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基于非靶向代谢组学分析酿酒酵母甲酸胁迫的响应和耐受性机制 被引量:6
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作者 曾令杰 +5 位作者 黄锦翔 梁大呈 佀再勇 龙秀锋 伍时华 易弋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第4期95-104,共10页
采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MC)的非靶向代谢组学,探究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)响应甲酸胁迫的代谢机制。主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等多元统计结果表明,甲酸处理后酿酒酵... 采用液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry,LC-MC)的非靶向代谢组学,探究酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)响应甲酸胁迫的代谢机制。主成分分析和正交偏最小二乘判别分析等多元统计结果表明,甲酸处理后酿酒酵母中发生显著变化(P<0.05)、变量投影重要性值超过1的差异代谢物共226种,主要为L-色氨酸、L-谷氨酰胺、5-羟基吲哚乙酸、吲哚乙醛、L-苯丙氨酸、L-谷氨酸、氧化型谷胱甘肽、5’-磷酸核糖基-N-甲酰甘氨酰胺。差异代谢通路分析表明,甲酸胁迫可能导致酵母细胞内活性氧积累诱导氧化应激、ATP过度消耗,这可能是抑制酵母细胞生长的主要原因。而胞内芳香族氨基酸的含量增加,部分氨基酸和核苷酸的合成代谢减慢可能是通过降低能量消耗而实现的自我保护,从而有助于提高酵母细胞对甲酸的耐受性。实验为进一步研究提高细胞酸类抑制物的耐受性方法提供了科学理论参考。 展开更多
关键词 酿酒酵母 甲酸胁迫 非靶向代谢组学
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甲酸对酿酒酵母的细胞毒性 被引量:4
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作者 曾令杰 黄锦翔 +5 位作者 安佳星 佀再勇 龙秀锋 伍时华 易弋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第6期125-131,共7页
研究甲酸对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)GGSF16的毒害作用,测定不同质量浓度甲酸对酿酒酵母生长代谢的影响,结果表明,甲酸质量浓度为1.8 g/L时能够明显抑制酵母细胞的生长和降低乙醇产量,延长细胞发酵周期;酵母细胞外的核酸、蛋... 研究甲酸对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)GGSF16的毒害作用,测定不同质量浓度甲酸对酿酒酵母生长代谢的影响,结果表明,甲酸质量浓度为1.8 g/L时能够明显抑制酵母细胞的生长和降低乙醇产量,延长细胞发酵周期;酵母细胞外的核酸、蛋白质和丙二醛含量分别是对照组的1.4、1.67倍和5.3倍,胞内己糖激酶活力提高到3.95倍(P<0.05);从扫描电子显微镜结果可以看出酵母细胞经甲酸处理后光滑的表面出现了空洞、皱褶,细胞之间出现粘黏现象;傅里叶变换红外光谱分析结果表明甲酸通过改变蛋白质和糖类的结构破坏酵母细胞壁,同时增大了细胞膜通透性,使得细胞内容物外露,最终导致细胞的死亡。 展开更多
关键词 甲酸 酿酒酵母 生长代谢 细胞膜通透性
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邻苯二酚对酿酒酵母理化特性的影响
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作者 黄锦翔 易弋 +4 位作者 梁君夏 马振花 严寅珲 龙秀锋 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第3期130-137,共8页
