果表明,以Ⅱ型Georgia 2007/1基因组中MGF 360-9L基因为参照,其在Ⅱ型ASFV毒株中高度保守,在54株不同基因型毒株间的相似性与ASFV系统进化关系一致,保守序列为3′末端378 bp片段,高级结构以α螺旋为主,核定位序列预测其定位于细胞核内;构建真核表达质粒,成功表达目的蛋白且定位于细胞核内。本研究结果为进一步研究MGF 360-9L基因抑制免疫应答和明确MGF 360基因家族在ASFV的致病机制积累了资料。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 MGF 360-9L基因 序列分析 结构预测 亚细胞定位
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非洲猪瘟病毒解旋酶结构与功能研究进展 被引量：7
4
作者 张婷 申超超 +7 位作者 杨博 张大俊 侯景 史喜绢 崔卉梅 张克山 郑海学 刘湘涛 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期135-143,共9页
目前对非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的5个解旋酶(D1133L、QP509L、Q706L、B962L和A859L)的结构和功能知之甚少,了解ASFV解旋酶结构和功能有助于明确ASFV致病机制。本文通过结合生物信息学的方法综述了ASFV解旋酶的结构和功能的研究进展,从解... 目前对非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的5个解旋酶(D1133L、QP509L、Q706L、B962L和A859L)的结构和功能知之甚少,了解ASFV解旋酶结构和功能有助于明确ASFV致病机制。本文通过结合生物信息学的方法综述了ASFV解旋酶的结构和功能的研究进展,从解旋酶的角度加深了对该病毒复制调控的认识。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 解旋酶 功能 结构预测 研究进展
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1株兔肺源金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药分析 被引量：7
5
作者 侯景 杨泽晓 +2 位作者 赵位 王翔 晏仕强 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期341-346,共6页
为了解四川某养兔场疑似金黄色葡萄球菌感染病例的病原菌及其药物敏感性,采集兔肺脏的化脓灶样品进行细菌分离纯化、染色镜检、培养特性、生化试验、16S rDNA序列鉴定及分离菌株的药敏试验和耐药基因检测。结果表明,分离鉴定出1株对小... 为了解四川某养兔场疑似金黄色葡萄球菌感染病例的病原菌及其药物敏感性,采集兔肺脏的化脓灶样品进行细菌分离纯化、染色镜检、培养特性、生化试验、16S rDNA序列鉴定及分离菌株的药敏试验和耐药基因检测。结果表明,分离鉴定出1株对小鼠具有致病性的金黄色葡萄球菌,药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌分离菌株具有多重耐药性,仅对头孢哌酮、头孢拉定、头孢噻吩、哌拉西林4种药物敏感,其他15种药物均耐受。耐药基因PCR检测结果显示,meca、aac(6′)/aph(2′)、aph(3′)-III、ant(4′,4′′)、plw043耐药基因呈阳性,耐药表型和基因型相一致。 展开更多
关键词 兔 金黄色葡萄球菌 分离鉴定 耐药基因
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灵芝孢子粉总三萜的提取优化及其体外生物活性 被引量：7
6
作者 温慧萍 雷伟敏 +3 位作者 柯乐芹 陈雨薇 侯景 肖建中 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2020年第4期705-713,共9页
对灵芝孢子粉总三萜的提取过程进行优化,以得率为指标,通过单因素试验、Plackett-Burman试验筛选出影响灵芝孢子粉总三萜得率的显著因素,利用响应面设计优化灵芝孢子粉总三萜的提取条件。对于提取出的灵芝孢子粉总三萜,评价其清除1,1-... 对灵芝孢子粉总三萜的提取过程进行优化,以得率为指标,通过单因素试验、Plackett-Burman试验筛选出影响灵芝孢子粉总三萜得率的显著因素,利用响应面设计优化灵芝孢子粉总三萜的提取条件。对于提取出的灵芝孢子粉总三萜,评价其清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和ABTS^+自由基的方法,并采用CCK-8比色法就其抗人肝癌细胞HepG-2增殖的活性进行研究。结果表明,最佳提取条件为乙醇体积分数80%,固液比1∶23,超声功率540 W,提取温度40℃,提取时间60 min。此优化条件下提取的灵芝孢子粉总三萜具有较好的抗氧化能力,清除ABTS^+的能力强于清除DPPH,对人肝癌细胞HepG-2亦具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 总三萜 优化提取 抗氧化
