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浙江省地方鸡种的遗传多样性研究 被引量：31
1
作者 傅衍 牛冬 +4 位作者 阮晖 罗静 陈功 余旭平 张亚平 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第7期606-613,共8页
测定了浙江省５个地方鸡种及来航鸡（对照）线粒体Ｄ－环区的部分序列（５３９ｂｐ），构建了鸡种的分子系统树。在所测序列中共有２４个变异位点，变异率为４．４５％。结果显示，浙江省地方鸡种分为两支，有两个母系来源，一支为仙居... 测定了浙江省５个地方鸡种及来航鸡（对照）线粒体Ｄ－环区的部分序列（５３９ｂｐ），构建了鸡种的分子系统树。在所测序列中共有２４个变异位点，变异率为４．４５％。结果显示，浙江省地方鸡种分为两支，有两个母系来源，一支为仙居鸡，它和外来品种来航鸡关系较近，有共同的母系祖先。另一支为灵昆鸡、白银耳鸡、乌骨鸡和萧山鸡，它们有着共同的母系祖先，其中灵昆鸡，白银耳鸡、乌骨鸡关系较近，萧山鸡与此３种鸡关系较远。 展开更多
关键词 地方鸡种 线粒体DNA D-环区序列 遗传多样性 浙江
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中华鳖白底板病病原的分析 被引量：31
2
作者 沈锦玉 潘晓艺 +3 位作者 余旭平 尹文林 曹铮 吴颖蕾 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期815-822,共8页
从患白底板病的中华鳖(Trionyx sinensis)肾、肝、脾分离出致病力较强的细菌TS6-1和TS6-2。同时样品经超薄切片,电子显微镜观察,在脾、肝、肾组织细胞质中观察到直径为30 nm病毒样颗粒。经人工感染试验证实,分离菌株及患病鳖内脏组织过... 从患白底板病的中华鳖(Trionyx sinensis)肾、肝、脾分离出致病力较强的细菌TS6-1和TS6-2。同时样品经超薄切片,电子显微镜观察,在脾、肝、肾组织细胞质中观察到直径为30 nm病毒样颗粒。经人工感染试验证实,分离菌株及患病鳖内脏组织过滤液均可导致中华鳖发病死亡,TS6-1和TS6-2的LD50分别为3.2×107CFU/mL和1.0×108CFU/mL。以患病鳖肝、脾组织的过滤液注射健康鳖后,3～5天内所有鳖全部死亡。通过对细菌形态、生理生化特性的测定,判定TS6-2属于嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。同时对TS6-1进行了16S rRNA分子鉴定,将测定的序列递交NCBI进行BLAST同源序列比对,与迟缓爱德华氏菌的16S rRNA基因具有较高的同源性(99%),该序列在GenBank上的登录号为DQ884466。结合细菌的生理生化特性,判定TS6-1属于迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tard)。由此认为中华鳖白底板病由病毒和嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌混合感染引起。药敏试验结果表明,TS6-1对先锋V、丁胺卡那敏感,TS6-2对卡那霉素、庆大霉素、丁胺卡那敏感。 展开更多
关键词 中华鳖 白底板病 病毒 迟缓爱德华氏菌 嗜水气单胞菌
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鹅圆环病毒浙江永康株全基因组的克隆及序列分析 被引量：29
3
作者 余旭平 郑新添 +2 位作者 何世成 朱军莉 沈琴芳 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期860-864,共5页
为研究水禽流感大规模爆发的机理,进行了水禽流感病例中并发病原,特别是免疫抑制性病原的检测研究。根据已发表的鹅圆环病毒(Goosecircovirus,GoCV)序列,设计了一对检测引物,对浙江永康禽流感病死鹅样品进行PCR扩增,获得与预期552bp大... 为研究水禽流感大规模爆发的机理,进行了水禽流感病例中并发病原,特别是免疫抑制性病原的检测研究。根据已发表的鹅圆环病毒(Goosecircovirus,GoCV)序列,设计了一对检测引物,对浙江永康禽流感病死鹅样品进行PCR扩增,获得与预期552bp大小相符的DNA片段,经测序确认为GoCV特异序列,推测样品中存在GoCV。根据测定的序列进一步设计反向扩增引物,经扩增、测序、拼接后获得GoCV全长基因组序列。基因组序列分析表明,浙江永康株GoCV_yk01全长1821bp,具有圆环病毒共同的与病毒复制相关的茎环结构和Rep蛋白保守基序等特征,它与德国、中国台湾发表的序列在全基因组水平有91%～93%的同源性,在Rep和外壳蛋白的氨基酸水平有94%～97%的同源性。应用ClustalW方法作进化树分析显示,GoCV_yk01序列与德国株及中国台湾株均不在同一分支。圆环病毒可以感染淋巴细胞等增殖快的细胞,引起免疫抑制,从而造成其他病原的并发和继发感染,怀疑GoCV可能在2004年初永康爆发的鹅流感中起到了一定的协同作用。该GoCV_yk01是中国内地首次检测确认并测定全基因组序列的鹅圆环病毒。 展开更多
