辛酸沉淀结合阴离子交换层析纯化马IgG的研究 被引量：3

1

作者 杨俊杰 段丽娟 +5 位作者 金学敏 孙烈英 任正祥 孟祥玉 张金 高建军 《微生物学免疫学进展》 2015年第1期17-20,共4页

目的以辛酸沉淀结合离子交换层析纯化破伤风抗毒素马免疫血浆,获得高质量的马IgG,为抗毒素F(ab')2的制备奠定基础。方法通过对辛酸沉淀马血浆过程中的pH、辛酸浓度以及血浆稀释倍数的实验设计(DoE),研究不同条件对IgG纯度、效价、... 目的以辛酸沉淀结合离子交换层析纯化破伤风抗毒素马免疫血浆,获得高质量的马IgG,为抗毒素F(ab')2的制备奠定基础。方法通过对辛酸沉淀马血浆过程中的pH、辛酸浓度以及血浆稀释倍数的实验设计(DoE),研究不同条件对IgG纯度、效价、比活性、浊度以及过滤速度的影响,确定各工艺参数的可操作区间,并结合Capto DEAE阴离子交换层析以流穿模式进一步纯化IgG。结果马血浆经一步辛酸沉淀获得的IgG纯度(SDSPAGE)大于92%、分子排阻色谱(SEC)纯度大于95%,比活性较血浆提高2.14±0.29倍;辛酸沉淀后的IgG样品经阴离子交换层析,可有效去除聚合体以及小分子杂质,将纯度提高至95%(SDS-PAGE)和98%(SEC)。结论马血浆经辛酸沉淀和阴离子交换层析可获得高纯度、高比活的IgG。 展开更多

关键词 破伤风抗毒素 辛酸 离子交换层析 实验设计(DoE)

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呼吸道合胞病毒F蛋白抗体的研究进展 被引量：3

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作者 任正祥 王建锋 高雪军 《微生物学免疫学进展》 2019年第1期67-72,共6页

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染,是造成婴幼儿、学龄前儿童、免疫缺陷患者、老年人等高危群体住院治疗及死亡的重要病因。目前,多个预防RSV感染的候选疫苗正处于研发中,尚无安全、有效的疫苗面世。对RSV感染的处... 呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)感染,是造成婴幼儿、学龄前儿童、免疫缺陷患者、老年人等高危群体住院治疗及死亡的重要病因。目前,多个预防RSV感染的候选疫苗正处于研发中,尚无安全、有效的疫苗面世。对RSV感染的处理仍以治疗为主,使用帕利珠单抗(Palivizumab)是当前仅有的预防药物。在过去数年间出现的新型抗体药物,如多克隆抗体、单克隆抗体、纳米抗体等有些已进入了临床前或I、II、III期临床试验阶段。融合蛋白(fusion protein,F蛋白)在RSV感染过程中是不可或缺的,它介导病毒包膜与宿主细胞膜的融合。在感染过程中,F蛋白从亚稳态的融合前构象状态(prefusion fusion protein,pre F)转变为热力学稳定的融合后状态(postfusion fusionprotein,post F)。近年来,研究人员通过不断筛选,获得了多株针对pre F的抗体。与结合post F的抗体相比,这些抗体具有更强的RSV中和活性。一些更新的抗体药物候选品,在实验中显示出了效力强、药代动力学特征明显、半衰期长等特点,并能以其他途径给药,而且能降低其制备成本。现就抗RSV pre F的抗体研究进展作一概述。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 F蛋白 中和抗体 纳米抗体

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层析法纯化马破伤风免疫球蛋白F(ab')_(2)的质量研究

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作者 梁凌宇 包正琦 +5 位作者 段丽娟 杨凯 马江 任正祥 戴于栋 高建军 《微生物学免疫学进展》 CAS 2023年第1期31-35,共5页