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抗βhCG蛋白疫苗的抗肿瘤作用 被引量：4
7
作者 叶嘉燕 胡向兵 +7 位作者 邢芸 侯景 李飞 张帆 金亮 李泰明 刘景晶 曹荣月 《药物生物技术》 CAS CSCD 2010年第5期386-392,共7页
以人绒毛膜促性腺激素β亚基（βhCG）的羧基端109~118的6段串联重复表位为靶点、热休克蛋白65（HSP65）为载体,设计一种新型的蛋白疫苗HSP65-X6-βhCGCTP37,探讨其能否抑制小鼠前列腺癌,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备... 以人绒毛膜促性腺激素β亚基（βhCG）的羧基端109~118的6段串联重复表位为靶点、热休克蛋白65（HSP65）为载体,设计一种新型的蛋白疫苗HSP65-X6-βhCGCTP37,探讨其能否抑制小鼠前列腺癌,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备的HSP65-X6-βhCGCTP37免疫C57BL/6小鼠,分别检测体液免疫应答和细胞免疫应答。通过ELISA法,从血清中检测到高滴度的抗βhCGIgG类抗体。Western blot实验证明小鼠血清中的抗体能够特异性识别βhCG表位。淋巴细胞增殖实验的结果显示,HSP65-X6-βhCGCTP37的免疫能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖。预防性实验的结果显示,HSP65-X6-βhCGCTP37激发的免疫应答对于RM-1肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,平均肿瘤重显著降低（P〈0.05）。同时有效地减少了小鼠的肺转移（P〈0.01）;抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生（P〈0.01）。HSP65-X6-βhCGCTP37蛋白疫苗能有效地抑制小鼠前列腺癌的生长。 展开更多
关键词 人绒毛膜促性腺激素β亚基 HSP65-X6-βhCGCTP37 蛋白疫苗 前列腺癌
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山茶油保湿性能和润肤功效研究 被引量：6
8
作者 俞泓彬 柳海燕 +2 位作者 蔡蕊 赵蕊蕊 侯景 《山东化工》 CAS 2021年第16期267-268,共2页
目的:评价山茶油的保湿性能和润肤功效。方法:通过常温保湿试验和加速保湿试验测定山茶油的保湿率;招募志愿者,对山茶油润肤功效进行评价,测定山茶油对志愿者皮肤水分、油分和弹性的影响。结果:山茶油的体外保湿性能与常用保湿剂甘油、... 目的:评价山茶油的保湿性能和润肤功效。方法:通过常温保湿试验和加速保湿试验测定山茶油的保湿率;招募志愿者,对山茶油润肤功效进行评价,测定山茶油对志愿者皮肤水分、油分和弹性的影响。结果:山茶油的体外保湿性能与常用保湿剂甘油、透明质酸钠相当;润肤功效评价实验表明,涂抹山茶油能够增加受试者皮肤的水分含量和皮肤弹性。结论:山茶油具有良好的保湿润肤功效,作为护肤品开发具有较大应用价值。 展开更多
关键词 山茶油 保湿 润肤 皮肤弹性
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虚实结合的疫苗工程综合性实验教学模式探索 被引量：2
9
作者 柳海燕 侯景 +1 位作者 刘青娥 郭志平 《丽水学院学报》 2023年第5期112-119,共8页
疫苗工程是一门实践性和应用性很强的课程,其实践教学对于专业人才的培养尤为重要。传统疫苗的研制和生产由于要使用病原微生物,对于实验设施、仪器设备和实验材料的要求极其严苛。受限于这些不利因素,疫苗工程的实践教学难以开展,无法... 疫苗工程是一门实践性和应用性很强的课程,其实践教学对于专业人才的培养尤为重要。传统疫苗的研制和生产由于要使用病原微生物,对于实验设施、仪器设备和实验材料的要求极其严苛。受限于这些不利因素,疫苗工程的实践教学难以开展,无法满足生物制药专业人才的培养需求。本教学团队利用虚拟仿真技术开展疫苗工程综合性实验教学,打破了传统实验的各种限制,让学生在虚拟实验室中高效、安全地进行实验。同时本着“能实不虚”的原则,穿插简单的线下实体实验,做到“虚中有实、虚实结合”。文章介绍以疫苗的生产与检定为技术背景开发的虚拟仿真实验教学软件,阐述其教学设计、实施流程以及教学成效,以期为生物制药综合性实践教学改革提供新思路。 展开更多