邻苯二酚是木质纤维素水解液中一种主要的细胞生长抑制物,毒性作用较强,能抑制后续酒精发酵过程中酿酒酵母的生长和发酵性能。本文研究邻苯二酚对酿酒酵母GGSF16理化特性的影响,结果表明,邻苯二酚质量浓度为1.2 g/L时,明显抑制酿酒酵母... 邻苯二酚是木质纤维素水解液中一种主要的细胞生长抑制物,毒性作用较强,能抑制后续酒精发酵过程中酿酒酵母的生长和发酵性能。本文研究邻苯二酚对酿酒酵母GGSF16理化特性的影响,结果表明,邻苯二酚质量浓度为1.2 g/L时,明显抑制酿酒酵母细胞的生长和代谢,导致消耗葡萄糖的时间变慢和乙醇发酵周期变长,降低乙醇生成率;明显改变酵母细胞的膜通透性,使胞内核酸和蛋白质发生内漏,含量分别是对照组的2.50,2.01倍;细胞内的应激代谢物海藻糖含量显著升高2.89倍;此外,为了抵抗细胞的氧化损伤,胞内GSH含量显著降低70.63%。扫描电子显微镜显示:用邻苯二酚处理后,表面光滑、饱满的酵母细胞的细胞壁和细胞膜被破坏,出现空洞、大量撕裂碎片和彼此之间粘黏等现象,细胞失去保护作用而死亡。本研究初步明确了酚类物质对酿酒酵母的损伤和毒性机制,为进一步揭示木质纤维素水解液对酿酒酵母的抑制作用提供参考。 展开更多
关键词 邻苯二酚 酿酒酵母 理化特性 谷胱甘肽 氧化胁迫
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基于转录组测序技术的儿茶酚胁迫下酿酒酵母响应机制 被引量:2
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作者 曾令杰 +5 位作者 黄锦翔 安佳星 龙秀锋 伍时华 易弋 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期47-53,共7页
酿酒酵母被认为是发酵纤维素产生乙醇的主要微生物。儿茶酚是木质纤维素水解液中一种主要的酚类抑制物,对酵母细胞的生长代谢具有一定的毒害作用。采用RNA-Seq技术在转录组水平探讨了酿酒酵母在质量分数为1.2 g/L儿茶酚下的响应机制,共... 酿酒酵母被认为是发酵纤维素产生乙醇的主要微生物。儿茶酚是木质纤维素水解液中一种主要的酚类抑制物,对酵母细胞的生长代谢具有一定的毒害作用。采用RNA-Seq技术在转录组水平探讨了酿酒酵母在质量分数为1.2 g/L儿茶酚下的响应机制,共筛选出223个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),其中包括172个上调基因和51个下调基因。结果表明,在儿茶酚胁迫下,酿酒酵母发生了氧化应激,同时通过上调硫代谢、碳代谢以及ABC转运蛋白等通路相关基因来提高酿酒酵母儿茶酚耐受性。研究初步揭示了儿茶酚胁迫下酿酒酵母响应机制,为进一步研究提高酿酒酵母酚类物质耐受性的方法提供了理论依据。 展开更多
关键词 酿酒酵母 儿茶酚 转录组 响应机制
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对羟基苯甲醛和阿魏酸对酿酒酵母理化特性的影响 被引量:2
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作者 安佳星 龙秀锋 +4 位作者 伍时华 曾令杰 黄锦翔 易弋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第22期125-130,共6页
研究木质纤维素水解液中的酚类物质对羟基苯甲醛和阿魏酸对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)GGSF16理化特性的影响。结果表明,经药物处理后酿酒酵母的糖代谢时间和乙醇发酵时间延长,胞外核酸、蛋白质和胞内海藻糖含量均显著增加(P<... 研究木质纤维素水解液中的酚类物质对羟基苯甲醛和阿魏酸对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)GGSF16理化特性的影响。结果表明,经药物处理后酿酒酵母的糖代谢时间和乙醇发酵时间延长,胞外核酸、蛋白质和胞内海藻糖含量均显著增加(P<0.05),扫描电子显微镜图可以看出,原本完整光滑的细胞经对羟基苯甲醛和阿魏酸处理后细胞表面出现褶皱、粘黏、裂解现象,结合傅里叶变换红外光谱呈现的代表脂质、蛋白质、核酸等分子成分官能团的改变可以得出,对羟基苯甲醛和阿魏酸能够破坏酿酒酵母的细胞壁,增大细胞膜的通透性,从而使细胞内容物流出,导致细胞损伤。 展开更多
关键词 对羟基苯甲醛 阿魏酸 酿酒酵母 理化性质
