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小鼠肝脏原代Kupffer细胞的分离和纯化 被引量：4
1
作者 孙超 罗清波 +3 位作者 卢修贤 郑道峰 何雕 吴忠均 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1021-1025,共5页
目的利用低速离心和差速贴壁的特性,探索一种高效分离纯化BALB/c小鼠Kupffer细胞(KC)的方法。方法采用0.5 g/L 4型胶原蛋白酶原位灌注和消化肝脏组织,低速分离肝脏的细胞后差速贴壁分离纯化KC,与Percoll密度梯度离心分离方法比较KC的产... 目的利用低速离心和差速贴壁的特性,探索一种高效分离纯化BALB/c小鼠Kupffer细胞(KC)的方法。方法采用0.5 g/L 4型胶原蛋白酶原位灌注和消化肝脏组织,低速分离肝脏的细胞后差速贴壁分离纯化KC,与Percoll密度梯度离心分离方法比较KC的产量和活性,应用F4/80免疫荧光染色鉴定细胞形态、流式细胞术检测F4/80的表达、墨汁吞噬实验进行吞噬功能鉴定。构建KC缺氧/复氧模型,流式细胞术检测主要组织相容性复合体(MHC)Ⅱ、CD40、CD68和CD86的表达,ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达。结果每只小鼠肝脏可获得(5.83±0.54)×106个KC,细胞存活率达92%,Percoll密度梯度分离仅能获得(2.19±0.43)×106个KC,F4/80免疫荧光染色显示贴壁后KC呈梭形或棘状,流式细胞术鉴定F4/80阳性细胞占比接近90%,吞墨实验可见胞质内大量被吞噬的碳颗粒。KC在缺氧复氧模型下MHC-Ⅱ、CD40、CD86分子表达增多,并分泌TNF-α参与炎症反应。结论成功建立了BALB/c小鼠KC分离纯化的方法。 展开更多
关键词 库普弗细胞(Kupffer细胞) 分离方法 改良 小鼠
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符合米兰标准和杭州标准的肝癌肝移植受者预后回顾性分析 被引量：4
2
作者 孙超 罗清波 +4 位作者 卢修贤 郑道峰 何雕 吴忠均 徐骁 《中华移植杂志（电子版）》 CAS 2015年第2期9-13,共5页
目的比较符合米兰标准和符合杭州标准的肝细胞肝癌(HCC)患者行肝移植术后生存和肿瘤复发情况,验证杭州标准的临床应用价值。方法回顾性分析2006年1月至2011年12月中国肝移植注册登记的肝移植手术,并在浙江大学医学院附属第一医院、重庆... 目的比较符合米兰标准和符合杭州标准的肝细胞肝癌(HCC)患者行肝移植术后生存和肿瘤复发情况,验证杭州标准的临床应用价值。方法回顾性分析2006年1月至2011年12月中国肝移植注册登记的肝移植手术,并在浙江大学医学院附属第一医院、重庆医科大学附属第一医院两家肝移植中心接受随访调查受者的临床资料,196例肝癌肝移植受者纳入研究。将符合米兰标准的HCC患者作为米兰标准组,共90例(45.9%);超出米兰标准但符合杭州标准者作为杭州标准组,共40例(20.4%);肿瘤结节直径之和>8 cm,术前AFP>400 ng/m L且组织学分级为低度分化者作为超出杭州标准组,共66例(33.7%)。比较3组受者术后生存率、无瘤生存率,并评判预后。结果米兰标准组受者术后1、3、5年生存率和1、3、5年无瘤生存率分别为88.9%、73.3%、60.0%和84.4%、66.7%、51.1%,杭州标准组受者术后1、3、5年生存率和1、3、5年无瘤生存率分别为80.0%、65.0%、50.0%和75.0%、55.0%、45.0%,超出杭州标准组受者术后1、3、5年生存率和1、3、5年无瘤生存率分别为57.6%、30.3%、18.1%和45.5%、27.3%、18.1%。对3组受者术后累积生存率和无瘤生存率进行比较,米兰标准组和杭州标准组受者术后1、3、5年生存率和1、3、5年无瘤生存率差异均无统计学意义(P均>0.05),米兰标准组受者术后1、3、5年生存率和无瘤生存率均显著高于超出杭州标准组受者(P均<0.05),杭州标准组受者术后1、3、5年生存率和1、3、5年无瘤生存率均显著高于超出杭州标准组受者(P均<0.05)。结论同米兰标准一样,杭州标准也具有很强的科学性,能够显著拓展受益人群,让更多未符合米兰标准的患者能够施行肝移植术。同时杭州标准能有效预测肝移植受者预后,其创新性提出的生物学标准AFP水平和肿瘤分化程度是影响肝癌肝移植受者术后预后的关键性因素。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 肝移植 杭州标准 米兰标准 甲胎蛋白