关键词 虚拟仿真实验 疫苗工程 实践教学 教学改革
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森林环境对模型小鼠的保健功效研究
10
作者 胡思斯 柳海燕 侯景 《特种经济动植物》 2024年第8期5-7,27,共4页
通过与城市环境比较来研究森林环境对小鼠自发活动、高血糖和高血脂的影响,建立基于实验动物模型的森林康养实证评价方法。建立高糖高脂喂养结合链脲佐菌素诱导的Ⅱ型糖尿病小鼠模型、注射维生素D3辅以高糖高脂喂养的高血脂小鼠模型,在... 通过与城市环境比较来研究森林环境对小鼠自发活动、高血糖和高血脂的影响,建立基于实验动物模型的森林康养实证评价方法。建立高糖高脂喂养结合链脲佐菌素诱导的Ⅱ型糖尿病小鼠模型、注射维生素D3辅以高糖高脂喂养的高血脂小鼠模型,在森林环境和城市环境中分别放置两种小鼠模型和普通小鼠组(自发活动分析),一段时间后检测其生化指标和并进行行为学分析。结果表明,森林组中反映小鼠积极情绪的行为学指标(运动总路程,中央格运动路程、时间和次数、站立次数)有所增加,而消极情绪指标(边角活动时间)有所下降,森林环境能够降低小鼠的血糖、甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的含量,增加高密度脂蛋白胆固醇的含量。综上,森林环境能使小鼠情绪放松,提高探索能力以及缓解心理焦躁,同时在一定程度上缓解高血糖和高血脂的病情。 展开更多
关键词 森林康养 高血糖 高血脂 自发行为
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肿瘤细胞裂解物抗小鼠B16F10黑色素瘤的作用研究 被引量：3
11
作者 路蕾 陈科 +7 位作者 刘彬 王泽宇 葛驰宇 侯景 金亮 邢芸 曹荣月 刘景晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2012年第3期232-237,共6页
反复冻融B16F10肿瘤细胞制备裂解物,以白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)为载体,OK432和来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407～426,M)的两段串联重复序列M2为佐剂,制备了肿瘤细胞疫苗B1... 反复冻融B16F10肿瘤细胞制备裂解物,以白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)为载体,OK432和来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407～426,M)的两段串联重复序列M2为佐剂,制备了肿瘤细胞疫苗B16F10-DT-M2-OK432(BDTMOK),探讨其能否抑制小鼠B16黑色素瘤,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备的BDTMOK免疫C57BL/6小鼠,分别检测体液免疫应答和细胞免疫应答。通过ELISA法,从血清中检测到高滴度的抗B16肿瘤细胞裂解物(B16 tumor cell lysate,B16TCL)类抗体。淋巴细胞增殖实验的结果显示,BDTMOK的免疫能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖。预防结合治疗性实验的结果显示,BDTMOK激发的免疫应答对于B16肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,皮下注射BDTMOK可以延长皮下移植瘤发生的潜伏期(P<0.05),并且平均瘤重显著降低(P<0.05);抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生(P<0.01)。疫苗BDTMOK能有效的抑制小鼠B16黑色素瘤的生长。 展开更多
关键词 肿瘤细胞疫苗 B16F10-DT-M2-OK432 B16F10黑色素瘤
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Gabor小波幅值和相位特征人脸识别方法比较 被引量：3
12
作者 徐永红 侯景 +1 位作者 赵艳茹 洪文学 《计算机工程与应用》 CSCD 2012年第15期195-200,共6页