关键词 鹅 圆环病毒 全基因组序列
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网箱养殖大黄鱼假单胞菌病病原的分离与鉴定 被引量：27
4
作者 沈锦玉 余旭平 +3 位作者 潘晓艺 许文军 尹文林 曹铮 《海洋水产研究》 CSCD 北大核心 2008年第1期1-6,共6页
浙江宁波、台州等地相继发生网箱养殖大黄鱼的大量死亡,主要症状为脾脏、肾脏有许多白色结节,大小为0.1～1mm。从病鱼体内分离出致病力极强的菌株GYCWS,人工感染试验证实为大黄鱼的病原菌,其半数致死量(LD50)为8.5×104CFU/ml。对... 浙江宁波、台州等地相继发生网箱养殖大黄鱼的大量死亡,主要症状为脾脏、肾脏有许多白色结节,大小为0.1～1mm。从病鱼体内分离出致病力极强的菌株GYCWS,人工感染试验证实为大黄鱼的病原菌,其半数致死量(LD50)为8.5×104CFU/ml。对该细菌进行了形态、生理生化特性的测定,并进行了全自动微生物分析系统(ID32GN)及16S rRNA分子鉴定。经PCR扩增获得了大小约1.5Kb的16S rRNA部分基因片段,产物经回收纯化,克隆到pMD18-T载体,转化大肠杆菌TG1,对阳性克隆子进行酶切及PCR鉴定确认阳性重组质粒,将测定的序列递交NCBI进行BLAST同源序列比对,与恶臭假单胞菌的16S rRNA基因(DQ201403、AY785244)具有较高的同源性(99%),该序列在Genbank上的登录号为DQ648602。结合细菌的生理生化特性,GYCWS菌株属于恶臭假单胞菌(Pseudo monas putida)。药敏试验结果表明,病原菌GYCWS对卡那霉素、庆大霉素、丁胺卡那、氟派酸、四环素、链霉素药物敏感。 展开更多
关键词 大黄鱼 病原 恶臭假单胞菌 16S RRNA
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甲鱼病原性豚鼠气单胞菌的分离鉴定 被引量：22
5
作者 余旭平 马有智 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第5期460-462,共3页
自杭州市郊某甲鱼场送检的病死甲鱼中分离到２２株细菌，在与嗜水气单胞菌抗血清不产生凝集的多株细菌中挑选３株作进一步鉴定，生理生化特性显示它们均属豚鼠气单胞菌。小鼠试验显示有毒力，用其中１株回归本动物发病死亡，并出现与自... 自杭州市郊某甲鱼场送检的病死甲鱼中分离到２２株细菌，在与嗜水气单胞菌抗血清不产生凝集的多株细菌中挑选３株作进一步鉴定，生理生化特性显示它们均属豚鼠气单胞菌。小鼠试验显示有毒力，用其中１株回归本动物发病死亡，并出现与自然病例类似症状。用１株分离菌制备的抗血清与其他２１株分离菌株进行玻板凝集试验，其中１１株有毒力菌株都出现凝集反应，显示豚鼠气单胞菌为本病的主要病原。 展开更多
关键词 甲鱼 豚鼠气单胞菌 病原性
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猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立 被引量：11
6
作者 朱军莉 余旭平 +3 位作者 时晗 吴海波 金俊杰 何世成 《中国兽医科技》 CSCD 北大核心 2004年第2期38-42,共5页
根据已发表的PCV 1和PCV 2全基因组序列 ,设计了 3条引物 ,组成PCV 2的特有引物对和PCV 1、PCV 2的共有引物对 ,分别扩增长度为 4 72bp和 339bp的片段。为验证PCR扩增的特异性 ,将 4 72bp的扩增产物纯化后 ,克隆到 pMD 18 T载体 ,转化... 根据已发表的PCV 1和PCV 2全基因组序列 ,设计了 3条引物 ,组成PCV 2的特有引物对和PCV 1、PCV 2的共有引物对 ,分别扩增长度为 4 72bp和 339bp的片段。为验证PCR扩增的特异性 ,将 4 72bp的扩增产物纯化后 ,克隆到 pMD 18 T载体 ,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定 ,并测序。将该序列递交NCBI进行BLAST同源序列比较 ,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV 2毒株核苷酸序列的同源性均在 99%以上 ,与PCV 1毒株的同源性为 86 %。结果显示 ,该方法最少可用于 3μg病料组织和 0 .75 pgDNA的PCV 2检出 ,具有很高的灵敏性。应用该PCR方法检测了浙江省和上海市 4 7份“猪高热综合征”病料 ,PCV 2感染阳性率为 36 .17% ,PCV 1单独感染阳性率为 34.0 4 %。 展开更多