目的 建立一种在现行硫酸铵盐析工艺基础上,采用疏水层析和离子交换层析制备马破伤风免疫球蛋白F(ab’)_(2)的层析纯化工艺,以进一步提高该类产品的纯度及比活性,改善其安全性。方法 通过3种不同工艺(传统硫酸铵工艺、传统硫酸铵工艺+... 目的 建立一种在现行硫酸铵盐析工艺基础上,采用疏水层析和离子交换层析制备马破伤风免疫球蛋白F(ab’)_(2)的层析纯化工艺,以进一步提高该类产品的纯度及比活性,改善其安全性。方法 通过3种不同工艺(传统硫酸铵工艺、传统硫酸铵工艺+一步阴离子交换层析、传统硫酸铵盐析+疏水层析+阴离子交换层析)纯化制备马破伤风免疫球蛋白F(ab’)_(2),然后检测各产物的比活性、纯度、聚合物含量等。结果 采用硫酸铵盐析工艺结合疏水层析和离子交换层析制备的马破伤风免疫球蛋白F(ab’)_(2),比活性均>100 000 IU/g,分子排阻高效液相色谱法检测F(ab’)_(2)含量>97.0%,完整IgG和聚合物含量之和降至0.5%以下,产品质量大幅提升。结论 建立的马破伤风免疫球蛋白F(ab’)_(2)的层析纯化工艺能有效地提高该类产品的纯度、比活性等关键质量,改善产品的安全性,且工艺可控性较好,易于生产放大,适用于马破伤风免疫球蛋白F(ab’)_(2)的规模化生产。 展开更多

关键词 马破伤风免疫球蛋白F(ab’)_(2) 破伤风抗毒素 疏水层析 离子交换层析 硫酸铵盐析 免疫马血清

原文传递

活性炭对抗毒素中防腐剂含量的影响

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作者 孙烈英 任正祥 +4 位作者 金学敏 段丽娟 杨俊杰 高建军 张金 《微生物学免疫学进展》 2015年第1期31-34,共4页

为了解使用活性炭去除抗毒素原液的不可溶性杂质试验中对防腐剂含量所产生的影响。方法比较不同用量活性炭吸附抗毒素原液中防腐剂的损失情况;按最低活性炭使用量,观察整个实验过程中防腐剂含量的变化。结果分别以20 g/L、30 g/L、50 g/... 为了解使用活性炭去除抗毒素原液的不可溶性杂质试验中对防腐剂含量所产生的影响。方法比较不同用量活性炭吸附抗毒素原液中防腐剂的损失情况;按最低活性炭使用量,观察整个实验过程中防腐剂含量的变化。结果分别以20 g/L、30 g/L、50 g/L活性炭经2 h吸附后,防腐剂量的损失均达到98%;在20 g/L活性炭使用量吸附4 h的试验中,防腐剂量的损失主要发生在最初的1 h。结论使用活性炭去除抗毒素原液中的不可溶性杂质试验中,由于活性炭较强的吸附作用,从而对防腐剂含量产生了很大的影响。 展开更多

关键词 抗毒素 防腐剂 活性炭 吸附

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一种前景广阔的单剂量、四价减毒登革热疫苗候选物

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作者 Monica A 任正祥 《微生物学免疫学进展》 2016年第5期95-96,共2页

登革病毒（ Dengue virus, DENV）的迅速传播在全球范围内造成了巨大的健康威胁,居住在超过100个国家,约占全球40%的人口面临着登革病毒传播的风险,其中包括美国。2010年,全球共报告登革病毒感染案例3.9亿,其中0.96亿出现了感染症状。... 登革病毒（ Dengue virus, DENV）的迅速传播在全球范围内造成了巨大的健康威胁,居住在超过100个国家,约占全球40%的人口面临着登革病毒传播的风险,其中包括美国。2010年,全球共报告登革病毒感染案例3.9亿,其中0.96亿出现了感染症状。感染登革病毒会造成一系列临床症状,包括与其他疾病无明显差别的轻微发热、典型登革热或者重症登革热。重症登革热的特征是出血和/或血浆渗漏（登革出血热和登革休克综合征）,以及器官衰竭。据估算,每年约有50万重症病例以及2万死亡病例。这些综合征是由4种抗原不同的血清型（ DENV-1-4）引起的,它们在西太平洋、南亚、东南亚、非洲、美洲等地区共循环传播。 展开更多

关键词 登革热 候选物 剂量 疫苗 减毒 四价 病毒传播 登革病毒

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新一代佐剂的研发--从参照经验到合理化设计

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作者 任正祥 《微生物学免疫学进展》 2016年第4期81-87,共7页