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miR-148a通过抑制Ca^(2+)/钙调蛋白依赖激酶Ⅱα(CaMKⅡα)减少小鼠肝缺血再灌注损伤 被引量：4
3
作者 郑道峰 何雕 +3 位作者 卢修贤 孙超 罗清波 吴忠均 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1202-1206,1211,共6页
目的探讨miR-148a通过抑制Ca2+/钙调蛋白依赖激酶Ⅱα(Ca MKⅡα)对肝缺血/再灌注(I/R)损伤的影响及其机制。方法建立小鼠肝I/R模型,采用实时定量PCR检测miR-148a、Ca MKⅡα、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA的表达... 目的探讨miR-148a通过抑制Ca2+/钙调蛋白依赖激酶Ⅱα(Ca MKⅡα)对肝缺血/再灌注(I/R)损伤的影响及其机制。方法建立小鼠肝I/R模型,采用实时定量PCR检测miR-148a、Ca MKⅡα、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)mRNA的表达,Western blot法检测肝脏组织Ca MKⅡα的表达;HE染色观察各组肝组织的形态学变化,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肝细胞凋亡情况。结果肝I/R后miR-148a表达上调,与Ca MKⅡα表达水平呈负相关;外源性miR-148 a模拟物处理肝I/R损伤小鼠后,Ca MKⅡα、TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平下降,肝脏组织炎性细胞浸润及肝实质细胞坏死减少,肝细胞凋亡降低。结论 miR-148a可通过抑制Ca MKⅡα的表达而缓解肝I/R损伤。 展开更多
关键词 miR-148a 肝缺血再灌注损伤 Ca2+/钙调蛋白依赖激酶Ⅱα(CaMKⅡα)
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白藜芦醇在缺氧/复氧诱导的肝细胞损伤中的保护作用及与TLR4/NF-κB通路的关系 被引量：3
4
作者 何雕 张国庆 +3 位作者 郑道峰 魏续福 刘锐 吴忠均 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1398-1403,共6页
目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)在缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)诱导的大鼠肝细胞损伤中的保护作用及其相关分子机制。方法建立BRL-3A细胞(大鼠肝细胞株)H/R模型。建模前分别用RES和TLR4抑制剂(HTA125)预处理细胞。建模完成... 目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)在缺氧/复氧(hypoxia reoxygenation,H/R)诱导的大鼠肝细胞损伤中的保护作用及其相关分子机制。方法建立BRL-3A细胞(大鼠肝细胞株)H/R模型。建模前分别用RES和TLR4抑制剂(HTA125)预处理细胞。建模完成后,检测细胞存活率及细胞凋亡,观察细胞形态变化,检测细胞培养液中谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)及炎症因子含量,检测细胞TLR4、NF-κB p65基因mRNA及蛋白水平表达及NF-κB p65入核情况。