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木犀草素对胃癌细胞MGC803增殖的抑制作用及其机制 被引量：12
1
作者 张相强 张鹏 +5 位作者 黄茂葵 李振华 代立婷 刘纪明 蒋建伟 王跃春 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期302-308,共7页
目的研究木犀草素对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用及其机制。方法通过MTT法、克隆形成抑制实验观察木犀草素对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用,碘化丙啶(PI)单染色法检测细胞周期,AnnexinⅤ-PI双染法测定细胞凋亡,蛋白质印迹法检测Bcl-2... 目的研究木犀草素对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用及其机制。方法通过MTT法、克隆形成抑制实验观察木犀草素对胃癌细胞MGC803的增殖抑制作用,碘化丙啶(PI)单染色法检测细胞周期,AnnexinⅤ-PI双染法测定细胞凋亡,蛋白质印迹法检测Bcl-2家族蛋白、Caspase蛋白、周期及自噬相关蛋白的表达情况。结果 MTT法检测发现,木犀草素作用于MGC803细胞24、48和72h后,IC50分别为127.37、76.12、16.84μmol/L;木犀草素能抑制胃癌细胞MGC803的克隆形成。PI单染色法发现随着木犀草素浓度的增大,发生G2期阻滞的细胞比例增加。蛋白质印迹法的检测结果表明,随着木犀草素浓度的增加,CDK4、CDK6、CyclinE2表达减少,CyclinD1、CyclinD3和p-Wee1表达基本不变,CyclinA、CyclinB、Myt1、p-cdc2(Tyr15)表达增高。AnnexinⅤ-PI双染法发现随木犀草素浓度增加,细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率均增加。蛋白质印迹法的检测结果表明,Mcl-1、Bcl-xL、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9蛋白表达随木犀草素浓度增加而减少,Bcl-2蛋白表达量变化不大,Bax蛋白表达量增加,因而引起Bcl-2/Bax、Mcl-1/Bax和Bcl-xL/Bax的比例下降;同时可见到Caspase-3和PARP出现了切割的条带;P62表达下降,Beclin-1、LC3Ⅱ表达增加。结论木犀草素使胃癌细胞MGC803发生G2期阻滞,诱导细胞自噬的发生并抑制细胞的生长,还通过线粒体途径诱导胃癌细胞MGC803凋亡。 展开更多
关键词 木犀草素 胃肿瘤 细胞周期 细胞凋亡 自噬
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重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响 被引量：11
2
作者 肖晓慧 宫瑞松 +3 位作者 张相强 李振华 代立婷 蒋建伟 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 2015年第10期1175-1180,共6页
目的探讨重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及其联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和洛铂的抗肿瘤效果。方法采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;分别观察PP-22联合5-FU... 目的探讨重楼活性单体PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及其联合5-氟尿嘧啶(5-FU)和洛铂的抗肿瘤效果。方法采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度PP-22对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;分别观察PP-22联合5-FU和洛铂对人结肠癌SW620细胞增殖的抑制作用;碘化丙锭单染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot法检测PP-22作用后细胞凋亡相关蛋白的表达。结果重楼单体PP-22能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-22浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组和DMSO组相比有显著差异;PP-22联合不同浓度的5-FU和洛铂作用于SW620细胞48 h,可提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性;不同浓度PP-22作用于SW620细胞后,细胞周期阻滞于S期;PP-22作用后存在Caspase-3和Caspase-9蛋白的活化和降解,抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-x L减少,促凋亡蛋白Bax的表达增加。结论 PP-22能显著抑制人结肠癌SW620细胞增殖,诱导细胞凋亡,提高SW620细胞对5-FU和洛铂的敏感性。 展开更多
关键词 重楼 人结肠癌SW620细胞 增殖 凋亡 敏感性
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EM-3通过Stat3通路诱导鼻咽癌细胞凋亡和G_2/M期阻滞并降低SP细胞比例 被引量：6
3
作者 李振华 李翠平 +5 位作者 张相强 代立婷 唐梦思 王国才 蒋建伟 曹明溶 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期1-10,共10页
