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单链脱氧核糖核酸在石墨电极表面固定化的研究 被引量:19
1
作者 刘盛辉 孙长林 +1 位作者 方禹之 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第2期130-134,共5页
用5%(V/V)3-氨基丙基三乙氧基硅烷(PrNH_2硅烷Ⅱ)在石墨电极表面硅烷化以导入氨基(—NH_2),然后用乙基-(3-二甲基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)作为偶联活化剂,将单链DNA(ssDNA)共价固定在石墨电极表面.采用显微分光光度法、红外光谱法和电... 用5%(V/V)3-氨基丙基三乙氧基硅烷(PrNH_2硅烷Ⅱ)在石墨电极表面硅烷化以导入氨基(—NH_2),然后用乙基-(3-二甲基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)作为偶联活化剂,将单链DNA(ssDNA)共价固定在石墨电极表面.采用显微分光光度法、红外光谱法和电化学方法对电极表面的ssDNA层进行了表征,并用紫外-可见光谱法对电极表面固定化ssDNA的杂交特性进行了研究.结果表明,ssDNA可以比较均匀地固定在石墨电极表面,而且ssDNA是通过5’端磷酸基以磷酸氨基酯键的形式共价结合在电极表面,固定在电极表面的ssDNA的杂交特性未发生变化,能够有效地与溶液中的互补链cDNA进行杂交反应. 展开更多
关键词 单链 石墨电极 固定化 DNA 传感器
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溴化乙锭标记DNA电化学探针的研究 被引量:19
2
作者 徐春 方禹之 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第8期1187-1190,共4页
以乙基 -( 3 -二甲基丙基 )碳化二亚胺盐酸盐 ( EDC)为偶联活化剂 ,将电化学活性物质溴化乙锭( Ethidium bromide,EB)成功地标记在人工合成的含有 2 1个碱基的寡聚 DNA片段上 ,制备成 EB标记 DNA探针 ;用电化学方法将待测样品 DNA片段... 以乙基 -( 3 -二甲基丙基 )碳化二亚胺盐酸盐 ( EDC)为偶联活化剂 ,将电化学活性物质溴化乙锭( Ethidium bromide,EB)成功地标记在人工合成的含有 2 1个碱基的寡聚 DNA片段上 ,制备成 EB标记 DNA探针 ;用电化学方法将待测样品 DNA片段固定在石墨电极表面 ,在一定的温度、p H值和离子强度条件下与EB标记 DNA探针进行杂交反应 ,从而对靶序列 DNA片段进行识别和测定 .此外 ,还讨论了该探针的电化学性质、荧光光谱、待测 DNA片段在石墨电极表面的电化学固定、 DNA链碱基长度对 EB标记 DNA电化学探针的影响以及探针的选择性、重现性和寿命 。 展开更多
关键词 溴化乙锭 电化学标记 DNA探针 DNA片段识别
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用盐酸阿霉素作为嵌入剂石墨电极伏安法识别测定DNA片段的研究 被引量:17
3
作者 方禹之 刘盛辉 《高等学校化学学报》 CSCD 北大核心 1996年第8期1222-1224,共3页
用盐酸阿霉素作为嵌入剂石墨电极伏安法识别测定DNA片段的研究方禹之,刘盛辉,何品刚(华东师范大学化学系,上海,200062)关键词DNA,嵌入剂,盐酸阿霉素,伏安法核酸分子杂交技术是近年来发展起来的检测DNA分子的一... 用盐酸阿霉素作为嵌入剂石墨电极伏安法识别测定DNA片段的研究方禹之,刘盛辉,何品刚(华东师范大学化学系,上海,200062)关键词DNA,嵌入剂,盐酸阿霉素,伏安法核酸分子杂交技术是近年来发展起来的检测DNA分子的一种重要手段,目前主要采用的放射性同... 展开更多
关键词 DNA 嵌入剂 盐酸阿霉素 伏安法
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在石墨电极上脱氧核糖核酸与米托蒽醌嵌入作用的电化学研究 被引量:16