结果 H/R条件使细胞存活率明显降低,细胞凋亡率增加(P<0.01),受损细胞明显增多,ALT、IL-1β含量增多(P<0.01),TLR4和NF-κB p65表达水平显著提高(P<0.01),p65入核细胞比例提高(P<0.01)。经RES及HTA125预处理后,细胞存活率显著提高,细胞凋亡比例显著缩小(P<0.01),受损细胞减少,ALT、IL-1β含量降低(P<0.01),TLR4和NF-κB p65表达水平明显降低(P<0.01),p65入核细胞比例下降(P<0.01)。结论 RES可以减轻H/R诱导的BRL-3A肝细胞损伤,该作用可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 缺氧/复氧 肝细胞损伤 Toll样受体4 核因子-ΚB
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浅谈机械化在煤矿开采中的应用
5
作者 何雕 《大科技》 2012年第14期252-253,共2页
在矿井的开采过程中，采煤工艺的优劣与否直接影响整个煤矿的生产能力。科学的、先进的采煤工艺可以实现煤矿的高产高效。我国工业控制自动化技术发展迅速，使得矿上的煤矿机电自动化应用日益增多。机械化在煤矿开采中的应用，极大地推... 在矿井的开采过程中，采煤工艺的优劣与否直接影响整个煤矿的生产能力。科学的、先进的采煤工艺可以实现煤矿的高产高效。我国工业控制自动化技术发展迅速，使得矿上的煤矿机电自动化应用日益增多。机械化在煤矿开采中的应用，极大地推动了企业高效安全，又快又好的发展。 展开更多
关键词 机械化 综合机械化 煤矿开采 应用
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邓小平关于农业“两个飞跃”思想的内涵、实践与意义
6
作者 赵凌云 何延雕 《四川师范大学学报（社会科学版）》 CSSCI 北大核心 2024年第5期5-15,199,共12页
邓小平关于农业“两个飞跃”思想深刻揭示了中国农业发展的阶段性和规律性,具有丰富的内涵意蕴和辩证的理论逻辑。“第一个飞跃”的实践极大地解放和发展了农村生产力,提高了农民生活水平,为“第二个飞跃”的实现创造了社会历史条件。... 邓小平关于农业“两个飞跃”思想深刻揭示了中国农业发展的阶段性和规律性,具有丰富的内涵意蕴和辩证的理论逻辑。“第一个飞跃”的实践极大地解放和发展了农村生产力,提高了农民生活水平,为“第二个飞跃”的实现创造了社会历史条件。在推进农业现代化建设中,“第二个飞跃”在总体原则、主体培育、形式转变、技术创新等方面起着重要的指导作用。邓小平这一思想贯穿于中国农业改革与发展的历史进程中,彰显了理论、实践、战略三个方面的深厚价值。 展开更多
关键词 邓小平 “两个飞跃” 农业现代化 农业强国
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毛泽东“走历史必由之路”的大历史观释义
7
作者 何延雕 《中共成都市委党校学报》 2023年第5期13-23,109,共12页
1939年毛泽东在纪念五四运动的文章中提出“走历史必由之路”的重要论断,以涤清党内外的部分偏颇思想,通过梳理毛泽东此时的相关活动,可以清晰看到这一思想的形成轨迹与出场语境。“走历史必由之路”是毛泽东基于大历史观全面把握马克... 1939年毛泽东在纪念五四运动的文章中提出“走历史必由之路”的重要论断,以涤清党内外的部分偏颇思想,通过梳理毛泽东此时的相关活动,可以清晰看到这一思想的形成轨迹与出场语境。“走历史必由之路”是毛泽东基于大历史观全面把握马克思主义关于人类社会历史发展规律的智慧结晶,具有丰富的理论内涵与实践诉求,其方法论价值经久不衰,与21世纪的今天遥相呼应。以大历史观释义毛泽东“走历史必由之路”,重现、重温其历史主动精神,不仅就其规律性来说对世界发展具有政治与历史双重意义,对中国式现代化道路亦有着宏观指导与具体借鉴的时代价值。 展开更多
关键词 毛泽东 历史主动精神 历史必由之路 大历史观
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