对采用Gabor幅值、Gabor相位以及Gabor幅值加相位结合这三种方法,在同等条件基础上对所提取的特征进行分块,用PCA降维,采用最近邻分类规则进行识别并比较结果。在ORL、Yale、Indian、YaleBE、PIE和FERET六个数据库进行比较研究的结果表... 对采用Gabor幅值、Gabor相位以及Gabor幅值加相位结合这三种方法,在同等条件基础上对所提取的特征进行分块,用PCA降维,采用最近邻分类规则进行识别并比较结果。在ORL、Yale、Indian、YaleBE、PIE和FERET六个数据库进行比较研究的结果表明,Gabor小波相位特征对光照有较高的鲁棒性,在光照变化明显的Yale和YaleBE数据库识别效果最好,而Gabor小波幅值加相位特征具有表情和时间变化的鲁棒性,在FERET的fb、dup1、dup2测试集上获得了较高的识别率。 展开更多
关键词 人脸识别 GABOR小波 Gabor幅值和相位特征 主成分分析(PCA)降维 最近邻分类
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重组HSP65-6P277乳酸乳球菌疫苗对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠的降糖作用 被引量：2
13
作者 吴洁 刘晓锐 +5 位作者 杨雪 侯景 徐茂磊 申丽丽 黄东成 刘坤锋 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期106-110,共5页
探讨表达HSP65-6P277蛋白的乳酸乳球菌活载体疫苗对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠的降糖作用及可能的作用机制。采用多次小剂量腹腔注射STZ建立1型糖尿病模型。将诱导型表达菌株Lactococcus lactis NZ9000pCYT∶HSP65-6P277和组... 探讨表达HSP65-6P277蛋白的乳酸乳球菌活载体疫苗对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠的降糖作用及可能的作用机制。采用多次小剂量腹腔注射STZ建立1型糖尿病模型。将诱导型表达菌株Lactococcus lactis NZ9000pCYT∶HSP65-6P277和组成型表达菌株L.lactis NZ9000 pHJ∶HSP65-6P277及无关蛋白对照菌株L.lactis NZ9000 pCYT∶Nuc灌胃1型糖尿病小鼠(2×109CFU,200μL),每天灌胃1次,连续7 d,之后每周灌胃1次,持续16周。每月从小鼠眼眶静脉丛取血1次,血糖检测仪检测STZ造模小鼠血糖水平并称体重。4个月后将小鼠处死,取小鼠脾脏做脾细胞增殖实验,采用ELISA试剂盒分别检测脾细胞上清液中的IL-10和IFN-γ细胞因子水平以及血清IgG抗体水平。结果显示,与对照组相比,pCYT∶HSP65-6P277组和pHJ∶HSP65-6P277组可以一定程度上降低STZ造模小鼠血糖水平(P<0.05),并能维持其正常体重稳定,降低脾细胞针对HSP65和P277的增殖(P<0.05),脾细胞上清液中IFN-γ细胞因子水平明显降低(P<0.05),血清IgG抗体水平无明显差异(P>0.05)。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 疫苗 P277 黏膜免疫 1型糖尿病
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菊欧氏杆菌β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因在大肠杆菌中的克隆、表达及活性分析 被引量：2
14
作者 黄潇 王泽宇 +3 位作者 邢芸 侯景 李泰明 刘景晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2012年第2期95-99,共5页
以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。测序结果经分析,该基因编码的蛋白序列与菊欧氏杆菌Ech586的β-1,4-内切葡聚糖酶同源性达到98... 以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。测序结果经分析,该基因编码的蛋白序列与菊欧氏杆菌Ech586的β-1,4-内切葡聚糖酶同源性达到98%。将celY的开放阅读框基因插入到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),采用LB-CMC平板刚果红染色筛选含celY基因的转化子。12%SDS-PAGE显示,重组菌经IPTG诱导后表达了目的蛋白,其相对分子质量与预期结果相符。CMCase活力测定显示重组pET-28a-celY阳性菌分泌到培养基中的CelY酶活力为84.4 U/L,周质中的酶活力为12.7 U/L。β-1,4-内切葡聚糖酶CelY工程菌的获得,为研究菊欧氏杆菌纤维素酶基因在菊欧氏杆菌同源转化中的表达及工程菌的酶学特性提供了重要的资料。 展开更多
