期刊文献+
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
胰高糖素样肽-1改善晚期糖基化终末产物诱导人主动脉内皮细胞铁死亡的机制研究 被引量:1
1
作者 胡珂昕 唐珑佳 +6 位作者 章辉 叶潇 沃恩康 项婷婷 马淑敏 武晓泓 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期409-415,共7页
目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)对晚期糖基化终末产物(AGE)诱导人主动脉内皮细胞(HAEC)铁死亡的作用及可能机制。方法将HAEC分为6组:对照组、AGE组、AGE+铁死亡抑制剂铁抑素-1(Fer-1)组、AGE+GLP-1(7~37)组、AGE+GLP-1(9~36)组、AGE+GLP... 目的探讨胰高糖素样肽-1(GLP-1)对晚期糖基化终末产物(AGE)诱导人主动脉内皮细胞(HAEC)铁死亡的作用及可能机制。方法将HAEC分为6组:对照组、AGE组、AGE+铁死亡抑制剂铁抑素-1(Fer-1)组、AGE+GLP-1(7~37)组、AGE+GLP-1(9~36)组、AGE+GLP-1(28~36)组。每组设置3个平行组。培养48 h后,试剂盒检测细胞活力及丙二醛(MDA)含量,实时荧光定量聚合酶链反应检测铁死亡相关基因[前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)]mRNA表达水平,Western blotting法检测细胞GPX4、ACSL4、苏氨酸蛋白激酶(LKB1)、磷酸化LKB1(p-LKB1)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK(p‐AMPK)蛋白水平。组间比较采用单因素方差分析和t检验。结果与对照组相比,AGE组细胞线粒体出现形态异常,且显著抑制细胞活力(P<0.05),AGE+Fer-1组细胞活力明显回升(P<0.05)。AGE组铁死亡正向调控基因PTGS2 mRNA水平上调(P<0.05),ACSL4 mRNA水平表达升高(P<0.05),而负向调控基因GPX4 mRNA水平表达下调(P<0.05),且上述基因表达在AGE+Fer-1组均被逆转(P<0.05)。与AGE组相比较,GLP-1及其小分子片段组HAEC细胞活力均明显升高(P<0.05),细胞内MDA含量减少,脂质过氧化程度减轻(均P<0.05)。铁死亡负调控蛋白GPX4表达上调(P<0.05),铁死亡正调控蛋白ACSL4表达下调(均P<0.05),p‐LKB1和p‐AMPK蛋白显著增加(均P<0.05)。结论GLP-1可以减少AGE诱导的HAEC铁死亡,其机制可能与激活LKB1/AMPK信号通路有关。 展开更多
关键词 糖基化终产物 高级 胰高糖素样肽-1 人主动脉内皮细胞 铁死亡
原文传递
基于流感病毒M2蛋白胞外区的双层蛋白质纳米颗粒的制备及免疫学效果评价
2
作者 马淑敏 项婷婷 +5 位作者 郭潮潭 杨灿 杨新燕 胡珂昕 沃恩康 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2023年第6期378-385,共8页
目的通过两步脱溶剂-交联法制备携带流感病毒血凝素茎部α螺旋区(HAα)、6个串联重复的M2蛋白胞外域(6M2e)和鞭毛蛋白(Flg)的双层蛋白质纳米颗粒, 探究其在小鼠体内的免疫效果。方法采用脱溶剂-交联法将融合蛋白FljB-6M2e-△D2D3-HAα... 目的通过两步脱溶剂-交联法制备携带流感病毒血凝素茎部α螺旋区(HAα)、6个串联重复的M2蛋白胞外域(6M2e)和鞭毛蛋白(Flg)的双层蛋白质纳米颗粒, 探究其在小鼠体内的免疫效果。方法采用脱溶剂-交联法将融合蛋白FljB-6M2e-△D2D3-HAα和HAα-6M2e制备成双层蛋白质纳米颗粒。通过透射电镜和纳米颗粒跟踪分析仪进行物理表征后评估其细胞毒性。免疫小鼠后采用ELISA方法进行特异性抗体效价测定, ELISPOT检测细胞免疫水平, CCK-8法检测脾细胞的增殖情况。结果本研究成功制备了粒径为(130.03±2.96) nm的双层蛋白质纳米颗粒FljB-6M2e-△D2D3-HAα/ HAα-6M2e。免疫小鼠后产生的抗M2e-IgG抗体效价为1∶25 600, 抗HAα-IgG抗体效价为1∶12 800, 高于对照组小鼠, 差异均具有统计学意义(t=3.051和3.780, P=0.038和0.019)。与对照组相比, 多肽刺激可以使小鼠脾细胞显著增殖[M2e刺激增殖率:(154.18±2.34)%, HAα刺激增殖率:(151.51±1.56)%](t=12.942和24.591, P均<0.001), 并且诱导产生分泌更多IL-4和IFN-γ的淋巴细胞(M2e刺激:t=5.477和6.571, P=0.005和0.013;HAα刺激:t=9.239和7.671, P=0.001和0.013)。多种细胞因子的mRNA水平显著升高, IFN-γ和IL-4的转录水平均高于对照组(IFN-γ:t=13.253和20.847, P均<0.001;IL-4 :t=6.032和4.824, P=0.004和0.009)。结论本研究所制备的双层蛋白质纳米颗粒可以刺激小鼠产生较高水平的体液和细胞免疫应答, 为开发多表位流感通用疫苗提供了有效依据。 展开更多
