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人参皂苷Rg3抑制人骨肉瘤143B细胞的增殖、迁移和侵袭并促进其凋亡 被引量：5
1
作者 毛筱涵 靳雅倩 +6 位作者 丰天宇 王豪 刘丹 袁仁杰 武娟 莫洲沛 左国伟 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期233-244,共12页
目的:探讨人参皂苷Rg3对骨肉瘤143B细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及可能的作用机制。方法:用梯度浓度的Rg3(40、50、60、70和80μmol/L)处理143B细胞(以用DMSO处理143B细胞作为对照组)24、48和72 h,采用MTT法和克隆形成实验检测Rg3... 目的:探讨人参皂苷Rg3对骨肉瘤143B细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及可能的作用机制。方法:用梯度浓度的Rg3(40、50、60、70和80μmol/L)处理143B细胞(以用DMSO处理143B细胞作为对照组)24、48和72 h,采用MTT法和克隆形成实验检测Rg3对143B细胞活力及增殖的影响,并计算Rg3对143B细胞的半数抑制浓度(half-maximal inhibitory concentration,IC50)值,筛选最适药物浓度和作用时间。Hoechst 33258染色法和FCM法分别检测Rg3对143B细胞凋亡及细胞周期的影响;细胞划痕愈合实验和Transwell小室实验分别检测Rg3对细胞迁移和侵袭能力的影响;实时荧光定量PCR法检测增殖标志物增殖细胞核抗原(proliferatingcellnuclearantigen,PCNA)mRNA的表达水平;蛋白质印迹法检测增殖标志物PCNA、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和剪切型(cleaved)-Casepase 3,细胞迁移和侵袭相关标志基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和MMP-7的表达水平;最后,用荧光素酶基因报告系统筛选Rg3参与调控的信号通路;蛋白质印迹法检测环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMPresponseelementbindingprotein,CREB)信号通路中相关蛋白蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)、CREB及其磷酸化蛋白的表达水平。结果:与对照组相比,Rg3浓度为40、50、60、70和80μmol/L时均可以抑制143B细胞的增殖,且这种抑制作用与浓度和作用时间呈正相关(P值均<0.001),Rg3对143B细胞的IC50值为(51.00±3.46)μmol/L。Rg3能下调增殖标志分子PCNAmRNA和蛋白的表达水平(P值均<0.05)。另一方面,Rg3又可促进143B细胞的凋亡并抑制其迁移和侵袭(P值均<0.05)。Rg3处理后的143B细胞中抑凋亡蛋白Bcl-2的表达水平下调(P<0.01),促凋亡蛋白Bax和cleaved-Caspase 3的表达水平上调(P值均<0.05);侵袭相关蛋白MMP-2和MMP-7的表达水平下调(P值均<0.05);同时CREB转录活性下降(P值<0.001),CREB信号通路中AKT及CREB磷酸化水平均明显下降(P值均<0.05)。结论:R 展开更多
关键词 骨肉瘤 人参皂甙 细胞增殖 细胞凋亡 细胞运动
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m^(6)A修饰相关lncRNA与宫颈癌的预后不良及免疫治疗的相关性分析 被引量：2
2
作者 顾睿 刘敏 +8 位作者 林苹 丰天宇 袁航 欧德琼 李思琦 李琴 赵岗 张洁 李凯 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期626-636,共11页