4
作者 刘盛辉 方禹之 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第11期1301-1304,共4页
本文研究了单键DNA分子(ssDNA)在石墨电极上的固定方法,采用核酸分子杂交技术,使具有电化学活性的米托蒽醌(MX)嵌入DNA分子双螺旋结构的碱基对中,在电极上形成dsDNA-MX层,通过伏安法研究DNA分子和MX相互作用的电化学行为,并... 本文研究了单键DNA分子(ssDNA)在石墨电极上的固定方法,采用核酸分子杂交技术,使具有电化学活性的米托蒽醌(MX)嵌入DNA分子双螺旋结构的碱基对中,在电极上形成dsDNA-MX层,通过伏安法研究DNA分子和MX相互作用的电化学行为,并且根据嵌入剂MX的氧化峰电流计算出DNA分子与MX的表观缔合常数K=8.4×104(mol/L)-1,结合位点的大小n=5。 展开更多
关键词 核酸分子杂交 嵌入作用 伏安法 DNA MX 电化学
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二茂铁标记DNA电化学探针的研制及性质研究 被引量:16
5
作者 徐春 蔡宏 +1 位作者 方禹之 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第9期1493-1495,共3页
以乙基 -( 3-二甲基丙基 )碳化二亚胺盐酸盐 ( EDC)为偶联活化剂 ,利用缩合反应分别将电化学活性物质氨基二茂铁 ( Aminoferrocene,AFC)和醛基二茂铁 ( Ferrocenecarboxaldehyde,FCA)成功地标记在变性小牛胸腺 DNA片段上 ,制备成二茂铁... 以乙基 -( 3-二甲基丙基 )碳化二亚胺盐酸盐 ( EDC)为偶联活化剂 ,利用缩合反应分别将电化学活性物质氨基二茂铁 ( Aminoferrocene,AFC)和醛基二茂铁 ( Ferrocenecarboxaldehyde,FCA)成功地标记在变性小牛胸腺 DNA片段上 ,制备成二茂铁标记 DNA探针 .分别采用电化学、紫外、红外光谱等方法研究了二茂铁标记 DNA探针的性质 ,计算了二茂铁的标记效率 ,变性小牛胸腺 DNA的反应效率以及二茂铁化合物与变性小牛胸腺 DNA的反应比率 .实验表明 ,氨基二茂铁和醛基二茂铁与 DNA上的磷酸基是以 1∶ 1比率进行的反应 ,该标记反应不影响 DNA链碱基的紫外吸收 ,二茂铁标记 DNA探针在石墨电极上有良好的电化学响应 .将制备好的二茂铁标记 DNA电化学探针置于冰箱中冷冻 (温度低于 -1 5℃ )保存 3个月后用于测定 ,峰电流仅下降 1 . 展开更多
关键词 二茂铁 标记反应 DNA电化学探针 DNA 分子识别 检测 制备 EDC 偶联活化剂 结构分析
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DNA电化学传感器在DNA损伤研究中的应用 被引量:18
6
作者 孙星炎 徐春 +2 位作者 刘盛辉 方禹之 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1998年第9期1393-1396,共4页
利用单链DNA分子共价固定在石墨电极表面,采用核酸分子杂交技术,以道诺霉素作为杂交指示剂形成DNA电化学传感器.研究了在不同致突变剂的作用下,特定碱基序列的DNA在电极表面能否杂交及杂交程度的差异,探讨了DNA突变情... 利用单链DNA分子共价固定在石墨电极表面,采用核酸分子杂交技术,以道诺霉素作为杂交指示剂形成DNA电化学传感器.研究了在不同致突变剂的作用下,特定碱基序列的DNA在电极表面能否杂交及杂交程度的差异,探讨了DNA突变情况及可能的突变机理. 展开更多
关键词 DNA 电化学传感器 道诺霉素 杂交 突变 损伤
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基于纳米金胶标记DNA探针的电化学DNA传感器研究 被引量:17
7
作者 蔡宏 王延琴 +1 位作者 方禹之 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第8期1390-1394,共5页
