黄花水仙和南日岛水仙的组培快繁 被引量：22

1

作者 何玮毅 陈晓静 陈祥檀 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2005年第3期313-317,共5页

以黄花水仙和南日岛水仙为材料,对2个水仙品种的组培快繁技术进行了研究.结果表明:以低温处理1个月的带鳞茎盘基部的鳞片为外植体,接种于MS+0.5 mg.L-1BA+0.1 mg.L-12,4-D的诱导培养基和MS+1.0 mg.L-1BA+0.5或1.0 mg.L-12,4-D的继代增... 以黄花水仙和南日岛水仙为材料,对2个水仙品种的组培快繁技术进行了研究.结果表明:以低温处理1个月的带鳞茎盘基部的鳞片为外植体,接种于MS+0.5 mg.L-1BA+0.1 mg.L-12,4-D的诱导培养基和MS+1.0 mg.L-1BA+0.5或1.0 mg.L-12,4-D的继代增殖培养基中,诱导黄花水仙形成的小鳞茎数量多,增殖率高;南日岛水仙以MS+0.5 mg.L-1BA+2.0 mg.L-1NAA的诱导培养基和MS+1.0 mg.L-1BA+0.5或1.0 mg.L-12,4-D的增殖培养基效果较好.生根培养基为1/2MS+0.05 mg.L-1NAA,移栽后成活率很高. 展开更多

关键词 中国水仙 组织培养 快速繁殖

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中国水仙查尔酮异构酶基因的克隆与表达分析 被引量：9

2

作者 蔡雪玲 陈晓静 +2 位作者 叶一江 何玮毅 申艳红 《热带作物学报》 CSCD 2011年第12期2287-2292,共6页

查尔酮异构酶(CHI)是影响类黄酮合成的一个重要限速酶,在植物花色发育过程中起着重要作用。通过RT-PCR和RACE技术从中国水仙的花瓣中克隆得到3条CHI基因,分别命名为NtCHIW、NtCHIJ和NtCHIY。3个基因均含有一个735 bp的开放阅读框(ORF),... 查尔酮异构酶(CHI)是影响类黄酮合成的一个重要限速酶,在植物花色发育过程中起着重要作用。通过RT-PCR和RACE技术从中国水仙的花瓣中克隆得到3条CHI基因,分别命名为NtCHIW、NtCHIJ和NtCHIY。3个基因均含有一个735 bp的开放阅读框(ORF),编码244个氨基酸。氨基酸序列分析表明:白花水仙与金盏银台、黄花水仙、洋葱、粳稻、拟南芥、油棕榈、葡萄相应基因的氨基酸序列同源性分别为93.03%、93.44%、64.75%、55.42%、50.58%、59.43%、58.20%。荧光定量PCR分析表明:随着花开放的过程,中国水仙的CHI基因转录水平发生变化,说明CHI基因可能参与花色变化的过程。 展开更多

关键词 中国水仙 查尔酮异构酶 基因克隆 序列分析 表达分析

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番木瓜胚性愈伤组织的诱导及体胚发生 被引量：8

3

作者 蔡雪玲 陈晓静 +1 位作者 申艳红 何玮毅 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第2期122-127,共6页

以番木瓜的幼胚、下胚轴、叶片和子叶作为外植体,研究不同的激素配比、附加物以及培养方式和条件对胚性愈伤组织和体胚的诱导效果.结果表明,幼胚是胚性愈伤组织和体胚发生的好材料.幼胚最佳诱导培养基为:改良MS+10 mg·L-1 2,4-D+5 ... 以番木瓜的幼胚、下胚轴、叶片和子叶作为外植体,研究不同的激素配比、附加物以及培养方式和条件对胚性愈伤组织和体胚的诱导效果.结果表明,幼胚是胚性愈伤组织和体胚发生的好材料.幼胚最佳诱导培养基为:改良MS+10 mg·L-1 2,4-D+5 mg·L-1 NAA+2 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 BA;最适合的增殖培养基为:改良MS+10 mg·L-1 2,4-D+2.5mg·L-1 NAA+1 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 BA;最佳体胚诱导培养基为:改良MS+10 mg·L-1 2,4-D+2 mg·L-1 KT;子叶较难诱导愈伤组织,叶片和下胚轴愈伤组织的诱导率较高,但愈伤组织质量较差,体胚发生率极低. 展开更多

关键词 番木瓜 愈伤组织 体胚发生 幼胚

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番木瓜果实成熟相关基因的cDNA-AFLP分析及克隆 被引量：8

4

作者 申艳红 陈晓静 +1 位作者 卢秉国 何玮毅 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1081-1088,共8页

为了探讨番木瓜果实成熟机理,利用cDNA-AFLP技术对破色期和半黄期的番木瓜果实进行基因差异表达分析,获得了50个与果实成熟相关的差异基因片段,其中28个与GenBank数据库中的功能基因同源,分别参与了果实成熟过程中基因表达调控,DNA与蛋... 为了探讨番木瓜果实成熟机理,利用cDNA-AFLP技术对破色期和半黄期的番木瓜果实进行基因差异表达分析,获得了50个与果实成熟相关的差异基因片段,其中28个与GenBank数据库中的功能基因同源,分别参与了果实成熟过程中基因表达调控,DNA与蛋白质合成及运输,蛋白质降解,能量代谢,营养物质代谢和逆境胁迫反应等过程。在差异片段序列基础上设计特异引物,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术成功克隆了4条差异基因cDNA全长,分别命名为CpGMP、CpPAA1、CpPOD和CpMYB。半定量RT-PCR分析结果表明,随着果实的成熟衰老,4个基因的表达量相应变化,说明其可能参与果实的成熟过程。 展开更多

关键词 番木瓜 果实 成熟 CDNA-AFLP 差异表达 RACE

原文传递

番木瓜肌动蛋白CpActin基因的克隆及其在果肉中的表达 被引量：7

5

作者 申艳红 陈晓静 +1 位作者 何玮毅 卢秉国 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期924-929,共6页

以番木瓜果肉为试材,提取总RNA,反转录为双链cDNA。采用cDNA末端快速扩增方法(RACE),获得了番木瓜果肉Actin基因的全长cDNA序列,将其命名为CpActin,Genbank登录号为FJ696416。CpActin全长cDNA为1533bp,含有一个1134bp的开放阅读框,编码... 以番木瓜果肉为试材,提取总RNA,反转录为双链cDNA。采用cDNA末端快速扩增方法(RACE),获得了番木瓜果肉Actin基因的全长cDNA序列,将其命名为CpActin,Genbank登录号为FJ696416。CpActin全长cDNA为1533bp,含有一个1134bp的开放阅读框,编码377个氨基酸,与毛白杨、葡萄、水稻、拟南芥的Actin同源性分别为98.94%、98.67%、96.29%、94.69%。利用邻接法构建了部分高等植物、哺乳动物和真菌的Actin系统进化树,结果表明番木瓜与葡萄的Actin进化距离最小。采用半定量RT-PCR技术分析CpActin基因在不同成熟度番木瓜果实中的表达情况,发现该基因的表达水平没有明显差异,表明CpActin基因可以作为内参,进行番木瓜其他果实基因差异表达的研究。 展开更多

关键词 番木瓜 肌动蛋白 克隆 表达分析

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番木瓜GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶基因的克隆及分析 被引量：3

6

作者 申艳红 陈晓静 +1 位作者 卢秉国 何玮毅 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第2期172-177,共6页

采用cDNA末端快速扩增方法,获得了番木瓜果实GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(GMP)基因的cDNA全长序列,将其命名为CpGMP,GenBank登录号为FJ489652.然后,根据拼接序列设计开放性阅读框上、下游引物,扩增得到了CpGMP基因的开放性阅读框序列和DNA序... 采用cDNA末端快速扩增方法,获得了番木瓜果实GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶(GMP)基因的cDNA全长序列,将其命名为CpGMP,GenBank登录号为FJ489652.然后,根据拼接序列设计开放性阅读框上、下游引物,扩增得到了CpGMP基因的开放性阅读框序列和DNA序列.ORF序列编码361个氨基酸,DNA序列包含4个外显子和3个内含子.序列分析表明,番木瓜GMP与大果黄褥花、桃、番茄、拟南芥、水稻GMP的同源性分别为90.30%、89.47%、88.92%、88.09%、85.87%.半定量RT-PCR分析表明,CpGMP基因随着番木瓜果实的成熟表达量逐渐增加,软化时又逐渐降低. 展开更多

关键词 番木瓜 GDP-D-甘露糖焦磷酸化酶 CDNA末端快速扩增 半定量RT-PCR

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多花水仙花瓣抑制消减杂交cDNA文库的构建及分析 被引量：2

7

作者 何炎森 何玮毅 陈晓静 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第3期289-296,共8页

采用抑制消减杂交(SSH)技术,以多花水仙的栽培品种‘黄花水仙2号’黄色花瓣和‘金盏银台’白色花瓣的cDNA分别作为测试子和驱动子,建立正、反向抑制消减杂交cDNA文库.随机挑选正、反向文库各216个阳性克隆测序,对已知功能的uniESTs进行... 采用抑制消减杂交(SSH)技术,以多花水仙的栽培品种‘黄花水仙2号’黄色花瓣和‘金盏银台’白色花瓣的cDNA分别作为测试子和驱动子,建立正、反向抑制消减杂交cDNA文库.随机挑选正、反向文库各216个阳性克隆测序,对已知功能的uniESTs进行基因本体论(GO)分类分析,荧光定量PCR检测部分可能参与色素形成的uniESTs.结果表明:水仙花色差异表达正、反向消减文库经检验质量可靠,为分离花色形成相关基因奠定了基础;GO功能分类分析显示,水仙花色差异可能受到多个代谢途径的影响;经初步筛选得到11个与水仙花色形成相关的uniESTs,为进一步克隆基因全长和功能验证提供参考. 展开更多

关键词 多花水仙 花色 抑制消减杂交

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番木瓜果肉果胶裂解酶基因克隆及反义植物表达载体的构建 被引量：2

8

作者 申艳红 陈晓静 +1 位作者 何玮毅 卢秉国 《热带作物学报》 CSCD 2009年第1期59-63,共5页

采用cDNA末端快速扩增方法,获得了番木瓜果肉果胶裂解酶(Pectate lyase,PL)基因的完整3′端和部分5′端序列。然后,根据本实验室已经获得的PL基因5′端DNA序列及笔者得到的3′端序列设计上、下游引物,以番木瓜基因组DNA为模板扩增得到P... 采用cDNA末端快速扩增方法,获得了番木瓜果肉果胶裂解酶(Pectate lyase,PL)基因的完整3′端和部分5′端序列。然后,根据本实验室已经获得的PL基因5′端DNA序列及笔者得到的3′端序列设计上、下游引物,以番木瓜基因组DNA为模板扩增得到PL基因的开放性阅读框。该序列编码385个氨基酸,与草莓、桃、芒果、拟南芥氨基酸序列的同源性分别为83.38%、75.76%、73.68%、65.96%。根据PL基因设计特异引物,扩增其保守区片段,将其反向插入pBI 121的CaMV 35 S启动子和Nos终止子之间,成功构建反义植物表达载体pBP,并导入到根癌农杆菌EHA 105中。 展开更多

关键词 番木瓜 果胶裂解酶 RACE 反义表达载体

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昆虫葡萄糖氧化酶的基本特性及功能 被引量：1

9

作者 董人富 马小丽 +4 位作者 陈亚琼 戚伟平 陈玮 何玮毅 尤民生 《环境昆虫学报》 CSCD 北大核心 2015年第2期426-431,共6页

葡萄糖氧化酶(glucose oxidases,GOX)是一种脱氢酶,普遍存在于动物、植物及微生物体内,可以专一性地将β-D-葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢。昆虫GOX可能是从葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶(glucose-methanol-choline oxidoreductases)经... 葡萄糖氧化酶(glucose oxidases,GOX)是一种脱氢酶,普遍存在于动物、植物及微生物体内,可以专一性地将β-D-葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢。昆虫GOX可能是从葡萄糖-甲醇-胆碱氧化还原酶(glucose-methanol-choline oxidoreductases)经由葡萄糖脱氢酶(glucose dehydrogenase)进化而来。在昆虫中,GOX主要分布在下唇腺,杂食性昆虫比寡食性、单食性昆虫的GOX活性高。昆虫GOX除了能够调节自身与氧化还原相关的生理活动,在抑制寄主植物防御反应、促进昆虫取食寄主方面具有重要的功能,但同时也能诱发某些植物的防御反应。进一步深入研究GOX在昆虫与植物互作方面的功能,将有助于阐明两者间长期以来的协同进化关系,为农业害虫的防控提供理论依据和新思路。 展开更多

关键词 葡萄糖氧化酶 进化 氧化还原 昆虫食性 植物防御

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番木瓜PL和β-Gal基因双价反义表达载体的构建 被引量：1