关键词 菊欧氏杆菌 Β-1 4-内切葡聚糖酶 β-1 4-内切葡聚糖酶celY基因 CMCase活力
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新型“瘦肉精”赛庚啶及其检测方法的研究进展 被引量：4
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作者 柳海燕 侯景 《河南工业大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2019年第3期126-130,共5页
赛庚啶作为一种新型“瘦肉精”,具有促进食欲、增加动物体质量的作用,然而添加至动物饲料中会导致动物体内药物残留,严重危害人体健康。为确保动物性食品市场的安全,目前迫切需要准确快速的赛庚啶残留检测方法进行市场监测。主要围绕赛... 赛庚啶作为一种新型“瘦肉精”,具有促进食欲、增加动物体质量的作用,然而添加至动物饲料中会导致动物体内药物残留,严重危害人体健康。为确保动物性食品市场的安全,目前迫切需要准确快速的赛庚啶残留检测方法进行市场监测。主要围绕赛庚啶的结构和理化性质、药理作用以及对人体的危害等方面展开介绍,深入探讨了赛庚啶残留物的多种检测方法以及存在的问题,提高对新型“瘦肉精”赛庚啶危害的认识,并为开发高效快捷的赛庚啶残留检测方法提供参考。 展开更多
关键词 赛庚啶 兽药残留 新型“瘦肉精” 检测方法
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PK-15细胞的TPL2基因敲除有利于口蹄疫病毒和塞内卡病毒复制 被引量：3
16
作者 闫鸣昊 郝军红 +6 位作者 张大俊 申超超 徐国伟 侯景 张克山 郑海学 刘湘涛 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期1060-1073,共14页
旨在构建TPL2(MAP3K8/COT)基因敲除PK-15细胞系PK-15-TPL2^-/-,评估该基因敲除前后对口蹄疫病毒(FMDV)和塞内卡病毒(SVA)复制的影响及产生影响的原因,为研究TPL2在病毒感染过程中的作用机制提供良好的生物材料,也为疫苗生产过程中进一... 旨在构建TPL2(MAP3K8/COT)基因敲除PK-15细胞系PK-15-TPL2^-/-,评估该基因敲除前后对口蹄疫病毒(FMDV)和塞内卡病毒(SVA)复制的影响及产生影响的原因,为研究TPL2在病毒感染过程中的作用机制提供良好的生物材料,也为疫苗生产过程中进一步提升FMDV和SVA产量指明方向。筛选2条针对TPL2基因的单向导RNA(sg RNA),合成sg RNA并将其插入到含有GFP标签的慢病毒表达载体,构建sg RNA/Cas9慢病毒表达质粒,包装慢病毒并感染PK-15细胞,通过流式细胞仪分选出已被转入sg RNA的单细胞。通过测序确认细胞系中TPL2的DNA序列,通过蛋白质印迹(Western blot)方法检测细胞系中TPL2表达情况。使用FMDV和SVA感染构建好的细胞系,利用IFA、RT-qPCR、Western blot和TCID50评估FMDV和SVA在PK-15-TPL2^-/-细胞中的复制水平,在此基础上通过测定干扰素(IFN)和IFN刺激基因(ISG)的mRNA表达水平,研究了FMDV或SVA感染的PK-15-TPL2^-/-细胞中干扰素途径的激活状态。TPL2基因敲除PK-15细胞系中TPL2基因发生了碱基插入突变和碱基缺失突变,构建的细胞系中均未检测到TPL2蛋白质表达。测定并比较了FMDV和SVA感染的PK-15和PK-15-TPL2^-/-细胞中病毒含量,表明TPL2基因敲除显著促进了FMDV和SVA的复制。同时,RT-qPCR进一步表明与FMDV和SVA感染期间的PK-15细胞相比,PK-15-TPL2^-/-细胞中IFN-α、IFN-β、IFN-γ、ISG15、ISG54和ISG56的mRNA表达明显降低。综上所述,本研究成功构建了TPL2基因敲除的PK-15细胞系,与对照细胞相比,TPL2基因的敲除更利于FMDV和SVA的复制,这可能与IFN-α、IFN-β、IFN-γ、ISG15、ISG54和ISG56表达的抑制有关。本研究提示CRISPR/Cas9基因编辑技术可以作为在动物和疫苗开发过程中编辑细胞系以提高病毒产量的有效工具,本结果为进一步提升FMDV和SVA产量指明了方向,也为研究TPL2在病毒感染过程中的作用机制提供了良好的生物材料。 展开更多
关键词 TPL2基因 PK-15细胞 基因敲除 口蹄疫病毒 塞内卡病毒
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浅析人工智能医学影像应用的现实与挑战 被引量：3
17