以纳米金胶为标记物 ,将其标记于人工合成的 5 -端巯基修饰的寡聚核苷酸片段上 ,制成了具有电化学活性的金胶标记 DNA电化学探针 ;在一定条件下 ,使其与固定在玻碳电极表面的靶序列进行杂交反应 ,利用 ss DNA与其互补链杂交的高度序... 以纳米金胶为标记物 ,将其标记于人工合成的 5 -端巯基修饰的寡聚核苷酸片段上 ,制成了具有电化学活性的金胶标记 DNA电化学探针 ;在一定条件下 ,使其与固定在玻碳电极表面的靶序列进行杂交反应 ,利用 ss DNA与其互补链杂交的高度序列选择性和极强的分子识别能力 ,以及纳米金胶的电化学活性 ,实现对特定序列 DNA片段的电化学检测以及对 DNA碱基突变的识别 . 展开更多
关键词 纳米金胶 标记 DNA探针 电化学DNA传感器 杂交反应 生物传感器
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脱氧核糖核酸与双苯甲亚胺相互作用的荧光特性研究 被引量:8
8
作者 孙星炎 +3 位作者 徐春 刘盛辉 陈奕利 方禹之 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第4期398-401,共4页
采用荧光光谱法对脱氧核糖核酸(DNA)与双苯甲亚胺(Hoechst 33258)相互作用的方式及其作用机理进行了研究,证实了Hoechst 33258与DNA的相互作用除嵌入作用外,还存在非特异性的静电作用;Hoechst 33258与DNA主要作用在A-T区域.同时,在磷酸... 采用荧光光谱法对脱氧核糖核酸(DNA)与双苯甲亚胺(Hoechst 33258)相互作用的方式及其作用机理进行了研究,证实了Hoechst 33258与DNA的相互作用除嵌入作用外,还存在非特异性的静电作用;Hoechst 33258与DNA主要作用在A-T区域.同时,在磷酸根的存在下可以减弱Hoechst 33258与DNA的非特异性作用.另外,根据荧光峰增强与Hoechst 33258浓度的线性关系,提出了Hoechst 33258的定量测定方法. 展开更多
关键词 荧光光谱法 脱氧核糖核酸 双苯甲亚胺 相互作用
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硫辛酸修饰碳纤维微电极在抗坏血酸共存下选择性测定神经递质多巴胺 被引量:17
9
作者 于雁灵 方禹之 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1996年第4期407-410,共4页
本文研究了硫辛酸修饰电化学活化碳纤维电极。此电极在测定脑神经递质多巴胺(DA)时,具有较高的灵敏度和较好的选择性,它能够有效地消除抗坏血酸(AA)的干扰。该电极测定多巴肢的线性范围为1×10-8~1×10-5mol/L;检出下... 本文研究了硫辛酸修饰电化学活化碳纤维电极。此电极在测定脑神经递质多巴胺(DA)时,具有较高的灵敏度和较好的选择性,它能够有效地消除抗坏血酸(AA)的干扰。该电极测定多巴肢的线性范围为1×10-8~1×10-5mol/L;检出下限为5×10-9mol/L。 展开更多
关键词 硫辛酸 神经递质 多巴胺 碳纤维微电极
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Nafion修饰电化学活化碳纤维微电极测定去甲肾上腺素 被引量:13
10
作者 方禹之 于雁灵 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1995年第12期1440-1443,共4页
本文用自制的碳纤维微电极,经过适当的电化学预处理以后,测定神经递质去甲肾上腺素时,表现出较高的灵敏度.用Nafion修饰后,能有效地消除脑中去甲肾上腺素的主要干扰物抗坏血酸的干扰,线性范围5×10^(-8)~2×10^(-4)mol/L,检出... 本文用自制的碳纤维微电极,经过适当的电化学预处理以后,测定神经递质去甲肾上腺素时,表现出较高的灵敏度.用Nafion修饰后,能有效地消除脑中去甲肾上腺素的主要干扰物抗坏血酸的干扰,线性范围5×10^(-8)~2×10^(-4)mol/L,检出下限为2×10^(-8)mol/L.用这种微电极对注射液中的去甲肾上腺素进行测定,回收率在97.2%~1O2.8%之间.可用于活体分析. 展开更多
