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柏木木屑中精油成分分析及抑菌抗氧化活性研究 被引量：11
1
作者 侯仰帅 姜媛媛 +2 位作者 晏明 余静 张利 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期314-318,共5页
【目的】以柏木木屑为原料进行柏木精油的提取,实现柏木资源的最大化利用和可持续发展。【方法】采用水蒸气蒸馏法提取柏木精油,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析精油成分,采用滤纸片扩散法测定精油和链霉素分别单独使用以及两者... 【目的】以柏木木屑为原料进行柏木精油的提取,实现柏木资源的最大化利用和可持续发展。【方法】采用水蒸气蒸馏法提取柏木精油,通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)分析精油成分,采用滤纸片扩散法测定精油和链霉素分别单独使用以及两者联合使用时对供试细菌的抑制情况,并测定了精油的总还原力以及对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O-2·)的清除能力。【结果】结果表明:精油主要成分为柏木醇(26.06%)、罗汉柏烯(18.25%)、α-柏木烯(15.06%)、(+)-花侧柏烯(8.23%)、α-姜黄烯(3.20%)、i-石竹烯(2.83%)、β-雪松烯(2.69%)和(+)-β-柏木烯(2.48%)等。柏木精油单独使用时对沙门氏菌的抑菌效果属高度敏感,对其他供试菌的抑菌效果属中度敏感。在大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、霍氏肠杆菌、克雷伯氏菌、炭疽杆菌的抑菌实验中,链霉素起主要作用;而在沙门氏菌、枯草芽孢杆菌抑菌实验中,柏木精油起主要作用。柏木精油的抗氧化活性与精油浓度呈现一定的量效关系,具有较强的还原力。对DPPH·、·OH、O-2·的IC50(清除率达到50%时的质量浓度)分别为2.55、2.23和1.30mg/mL,表现出较强的抗氧化活性。【结论】柏木木屑精油具有较强的抑菌能力以及抗氧化能力,为生物杀菌剂以及天然食品防腐剂和抗氧化剂的研究提供了理论依据。 展开更多
关键词 柏木木屑 柏木精油 成分 抑菌活性 抗氧化活性
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重组人凝血因子Ⅷ对α-凝血酶生成活性的影响
2
作者 宋春雷 丁亚凌 +4 位作者 侯仰帅 李德款 伍立恒 曾金杰 梁洪 《药物生物技术》 CAS 2024年第3期241-244,共4页
A型血友病是最常见的遗传性出血疾病,其共同的特征是活性凝血酶生成障碍,凝血时间延长,临床上主要表现为凝血因子Ⅷ(FⅧ)质或量的异常,以关节、肌肉、内脏和深部组织自发性或轻微外伤后出血难以停止为特征,常在儿童期起病,反复关节出血... A型血友病是最常见的遗传性出血疾病,其共同的特征是活性凝血酶生成障碍,凝血时间延长,临床上主要表现为凝血因子Ⅷ(FⅧ)质或量的异常,以关节、肌肉、内脏和深部组织自发性或轻微外伤后出血难以停止为特征,常在儿童期起病,反复关节出血可导致患者逐渐出现关节活动障碍而致残。男性人群中,A型血友病的发病率约为1/5000,而女性血友病患者极其罕见。我国血友病的患病率为2.73/100000人口,其中A型血友病占80%~85%。实验旨在探究重组人凝血因子Ⅷ(rhFⅧ)对下游凝血途经的激活能力,并与已上市同类产品进行比较。以缺凝血因子Ⅷ血浆为实验组样本,标准血浆为对照组,利用缓冲液将各个产品稀释至1、5和10 IU/mL,得到3个FⅧ活性工作液,所制备FⅧ工作液再用缺凝血因子Ⅷ血浆(模拟血友病甲样本)稀释10倍,制成0、0.1、0.5、1 IU/mL 4种不同活性FⅧ血浆样本,利用凝血酶生成分析仪分别检测rhFⅧ、Advate和血源FⅧ在不同浓度条件下,对α-凝血酶生成速度及生成潜力的影响。与Advate、血源FⅧ相比,rhFⅧ具有相同的促α-凝血酶生成效果;且α-凝血酶生成的峰高随FⅧ浓度的增加而呈上升趋势;达峰时间随FⅧ浓度的增加而呈下降趋势;α-凝血酶生成曲线下积分面积随FⅧ浓度增加而增加。rhFⅧ与市售重组及血源性FⅧ产品相比,在体外具有相同的促α-凝血酶生成活性,具备良好的成药性,未来有望在国内获批上市。 展开更多
关键词 A型血友病 重组人凝血因子Ⅷ α-凝血酶 生成速度 凝血酶活性 凝血功能
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长效重组人凝血因子Ⅷ细胞培养条件的优化