10

作者 申艳红 陈晓静 何玮毅 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2010年第2期159-163,共5页

在已报道的番木瓜果胶裂解酶(PL)和β-半乳糖苷酶(β-Gal)基因序列的基础上,设计特异引物,分别扩增保守区序列,将其分别反向插入植物表达载体pCAMB IA1301-35S-GUS-Nos的CaMV35S启动子和Nos终止子之间,构建反义表达载体pCP和pCG.然后用... 在已报道的番木瓜果胶裂解酶(PL)和β-半乳糖苷酶(β-Gal)基因序列的基础上,设计特异引物,分别扩增保守区序列,将其分别反向插入植物表达载体pCAMB IA1301-35S-GUS-Nos的CaMV35S启动子和Nos终止子之间,构建反义表达载体pCP和pCG.然后用2种不同的方法将带有完整启动子和终止子的PL和-βGal基因引入pCAMB IA2301中,获得PL和β-Gal基因的双价植物反义表达载体pCPG,并对2种方法进行比较. 展开更多

关键词 番木瓜 果胶裂解酶 Β-半乳糖苷酶 反义表达载体

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2个番木瓜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆与分析 被引量：1

11

作者 申艳红 陈晓静 +2 位作者 李荣荣 卢秉国 何玮毅 《热带作物学报》 CSCD 2011年第5期861-865,共5页

采用RT-PCR扩增获得了2个番木瓜果实多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因cDNA和DNA全长序列,将其命名为CpPGIP1和CpPGIP2。CpPGIP1基因全长为984 bp,编码325个氨基酸;CpPGIP2基因全长为1 025 bp,编码326个氨基酸。2基因均没有内含子序列... 采用RT-PCR扩增获得了2个番木瓜果实多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP)基因cDNA和DNA全长序列,将其命名为CpPGIP1和CpPGIP2。CpPGIP1基因全长为984 bp,编码325个氨基酸;CpPGIP2基因全长为1 025 bp,编码326个氨基酸。2基因均没有内含子序列,核苷酸序列有66.54%的相似性,氨基酸序列有63.53%的相似性。2基因均含有植物PGIP基因编码蛋白特有的亮氨酸重复保守序列LXXLXXLXXLXLXXNXLXGXIPXX。对PGIP基因在不同成熟度番木瓜果实表达量分析发现,2基因4个时期均有表达,而且基本呈现同一表达趋势,绿色期表达量最高,随着果实成熟表达量逐渐降低。 展开更多

关键词 番木瓜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(PGIP) 基因克隆 半定量RT—PCR

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fl(2)d单等位基因的敲除显著降低小菜蛾的生殖力和育性 被引量：2

12

作者 李飞飞 王贝贝 +3 位作者 赖颖芳 杨菲颖 尤民生 何玮毅 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第14期3029-3042,共14页

【目的】RNA甲基化是基因转录后水平表观修饰的主要形式,参与了众多重要的细胞学过程。小菜蛾(Plutella xylostella)是危害十字花科蔬菜的重要寡食性害虫,与RNA甲基化相关基因的功能尚未见报道。本研究通过克隆小菜蛾的RNA甲基化蛋白同... 【目的】RNA甲基化是基因转录后水平表观修饰的主要形式,参与了众多重要的细胞学过程。小菜蛾(Plutella xylostella)是危害十字花科蔬菜的重要寡食性害虫,与RNA甲基化相关基因的功能尚未见报道。本研究通过克隆小菜蛾的RNA甲基化蛋白同源基因fl(2)d,鉴定其表达模式,并敲除该基因以探究其生物学功能。【方法】通过小菜蛾基因组网站查找fl(2)d基因序列,PCR扩增其蛋白质编码序列(CDS);采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术,检测小菜蛾不同发育阶段个体以及成虫生殖腺中fl(2)d的相对表达量;运用CRISPR/Cas9结合卵的显微注射技术,对小菜蛾fl(2)d进行编辑;将fl(2)d被编辑过的成虫与野生型成虫杂交,并对其产生的后代进行近交,筛选fl(2)d突变品系;观测并比较突变体与野生型个体遗传特性、生物学参数和表型的差异,明确fl(2)d的功能。【结果】克隆得到长度为912 bp的fl(2)d CDS,fl(2)d在雌蛹、雌成虫和卵中的表达量较高,雄成虫和雄蛹的表达量较低,幼虫期的表达量最低,成虫卵巢中表达量显著高于精巢。通过向小菜蛾的卵注射靶向fl(2)d的向导RNA(sgRNA)和Cas9蛋白的混合物,对所产生的阳性后代进行10代的单对近交筛选,获得3种杂合的移码突变品系,分别缺失了4个(Δfl(2)d213-4)、5个(Δfl(2)d213-5)和7个(Δfl(2)d214-7)碱基。在上述品系的筛选过程中,发现了6只缺失4个碱基的纯合突变个体,2只缺失5个碱基的纯合突变个体;缺失4个碱基的纯合个体成功配成了两对,近交未产卵;剩余的2只缺失4个碱基的雄性纯合个体和2只缺失5个碱基的雄性纯合个体分别与同世代的雌性杂合突变个体近交后仍未产卵。说明fl(2)d纯合突变的个体存活率极低,且可能无法产生后代。通过分析后代基因型的分离比,发现杂合突变个体近交以及杂合突变个体与野生型个体杂交产生的后代中,杂合突变个体与野生型个体的� 展开更多

关键词 小菜蛾 fl(2)d 杂合突变体 生殖力 育性

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多花水仙花朵全长cDNA文库的构建

13

作者 鲁娜 陈晓静 +1 位作者 申艳红 何玮毅 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2013年第5期518-522,共5页

采用SMART技术,以多花水仙‘黄花水仙2号’盛开期花朵为材料,构建其全长cDNA文库,并对文库质量进行鉴定.结果表明,所构建初始文库的滴度为6.30×105cfu·mL-1,扩增后文库的滴度为1.58×108cfu·mL-1,重组率为84%,插入... 采用SMART技术,以多花水仙‘黄花水仙2号’盛开期花朵为材料,构建其全长cDNA文库,并对文库质量进行鉴定.结果表明,所构建初始文库的滴度为6.30×105cfu·mL-1,扩增后文库的滴度为1.58×108cfu·mL-1,重组率为84%,插入片段大小集中在500-2000 bp之间,平均长度约970 bp,符合cDNA文库的质量标准.可见,所构建的文库比较完整,能够反映黄花水仙花朵盛开期基因的表达情况. 展开更多

关键词 多花水仙 花色 SMART技术 CDNA文库

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害虫遗传防控技术的研究与应用 被引量：14

14

作者 徐雪娇 何玮毅 +2 位作者 杨婕 陈玮 尤民生 《中国科学：生命科学》 CSCD 北大核心 2019年第8期938-950,共13页

遗传防控技术作为传统有害生物防控方式的替代策略,自20世纪50年代以来在世界各国受到广泛的关注,被认为是一类有利于人类健康、食品安全和农业可持续发展的害虫种群防控技术,同时也为日益严峻的生物入侵问题提供了解决方案.本文综述了... 遗传防控技术作为传统有害生物防控方式的替代策略,自20世纪50年代以来在世界各国受到广泛的关注,被认为是一类有利于人类健康、食品安全和农业可持续发展的害虫种群防控技术,同时也为日益严峻的生物入侵问题提供了解决方案.本文综述了不育昆虫技术(sterile insect technique,SIT)、释放携带显性致死基因昆虫技术(release of insects carrying a dominant lethal,RIDL)和基因驱动技术(gene drive)的基本原理及部分应用案例,比较了不同技术的优势与限制因素,并介绍了相关研究中常见的几种基因整合策略,以期进一步改进害虫综合治理的基础研究和技术研发. 展开更多

关键词 遗传防控 不育昆虫技术 释放携带显性致死基因昆虫技术 基因驱动技术

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基因组学时代害虫治理的研究进展及前景 被引量：11

15

作者 彭露 何玮毅 +5 位作者 夏晓峰 谢苗 柯富士 尤士骏 黄宇萍 尤民生 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-22,共22页