关键词 碳纤维微电极 NAFION 修饰电极 去甲肾上腺素
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以人为本实施分析化学实验教学改革 被引量:21
11
作者 程圭芳 王清江 +1 位作者 宗俊 《大学化学》 CAS 2007年第6期20-23,共4页
探讨如何在分析化学实验教学中体现以人为本、以学生为主的教育理念。介绍从教学理念、教学内容、教学方法及成绩评定等方面进行的教学改革。
关键词 分析化学实验教学 实验教学改革 以人为本 教育理念 教学理念 教学内容 成绩评定 教学方法
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电致化学发光法测定药剂中盐酸表阿霉素的含量 被引量:8
12
作者 刘祥萍 +1 位作者 余慧 方禹之 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2000年第9期1062-1065,共4页
在一定的条件下,盐酸阿霉素(PMB)有电致化学发光现象,其发光强度受脉冲幅度、底液性质和金属离子的影响,并且在相同的脉冲幅度和一定的浓度范围内,PMB的发光强度与浓度在 1.36 × 10-7~ 8.8 × 10-... 在一定的条件下,盐酸阿霉素(PMB)有电致化学发光现象,其发光强度受脉冲幅度、底液性质和金属离子的影响,并且在相同的脉冲幅度和一定的浓度范围内,PMB的发光强度与浓度在 1.36 × 10-7~ 8.8 × 10-6 mol/L范围内呈现良好的线性关系,可以用于测定药剂中PMB的含量。方法的检测限为3.0×10-8mol/L(S/N=3),RSD为3.6%(n=7)。 展开更多
关键词 盐酸表阿霉素 电致化学发光 测定 蒽环类抗生素
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基于碳纳米管的超级电容器研究进展 被引量:20
13
作者 章仁毅 张小燕 +2 位作者 樊华军 方禹之 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期489-499,共11页
综述了基于碳纳米管及其复合材料作超级电容器的电极材料的研究现状,通过对碳纳米管的改性或与其它材料复合,能有效地提高电容器的电容特性。总结了近几年来在开发超级电容器电极材料领域中对碳纳米管的活化和提高碳纳米管的分散性技术... 综述了基于碳纳米管及其复合材料作超级电容器的电极材料的研究现状,通过对碳纳米管的改性或与其它材料复合,能有效地提高电容器的电容特性。总结了近几年来在开发超级电容器电极材料领域中对碳纳米管的活化和提高碳纳米管的分散性技术、碳纳米管与过渡金属氧化物复合材料、碳纳米管与导电聚合物复合材料以及碳纳米管与石墨烯复合材料研究的进展。 展开更多
关键词 碳纳米管 超级电容器 复合材料
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脱氧核糖核酸在电极表面的固定化研究进展 被引量:9
14
作者 蔡宏 徐颖 +1 位作者 方禹之 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第6期815-820,共6页
介绍了电化学脱氧核糖核酸 (DNA)传感器的原理并重点评述了DNA在不同材料电极表面的固定化技术 ,对比了吸附法、自组装法、亲和素 生物素法、共价键合法以及组合法固定DNA在构建电化学DNA传感器中的应用。参考文献
关键词 脱氧核糖核酸 电极 固定化 电化学传感器 设计
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阿霉素的光谱电化学研究 被引量:6
15
作者 冯敏 +1 位作者 杨玉林 方禹之 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 1999年第6期866-871,共6页
