为研究枸杞多糖对山羊精原干细胞体外增殖的影响,使用机械分离法、两步酶解法及差速贴壁获取纯度较高的山羊精原干细胞,使用碱性磷酸酶(AKP)染色法及免疫荧光染色法对山羊SSCs进行鉴定;通过添加不同浓度的LBP培养山羊精原干细胞,利用CC...为研究枸杞多糖对山羊精原干细胞体外增殖的影响,使用机械分离法、两步酶解法及差速贴壁获取纯度较高的山羊精原干细胞,使用碱性磷酸酶(AKP)染色法及免疫荧光染色法对山羊SSCs进行鉴定;通过添加不同浓度的LBP培养山羊精原干细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖数量,筛选最佳体外培养浓度;分别测试细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(T-AOC)的含量,最后运用real time PCR技术检测各试验组中Bcl-2和Bax、Bad基因的相对表达量。结果表明,与对照组相比,培养液中添加20μg/mL或40μg/mL的LBP均可以显著促进山羊精原细胞增殖(P<0.05)。与其他试验组相比,40μg/mL的LBP添加组的MDA含量、Bax、Bad基因相对表达量均显著降低,SOD及T-AOC的含量、Bcl-2基因相对表达量均显著升高。因此,在山羊精原细胞体外过程中添加40μg/mL的LBP最有利于促进细胞自我更新。展开更多
文摘为研究枸杞多糖对山羊精原干细胞体外增殖的影响,使用机械分离法、两步酶解法及差速贴壁获取纯度较高的山羊精原干细胞,使用碱性磷酸酶(AKP)染色法及免疫荧光染色法对山羊SSCs进行鉴定;通过添加不同浓度的LBP培养山羊精原干细胞,利用CCK-8法检测细胞增殖数量,筛选最佳体外培养浓度;分别测试细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及总抗氧化能力(T-AOC)的含量,最后运用real time PCR技术检测各试验组中Bcl-2和Bax、Bad基因的相对表达量。结果表明,与对照组相比,培养液中添加20μg/mL或40μg/mL的LBP均可以显著促进山羊精原细胞增殖(P<0.05)。与其他试验组相比,40μg/mL的LBP添加组的MDA含量、Bax、Bad基因相对表达量均显著降低,SOD及T-AOC的含量、Bcl-2基因相对表达量均显著升高。因此,在山羊精原细胞体外过程中添加40μg/mL的LBP最有利于促进细胞自我更新。