目的本研究旨在通过挖掘宫颈癌TCGA数据库,分析N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)修饰相关长链非编码RNA(lncRNA)与宫颈癌预后不良及免疫治疗的相关性,从而有效地评估宫颈癌患者的预后和宫颈癌免疫治疗的可行性。方法基于TCGA... 目的本研究旨在通过挖掘宫颈癌TCGA数据库,分析N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenosine,m^(6)A)修饰相关长链非编码RNA(lncRNA)与宫颈癌预后不良及免疫治疗的相关性,从而有效地评估宫颈癌患者的预后和宫颈癌免疫治疗的可行性。方法基于TCGA数据库宫颈癌样本,利用生物信息学的方法鉴定与宫颈癌预后相关的m^(6)A修饰相关lncRNA,并以此构建宫颈癌的预后风险模型。结果从304例患者样本中筛选出343个m^(6)A修饰相关lncRNA,通过单因素Cox回归分析得到26个m^(6)A修饰相关lncRNA与宫颈癌患者预后相关,并利用Lasso回归分析得到7个m^(6)A修饰相关lncRNA(DLEU1、AC099850.4、DDN-AS1、EP300-AS1、AC131159.1、AL441992.2、AL021707.6)用以构建预后风险模型。Kaplan-Meier曲线显示低风险组的OS高于高风险组(P<0.001);ROC曲线下面积(AUC)表明本风险模型准确性高、可信度强;多因素Cox分析显示风险评分是评估宫颈癌患者预后的独立因素。TIDE评分预测高风险组接受免疫治疗后获益更大。免疫检查点PD1与DDN-AS1等m^(6)A修饰相关lncRNA表达相关,且在高风险组中表达更高(P<0.05)。结论基于上述7个m^(6)A修饰相关lncRNA构建的预后风险模型能够有效预测宫颈癌患者的预后,并能评估以PD1为靶点的免疫治疗疗效。 展开更多
关键词 宫颈癌 m^(6)A lncRNA 预后 免疫治疗
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TRIM5高表达与胶质瘤患者不良预后和免疫浸润的相关性研究(英文) 被引量：2
3
作者 陈悦 李琴 +7 位作者 张洁 顾睿 李凯 赵岗 袁航 丰天宇 欧德琼 林苹 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第3期469-479,共11页
三结构域蛋白家族5(TRIM5)在自噬中起重要作用,并参与免疫和肿瘤进程,然而TRIM5在神经胶质瘤中的功能尚不清楚。本研究旨在通过生物信息学分析来评估TRIM5在胶质瘤中的作用。本研究神经胶质瘤数据库临床样本包括低级别神经胶质瘤(LGG)... 三结构域蛋白家族5(TRIM5)在自噬中起重要作用,并参与免疫和肿瘤进程,然而TRIM5在神经胶质瘤中的功能尚不清楚。本研究旨在通过生物信息学分析来评估TRIM5在胶质瘤中的作用。本研究神经胶质瘤数据库临床样本包括低级别神经胶质瘤(LGG)与多形性成胶质细胞瘤(GBM)。通过Oncomine、基因表达谱交互分析(GEPIA)和癌症基因组图谱(TCGA)数据库探寻了TRIM5在胶质瘤组织中的表达。基于TCGA数据库,我们利用生存分析和多因素Cox回归分析评价TRIM5的预后作用。利用STRING数据库预测TRIM5相关蛋白网络,并通过KEGG富集分析预测TRIM5在胶质瘤中的潜在分子通路。此外,采用CIBERSORT和TIMER数据库进行免疫浸润分析。结果表明,与Oncomine、GEPIA和TCGA数据库中的正常样本相比,神经胶质瘤样本中的TRIM5表达明显上调。生存分析结果显示,较高的TRIM5表达与LGG+GBM患者以及LGG患者较差的总体生存(OS)有关,但与GBM患者OS无关。临床相关性分析结果显示,TRIM5表达与年龄(χ2=44.31,P<0.001)、病理学分级(χ2=130.10,P<0.001)以及组织学类型(χ2=125.50,P<0.001)具有相关性。多因素Cox风险分析结果显示TRIM5表达(HR=1.48,95%CI=1.20~1.80,P<0.001)、年龄(HR=1.05,95%CI=1.03~1.10,P<0.001)以及病理学分级(HR=3.11,95%CI=2.30~4.20,P<0.001)是胶质瘤患者(LGG+GBM)预后的独立危险因素;TRIM5表达(HR=1.82,95%CI=1.42~2.32,P<0.001)、年龄(HR=1.06,95%CI=1.05~1.08,P<0.001)、病理学分级(HR=1.92,95%CI=1.22~3.01,P=0.005)以及组织学类型(HR=0.71,95%CI=0.57~0.89,P=0.003)是LGG患者的独立预后因素。相互作用网络分析发现,IRF3、IRF7、OAS1、OAS2、OAS3、OASL、GBP1、PML、BTBD1以及BTBD2蛋白与TRIM5具有相互作用。此外,KEGG分析还发现细胞凋亡、肿瘤以及免疫相关通路在TRIM5升高时显著富集。免疫浸润分析显示,TRIM5表达可以影响胶质瘤中活化NK细胞、单核细胞、活化肥大细胞、巨噬细胞等免疫细胞浸 展开更多
关键词 TRIM5 神经胶质瘤 生物标志物 预后 免疫浸润
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microRNA-708-5p对骨肉瘤细胞凋亡与迁移的作用及机制 被引量：1
4
作者 丰天宇 朱中凯 +6 位作者 王豪 毛筱涵 刘丹 袁仁杰 刘跃华 左国伟 张明昊 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2019年第3期446-455,共10页