利用循环伏安、紫外可见光谱电化学、荧光光谱电化学、圆二色光谱电化学等方法研究了阿霉素(ADM)在石墨电极上的电化学行为.结果发现,阿霉素在+0.2~+0.7V和-0.2~-0.7V范围内分别出现一对氧化还原峰.正电位... 利用循环伏安、紫外可见光谱电化学、荧光光谱电化学、圆二色光谱电化学等方法研究了阿霉素(ADM)在石墨电极上的电化学行为.结果发现,阿霉素在+0.2~+0.7V和-0.2~-0.7V范围内分别出现一对氧化还原峰.正电位下,蒽环上的酚羟基发生单电子氧化,并伴随后续化学反应.负电位范围内,阿霉素经历ECE电极反应过程,即蒽醌经单电子还原生成半醌自由基,半醌可发生不可逆的化学反应,脱去配氧糖基,转变为7-去氧柔毛霉醌(7-deoxyadriamycinone)。 展开更多
关键词 阿霉素 光谱电化学 循环伏安 半醌自由基 电极反应机理 抗肿瘤药物
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基于核酸适配体和纳米材料的凝血酶蛋白特异性识别电化学生物传感器 被引量:11
16
作者 郑静 林莉 +4 位作者 程圭芳 王安宝 谭雪莲 方禹之 《中国科学(B辑)》 CSCD 北大核心 2006年第6期485-492,共8页
介绍了一种结合核酸适配体技术和纳米技术,以凝血酶蛋白为研究对象的高效、高灵敏、特异性识别蛋白质的电化学生物传感器.利用金纳米颗粒标记的核酸适配体以及被固定在磁性纳米颗粒上的核酸适配体与凝血酶蛋白同时结合形成磁性颗粒/凝血... 介绍了一种结合核酸适配体技术和纳米技术,以凝血酶蛋白为研究对象的高效、高灵敏、特异性识别蛋白质的电化学生物传感器.利用金纳米颗粒标记的核酸适配体以及被固定在磁性纳米颗粒上的核酸适配体与凝血酶蛋白同时结合形成磁性颗粒/凝血酶/纳米金胶的三明治结构,利用磁性分离,将金胶纳米颗粒特异性地吸着到电极表面,通过检测电极上金胶的电化学信号,实现对凝血酶靶蛋白的检测.这种生物传感器对凝血酶蛋白具有很高的特异性识别能力,其检测不受其他蛋白质如牛血清白蛋白等存在的干扰,可应用于实际血浆中凝血酶的检测.由于利用磁性纳米颗粒使得分离、富集和测定在同一个自制的电化学反应池中进行,其操作不仅简单,而且检测的灵敏度得到提高.该蛋白质生物传感器的线性范围为5.6×10^(-12)~1.12×10^(-9)mol/L,检测限可以达到1.42×10^(-12)mol/L. 展开更多
关键词 核酸适配体 纳米材料 凝血酶 电化学 传感器
原文传递
基于电化学聚合固定抗体的电化学发光免疫分析法检测人免疫球蛋白 被引量:17
17
作者 云雯 王晓英 +4 位作者 董平 朱金坤 徐颖 方禹之 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第1期8-12,共5页
基于电化学聚合在金电极表面固定兔抗人免疫球蛋白G抗体与人免疫球蛋白G及标记有Ru(bpy)32+的羊抗人免疫球蛋白G抗体之间发生特异性免疫反应,形成三明治结构,成功建立了用于测定人血清中免疫球蛋白G的电化学发光(ECL)免疫技术。利用此... 基于电化学聚合在金电极表面固定兔抗人免疫球蛋白G抗体与人免疫球蛋白G及标记有Ru(bpy)32+的羊抗人免疫球蛋白G抗体之间发生特异性免疫反应,形成三明治结构,成功建立了用于测定人血清中免疫球蛋白G的电化学发光(ECL)免疫技术。利用此方法测定人免疫球蛋白G含量,浓度在50μg/L~2mg/L范围内与电化学发光强度呈良好的线性关系,线性回归方程为y(a.u.)=48.41+0.09x(μg/L)(n=7);检出限为20μg/L(3σ)。测得正常人血清中免疫球蛋白G平均含量为11.2g/L,结果令人满意。 展开更多
关键词 人免疫球蛋白G 电化学发光 免疫检测 电化学聚合
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石墨烯-壳聚糖/金纳米粒子修饰电极同时测定亚硫酸根和亚硝酸根 被引量:18
18
作者 汪雪 李辉 +5 位作者 吴敏 葛淑丽 朱妍 王清江 方禹之 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1232-1237,共6页