佐剂是现代疫苗开发的重要一环。尽管佐剂有着数十年的发展历程,但当前仅有少数几种类型的佐剂能够用于人用疫苗。为了更好地理解有些佐剂能够成功应用而另一些被舍弃的原因,我们会讨论几种成功应用的第一代佐剂的共同属性。接下来,将... 佐剂是现代疫苗开发的重要一环。尽管佐剂有着数十年的发展历程,但当前仅有少数几种类型的佐剂能够用于人用疫苗。为了更好地理解有些佐剂能够成功应用而另一些被舍弃的原因,我们会讨论几种成功应用的第一代佐剂的共同属性。接下来,将评估第二代佐剂的当前发展趋势,包括设计合理、配方适宜的合成免疫增强剂所具有的潜在优势。最后,讨论下一代佐剂值得具有的属性。 展开更多

关键词 免疫增强剂 共同属性 激动剂 水包油乳剂 抗原特异性 流感疫苗 疟疾疫苗 疫苗生产 免疫应答 微粒剂

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呼吸道合胞病毒感染的动物模型 被引量：1

7

作者 任正祥 《微生物学免疫学进展》 2018年第4期18-18,共1页

人呼吸道合胞病毒（hRSV）是引起世界范围内婴儿呼吸系统疾病以及住院治疗的主要原因,并导致了成年人中的高发病率和老年群体的额外死亡。当前尚无获批疫苗或者有效的治疗药物。人呼吸道合胞病毒疫苗候选物正在被源源不断地开发出来,它... 人呼吸道合胞病毒（hRSV）是引起世界范围内婴儿呼吸系统疾病以及住院治疗的主要原因,并导致了成年人中的高发病率和老年群体的额外死亡。当前尚无获批疫苗或者有效的治疗药物。人呼吸道合胞病毒疫苗候选物正在被源源不断地开发出来,它们面向不同人群,防范人呼吸道合胞病毒感染的风险。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 病毒感染 动物模型 呼吸系统疾病 病毒疫苗 住院治疗 世界范围 治疗药物

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三价肺炎链球菌蛋白疫苗保护乳鼠抵抗肺炎链球菌引起的试验性急性中耳炎 被引量：1

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作者 任正祥 Xu Q 《微生物学免疫学进展》 2018年第1期55-55,共1页

现有的获批肺炎疫苗,它们基于荚膜多糖的血清分型,能有效预防肺炎链球菌引起的侵入性疾病,但对于非细菌性肺炎和急性中耳炎（AOM）效果不佳。此前我们报道过,一种三价肺炎链球菌蛋白重组疫苗（PPrV）能够让小鼠模型抵御肺炎。在此,作者... 现有的获批肺炎疫苗,它们基于荚膜多糖的血清分型,能有效预防肺炎链球菌引起的侵入性疾病,但对于非细菌性肺炎和急性中耳炎（AOM）效果不佳。此前我们报道过,一种三价肺炎链球菌蛋白重组疫苗（PPrV）能够让小鼠模型抵御肺炎。在此,作者使用乳鼠模型, 展开更多

关键词 肺炎链球菌 中耳积液 重组疫苗 急性中耳炎

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霍乱流行国家中不同年龄组人群接受口服霍乱疫苗后抗体分泌细胞与粪便IgA应答的动力学 被引量：1

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作者 任正祥 Akhtar M 《微生物学免疫学进展》 2018年第1期79-79,共1页

儿童和婴幼儿接种口服肠道疾病疫苗后,免疫应答情况会受到多种因素的影响,如年龄、接种疫苗前曾接触（感染）过相关微生物、母乳喂养等。本项研究旨在通过不同临床样本,确定最佳时间点,评估口服肠道疫苗的免疫应答状况。应答状况的确定,

关键词 口服霍乱疫苗 ASC 淋巴细胞 抗体分泌细胞 霍乱流行

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与疫苗研发相关的呼吸道合胞病毒糖蛋白的结构、抗原及免疫原性特征

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作者 任正祥 《微生物学免疫学进展》 2018年第2期26-26,共1页