关键词 猪圆环病毒 复合PCR检测方法 多系统衰竭综合征 同源序列
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在大肠杆菌中温度诱导高效表达猪生长激素 被引量：18
7
作者 余旭平 齐顺章 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期307-311,共5页
本实验构建了温度诱导的表达猪生长激素的表达载体,转化大肠杆菌N4830后,经温度诱导,获得了高效表达。由SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western blot证实表达产物为猪生长激素,经扫描估测猪生长激素的表达量占大肠杆菌细胞全蛋白的30%左右。
关键词 猪 生长激素 温度 高效表达
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牛蛙无乳链球菌病病原的分离鉴定 被引量：16
8
作者 杭小英 周冬仁 +3 位作者 叶雪平 余旭平 罗毅志 施伟达 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期361-364,共4页
牛蛙,原产北美洲,是一种大型的食用蛙。牛蛙具有适应性广,抗病力强,生长速度快,养殖周期短,经济效益高等特点,近年来随着零售价格回升,已成为目前广大养殖户的主要养殖品种之一。随着牛蛙养殖产业的蓬勃发展,新的病害不断出现,2009、201... 牛蛙,原产北美洲,是一种大型的食用蛙。牛蛙具有适应性广,抗病力强,生长速度快,养殖周期短,经济效益高等特点,近年来随着零售价格回升,已成为目前广大养殖户的主要养殖品种之一。随着牛蛙养殖产业的蓬勃发展,新的病害不断出现,2009、2010年在浙江养殖牛蛙地区发生一种新的流行病,其病症为：口腔偶见血丝, 展开更多
关键词 牛蛙 无乳链球菌 病原 16S RRNA
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鸽圆环病毒浙江株△Cap基因的克隆与原核表达 被引量：16
9
作者 余旭平 刘晓宁 +3 位作者 郑新添 邬栋栋 刘江梅 竺春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期680-684,共5页
根据已发表的鸽圆环病毒(PiCV)序列,在V1ORF保守序列部位设计引物(目的片段长度为629bp),对浙江某鸽养殖场的病料进行PCR扩增检测,获得阳性样品;应用设计的删除核定位信号外壳蛋白基因(△Cap)的引物,扩增获得680bp的△Cap基因,克隆于pMD... 根据已发表的鸽圆环病毒(PiCV)序列,在V1ORF保守序列部位设计引物(目的片段长度为629bp),对浙江某鸽养殖场的病料进行PCR扩增检测,获得阳性样品;应用设计的删除核定位信号外壳蛋白基因(△Cap)的引物,扩增获得680bp的△Cap基因,克隆于pMD18-T载体,进行测序;将△Cap基因亚克隆到原核表达载体pET-28a进行融合表达,SDS-PAGE电泳检测发现,△Cap融合蛋白经IPTG诱导后在大肠杆菌中以包涵体形式表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的22.1%。 展开更多
关键词 鸽 圆环病毒 核定位信号 △Cap蛋白 表达
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血清1和3型多杀性巴氏杆菌铁调控外膜蛋白共同抗原的初步分析 被引量：15
10
作者 余旭平 邬栋栋 +3 位作者 刘晓宁 胡东建 杜鑫 陈玉银 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期245-250,共6页
