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过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β对乳腺癌干细胞干性表达的调控 被引量:3
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作者 赵菊芬 马荣 +4 位作者 曹佳 传扬 陶翔 王嘉 王立斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第1期59-65,共7页
背景:研究表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1beta,PGC-1β)通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡。而PGC-1β能否通过PI3K/AKT/m... 背景:研究表明,过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1β(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1beta,PGC-1β)通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌细胞的增殖、迁移及凋亡。而PGC-1β能否通过PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞的干性及其影响机制还不清楚。目的:探究PGC-1β对乳腺癌干细胞干性的影响及调控机制。方法:将PGC-1β空载体、过表达载体(Lv-PGC-1β)、干扰载体(Sh-PGC-1β)分别转染乳腺肿瘤MCF-7细胞,荧光显微镜观察转染效果;qRTPCR及Western blot验证慢病毒转染后PGC-1βmRNA和蛋白的相对表达。在干性培养基中分别培养未转染组、PGC-1β空载体组、PGC-1β过表达组及PGC-1β干扰组的MCF-7细胞使其成为乳腺癌干细胞,显微镜下观察并记录干细胞球体的形成过程,Western blot验证干性标志物(ABCG2、ALDH1、OCT4)、上皮-间充质转化标记物(E-Cadherin、N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1)及PI3K/AKT/mTOR通路核心蛋白的相对表达。结果与结论:①MCF-7贴壁细胞经干性培养基培养形成了折光性好、中间密度高的致密球干细胞;②乳腺癌干细胞干性蛋白的表达明显高于其贴壁细胞(P<0.01);③与未转染组、空载体组相比,PGC-1β过表达组乳腺癌干细胞的形成时间缩短,细胞球体数目增多、球体直径增大(P<0.01),而PGC-1β干扰组细胞球体数目减少、球体直径减小(P<0.01);④PGC-1β过表达组干性相关蛋白的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),上皮-间充质转化相关蛋白E-Cadherin表达低于未转染组、空载体组(P<0.01),而N-Cadherin、Vimentin、Slug和ZEB1的表达高于未转染组、空载体组(P<0.01);PI3K/AKT/mTOR相关蛋白及其磷酸化相关蛋白表达高于未转染组、空载体组(P<0.01),PGC-1β干扰组结果则与PGC-1β过表达组相反;⑤结果提示,PGC-1β能够通过激活PI3K/AKT/mTOR信号通路影响乳腺癌干细胞上皮-间充质转化,从而促进乳腺癌� 展开更多
关键词 PGC-1β MCF-7细胞 乳腺癌干细胞 干性 转染 上皮-间充质转化 PI3K/AKT/mTOR信号通路 成球实验
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Mortalin通过PI3K/AKT通路对人神经胶质瘤细胞U87增殖迁移的影响 被引量:1
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作者 传扬 赵菊芬 +4 位作者 马荣 魏波 曹佳 田进海 王立斌 《宁夏医科大学学报》 2022年第6期597-602,共6页
目的构建Mortalin慢病毒过表达载体和干扰载体,转染人神经胶质瘤细胞U87,探究Mortalin对U87细胞活力及增殖侵袭效应。方法经PCR技术扩增得到Mortalin过表达片段,引物退火得到Mortalin干扰片段,连接线性表达载体并转染293T细胞后,从293T... 目的构建Mortalin慢病毒过表达载体和干扰载体,转染人神经胶质瘤细胞U87,探究Mortalin对U87细胞活力及增殖侵袭效应。方法经PCR技术扩增得到Mortalin过表达片段,引物退火得到Mortalin干扰片段,连接线性表达载体并转染293T细胞后,从293T细胞上清液中获取Mortalin慢病毒载体。通过转染剂(感染增强液)转染U87细胞,在荧光显微镜下观察转染效果,qRT-PCR检测转染Mortalin慢病毒载体后在U87细胞中表达状况。CCK-8实验、克隆实验、划痕实验分别验证Mortalin对U87细胞活力、增殖、迁移的影响,Western blot验证PI3K/AKT蛋白表达。结果成功构建Mortalin慢病毒载体,转染人神经胶质瘤(U87)细胞。与Control组相比,NC组变化差异无统计学意义(P>0.05)。与NC组相比,过表达Mortalin可以提高U87细胞集落形成和迁移能力(P均<0.05),PI3K/AKT蛋白高表达(P<0.05),而干扰组U87细胞则低表达(P<0.05)。结论Mortalin能够提高U87细胞活力,并通过激活PI3K/AKT信号通路促进细胞增殖、迁移。 展开更多
关键词 Mortalin 载体 人神经胶质瘤细胞 增殖 迁移
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溶血对生化检验结果的影响
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作者 传扬 徐婷婷 《医学信息(医学与计算机应用)》 2014年第29期175-175,共1页
目的:探讨溶血现象对生化检验结果的影响,分析其主要原因,最大限度避免溶血现象的发生,提高检验结果准确度。方法采用长征复星 CS-800生化分析仪,检测患者溶血与正常血清的11项生化指标。按照仪器使用说明书将正常血清与溶血血清分别测... 目的:探讨溶血现象对生化检验结果的影响,分析其主要原因,最大限度避免溶血现象的发生,提高检验结果准确度。方法采用长征复星 CS-800生化分析仪,检测患者溶血与正常血清的11项生化指标。按照仪器使用说明书将正常血清与溶血血清分别测定十次,取其均值对比,并进行统计学分析。结果心肌酶类生化项目检测结果明显高于正常血清(P<0.01),而其他项目检测结果影响甚微(P>0.05)。结论溶血标本对检测结果产生较大影响,不利于临床医生对患者病情判断,应加强采血人员责任意识,规范化采血,提高检验结果的准确性,必要时重新采血。 展开更多
关键词 溶血生化检验 采血
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