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梨叶片总蛋白提取及双向电泳体系的建立 被引量：12
1
作者 胡敏 徐凌飞 +3 位作者 张军科 仇宗浩 丁勤 张静 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2012年第1期197-203,209,共8页
【目的】探索建立有效的梨叶片蛋白质组双向电泳体系,为梨蛋白质组的后续研究提供参考。【方法】以早酥梨叶片为材料,比较蛋白质提取方法、蛋白质裂解时间、IPG胶条的pH梯度和长度、等电聚焦程序及SDS-PAGE电泳参数对梨叶片蛋白双向电... 【目的】探索建立有效的梨叶片蛋白质组双向电泳体系,为梨蛋白质组的后续研究提供参考。【方法】以早酥梨叶片为材料,比较蛋白质提取方法、蛋白质裂解时间、IPG胶条的pH梯度和长度、等电聚焦程序及SDS-PAGE电泳参数对梨叶片蛋白双向电泳结果的影响。【结果】采用第2种改良的三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法提取梨叶片总蛋白,蛋白质裂解1h,选用长17cm、pH 4～7的IPG胶条及聚焦程序Ⅱ进行等电聚焦,于100V30min、180V 6h条件下进行SDS-PAGE垂直电泳,可以获得背景清晰、重复性好的双向电泳图谱。【结论】建立并优化了适用于梨叶片蛋白质组分析的双向电泳体系。 展开更多
关键词 梨 叶片 蛋白质提取 双向电泳
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早酥梨及其红色芽变Ty1-copia反转录转座子逆转录酶的克隆与分析 被引量：6
2
作者 周鹏 仇宗浩 +2 位作者 翟锐 梁东 徐凌飞 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2014年第5期162-170,182,共10页
【目的】从早酥梨及其红色芽变基因组中克隆Ty1-copia反转录转座子逆转录酶序列,分析其特点和差异。【方法】根据Ty1-copia反转录转座子逆转录酶保守区域设计简并引物,建立并优化PCR扩增体系,回收、克隆、测序得到的目的基因序列。【结... 【目的】从早酥梨及其红色芽变基因组中克隆Ty1-copia反转录转座子逆转录酶序列,分析其特点和差异。【方法】根据Ty1-copia反转录转座子逆转录酶保守区域设计简并引物,建立并优化PCR扩增体系,回收、克隆、测序得到的目的基因序列。【结果】成功从早酥梨基因组和红色芽变材料中分别获得29,30条逆转录酶序列,序列大小均为260bp左右。生物信息学分析表明,与早酥梨相比,红色芽变的逆转录酶序列多发生终止子突变、缺失突变、替换突变。聚类分析可将所得序列分为7个家族,基于逆转录酶序列进行的不同物种进化树分析显示,第7家族序列与苹果和李具有很高的同源性,可能是反转录转座子横向传递的结果。【结论】早酥梨及其红色芽变Ty1-copia反转录转座子逆转录酶序列具有普遍性、异质性等特点,虽均已不具备转录活性,但红色芽变的逆转录酶序列突变程度更高。 展开更多
关键词 梨 红色芽变 逆转录酶 进化分析
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两个品种绿皮梨及其红色芽变品种光合生理特性的比较 被引量：2
3
作者 董晓勤 周鹏 +2 位作者 仇宗浩 翟锐 徐凌飞 《北方园艺》 CAS 北大核心 2013年第20期1-5,共5页
以"早酥"梨、"巴梨"与其红色芽变"红早酥"梨、"红巴梨"为试材,在田间条件下,比较研究了4个梨品种功能叶片的光合生理特性的差异和叶片色素含量的变化。结果表明:4个梨品种净光合速率(Pn)日变... 以"早酥"梨、"巴梨"与其红色芽变"红早酥"梨、"红巴梨"为试材,在田间条件下,比较研究了4个梨品种功能叶片的光合生理特性的差异和叶片色素含量的变化。结果表明:4个梨品种净光合速率(Pn)日变化曲线呈单峰型,且日变化平均值大小依次为:"早酥"梨>"红早酥"梨>"红巴梨">"巴梨";4个梨品种蒸腾速率(Tr)日变化曲线呈单峰型;"早酥"与"红早酥"梨气孔导度(Gs)日变化曲线呈双峰型,"巴梨"与"红巴梨"为单峰型;"早酥"与"红早酥"梨胞间CO2浓度(Ci)日变化曲线呈双谷型,"巴梨"与"红巴梨"为单谷型;瞬时水分利用效率(WUE)和光能利用效率(LUE)日变化曲线均呈单谷型。红色芽变的"红早酥"梨与"红巴梨"叶片中叶绿素、花色素苷含量均显著高于其对应的"早酥"梨与"巴梨"。 展开更多
关键词 梨 红色芽变 光合作用 光合色素 花青苷
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