用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19(血清1型)、P1059株(血清3型),提取外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60.5 ku铁调控外膜蛋白(IROM... 用普通BHI和缺铁BHI培养基培养禽多杀性巴氏杆菌C48-19(血清1型)、P1059株(血清3型),提取外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE电泳比较不同培养条件下两株细菌的外膜蛋白,发现缺铁培养时2株细菌均增加了87、81、79、64、60.5 ku铁调控外膜蛋白(IROMPs)。以C48-19株攻毒后耐过的鸡血清作为抗体进行免疫印迹,检测到其中的87、79和60.5 ku蛋白是2株细菌共同的、具有交叉免疫反应性的IROMPs,推测这3种蛋白可能是这2个菌株的共同抗原,并可能在C48-19感染的鸡体内特异表达;对鸡胚尿囊液中培养的C48-19株OMPs的SDS-PAGE电泳和免疫印迹试验,也观察到类似IROMPs的表达。这些IROMPs的发现为亚单位疫苗的研制提供了候选蛋白。 展开更多
关键词 禽多杀性巴氏杆菌 铁调控外膜蛋白 SDS-PAGE 免疫印迹
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鸽圆环病毒浙江株全基因组的克隆及序列分析 被引量：14
11
作者 余旭平 竺春 +2 位作者 郑新添 母安雄 于洪涛 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期355-361,共7页
鸽圆环病毒（Pigeon circovrius,PiCV）是圆环病毒科的一个成员,是一种免疫抑制性病原,鸽子感染圆环病毒后可以出现昏睡、嗜眠、厌食、体重减轻、呼吸窘迫等症状。本研究应用建立的PCR方法,检测了从浙江省5个鸽场采集的样品,结果在杭州... 鸽圆环病毒（Pigeon circovrius,PiCV）是圆环病毒科的一个成员,是一种免疫抑制性病原,鸽子感染圆环病毒后可以出现昏睡、嗜眠、厌食、体重减轻、呼吸窘迫等症状。本研究应用建立的PCR方法,检测了从浙江省5个鸽场采集的样品,结果在杭州某鸽场检测到阳性。进一步设计引物分段PCR扩增、克隆并测定了2株鸽圆环病毒的全基因组序列,分别命名为PiCV-zj1和PiCV-zj2,序列的GenBank登录号为DQ090945和DQ090944。基因组序列分析表明,PiCV-zj1及PiCV-zj2全长均为2039bp,具有圆环病毒共同的与病毒复制相关的茎环结构和Rep蛋白保守基序等特征,与已发表的国外11株鸽圆环病毒序列在全基因组核苷酸水平有86%~89.1%的同源性,在Rep和外壳蛋白的氨基酸水平分别有92.1%~94.7%和76.6%~81.4%的同源性。应用PHYLIP方法作进化树分析并应用bootstrap重复1000次进行检验,结果显示：10个欧美株组成一个大的分支,而浙江株和澳洲株各自独立分支。这是我国首次检测确认鸽圆环病毒的存在,并测定了2株PiCV病毒的全基因组序列。 展开更多
关键词 鸽 圆环病毒 全基因组序列
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Chelex-100快速提取动物源饲料DNA方法的建立 被引量：12
12
作者 赵秀玲 闻伟刚 +2 位作者 余旭平 胡群 黄绍棠 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2004年第1期82-85,共4页
为防止疯牛病疫区反刍动物源性饲料传入我国,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定。本文建立了一种利用Chelex-100快速提取动物源性饲料DNA的方法,用于反刍动物源性饲料的PCR扩增分析。结果显示该方法与GuSCN法、SDS法同样... 为防止疯牛病疫区反刍动物源性饲料传入我国,非常有必要对贸易往来中的肉骨粉品种来源进行鉴定。本文建立了一种利用Chelex-100快速提取动物源性饲料DNA的方法,用于反刍动物源性饲料的PCR扩增分析。结果显示该方法与GuSCN法、SDS法同样理想,从而实现了对进境饲料的快速检定的要求。该方法检测灵敏度达到牛成分含量为0.1%的水平,具有简单、快捷、灵敏度高的优点。 展开更多
关键词 Chelex-100 动物源饲料 DNA PCR 检测方法 灵敏度 反刍动物肉骨粉
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茶(Camelliasinensis)蜂花粉与蜂粮中花粉形态和营养成分的比较 被引量：12
13
作者 苏松坤 陈盛禄 +4 位作者 林雪珍 胡福良 余旭平 汪礼国 王正二 《中国养蜂》 2000年第6期3-6,共4页