过去数年中，人呼吸道合胞病毒的结构与免疫生物学研究领域进步巨大。融合（F）糖蛋白在融合前与融合后状态中的结构测定是个鼓舞人心的重大发现，这不仅为理解与膜融合相关的结构变化提供了便利，也有助于鉴别F糖蛋白错综复杂的抗原特... 过去数年中，人呼吸道合胞病毒的结构与免疫生物学研究领域进步巨大。融合（F）糖蛋白在融合前与融合后状态中的结构测定是个鼓舞人心的重大发现，这不仅为理解与膜融合相关的结构变化提供了便利，也有助于鉴别F糖蛋白错综复杂的抗原特性。此外，这些发现拓宽了基于结构的hRSV疫苗候选物的设计路径。 展开更多

关键词 呼吸道合胞病毒 病毒糖蛋白 结构测定 抗原特性 免疫原性 疫苗 研发 特征

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10价肺炎结合疫苗对其和流感嗜血杆菌在儿童鼻咽部带菌的影响

11

作者 任正祥 Brandileone M C 《微生物学免疫学进展》 2017年第6期60-60,共1页

2010年3月,巴西引入了10价肺炎多糖结合疫苗（PCV10）,用于婴幼儿的计划免疫（4剂程序）和23月龄以下儿童的疫苗补种。作者在圣保罗市调查了PCV10对于疫苗型肺炎链球菌（Spn）和不可分型流感嗜血杆菌（NTHi）在儿童鼻咽部携带的影响。于... 2010年3月,巴西引入了10价肺炎多糖结合疫苗（PCV10）,用于婴幼儿的计划免疫（4剂程序）和23月龄以下儿童的疫苗补种。作者在圣保罗市调查了PCV10对于疫苗型肺炎链球菌（Spn）和不可分型流感嗜血杆菌（NTHi）在儿童鼻咽部携带的影响。于2010年（基线）和2013年（接种PCV10后）进行了有代表性的监测。在基层健康中心,作者召集了12~23月龄,此前未接种过PCV的健康幼童,完成了全程免疫。 展开更多

关键词 肺炎链球菌 嗜血杆菌 疫苗 儿童 流感 带菌 鼻 计划免疫

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一种前景广阔的单剂量、四价减毒登革热疫苗候选物

12

作者 任正祥 Monica A 《微生物学免疫学进展》 2017年第4期42-42,共1页

登革病毒的迅速传播在全球范围内造成了巨大的健康威胁,居住在超过100个国家,约占全球40%的人口面临着登革病毒传播的风险,其中包括美国。2010年,全球共报告登革病毒感染案例3.9亿,其中0.96亿出现了感染症状。感染登革病毒会造成一系列... 登革病毒的迅速传播在全球范围内造成了巨大的健康威胁,居住在超过100个国家,约占全球40%的人口面临着登革病毒传播的风险,其中包括美国。2010年,全球共报告登革病毒感染案例3.9亿,其中0.96亿出现了感染症状。感染登革病毒会造成一系列临床症状,包括与其他疾病无明显差别的轻微发热、典型登革热或者重症登革热。 展开更多

关键词 登革病毒 登革出血热 减毒 四价 登革休克综合征 临床症状 免疫原性 接种者 黄病毒属病毒 蚀斑形成单位

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在小鼠体内测定腺相关病毒样颗粒作为新型B细胞疫苗载体的免疫原性和安全性

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作者 任正祥 Manzano-Szalai K 《微生物学免疫学进展》 2016年第1期65-65,共1页

腺相关病毒（AAVs）已被用作多种人类疾病基因疗法的载体。AAV由60个病毒壳粒组装而成,壳粒可经基因操作,在其表面高密度地展示短肽序列。我们此项研究的目的是利用鸟卵中取得的卵清蛋白（OVA）作为模式抗原或过敏原,分别评估腺相关病... 腺相关病毒（AAVs）已被用作多种人类疾病基因疗法的载体。AAV由60个病毒壳粒组装而成,壳粒可经基因操作,在其表面高密度地展示短肽序列。我们此项研究的目的是利用鸟卵中取得的卵清蛋白（OVA）作为模式抗原或过敏原,分别评估腺相关病毒样颗粒（AAVLP）展示的B细胞表位的免疫原性和安全性。 展开更多

关键词 腺相关病毒 B细胞 免疫原性 壳粒 基因操作 肽序列 卵清蛋白 基因疗法 人类疾病 衣壳蛋白

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