关键词 正黏病毒科 流感病毒 纳米疫苗 鞭毛蛋白佐剂 免疫原性
原文传递
基于网络药理学及验证实验探讨淡豆豉治疗流感的作用机制 被引量:3
3
作者 路鑫怡 +1 位作者 杨灿 郭潮潭 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期102-109,共8页
目的:淡豆豉广泛应用于治疗流感的方剂中,本研究结合网络药理学和细胞实验初步探讨淡豆豉抗流感病毒作用方式、物质基础和分子生物学基础。方法:通过TCMSP和TCM-ID数据库获取淡豆豉中的活性成分,借助PharmMapper数据库和Swiss target pr... 目的:淡豆豉广泛应用于治疗流感的方剂中,本研究结合网络药理学和细胞实验初步探讨淡豆豉抗流感病毒作用方式、物质基础和分子生物学基础。方法:通过TCMSP和TCM-ID数据库获取淡豆豉中的活性成分,借助PharmMapper数据库和Swiss target predication数据库获取活性成分靶点信息。在GeneCards和DisGeNET数据库获取流感相关靶点,使用Venny平台对淡豆豉活性成分和流感相关靶点取交集并构建药物-成分-靶点-疾病网络图。利用Cytoscape软件建立可视化蛋白-蛋白相互作用网络(PPI),利用David数据库和R语言进行GO富集分析和KEGG通路与基因功能富集分析及网络可视化。通过细胞实验对重要信号通路进行验证。结果:淡豆豉的主要成分为6"-O-乙酰基苷、大豆黄素、黄豆苷元、染料木素和异黄酮、等,在其中共筛选出7个有效成分,涉及靶点868个;流感相关靶点303个,二者交集靶点47个,涉及的关键靶点有:热休克蛋白90 AA1(Hsp90AA1)、肿瘤坏死因子(TNF)、白介素-2(IL-2)、等;GO分析作用靶点主要富集在蛋白结合、蛋白激酶调节过程;KEGG分析得到关键通路包括:流感病毒信号通路、凋亡信号通路、Toll信号通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、等。细胞实验结果证实,与模型对照组相比较,淡豆豉水煎液1.6、8 mg/mL组可通过直接作用方式降低24 h后病毒蛋白表达和子代病毒产生量(P<0.05);与模型对照组相比,淡豆豉煎出液8 mg/mL组作用24 h和36 h组的热休克蛋白90(Hsp90)、半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3)及半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶9(caspase 9)的mRNA转录水平下调(P<0.05),Hsp90、Caspase 3 mRNA及Caspase 3剪切体蛋白表达水平明显下调,细胞凋亡率均明显降低(P<0.05)。结论:淡豆豉通过与宿主细胞相关靶点相互作用影响病毒的感染、病毒基因组的复制、转录、翻译过程或调控细胞凋亡发挥抗流感作用。 展开更多
关键词 淡豆豉 流感病毒 子代病毒 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3 热休克蛋白90
原文传递
流感病毒血凝素茎部螺旋区和串联重复M2蛋白胞外区域融合蛋白的免疫效果研究
4
作者 项婷婷 马淑敏 +5 位作者 路鑫怡 郭潮潭 杨灿 杨新燕 沃恩康 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2023年第1期31-38,共8页
目的探索含有流感病毒血凝素茎部α螺旋区(HAα)和6个串联重复M2蛋白胞外区域(6M2e)的融合蛋白的表达和制备方法,并对其在小鼠体内的免疫效果进行评价。方法采用去除高变区的鞭毛蛋白序列,将HAα和6M2e插入到原高变区位点,构建重组质粒p... 目的探索含有流感病毒血凝素茎部α螺旋区(HAα)和6个串联重复M2蛋白胞外区域(6M2e)的融合蛋白的表达和制备方法,并对其在小鼠体内的免疫效果进行评价。方法采用去除高变区的鞭毛蛋白序列,将HAα和6M2e插入到原高变区位点,构建重组质粒pET28a-FljBΔD2D3-HAα-6M2e。在大肠埃希菌中诱导表达后进行纯化和鉴定,并评估其细胞毒性。最后将制备的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,采用ELISA方法检测小鼠血清特异性抗体效价,实时荧光PCR法检测小鼠IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-ɑ的mRNA水平,CCK-8法检测脾细胞的增殖。结果成功构建重组质粒pET28a-FljBΔD2D3-HAα-6M2e,蛋白表达最适条件为1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37℃诱导10 h,通过镍柱纯化获得高纯度的无毒融合蛋白。免疫小鼠后抗M2e-IgG和抗HAα-IgG的抗体ELISA效价均达到1∶102400,且与对照组相比差异有统计学意义(t=0.33,P=0.774;t=7.60,P=0.001)。各类细胞因子的mRNA水平升高,其中实验组IFN-γ转录水平为38.74±3.65,蛋白水平为(66.03±3.31)pg/mL,高于对照组(t=21.33,P=0.003;t=10.21,P<0.01)。结论成功制备了高纯度的融合蛋白FljBΔD2D3-HAα-6M2e,能有效刺激小鼠产生抗M2e-IgG和抗HAα-IgG,具有良好的免疫效果,为流感疫苗候选物研发奠定了基础。 展开更多