采用扫描电子显微镜观察茶蜂花粉和不同酿制时间的蜂粮中花粉粒外部形态和萌发沟 ,没有发现花粉的细胞壁和细胞结构被破坏的迹象 ,花粉粒在蜂粮酿制过程中外部形态保持不变。通过体外模拟消化试验和光学显微镜观察 ,发现蜂粮中花粉粒内... 采用扫描电子显微镜观察茶蜂花粉和不同酿制时间的蜂粮中花粉粒外部形态和萌发沟 ,没有发现花粉的细胞壁和细胞结构被破坏的迹象 ,花粉粒在蜂粮酿制过程中外部形态保持不变。通过体外模拟消化试验和光学显微镜观察 ,发现蜂粮中花粉粒内含物外吐的数量比蜂花粉多 ,而且在蜂粮酿制过程中 ,随着时间的延长 ,其内含物外吐的花粉粒所占的比例增加 ,花粉内含物外吐使花粉更易于被破壁和消化。蜂花粉和蜂粮中营养成分测定结果表明 ,蜂粮酿制初期 ,由于蜜蜂的添加物和乳酸发酵作用 ,其蛋白质、总糖含量比蜂花粉高 ;随着酿制时间的延长 。 展开更多
关键词 茶蜂花粉 蜂粮 营养成分 花粉形态 比较研究
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犬瘟热病毒Guizhou株血凝素基因的克隆及序列分析 被引量：8
14
作者 朱军莉 余旭平 +5 位作者 张登祥 沈琴芳 徐在平 李永明 周碧君 吴彤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期17-20,共4页
参照已发表的文献合成1对引物，以犬瘟热病毒Guizhou分离株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板，RT-PCR扩增获得血凝素蛋白基因（H）901～1661位大小为761bp的片段，并将PCR扩增产物进行克隆和测序。将Guizhou株与GenBank数据库中的31... 参照已发表的文献合成1对引物，以犬瘟热病毒Guizhou分离株感染Vero细胞收获病毒提取的RNA为模板，RT-PCR扩增获得血凝素蛋白基因（H）901～1661位大小为761bp的片段，并将PCR扩增产物进行克隆和测序。将Guizhou株与GenBank数据库中的31株CDV及国内NanjingOP株的H基因序列进行同源性和系统发生树分析，发现Guizhou株的H基因部分序列与疫苗毒株Convac和Onderstpoort的同源性最低，只有90％；与日本野毒株Tanu96、KDK-1、Hmanatsu、Yanaka、UENO的同源性较高，为96％～98％；且与国内从大熊猫和小熊猫分离的野毒株GP和LP的同源性也较高，为98％和96％。系统发生树分析显示，Guizhou株与国内野毒株GP和LP，及日本的5个野毒株应属同一类，其中和GP株基因型最近，推测这些毒株间有更近的共同祖先。因此怀疑该病毒较适应于野生动物，且在我国某些地区的野生动物中可能存在自然疫源性传播。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 H基因 序列分析 同源性
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猪场空气细菌数量与猪高热综合征的相关性研究 被引量：11
15
作者 余旭平 何世成 +2 位作者 吴海波 金俊杰 朱军莉 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期102-108,共7页
自2001年入夏以来,浙江、上海等许多地区的猪群中流行以持续高热、气喘、皮肤发红为主要特征的猪"高热综合征",给养猪业带来了巨大的损失.但到目前为止,其主要病原依然未被确定.为了研究空气中细菌含量与该病的发生和严重程... 自2001年入夏以来,浙江、上海等许多地区的猪群中流行以持续高热、气喘、皮肤发红为主要特征的猪"高热综合征",给养猪业带来了巨大的损失.但到目前为止,其主要病原依然未被确定.为了研究空气中细菌含量与该病的发生和严重程度之间的关系,我们对浙江省几个不同规模、不同发病情况的猪场的空气细菌含量进行了测试.结果发现:该病的发生及严重程度与猪舍内空气的细菌含量存在着明显的正相关性. 展开更多
关键词 猪 空气 细菌数量 高热综合征
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猪链球菌的鉴定及其PCR分型方法的建立 被引量：10
16
作者 张秀亮 沈琴芳 +2 位作者 郑新添 刘慧芳 余旭平 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2005年第9期86-87,共2页
关键词 猪链球菌 分型方法 PCR 鉴定 PRRSV PCV-2 持续高温 周边地区 经济损失
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甲砜霉素散对鸡巴氏杆菌病治疗及毒性试验 被引量：8
17
作者 徐仲钧 余旭平 《中国兽药杂志》 北大核心 1996年第2期34-35,共2页