3
作者 向雨秘 费保进 +3 位作者 聂艳桃 胡珍霞 侯仰帅 梁洪 《药物生物技术》 CAS 2023年第1期25-31,共7页
优化国产长效重组人凝血因子Ⅷ的细胞培养条件,为后续研究提供实验依据。采用分批补料培养方式,将长效重组人凝血因子Ⅷ细胞接种至1 L发酵罐中进行培养,分析在不同补料培养基浓度(2%Cell Boost 2,3%Cell Boost 2,5%Cell Boost 2,补料培... 优化国产长效重组人凝血因子Ⅷ的细胞培养条件,为后续研究提供实验依据。采用分批补料培养方式,将长效重组人凝血因子Ⅷ细胞接种至1 L发酵罐中进行培养,分析在不同补料培养基浓度(2%Cell Boost 2,3%Cell Boost 2,5%Cell Boost 2,补料培养基为Cell Boost 2和细胞培养基按照W/V比配制的培养基)、不同细胞培养pH(pH=6.9、pH=7.0、pH=7.1)、不同培养基(CDM4 PERMAb、CD11V、Veros),培养基补加Cu^(2+)的情况下,细胞密度、细胞活率、细胞代谢以及发酵液中蛋白活性的变化,从而确定最优培养条件。最佳培养条件:补料浓度2%Cell Boost 2,细胞培养pH 7.0,培养基为添加40μmol/L Cu^(2+)的CD11V,整个细胞培养周期17 d,细胞培养液收获体积是初始培养体积的2.6倍;细胞密度峰值达2375×10^(4)cells/mL,在收获时活率高于90%;在蛋白表达最高时,乳酸仅为0.3 mmol/L,蛋白活性高达2443.94 IU/mL,是同等条件下CDM4 PERMAb培养基(1182.17 IU/mL)的2.1倍。该研究优化了国产长效重组人凝血因子Ⅷ的细胞培养条件,提高了目的蛋白的活性,延长了整个培养周期,提升了目的蛋白的产量,对国产长效重组人凝血因子Ⅷ的产业化具有促进意义。 展开更多
关键词 血友病A 长效重组人凝血因子Ⅷ 中国仓鼠卵巢细胞 分批补料培养 接种培养 细胞培养 蛋白活性
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生物反应器不同搅拌速度的计算流体力学模拟及对悬浮培养CHO细胞的影响 被引量：2
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作者 侯仰帅 费保进 +7 位作者 梁洪 杨金亮 宋春雷 胡珍霞 张骞 黄娟 向雨秘 雷韬 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第11期1285-1291,共7页
目的考察搅拌式生物反应器不同搅拌速度对悬浮培养的CHO细胞生长、代谢及促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)表达的影响。方法采用计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)技术对5 L生物反应器在100、200、300、400 ... 目的考察搅拌式生物反应器不同搅拌速度对悬浮培养的CHO细胞生长、代谢及促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)表达的影响。方法采用计算流体力学(computational fluid dynamics,CFD)技术对5 L生物反应器在100、200、300、400 r/min搅拌速度下的内部流场进行模拟;对培养过程中的细胞密度、细胞活率、细胞直径、pH、生化参数及FSH浓度进行检测,根据细胞比生长速率、葡萄糖比消耗速率、谷氨酰胺比消耗速率、乳酸比生成速率、氨比生成速率以及FSH浓度变化,确定不同搅拌速度对细胞生长、代谢及FSH产量的影响。结果在100、200、300、400 r/min搅拌速度下,随着搅拌速度的增加,反应器内的剪切速率逐渐增大;导致最大细胞密度逐渐降低,依次为6.22×10^6、6.14×10^6、5.87×10^6、5.72×10^6个/mL;细胞比生长速率逐渐降低,依次为0.52、0.49、0.47、0.47/d;培养前5 d,在100 r/min搅拌速度下,较其他条件下细胞代谢变慢,培养后5 d无明显差异;搅拌速度对FSH产量无显著影响。结论本研究从微观角度了解了反应器内的流场特性,将仿真与实验结合,确定了不同搅拌速度下产生的剪切力对CHO细胞悬浮培养的影响,为细胞培养工艺参数的优化奠定了基础。 展开更多
关键词 生物反应器 搅拌速度 计算流体力学模拟 CHO细胞 悬浮培养
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