该文主要研究microRNA-708-5p(miR-708-5p)在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞凋亡、迁移的影响及机制。该研究利用miRNA基因芯片筛选差异表达miRNA; qRT-PCR(quantitative Realtime PCR)检测miR-708-5p在骨肉瘤细胞株MG63和正常细胞hMSC、H... 该文主要研究microRNA-708-5p(miR-708-5p)在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞凋亡、迁移的影响及机制。该研究利用miRNA基因芯片筛选差异表达miRNA; qRT-PCR(quantitative Realtime PCR)检测miR-708-5p在骨肉瘤细胞株MG63和正常细胞hMSC、HS-5中的表达;通过阳离子脂质体介导法过表达miR-708-5p;分别用Hoechst 33258染色、流式细胞术、划痕实验、Transwell法检测凋亡和迁移;通过qRT-PCR检测miR-708-5p、ZEB1(Zinc?nger E-box binding homeobox 1)的RNA水平; Western blot检测E-cadherin、N-cadherin、ZEB1蛋白表达;利用TargetScan和双荧光素酶报告实验预测并验证miR-708-5p与ZEB1的靶向关系。结果显示, miR-708-5p在MG63中表达下调,恢复miR-708-5p表达水平可诱导MG63细胞凋亡并抑制迁移。Western blot结果显示,过表达miR-708-5p可上调E-cadherin,下调N-cadherin和ZEB1。双荧光素酶报告实验显示, miR-708-5p可直接靶向ZEB1。敲低ZEB1可抑制MG63迁移。该项研究结果表明, miR-708-5p可诱导骨肉瘤细胞凋亡,且通过靶向ZEB1来抑制迁移。 展开更多
关键词 miRNA-708-5p 骨肉瘤 凋亡 迁移 ZEB1
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野百合碱诱导运动诱发肺动脉高压大鼠模型的建立及他达那非早期干预效果 被引量：1
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作者 朱中凯 易鑫 +5 位作者 何杨柯 丰天宇 赵勇鹏 李丹 陈中祝 黄玮 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1532-1539,共8页
目的:建立运动诱发肺动脉高压(exercise induced PH,EiPH)大鼠模型,早期明确诊断,及时给予治疗,评估大鼠PH进展、肺血管重塑情况及生存率。方法:雄性Sprague Dawely(SD)大鼠60只,体质量200~220 g,大鼠注射野百合碱(monocrotaline,MCT)(6... 目的:建立运动诱发肺动脉高压(exercise induced PH,EiPH)大鼠模型,早期明确诊断,及时给予治疗,评估大鼠PH进展、肺血管重塑情况及生存率。方法:雄性Sprague Dawely(SD)大鼠60只,体质量200~220 g,大鼠注射野百合碱(monocrotaline,MCT)(60 mg/kg)后,分别在第1、3、5、7、9天检测大鼠静息状态下平均肺动脉压力(mean pulmonary artery pressure,mPAP)及运动状态下峰值mPAP(maximum mPAP,mPAPmax)。选取大鼠静息mPAP<25 mmHg且运动状态下mPAPmax>30 mmHg定义为EiPH组;将大鼠静息mPAP≥25 mmHg随机分为静息PH(rest PH,rPH)组和PH组;注射生理盐水的大鼠为对照组。EiPH组与rPH组大鼠分别给予等量他达那非灌胃2周。各组大鼠于实验终点完成超声心动图检查,改良右心导管测压,留取心肺组织。结果:MCT注射后第7天,大鼠运动状态下mPAPmax较对照组明显升高[(38.5±2.7)mmHg vs.(27.24±0.46)mmHg,P=0.000]。MCT注射后第35天,rPH+T组大鼠静息mPAP升高[(26.67±0.11)mmHg vs.(35.23±0.47)mmHg,P=0.000]、右室肥厚指数增加(0.34±0.01 vs.0.46±0.02,P=0.004)、肺动脉中膜厚度百分比增加(44.4%vs.55.6%,P=0.008)。结论:本研究成功建立EiPH大鼠模型。他达那非干预实验结果表明,早期阶段给予PH大鼠治疗的降压及抑制肺血管重构效果优于同等剂量药物的晚期用药。 展开更多
关键词 侵入性运动试验 早期诊断 肺高压 他达那非
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