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题名核黄素工业菌株高通量筛选方法的建立和应用
被引量：2
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作者
付首颖
夏苗苗
张祎凝
刘川
涂然
张大伟
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机构
天津科技大学
中国科学院天津工业生物技术研究所
中国科学院大学
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出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第4期47-53,共7页
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基金
国家重点研发计划(2018YFA0900302)
天津市杰出青年科学基金(17JCJQJC45300)
中国科学院科技服务网络计划(KFJ-STSZDTP-065B)。
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文摘
枯草芽孢杆菌是主要的核黄素工业生产菌之一,高通量筛选技术是选育获得高产核黄素菌株的关键环节。为实现工业菌种选育与高通量筛选技术相结合,对流式细胞分选、液滴微流控分选和96孔板筛选在核黄素工业菌株筛选中的应用进行了研究,并对96孔板筛选方法进行了优化。在流式细胞分析中,来源于同一株工业菌的低产菌株P1与高产菌株R1的细胞荧光与核黄素产量不成正相关。在液滴微流控分析中,P1和R1的发酵液上清荧光与核黄素产量成正相关,然而液滴分选后活细胞的数量很少。在96孔板筛选实验中,振荡培养后P1和R1的发酵液荧光分别为22 264 a.u.、28 647 a.u.;静置培养后荧光分别为7 095 a.u.、10 189 a.u.,核黄素产量与荧光成正相关,且二者荧光差异显著。利用96孔板静置培养的方法对工业菌株S1的突变体库进行筛选,得到的优选菌株核黄素产量为2.53 g/L,相比S1提高了15%。这些结果表明96孔板静置培养-荧光检测筛选可以应用于核黄素工业生产菌产量的提高。
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关键词
核黄素
枯草芽孢杆菌
96孔板筛选
静置培养
荧光检测
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Keywords
riboflavin
Bacillus subtilis
96-well plate screening
static culture
fluorescence detection
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分类号
TQ924
[轻工技术与工程—发酵工程]
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