采用滴涂法得到了石墨烯(GR)-壳聚糖(CS)修饰的玻碳电极(GCE),再采用电沉积的方法将HAuCl4直接还原成金纳米粒子,沉积在GR-CS表面,制得了GR-CS/AuNPs GCE修饰电极。采用透射电子显微镜(TEM)分别对制备的GR和构建的修饰电极GR-CS/AuNPs ... 采用滴涂法得到了石墨烯(GR)-壳聚糖(CS)修饰的玻碳电极(GCE),再采用电沉积的方法将HAuCl4直接还原成金纳米粒子,沉积在GR-CS表面,制得了GR-CS/AuNPs GCE修饰电极。采用透射电子显微镜(TEM)分别对制备的GR和构建的修饰电极GR-CS/AuNPs GCE进行了形貌表征。用循环伏安法研究了SO32-和NO2-在GR-CS/AuNPs GCE上的电化学行为。结果表明,此修饰电极对SO32-和NO2-均有较好的电催化活性作用,并且能实现对两种物质的同时测定,SO32-和NO2-在该修饰电极上的线性范围分别为5~410μmol/L和1~380μmol/L,检出限(S/N=3)分别为1.0和0.25μmol/L。GR-CS/AuNPs GCE具有很好的稳定性、重现性和灵敏度。此电极用于实际水样的SO32-和NO2-的含量测定,回收率为97.2%~102.6%,结果令人满意。 展开更多
关键词 石墨烯 壳聚糖 金纳米粒子 亚硝酸根 亚硫酸根
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基于核酸适配体的新型荧光纳米生物传感器用于凝血酶的测定 被引量:16
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作者 徒永华 程圭芳 +4 位作者 林莉 郑静 吴自荣 方禹之 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期2266-2270,共5页
利用凝血酶的两条核酸适配体与凝血酶的高亲和力构建了三明治结构,利用磁性纳米颗粒的磁性分离技术,设计并制作了一种新型的荧光纳米生物传感器,用其检测凝血酶.此法对凝血酶的响应线性范围为2.24×10^-11~4.03×10^-9mo... 利用凝血酶的两条核酸适配体与凝血酶的高亲和力构建了三明治结构,利用磁性纳米颗粒的磁性分离技术,设计并制作了一种新型的荧光纳米生物传感器,用其检测凝血酶.此法对凝血酶的响应线性范围为2.24×10^-11~4.03×10^-9mol/L,其线性方程为I=0.9758×10^11c-2.628,检出限为1.0×10^-11mol/L,对浓度为2.68×10^-10mol/L的凝血酶检测10次,其RSD为2.56%,测得的荧光信号稳定,24h后测定并无衰减,具有很高的检测特异性和灵敏度. 展开更多
关键词 核酸适配体 凝血酶 磁性纳米颗粒 荧光
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聚苯胺纳米线修饰的DNA电化学传感器的研究 被引量:8
20
作者 常竹 祝宁宁 +3 位作者 赵琨 樊浩 方禹之 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第2期135-139,共5页
采用电流密度递减的方法在玻碳电极表面修饰聚苯胺纳米线(PAINW),以SEM对其形貌进行表征,测得PAINW的尖端直径在80~100nm之间.以乙基-(3-二甲基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)为偶联活化剂,将5'-磷酸基修饰的寡聚核苷酸片断共价固定... 采用电流密度递减的方法在玻碳电极表面修饰聚苯胺纳米线(PAINW),以SEM对其形貌进行表征,测得PAINW的尖端直径在80~100nm之间.以乙基-(3-二甲基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)为偶联活化剂,将5'-磷酸基修饰的寡聚核苷酸片断共价固定在聚苯胺修饰的电极上,一定条件下,以亚甲基蓝为电化学杂交指示剂,采用差分脉冲伏安法对杂交信号进行检测,实现了对特定序列DNA片段的互补、非互补序列的识别. 展开更多
关键词 聚苯胺纳米线 DNA杂交 电化学检测
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