甲砜霉素散对鸡巴氏杆菌病治疗及毒性试验徐仲钧，余旭平（浙江农业大学动物科学学院杭州，３１００２９）受浙江安吉兽药厂委托，对该厂生产的甲砜霉素（５％ＴＡＰ）散对鸡巴氏杆菌病的治疗效果，并与氯霉素（ＣＡＰ）进行对比，我们... 甲砜霉素散对鸡巴氏杆菌病治疗及毒性试验徐仲钧，余旭平（浙江农业大学动物科学学院杭州，３１００２９）受浙江安吉兽药厂委托，对该厂生产的甲砜霉素（５％ＴＡＰ）散对鸡巴氏杆菌病的治疗效果，并与氯霉素（ＣＡＰ）进行对比，我们采用人工感染的鸡巴杆菌病用不同剂量... 展开更多
关键词 鸡病 巴氏杆菌病 甲砜霉素散 治疗 毒性试验
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多杀性巴氏杆菌鉴定与特性研究的分子生物学方法 被引量：9
18
作者 曾静雯 刘慧芳 +6 位作者 沈琴芳 郑新添 余旭平 吴彤 李永明 周碧君 王开功 《中国兽药杂志》 2006年第4期41-44,31,共5页
多杀性巴氏杆菌是一种常见病原菌,其血清型众多(16种血清型),在毒力及流行病学等方面的生物学特性差异很大。分子生物学鉴定和特性分析方法能直接揭示其基因型上的差异,具有高灵敏度和可靠性。本文综述了多杀性巴氏杆菌的PCR、菌落杂交... 多杀性巴氏杆菌是一种常见病原菌,其血清型众多(16种血清型),在毒力及流行病学等方面的生物学特性差异很大。分子生物学鉴定和特性分析方法能直接揭示其基因型上的差异,具有高灵敏度和可靠性。本文综述了多杀性巴氏杆菌的PCR、菌落杂交和16S rRNA基因测序等鉴定方法以及限制性酶切分析、核糖体分型、脉冲场凝胶电泳、PCR指纹等特性分析方法。 展开更多
关键词 多杀性巴氏杆菌 PCR 限制性酶切分析 核糖体分型 脉冲场凝胶电泳
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蜂粮中的细菌对pH的影响 被引量：8
19
作者 苏松坤 陈盛禄 +2 位作者 余旭平 林雪珍 胡福良 《中国养蜂》 2002年第2期4-5,共2页
测定中国茶 (Camelliasinensis)的新鲜蜂花粉、晒干蜂花粉和不同酿制时间的蜂粮的平均pH分别是5 6 3、5 0 5和 4 0 6。通过接种试验 ,发现细菌是引起蜂粮pH下降的直接原因 ,其中植物乳球菌、果糖乳杆菌、詹氏乳杆菌等是产生有机酸的... 测定中国茶 (Camelliasinensis)的新鲜蜂花粉、晒干蜂花粉和不同酿制时间的蜂粮的平均pH分别是5 6 3、5 0 5和 4 0 6。通过接种试验 ,发现细菌是引起蜂粮pH下降的直接原因 ,其中植物乳球菌、果糖乳杆菌、詹氏乳杆菌等是产生有机酸的主要细菌 ,而利斯特氏杆菌对pH的作用不大。 展开更多
关键词 蜜蜂 细菌 花粉 蜂粮 PH值 酿制 接种试验
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鹅圆环病毒重组核衣壳蛋白的原核表达 被引量：8
20
作者 余旭平 胡东建 +3 位作者 郑新添 竺春 刘晓宁 于洪涛 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期505-509,共5页
根据已发表的鹅圆环病毒GoCV-yk1株的序列,设计引物扩增出全长核衣壳蛋白基因(Cap),用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳检测未见到目的蛋白条带。应用生物信息学... 根据已发表的鹅圆环病毒GoCV-yk1株的序列,设计引物扩增出全长核衣壳蛋白基因(Cap),用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切后插入到原核表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)进行融合表达,经SDS-PAGE电泳检测未见到目的蛋白条带。应用生物信息学分析确定Cap蛋白的核定位信号区域,新设计一对引物扩增出不包含核定位信号序列编码区的核衣壳蛋白基因,将截短Cap基因克隆入pET-28a进行融合表达,经SDS-PAGE电泳和Western blot检测,截短Cap蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分子量约为27.6ku,表达产物以包涵体形式存在,其表达量可以达菌体总蛋白的18.3%。截短Cap蛋白的高效表达为鹅圆环病毒ELISA检测方法的建立和进一步开展GoCV致病性及其免疫机制的探索奠定了基础。 展开更多
关键词 鹅 圆环病毒 核衣壳蛋白基因 核定位信号 原核表达
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