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中村芽胞杆菌壳聚糖酶在大肠杆菌中重组表达及酶学性质
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作者 严寅珲 鲁晶娣 +3 位作者 黄锦翔 凌瑶 易弋 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2022年第9期74-81,共8页
壳聚糖是一类来源丰富的大分子聚合物,在化工、食品、生物等多个领域都有广泛的应用价值,然而,只有降解成小分子的低聚糖才能更好地发挥其活性。随着酶法降解壳聚糖相较于其它方法的优势愈来愈明显,探索新型稳定高效的壳聚糖酶引起研究... 壳聚糖是一类来源丰富的大分子聚合物,在化工、食品、生物等多个领域都有广泛的应用价值,然而,只有降解成小分子的低聚糖才能更好地发挥其活性。随着酶法降解壳聚糖相较于其它方法的优势愈来愈明显,探索新型稳定高效的壳聚糖酶引起研究者的关注。参考GeneBank数据库中中村芽胞杆菌(Bacillus nakamurai)的壳聚糖酶氨基酸序列设计相应的编码基因,利用大肠杆菌原核表达系统表达和纯化重组蛋白。酶学性质研究结果显示:该酶在最适温度37℃,46℃处理30 min时仍有50%的相对酶活,最适pH值4.5。在pH 2.5条件下处理60 min时,仍可保持60%相对酶活。Ag^(+)、Hg^(+)完全抑制酶活性,Mn^(2+)、Mg^(2+)、Ca^(2+)对酶活性有促进作用,K^(+)、Na^(+)、EDTA对酶活性无明显作用。本文首次研究来源于中村芽胞杆菌的壳聚糖酶的酶学性质,以拓展该酶库资源,为该酶后续研究和应用提供理论依据。 展开更多
关键词 中村芽胞杆菌 壳聚糖酶 酶学性质
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半夏等15种常见中草药提取物的抗氧化能力比较研究 被引量:6
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作者 易弋 +4 位作者 黄锦翔 严寅珲 马振花 朱敦朝 赵早亚 《广西科技大学学报》 2022年第3期91-99,共9页
采用体外抗氧化实验,包括DPPH/超氧阴离子/羟自由基清除率、Fe^(2+)螯合能力和总还原力的检测,对半夏等15种中草药水提物和醇提物的抗氧化能力进行研究,并对其综合抗氧化能力进行评价。结果表明,在不同的检测方法下,同一中草药的同种提... 采用体外抗氧化实验,包括DPPH/超氧阴离子/羟自由基清除率、Fe^(2+)螯合能力和总还原力的检测,对半夏等15种中草药水提物和醇提物的抗氧化能力进行研究,并对其综合抗氧化能力进行评价。结果表明,在不同的检测方法下,同一中草药的同种提取物会有不同的抗氧化能力,例如青果的水提物对于Fe^(2+)螯合能力最强,螯合率达到了149.27%;而超氧阴离子自由基清除率仅为阳性对照物的55.20%;对不同中草药抗氧化能力进行综合评价,发现同一中草药的水提物和醇提物的抗氧化效果不同,水提物抗氧化效果最好的分别是青果、丹参、薄荷,醇提物抗氧化效果最好的分别是青果、花椒、桑寄生;综合水提物与醇提物的结果,发现抗氧化能力最强的3种中草药分别为青果、薄荷、丹参。上述结果说明,青果、丹参和薄荷具有良好的抗氧化性能,可为未来挖掘新型天然抗氧化剂提供参考。 展开更多
关键词 中草药 提取物 抗氧化能力 综合评价
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不同方法提取酿酒酵母总RNA的比较 被引量:2
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作者 安佳星 伍时华 +4 位作者 曾令杰 黄锦翔 梁天林 易弋 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第11期82-86,共5页