目的:研究白花地胆草(Elephantopus mollis H.B.K)的乙醇提取物EM-3抗肿瘤作用分子机制。方法:MTT、克隆形成抑制和细胞划痕实验检测EM-3对鼻咽癌细胞增殖、迁移能力的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;PI单染检测细胞周期;超... 目的:研究白花地胆草(Elephantopus mollis H.B.K)的乙醇提取物EM-3抗肿瘤作用分子机制。方法:MTT、克隆形成抑制和细胞划痕实验检测EM-3对鼻咽癌细胞增殖、迁移能力的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;PI单染检测细胞周期;超速流式分选细胞仪检测鼻咽癌CNE2-S18肿瘤干细胞样SP细胞(side population cell)比例;Western blotting检测细胞凋亡、周期、侵袭迁移及肿瘤干细胞相关蛋白表达变化。结果:MTT、克隆形成抑制和细胞划痕实验结果表明,EM-3可以显著抑制鼻咽癌细胞的增殖,随着药物浓度的增大,细胞克隆数逐渐减少,体积逐渐变小,而且能够显著抑制鼻咽癌细胞的迁移;流式细胞术结果表明随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐增加,并且G_2/M期细胞比例逐渐增加;超速流式分选细胞仪结果表明,EM-3可以显著降低CNE2-S18肿瘤干细胞样SP细胞的比例;Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加,x IAP、Bcl-2、Cyclin D1、MMP2(药物高浓度)、MMP9、p-Met、Oct4(药物高浓度)及Sox2蛋白表达减少,而Cyclin B1、Bax蛋白表达增多,并伴随Caspase-9、Caspase-3活化及多聚ADP核糖聚合酶PARP酶切失活。结论:EM-3通过抑制Stat3通路诱导鼻咽癌细胞发生凋亡,并诱导G_2/M期阻滞。此外,EM-3经MMPs途径抑制鼻咽癌细胞迁移,同时可以有效降低CNE2-S18肿瘤干细胞样SP细胞干性。 展开更多
关键词 白花地胆草 鼻咽癌 凋亡 G_2/M期阻滞 STAT3
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卤地菊乙醇提取物W40单体诱导GLC-82细胞凋亡的分子机制研究
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作者 代立婷 吴忠南 +4 位作者 黄翔 杨杰 曾慧兰 王国才 蒋建伟 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1-7,共7页
目的:探讨卤地菊Wedelia prostrate(Hook.et Arn.)Hemsl.的乙醇提取物W40单体对非小细胞肺癌GLC-82细胞的抗肿瘤作用分子机制。方法:通过MTT和克隆形成抑制实验检测W40对非小细胞肺癌GLC-82细胞增殖的影响;通过细胞划痕实验检测W40对细... 目的:探讨卤地菊Wedelia prostrate(Hook.et Arn.)Hemsl.的乙醇提取物W40单体对非小细胞肺癌GLC-82细胞的抗肿瘤作用分子机制。方法:通过MTT和克隆形成抑制实验检测W40对非小细胞肺癌GLC-82细胞增殖的影响;通过细胞划痕实验检测W40对细胞迁移的影响;通过Annexin V-FITC/PI双染法检测W40对细胞凋亡的诱导;通过Western blotting分析细胞增殖和凋亡相关蛋白的水平。结果:MTT实验表明,W40对GLC-82细胞有较为明显的细胞毒作用;克隆形成抑制实验表明,W40可以显著抑制GLC-82细胞增殖,且抑制程度呈现浓度依赖效应;细胞划痕实验表明,W40能够在一定程度上抑制GLC-82细胞的迁移能力;Annexin V-FITC/PI双染的结果显示,随着药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加;Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加,p-Stat3蛋白的表达水平下降,Stat3下游蛋白Bcl-2、Mcl-1的表达减少。同时,促凋亡蛋白Bax的表达增多,并伴随Caspase-9、Caspase-3活化及多聚ADP-核糖聚合酶PARP酶切失活;p-BRAF蛋白的表达水平下降,p-BRAF下游蛋白p-MEK、p-ERK表达减少。结论:W40通过抑制BRAF/MAPK/ERK及Stat3信号通路来诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 卤地菊 肺癌 细胞凋亡 STAT3 BRAF/MAPK/ERK信号通路
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红菜苔废弃物中多酚的超声波水提工艺优化
5
作者 代立婷 李娅 +3 位作者 何玲玲 唐文娟 刘超立 李建华 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期275-278,共4页
在优化Folin-Ciocalteau法测定多酚比色条件及单因素实验的基础上,采用Design-Expert软件中的中心复合设计(Central Composite Design,CCD)模块,设计一组3因素实验来确定超声波功率、料液比和提取时间这3个因素对从红菜苔茎皮等废弃物... 在优化Folin-Ciocalteau法测定多酚比色条件及单因素实验的基础上,采用Design-Expert软件中的中心复合设计(Central Composite Design,CCD)模块,设计一组3因素实验来确定超声波功率、料液比和提取时间这3个因素对从红菜苔茎皮等废弃物中提取多酚的影响。构建了具有良好预测能力的数学模型并通过响应曲面分析得到了红菜苔多酚最佳提取参数:超声波功率249W,料液比52∶1(mL∶g),提取时间34min,在此条件下进行验证实验,测得红菜苔多酚提取量为5.84mg/g,达到理论预测值的97.34%。采用该工艺条件提取红菜苔多酚,稳定可靠,得率较高,无污染,可用于指导红菜苔废弃物中多酚的提取生产。 展开更多
关键词 红菜苔废弃物 多酚 超声波 水提取法
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