采用网络药理学、分子对接及动物实验探究五灵胶囊抗肝纤维化的潜在作用机制。首先通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、中医药综合数据库(...采用网络药理学、分子对接及动物实验探究五灵胶囊抗肝纤维化的潜在作用机制。首先通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、中医药综合数据库(Traditional Chinese Medicines Integrated Database,TCMID)和GeneCards等数据库,以及文献检索获取五灵胶囊抗肝纤维化的化学成分与作用靶点,采用STRING数据库和Cytoscape 3.9.1软件对交集靶点进行蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络分析,筛选出核心靶点,并对核心靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,进一步构建“药物-核心成分-靶点-通路-疾病”网络,随后利用AutoDock Vina软件对核心成分与核心靶点进行分子对接,预测其抗肝纤维化的潜在作用机制。最后构建四氯化碳(CCl_(4))诱导的肝纤维化大鼠模型,观察大鼠一般体征和肝组织形态,采用苏木精-伊红(HE)及Masson染色对肝组织切片进行分析,并通过ELISA、实时荧光PCR等研究五灵胶囊对炎症因子、羟脯氨酸(HYP)水平及核心靶点的作用。筛选得到五灵胶囊化学成分445个,其对应潜在靶点3882个,与1240个肝纤维化疾病靶点相交,筛选得到TNF、IL6、INS、PIK3CA等47个核心靶点。GO功能和KEGG通路富集分析得知,核心靶点主要影响细胞刺激反应过程、代谢调节过程,涉及癌症、PI3K-Akt、MAPK等信号通路。分子对接结果显示,五灵胶囊的核心成分赤芝酸K、灵芝酸B、赤芝酸N、柴胡皂苷Q2、新隐丹参酮等与核心靶点TNF、IL6、PIK3CA均有较高的亲和力。动物实验结果显示,五灵胶囊可以减少大鼠肝脏中脂肪空泡、炎症浸润以及胶原沉积,降低炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及HYP水平,下调PI3K、Akt mRNA的表达量。结果表明,五灵胶囊可能通过调控PI3K-Akt�展开更多
文摘采用网络药理学、分子对接及动物实验探究五灵胶囊抗肝纤维化的潜在作用机制。首先通过中药系统药理学数据库与分析平台(Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform,TCMSP)、中医药综合数据库(Traditional Chinese Medicines Integrated Database,TCMID)和GeneCards等数据库,以及文献检索获取五灵胶囊抗肝纤维化的化学成分与作用靶点,采用STRING数据库和Cytoscape 3.9.1软件对交集靶点进行蛋白-蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)网络分析,筛选出核心靶点,并对核心靶点进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,进一步构建“药物-核心成分-靶点-通路-疾病”网络,随后利用AutoDock Vina软件对核心成分与核心靶点进行分子对接,预测其抗肝纤维化的潜在作用机制。最后构建四氯化碳(CCl_(4))诱导的肝纤维化大鼠模型,观察大鼠一般体征和肝组织形态,采用苏木精-伊红(HE)及Masson染色对肝组织切片进行分析,并通过ELISA、实时荧光PCR等研究五灵胶囊对炎症因子、羟脯氨酸(HYP)水平及核心靶点的作用。筛选得到五灵胶囊化学成分445个,其对应潜在靶点3882个,与1240个肝纤维化疾病靶点相交,筛选得到TNF、IL6、INS、PIK3CA等47个核心靶点。GO功能和KEGG通路富集分析得知,核心靶点主要影响细胞刺激反应过程、代谢调节过程,涉及癌症、PI3K-Akt、MAPK等信号通路。分子对接结果显示,五灵胶囊的核心成分赤芝酸K、灵芝酸B、赤芝酸N、柴胡皂苷Q2、新隐丹参酮等与核心靶点TNF、IL6、PIK3CA均有较高的亲和力。动物实验结果显示,五灵胶囊可以减少大鼠肝脏中脂肪空泡、炎症浸润以及胶原沉积,降低炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)及HYP水平,下调PI3K、Akt mRNA的表达量。结果表明,五灵胶囊可能通过调控PI3K-Akt�
