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禽腺病毒血清4型Fiber2蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定 被引量：6
1
作者 郭瑞珍 苏冰倩 +6 位作者 王棋 王一 于朋伟 孟洁洁 齐艳丽 杨国宇 褚贝贝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期2000-2012,共13页
旨在制备禽腺病毒血清4型(FAdV-4)纤突蛋白(Fiber2)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的可溶性重组蛋白NusA-Fiber2作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得3株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白MAb的杂交瘤细胞株2G5、2G8、4C2,取细胞... 旨在制备禽腺病毒血清4型(FAdV-4)纤突蛋白(Fiber2)的特异性单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的可溶性重组蛋白NusA-Fiber2作为免疫原免疫BALB/c雌鼠,筛选获得3株能稳定分泌抗FAdV-4 Fiber2蛋白MAb的杂交瘤细胞株2G5、2G8、4C2,取细胞株2G5制备腹水并纯化,利用间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)和Western blot鉴定该单抗的特异性。用制备的单抗包被酶标板,通过一系列的优化,建立了FAdV-4 Fiber2双抗夹心ELISA检测方法。通过逐步截短分析鉴定出单克隆抗体识别的抗原表位区域。结果表明:成功获取3株单克隆细胞株2G5、2G8、4C2。MAb 2G5可与原核表达纯化的Fiber2蛋白及FAdV-4特异性反应。建立的双抗夹心ELISA检测方法具有很好的特异性、灵敏性和重复性。该MAb识别的表位序列是N端aa1—33。本研究成功制备了具有良好Western blot和IFA反应原性的单克隆抗体,为Fiber2蛋白功能研究和FAdV-4新型表位疫苗商品化研发奠定了基础。 展开更多
关键词 禽腺病毒血清4型 Fiber2蛋白 单克隆抗体 双抗夹心ELISA 表位鉴定
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干扰素基因刺激因子基因敲除对猪伪狂犬病病毒复制的影响 被引量：4
2
作者 侯璐 王一 +9 位作者 张爽 李国利 曾磊 郭玉堃 翟云云 于朋伟 王棋 王春凤 杜永坤 万博 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期2273-2282,共10页
研究干扰素基因刺激因子(STING)基因敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响。用CRISPR/Cas9技术敲除猪肺巨噬细胞系(3D4/21)的STING基因,用T7核酸酶检测靶基因敲除效率,用细胞计数试剂盒检测基因敲除细胞的活力,用表达绿色荧光蛋白(GFP)... 研究干扰素基因刺激因子(STING)基因敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响。用CRISPR/Cas9技术敲除猪肺巨噬细胞系(3D4/21)的STING基因,用T7核酸酶检测靶基因敲除效率,用细胞计数试剂盒检测基因敲除细胞的活力,用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组病毒PRV-GFP感染基因敲除细胞,用流式细胞术检测感染细胞的荧光强度,用定量RT-PCR检测PRV的gB、TK基因表达及其感染细胞的IL-1β、IFN-β、ISG15基因转录,用Western blot检测PRV gE蛋白表达水平,用病毒滴定法测定子代病毒滴度。结果显示:设计的3个STING基因外显子2特异sgRNA均能切割3D4/21细胞的靶序列,其中sgRNA3的基因编辑效率最高;对sgRNA1介导STING基因敲除系进行克隆化,获得基因敲除细胞系3株,基因敲除对细胞活力无影响;亲本细胞培养的PRV-GFP感染阳性细胞占80.77%,STING基因敲除细胞培养的PRV-GFP感染阳性细胞占95.55%;STING基因敲除对PRV基因表达具有促进作用,亲本3D4/21细胞的病毒滴度为106.2 TCID50·0.1 mL^-1,STING基因敲除细胞的病毒滴度为108.3TCID50·0.1 mL^-1,病毒感染细胞的IL-1β、IFN-β和ISG15转录下调明显。STING基因敲除能促进PRV在3D4/21细胞中复制,可能与感染细胞的IL-β、IFN-β和ISG15表达抑制有关。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 干扰素基因刺激因子 猪肺巨噬细胞 伪狂犬病病毒