关键词 正黏病毒科 流感病毒 疫苗 融合蛋白 免疫原性
原文传递
燕窝酶解液的制备及其抗流感病毒作用初探 被引量:1
5
作者 路鑫怡 沃恩康 +6 位作者 杨新燕 杨灿 徐琦 杨柳 项婷婷 郭潮潭 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2022年第3期162-167,共6页
目的制备燕窝酶解液并初步了解其抗流感病毒的方式和效果。方法以唾液酸提取率为评价标准,选择最佳酶解时长和液料比,获取燕窝酶解液。通过实时荧光定量PCR和血凝试验分析并明确燕窝酶解液对流感病毒的抑制方式和单个复制周期中的作用... 目的制备燕窝酶解液并初步了解其抗流感病毒的方式和效果。方法以唾液酸提取率为评价标准,选择最佳酶解时长和液料比,获取燕窝酶解液。通过实时荧光定量PCR和血凝试验分析并明确燕窝酶解液对流感病毒的抑制方式和单个复制周期中的作用环节。试验同时设立病毒对照组。采用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测燕窝干预下NF-κB的表达情况和炎症细胞因子转录水平的变化。结果在液料比45∶1、酶解时长不低于3 h的条件下获得燕窝酶解液,唾液酸的提取率为(66.87±0.05)%。相比病毒对照组,燕窝酶解液通过直接抑制流感病毒的方式降低病毒基因NP和M的转录水平(t=2.81和3.34,P=0.023和0.010)。在病毒复制过程中燕窝酶解液在病毒感染初期和复制初期(0 h和2 h)发挥抑制效果,NP基因转录相比病毒对照组显著降低(t=13.79和21.84,P=0.005和0.002)。与燕窝液组相比,在燕窝酶解液干预下,炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ、NF-κB、NF-κBp65的表达也降低(t=15.12、21.31、4.85、7.40、13.77和29.39,P均<0.05)。结论通过酶解的方式可以提高燕窝的抗流感病毒效果,燕窝酶解液能够抑制流感病毒引起的炎症因子表达。 展开更多
关键词 流感病毒A型 燕窝 酶解液 抗流感病毒 炎症因子 抑制
原文传递
淡豆豉水煎液体外抗流感病毒作用
6
作者 沃恩康 +5 位作者 杨新燕 杨灿 路鑫怡 项婷婷 马淑敏 郭潮潭 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2022年第5期303-308,共6页
目的了解淡豆豉水煎液体外抗流感病毒作用,为抑制病毒的新型中药开发提供基础。方法以A/Puerto Rico/8/1934(H1N1)(以下简称PR8病毒)感染狗肾上皮细胞(MDCK)作为模型,应用噻唑兰(MTT)法评估淡豆豉水煎液的安全性。以血液凝集抑制实验和... 目的了解淡豆豉水煎液体外抗流感病毒作用,为抑制病毒的新型中药开发提供基础。方法以A/Puerto Rico/8/1934(H1N1)(以下简称PR8病毒)感染狗肾上皮细胞(MDCK)作为模型,应用噻唑兰(MTT)法评估淡豆豉水煎液的安全性。以血液凝集抑制实验和神经氨酸酶活性抑制实验检测淡豆豉水煎液对流感病毒吸附和释放的影响。设立PR8病毒+淡豆豉水煎液组和PR8病毒组,以实时荧光定量PCR、Western印迹试验、免疫荧光的方法检测淡豆豉水煎液对病毒基因转录水平和蛋白表达水平的影响。结果6.25 mg/mL的淡豆豉水煎液能够抑制1 HAU流感病毒的吸附。PR8+淡豆豉水煎液组的子代病毒血凝效价为PR8组的1/8。2000μg/mL的淡豆豉水煎液能够抑制大于80%的神经氨酸酶活性。在第24小时,PR8+淡豆豉水煎液组的NP和M1基因转录水平分别为3444.52±378.35和98737.80±1643.00;NP、M1a和M2e蛋白表达水平分别为0.39±0.03、0.54±0.01和0.82±0.02,均低于PR8组(t=-16.03、-16.17、-39.26、-272.80和-220.00,P均<0.05)。结论淡豆豉水煎液通过影响流感病毒生命周期的吸附、基因转录和翻译、流感子代病毒释放多个阶段,在体外发挥直接抗流感病毒作用。 展开更多
关键词 正黏病毒科 淡豆豉水煎液 中药抗病毒作用 病毒生命周期 基因转录 蛋白表达
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部