目的研究心脏发育相关基因心肌转录因子NKX2.5和锌指转录因子GATA4在先天性心脏病(CHD)的相互作用关系。方法构建基因NKX2.5和GATA4真核表达质粒及脑钠肽启动子荧光素酶报告基因表达质粒,真核表达质粒经转染后,利用免疫共沉淀技术证明基...目的研究心脏发育相关基因心肌转录因子NKX2.5和锌指转录因子GATA4在先天性心脏病(CHD)的相互作用关系。方法构建基因NKX2.5和GATA4真核表达质粒及脑钠肽启动子荧光素酶报告基因表达质粒,真核表达质粒经转染后,利用免疫共沉淀技术证明基因NKX2.5和GATA4两者是否有相互作用,通过荧光素酶分析技术分析基因NKX2.5和GATA4对脑钠肽启动子序是否存在协同激活作用。结果 p CMV-HA-NKX2.5与Pre-immune作用后蛋白表达量0,与Anti-Myc作用后蛋白表达量为3.63±1.23,与Input作用后蛋白表达量为2.95±1.05,NKX2.5可将GATA4沉淀下来;p CMV-Myc-GATA4与Pre-immune作用后蛋白表达量0,与Anti-Myc作用后蛋白表达量为5.63±2.06,与Input作用后蛋白表达量为5.75±2.86,GATA4可将NKX2.5沉淀下来;脑钠肽(BNP)启动子荧光表达质粒与两者共转染比分别单独转染NKX2.5和GATA4对脑钠肽启动子的激活作用更强。结论 NKX2.5和GATA4之间具有相互作用,在心脏发育过程中起着重要的协同作用。展开更多
文摘目的研究心脏发育相关基因心肌转录因子NKX2.5和锌指转录因子GATA4在先天性心脏病(CHD)的相互作用关系。方法构建基因NKX2.5和GATA4真核表达质粒及脑钠肽启动子荧光素酶报告基因表达质粒,真核表达质粒经转染后,利用免疫共沉淀技术证明基因NKX2.5和GATA4两者是否有相互作用,通过荧光素酶分析技术分析基因NKX2.5和GATA4对脑钠肽启动子序是否存在协同激活作用。结果 p CMV-HA-NKX2.5与Pre-immune作用后蛋白表达量0,与Anti-Myc作用后蛋白表达量为3.63±1.23,与Input作用后蛋白表达量为2.95±1.05,NKX2.5可将GATA4沉淀下来;p CMV-Myc-GATA4与Pre-immune作用后蛋白表达量0,与Anti-Myc作用后蛋白表达量为5.63±2.06,与Input作用后蛋白表达量为5.75±2.86,GATA4可将NKX2.5沉淀下来;脑钠肽(BNP)启动子荧光表达质粒与两者共转染比分别单独转染NKX2.5和GATA4对脑钠肽启动子的激活作用更强。结论 NKX2.5和GATA4之间具有相互作用,在心脏发育过程中起着重要的协同作用。