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CZT-SPECT测定心肌血流量和血流储备对冠状动脉重度狭窄的预测价值 被引量：2
3
作者 崔利军 于朋伟 +4 位作者 田刚 宋振国 黄平 王洋翀子 王永德 《临床心血管病杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期129-134,共6页
目的:探讨基于碲锌镉(CZT)心脏专用SPECT(CZT-SPECT)测定心肌血流量(MBF)及血流储备(CFR)对冠状动脉(冠脉)重度狭窄的预测价值。方法:回顾性分析2021年1月—2021年8月于泰达国际心血管病医院完成CZT-SPECT检查的可疑或已确诊冠心病患者... 目的:探讨基于碲锌镉(CZT)心脏专用SPECT(CZT-SPECT)测定心肌血流量(MBF)及血流储备(CFR)对冠状动脉(冠脉)重度狭窄的预测价值。方法:回顾性分析2021年1月—2021年8月于泰达国际心血管病医院完成CZT-SPECT检查的可疑或已确诊冠心病患者129例。本研究根据患者是否存在冠脉重度狭窄病变分为缺血组和对照组(冠脉重度狭窄病变的定义标准为血管直径≥2 mm且狭窄≥70%的病变)。绘制静息MBF(rMBF)、负荷MBF(sMBF)及CFR预测冠脉重度狭窄的受试者工作特性(ROC)曲线,并根据Youden指数确定截断值。结果:共纳入129例患者,平均年龄为(60.3±9.6)岁,男性占比51.2%,单支病变患者33例(25.6%),双支病变患者22例(17.1%),三支病变患者18例(13.9%)。分别在血管水平和患者水平进行分析,结果显示缺血组rMBF、sMBF、CFR均明显低于对照组(P<0.01),其中sMBF差异最为明显。绘制rMBF、sMBF、CFR预测冠脉重度狭窄的ROC曲线,结果显示rMBF、sMBF、CFR预测冠脉重度狭窄的AUC分别为0.641、0.808、0.781,截断值分别为0.735 mL·g^(-1)·min^(-1)、1.885 mL·g^(-1)·min^(-1)、2.185。有效预测指标为sMBF和CFR,灵敏度分别为78.5%、83.5%,特异度分别为88.2%、70.1%。结论:CZT-SPECT较容易获得rMBF、sMBF、CFR心肌定量血流参数,缺血组参数值明显低于对照组。sMBF和CFR预测心肌缺血表现出较好的诊断性能,其中sMBF最为突出。临床应用CFR进行缺血评估时,需要同时关注sMBF、rMBF绝对值。 展开更多
关键词 心肌血流量 冠状动脉血流储备 单光子发射型断层成像 心肌灌注显像
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试论计算机网络信息安全防护方法
4
作者 于朋伟 《经济与社会发展研究》 2018年第9期0196-0196,共1页
计算机与我们的生活和工作紧密相关,计算机当中许多重要的文件和资料是以电子文件的形式存储的。但是,计算机并不是绝对安全的,并且信息盗窃案件时有发生。大多数人通常以加密形式对信息保密,如何避免计算机信息安全问题是目前安全防护... 计算机与我们的生活和工作紧密相关,计算机当中许多重要的文件和资料是以电子文件的形式存储的。但是,计算机并不是绝对安全的,并且信息盗窃案件时有发生。大多数人通常以加密形式对信息保密,如何避免计算机信息安全问题是目前安全防护人员值得考虑的问题。据此,本文对计算机网络信息安全与安全防护策略进行分析。 展开更多
关键词 计算机网络信息 信息安全 安全防护
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数据加密技术在计算机网络安全中的应用分析
5
作者 于朋伟 《经济与社会发展研究》 2018年第9期0073-0073,共1页
随着网络应用领域的不断扩大,确保信息的机密性和安全性变得越来越重要。据此,本文简要对计算机网络中的数据加密技术进行分析,希望可以帮助正在使用计算机的人们了解数据加密技术对网络安全的防护帮助。
关键词 数据加密技术 计算机网络安全 应用
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