随着DNA测序技术的不断更新和生物信息学的快速发展,昆虫基因组学的研究与日俱增,提高了人们对种群遗传学和进化生态学的理解和认识,促进了对重要农业害虫的适应性和致害机理的研究,为安全、有效、可持续地开展害虫综合治理提供了新思... 随着DNA测序技术的不断更新和生物信息学的快速发展,昆虫基因组学的研究与日俱增,提高了人们对种群遗传学和进化生态学的理解和认识,促进了对重要农业害虫的适应性和致害机理的研究,为安全、有效、可持续地开展害虫综合治理提供了新思路和新手段。近两年来,全球发布的昆虫基因组数量每年可达30个。在遗传学、生态学和进化论等生命科学基本原理和方法的指导下,基因组学的研究为揭示害虫遗传变异的内在机制、生态适应性策略和种群变动规律提供了重要的数据和信息资源,同时催生了一系列害虫治理新技术和新方法的研发与应用。为了进一步促进和加强基因组时代的害虫治理研究,拓展该领域研究的广度与深度,本文就昆虫基因组的研究,昆虫与植物协同进化模式及其互作机理,昆虫免疫和抗药性分子机制,以及害虫防治新技术等方面进行了综述,旨在为了解基因组时代害虫治理的研究进展及前景提供参考,对进一步改进害虫生态控制的策略和措施也具有指导意义。 展开更多

关键词 昆虫基因组 协同进化 免疫 抗药性 害虫治理

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番木瓜叶片、叶柄胚性愈伤组织的诱导及其体胚植株的发生 被引量：10

16

作者 何玮毅 陈晓静 +2 位作者 申艳红 卢秉国 潘东明 《热带作物学报》 CSCD 2008年第6期690-697,共8页

以"漳红"番木瓜组培苗的叶片和叶柄为外植体,在改良MS+0.5 mg/L KT+1.0mg/L 2,4-D+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+400 mg/L Glu+30 g/L蔗糖的固体培养基上诱导出了胚性愈伤组织。其中,CⅡa型胚性愈伤在一定条件下能够继代增殖,并... 以"漳红"番木瓜组培苗的叶片和叶柄为外植体,在改良MS+0.5 mg/L KT+1.0mg/L 2,4-D+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+400 mg/L Glu+30 g/L蔗糖的固体培养基上诱导出了胚性愈伤组织。其中,CⅡa型胚性愈伤在一定条件下能够继代增殖,并能向CⅡb型转变,CⅡb型胚性愈伤则容易发生体胚。采用两步生根法,将体胚再生植株先接种于1/2 MS+0.5 mg/L IBA+1.0 g/L AC+30 g/L蔗糖的固体培养基中暗培养7 d后,转移至1/2 MS+1.0 g/L AC+25μmol/L VB2+30 g/L蔗糖的固体培养基上光照培养,生根效果最好。移栽后,成活率可达45%以上。 展开更多

关键词 番木瓜 叶片 叶柄 胚性愈伤组织 体胚发生 生根

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小菜蛾对苏云金芽胞杆菌(Bt)的抗性研究进展 被引量：10

17

作者 尤士骏 刘昭霞 +3 位作者 熊磊 廖金英 何玮毅 尤民生 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期951-962,共12页

小菜蛾Plutella xylostella(L.)是为害十字花科蔬菜的一种重要的世界性害虫,由于其分布范围广、繁殖速度快、抗性水平高,已经成为最难防治的害虫之一。基于苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)开发的杀虫剂在小菜蛾生物防治中发... 小菜蛾Plutella xylostella(L.)是为害十字花科蔬菜的一种重要的世界性害虫,由于其分布范围广、繁殖速度快、抗性水平高,已经成为最难防治的害虫之一。基于苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt)开发的杀虫剂在小菜蛾生物防治中发挥重要的作用,但小菜蛾作为在田间最早对Bt产生抗性的害虫,其抗性发展及抗性机理也引起了全世界的广泛关注。本文概述了小菜蛾的发生危害及其抗药性的研究动态、苏云金芽胞杆菌的起源、发展及应用,分析了小菜蛾对Bt杀虫毒素产生抗药性及其抗性机理,并从抗性发展风险、转基因油菜种植和进一步深入开展抗性机理的研究三个方面进行了展望,以期为优化小菜蛾抗药性的治理策略、提高生物农药和Bt作物的控害效能提供借鉴和参考。 展开更多

关键词 小菜蛾 BT毒素 抗药性 抗性机理 抗药性治理

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节肢动物ABC转运蛋白及其介导的杀虫剂抗性 被引量：7

18

作者 戚伟平 马小丽 +3 位作者 何玮毅 陈玮 董人富 尤民生 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期729-736,共8页

腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter),简称ABC转运蛋白(ABC transporter),是继细胞色素P450单加氧酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶之后又一类参与解毒作用的重要蛋白家族,因其在杀虫剂解毒等方面起着非常重要... 腺苷三磷酸结合盒转运蛋白(ATP-binding cassette transporter),简称ABC转运蛋白(ABC transporter),是继细胞色素P450单加氧酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽S-转移酶之后又一类参与解毒作用的重要蛋白家族,因其在杀虫剂解毒等方面起着非常重要的作用,近年来逐渐受到广泛关注。ABC转运蛋白是一大类跨膜蛋白,其核心结构通常由4个结构域组成,包括2个高度疏水的跨膜结构域(transmembrane domains,TMD)和2个核苷酸结合域(nucleotide binding domains,NBD)。根据序列相似性和保守结构域,可以把ABC转运蛋白家族分为8个亚家族,每个亚家族的成员数及功能不同。这类蛋白在各种生物体内均有分布,其主要功能包括转运物质、信号传导、细胞表面受体及参与细胞内DNA修复,转录及调节基因的表达过程等。此外,近年来的研究表明,ABC转运蛋白的突变或过表达不仅与节肢动物对化学农药的抗药性密切相关,而且在抗Bt毒素方面也起着非常重要的作用,对转Bt作物造成严重威胁。本文综述了节肢动物ABC转运蛋白的结构,ATP水解介导的作用机制,亚家族的分类、结构及生理功能,以及由ABC转运蛋白介导的抗药性研究进展,旨在深入了解ABC转运蛋白的研究现状及其在节肢动物抗药性方面的作用,为阐明节肢动物抗药性机制提供新的理论依据,对改进农业害虫的抗性监测和治理策略也具有一定的指导意义。 展开更多

关键词 节肢动物 ABC转运蛋白 分子结构 亚家族 生理功能 介导抗性

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昆虫DNA甲基化的研究进展 被引量：6

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作者 陈玮 徐雪娇 +2 位作者 陈楠菁 何玮毅 尤民生 《应用昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1082-1093,共12页

DNA甲基化是表观遗传学的一个分支学科,因其在调控基因表达和生物体许多生理生化过程具有重要的作用,近年来逐渐受到广泛关注。昆虫由于种类繁多,变态发育和表型复杂,研究DNA甲基化的功能具有重要的意义。昆虫DNA甲基化需要由DNA甲基化... DNA甲基化是表观遗传学的一个分支学科,因其在调控基因表达和生物体许多生理生化过程具有重要的作用,近年来逐渐受到广泛关注。昆虫由于种类繁多,变态发育和表型复杂,研究DNA甲基化的功能具有重要的意义。昆虫DNA甲基化需要由DNA甲基化转移酶(Dnmts)参与完成,其数量和结构在不同物种中差异较大。大多数昆虫均具有维持DNA甲基化水平的Dnmt1,缺乏行使从头DNA甲基化功能的Dnmt3,Dnmt2(也称为TRDMT1)虽保守存在但其DNA结合的能力极其微弱。昆虫DNA甲基化的总体水平较低,并且呈现不同龄期和组织的时空分布特异性。在昆虫基因组中,以外显子区的DNA甲基化水平最为显著,具有增强基因表达的功能,表现出在序列保守和广泛表达的基因中水平高、在特异表达的基因中水平低的进化特征。目前用于研究昆虫DNA甲基化的方法主要有生物信息学预测和甲基化特异限制性内切酶、甲基化敏感扩增多态性、基因组DNA甲基化测序等实验研究方法。本文就昆虫DNA甲基化转移酶的特性、DNA甲基化的分布与进化及其研究方法进行综述,旨在深入了解昆虫DNA甲基化的研究现状及其重要作用,为促进该研究领域的发展提供新的思路和方法。 展开更多

关键词 昆虫 DNA甲基化 Dnmts 进化 研究方法

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番木瓜组培苗叶片基因组DNA的微量提取 被引量：6

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作者 何玮毅 陈晓静 +3 位作者 申艳红 卢秉国 官磊 潘东明 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2009年第1期34-38,共5页

比较了3种从番木瓜组培苗叶片中提取基因组DNA的方法.结果表明:改良CTAB法步骤简单,DNA得率与质量均较高,并能用于转基因植株的PCR检测、限制性内切酶酶切以及后续的反向PCR反应;SDS-KAc法存在RNA残留;试剂盒法的DNA得率与质量均较低.

关键词 番木瓜 组培苗 基因组DNA 微量提取

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