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胎球蛋白A的纯化及其对3T3-L1脂肪细胞胰岛素通路的抑制作用 被引量:6
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作者 陈婷 靳彦文 +5 位作者 瞿秀华 崔艳 李大培 朱晓辉 曹诚 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期819-822,共4页
目的对胎球蛋白A(AHSG)蛋白进行纯化,并探讨其对脂肪细胞胰岛素通路的调节作用。方法通过硫酸铵沉淀、PEG沉淀、DEAE离子交换和Protamine亲和层析方法纯化血浆中的AHSG蛋白。培养3T3-L1前脂肪细胞并分化为成熟脂肪细胞,置于低糖DMEM培... 目的对胎球蛋白A(AHSG)蛋白进行纯化,并探讨其对脂肪细胞胰岛素通路的调节作用。方法通过硫酸铵沉淀、PEG沉淀、DEAE离子交换和Protamine亲和层析方法纯化血浆中的AHSG蛋白。培养3T3-L1前脂肪细胞并分化为成熟脂肪细胞,置于低糖DMEM培养基培养,然后加入终浓度为100μg/ml和600μg/ml的AHSG及终浓度为600μg/ml的人白蛋白(HAS)分别进行培养,最后用不同浓度(0、10、20nmol/L)的胰岛素刺激细胞。采用Western blotting检测AHSG和HSA对3T3-L1脂肪细胞胰岛素下游分子IRS-1和Akt的磷酸化水平的影响。结果从血浆中纯化的AHSG蛋白纯度达90%以上。纯化的AHSG在100μg/ml浓度下可以减弱胰岛素对IRS-1蛋白磷酸化的影响,在600μg/ml浓度下可以完全抑制IRS-1蛋白磷酸化;纯化的AHSG在100μg/ml浓度下可以减弱胰岛素对Akt蛋白磷酸化的影响,在600μg/ml的浓度下可以明显抑制Akt蛋白的磷酸化,而600μg/ml的HAS则不能抑制IRS-1和Akt蛋白的磷酸化。结论从血清中纯化出的AHSG在生理浓度下可以抑制胰岛素对3T3-L1细胞中IRS-1和Akt蛋白的磷酸化作用,在脂肪细胞胰岛素通路中扮演着重要角色。 展开更多
关键词 胎球蛋白A 胰岛素 受体 胰岛素 蛋白激酶类
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一种新的Srrm1/SRm160可变剪接体经历无义突变介导的mRNA降解
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作者 瞿秀华 +4 位作者 刘萱 李晓明 靳彦文 李平 曹诚 《生物技术通讯》 CAS 2010年第5期605-609,共5页
目的:研究基因Srrm1/SRm160的可变剪接。方法:应用RT-PCR研究Srrm1/SRm160的可变剪接,通过蛋白质的翻译抑制和RNA干扰研究剪接异构体是否经历无义突变介导的mRNA降解(NMD)过程。结果:获得Srrm1/SRm160新的可变剪接异构体,该异构体产生... 目的:研究基因Srrm1/SRm160的可变剪接。方法:应用RT-PCR研究Srrm1/SRm160的可变剪接,通过蛋白质的翻译抑制和RNA干扰研究剪接异构体是否经历无义突变介导的mRNA降解(NMD)过程。结果:获得Srrm1/SRm160新的可变剪接异构体,该异构体产生提前终止密码子,翻译抑制和RNA干扰证实含有提前终止密码子的剪接体经过NMD而降解。结论:Srrm1/SRm160通过可变剪接和NMD调节自身的表达水平,作为剪接因子进一步调节其他基因的可变剪接。 展开更多
关键词 可变剪接 提前终止密码子 无义突变介导的mRNA降解
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浅谈新产品开发中的标准化工作
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作者 《江苏标准化》 1993年第3期25-25,共1页
关键词 产品开发 产品 标准化
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