选择试剂盒法、总核糖核酸(RNA)提取试剂(Trizol)法、热酚法3种方法提取酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总RNA,根据提取效果,选用酵母破壁酶辅助破壁并进行不同菌体量优化,通过对总RNA进行浓度和纯度的分析,比较不同方法对酿酒酵母... 选择试剂盒法、总核糖核酸(RNA)提取试剂(Trizol)法、热酚法3种方法提取酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总RNA,根据提取效果,选用酵母破壁酶辅助破壁并进行不同菌体量优化,通过对总RNA进行浓度和纯度的分析,比较不同方法对酿酒酵母总RNA提取的影响。结果表明,试剂盒法和Trizol法不适合提取酿酒酵母总RNA,但通过添加酵母破壁酶,可以提高提取效果。热酚法适合提取酿酒酵母总RNA,但添加酵母破壁酶反而会导致RNA降解。因此,使用热酚法提取酿酒酵母总RNA是较为有效且简便的方法。 展开更多
关键词 试剂盒法 TRIZOL法 热酚法 酵母破壁酶 酿酒酵母 RNA提取
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酵母破壁酶和蜗牛酶辅助TRIzol试剂法提取酿酒酵母总RNA 被引量:1
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作者 安佳星 伍时华 +4 位作者 黄嘉齐 曾令杰 黄锦翔 易弋 《中国酿造》 CAS 北大核心 2020年第12期46-50,共5页
该研究以酵母破壁酶、蜗牛酶破碎酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞壁,再使用总核糖核酸(RNA)提取试剂(TRIzol)法提取酵母总RNA,通过对总RNA进行浓度与纯度的分析,比较酶处理对RNA提取的影响。结果表明,酵母破壁酶的最佳提取条件... 该研究以酵母破壁酶、蜗牛酶破碎酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞壁,再使用总核糖核酸(RNA)提取试剂(TRIzol)法提取酵母总RNA,通过对总RNA进行浓度与纯度的分析,比较酶处理对RNA提取的影响。结果表明,酵母破壁酶的最佳提取条件为加酶量37.5μL,提取温度27℃,提取时间15 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1079.05 ng/μL,A260 nm/A280 nm为2.10,A260 nm/A230 nm为2.15;蜗牛酶的最佳提取条件为加酶量30 mg/mL,提取温度37℃,提取时间30 min。在此最佳提取条件下,提取RNA质量浓度为1673.39 ng/μL,A260 nm/A280 nm为1.99,A260 nm/A230 nm为1.81。结果显示,酵母破壁酶的提取效果优于蜗牛酶。 展开更多
关键词 TRIzol试剂法 蜗牛酶 酵母破壁酶 酿酒酵母 RNA提取
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基于RNA-seq技术的酿酒酵母响应甲酸胁迫的分子机制研究
10
作者 曾令杰 黄锦翔 +4 位作者 安佳星 佀再勇 龙秀锋 易弋 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期58-65,共8页
甲酸是木质纤维素水解液中一种具有代表性的小分子酸类细胞抑制物,在木质纤维素酒精发酵过程中能抑制细胞的生长。利用RNA-Seq分析技术对酿酒酵母在1.8 g/L甲酸处理前后的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行了分析... 甲酸是木质纤维素水解液中一种具有代表性的小分子酸类细胞抑制物,在木质纤维素酒精发酵过程中能抑制细胞的生长。利用RNA-Seq分析技术对酿酒酵母在1.8 g/L甲酸处理前后的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)进行了分析。结果表明,在甲酸的胁迫下,共鉴定出1504个DEGs,其中上调基因797个,下调基因707个,并通过GO(Gene Ontology)和KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)富集分析发现,这些差异表达基因主要参与了核糖体通路、减数分裂-酵母、丝裂原活化蛋白激酶信号通路、糖酵解/糖异生通路、淀粉和蔗糖代谢通路、半胱氨酸和蛋氨酸代谢通路以及嘌呤代谢通路。研究初步揭示了甲酸胁迫下酿酒酵母的分子响应机制,为进一步研究提高木质纤维素水解液中细胞抑制物耐受性的方法提供了科学依据。 展开更多
关键词 甲酸 酿酒酵母 RNA-SEQ 分子机制
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