作者 侯景 《价值工程》 2020年第6期234-235,共2页
人工智能是未来的发展方向,医学与人工智能的结合可谓是最有发展前景的领域,是造福人类的重要举措。当下的人工智能主要在医学的影像方面发挥作用,主要有深度学习和图像识别两种应用,在肿瘤检查、肿瘤诊断等多个内容中展现出了强大功效... 人工智能是未来的发展方向,医学与人工智能的结合可谓是最有发展前景的领域,是造福人类的重要举措。当下的人工智能主要在医学的影像方面发挥作用,主要有深度学习和图像识别两种应用,在肿瘤检查、肿瘤诊断等多个内容中展现出了强大功效,在人工智能医学影像显现出强大优势的同时,挑战也随之而来。本文我们针对人工智能医学影像应用的现实与挑战进行详细阐述,进一步加深对人工智能医学影像的了解,希望能对人工智能医学影像发展做出积极影响。 展开更多
关键词 人工智能 医学影像应用 现实挑战
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S-腺苷蛋氨酸抗小鼠H22肝癌作用研究
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作者 姚毅 张宇 +6 位作者 张帆 侯景 罗新龙 曹荣月 金亮 吴洁 刘景晶 《药物生物技术》 CAS CSCD 2011年第1期43-47,共5页
探讨S-腺苷蛋氨酸(SAM)能否抑制小鼠H22肝癌。通过建立H22小鼠肝癌模型,SAM预防及治疗,检测皮下抑瘤率、皮内肿瘤微血管新成、肺转移等指标对其抗肿瘤作用机理进行部分探讨。结果显示,SAM对H22肿瘤攻击起到有效地保护作用,与PBS阴性对... 探讨S-腺苷蛋氨酸(SAM)能否抑制小鼠H22肝癌。通过建立H22小鼠肝癌模型,SAM预防及治疗,检测皮下抑瘤率、皮内肿瘤微血管新成、肺转移等指标对其抗肿瘤作用机理进行部分探讨。结果显示,SAM对H22肿瘤攻击起到有效地保护作用,与PBS阴性对照组相比,预防组和治疗组肿瘤生长缓慢,平均瘤重显著降低(P<0.01),抑瘤率达到70%以上;有效地抑制了小鼠皮内模型中的微血管新生(P<0.01);同时在一定程度上减少了小鼠的肺转移(P<0.05)。SAM通过抑制肿瘤血管生长表现出有效的抑制小鼠H22肝癌作用。 展开更多
关键词 S-腺苷蛋氨酸 H22肝癌 抑制血管生成 肺转移
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生物医学工程专业创新设计与实践课程建设
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作者 侯景 《科教文汇》 2014年第16期88-89,共2页
为进一步加强和完善生物医学工程专业创新设计与实践教学平台的建立,形成与专业核心课程体系紧密相连的实践教学环节,针对医用电子仪器和医学图像处理两门专业课程的实践教学课程建设进行探索,设置多元化的教学环节,最大限度利用实验室... 为进一步加强和完善生物医学工程专业创新设计与实践教学平台的建立,形成与专业核心课程体系紧密相连的实践教学环节,针对医用电子仪器和医学图像处理两门专业课程的实践教学课程建设进行探索,设置多元化的教学环节,最大限度利用实验室现有资源,对学生开放使用以培养学生创新思维和专业技能,经过在一届本科生中的应用,教学效果明显,更为学生毕业时能够成为具有较强知识更新能力和创新意识的生物医学与工程科学相结合的应用型人才奠定坚实基础。 展开更多
关键词 生物医学工程 医用电子仪器 医学图像处理实践教学 专业创新设计与实践
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基于四元数小波变换的医学图像边缘检测
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作者 侯景 《科技传播》 2014年第10期132-133,共2页
医学图像的边缘检测可以使医生更准确清晰地获得有用信息,区分病灶部位便于疾病的诊断。为了能够准确获得医学图像边缘,并且抑制医学图像产生过程中的噪声和伪影,本文提出一种新的医学图像边缘检测算法,利用四元数小波变换的本质二维属... 医学图像的边缘检测可以使医生更准确清晰地获得有用信息,区分病灶部位便于疾病的诊断。为了能够准确获得医学图像边缘,并且抑制医学图像产生过程中的噪声和伪影,本文提出一种新的医学图像边缘检测算法,利用四元数小波变换的本质二维属性,从水平、垂直和对角子带对医学图像进行分解和重构,最终选择合适阈值显示出图像的边缘。实验结果表明,本文提出的方法较传统的边缘检测算子效果有明显的提高,通过边缘检测评价显示本文算法具有精确的医学图像边缘定位检测能力和抗噪声伪影特性。 展开更多
关键词 医学图像边缘检测 四元数小波变换 传统边缘检测算子 边缘连通性
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