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湖羊瘤胃微生物来源的低温葡聚糖酶的表达与功能表征
1
作者
丁
钰
杰
徐晓锋
+7 位作者
韩俊彦
周叶波
麻子莹
沈桢祎
钱国英
王佳堃
徐洁皓
王谦
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期531-541,共11页
葡聚糖酶作为添加剂在饲料、食品和纺织工业中具有重要的应用价值。本研究从湖羊瘤胃微生物c DNA中扩增IDSGH5-50基因,通过大肠埃希菌BL21(DE3)进行异源表达,研究重组蛋白rIDSGH5-50的酶学性质和水解产物。结果表明:IDSGH5-50编码690个...
葡聚糖酶作为添加剂在饲料、食品和纺织工业中具有重要的应用价值。本研究从湖羊瘤胃微生物c DNA中扩增IDSGH5-50基因,通过大肠埃希菌BL21(DE3)进行异源表达,研究重组蛋白rIDSGH5-50的酶学性质和水解产物。结果表明:IDSGH5-50编码690个氨基酸,蛋白质分子量为75.78 kDa,等电点为4.75;重组蛋白rIDSGH5-50的最适反应条件为温度30℃、pH 6.0,且能在4~20℃下保持较高活性(>70%),在pH 5.0~8.0范围内稳定性较高。rIDSGH5-50的活性底物谱分析显示,rIDSGH5-50能催化大麦β-葡聚糖、地衣多糖、罗望子木葡聚糖和魔芋胶,对应的比活性分别为(10.42±0.16)、(7.12±0.08)、(7.03±0.38)、(5.94±0.65) U/mg。薄层色谱分析表明,在rIDSGH5-50催化下,大麦β-葡聚糖主要降解成纤维四糖和纤维五糖,地衣多糖主要降解成纤维三糖和纤维五糖,魔芋胶主要降解成纤维五糖,罗望子木葡聚糖主要降解成聚合度>5的寡糖。本研究报道了一种来自瘤胃球菌属的低温内切β-1,4-葡聚糖酶IDSGH5-50,为饲料、食品酶制剂开发奠定了基础。
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关键词
湖羊瘤胃
葡聚糖酶
低温
冷适应
底物水解
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职称材料
湖羊瘤胃微生物GH9家族葡聚糖酶基因IDSGLUC9-25的表达与功能表征
2
作者
徐晓锋
韩俊彦
+7 位作者
丁
钰
杰
廖静
高德英
张骥
王佳堃
尹尚军
王谦
徐洁皓
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期755-766,共12页
【目的】葡聚糖酶是饲用添加剂的重要成分,本研究旨在从湖羊消化道微生物中挖掘性质优良的GH9家族葡聚糖酶基因,用于研发新型饲用酶制剂。【方法】从湖羊瘤胃微生物cDNA中扩增IDSGLUC9-25基因,在大肠杆菌中进行异源表达,对重组蛋白进行...
【目的】葡聚糖酶是饲用添加剂的重要成分,本研究旨在从湖羊消化道微生物中挖掘性质优良的GH9家族葡聚糖酶基因,用于研发新型饲用酶制剂。【方法】从湖羊瘤胃微生物cDNA中扩增IDSGLUC9-25基因,在大肠杆菌中进行异源表达,对重组蛋白进行诱导表达和纯化,研究重组蛋白的酶学性质和底物水解模式。【结果】IDSGLUC9-25基因编码527个氨基酸,包含一个CelD_N结构和一个GH9家族催化结构域;重组蛋白rIDSGLUC9-25分子量约为62.7 kDa,最适反应温度和pH分别为40℃和6.0,在30–50℃下活性较高,在pH 4.0–8.0范围内能够保持较高的稳定性,经pH4.0–8.0缓冲液处理1h后残余活性均大于90%;底物谱分析表明,rIDSGLUC9-25能催化大麦β-葡聚糖、苔藓地衣多糖、魔芋胶和木葡聚糖,比活性分别为(443.55±24.48)、(65.56±5.98)、(122.37±2.85)和(159.16±7.73)U/mg;利用薄层色谱法(thinlayer chromatography,TLC)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析水解产物发现,rIDSGLUC9-25降解大麦葡聚糖主要生成纤维三糖(占总还原糖64.19%±1.19%)和纤维四糖(占总还原糖26.24%±0.12%),催化地衣多糖主要生成纤维三糖(占总还原糖78.46%±0.89%)。【结论】本研究报道了一种来自密螺旋体属细菌的内切β-1,4-葡聚糖酶IDSGLUC9-25(EC3.2.1.4),能高效催化多糖底物生成纤维三糖和纤维四糖,为研发饲用酶制剂和制备低聚寡糖建立基础。
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关键词
湖羊
消化道微生物
葡聚糖酶
IDSGLUC9-25
纤维寡糖
原文传递
莫若
3
作者
丁
钰
杰
《作文与考试(初中版)》
2012年第10期11-12,共2页
岁月流逝,再回首,往往会叹道:“若……”而只此一字,就可令人双眸朦胧。人的一生中太多的若是,抑或,若不是,万千伤感,都逃不脱一个“若”字。
关键词
中学生
作文
语文学习
阅读知识
原文传递
石塘碉楼特征及其空间布局形式初探
4
作者
丁
钰
杰
宣建华
《建筑与文化》
2024年第1期199-201,共3页
在浙江温岭石塘的石屋聚落中分布着数量众多的碉楼,碉楼是聚落防御体系的重要组成部分。探析碉楼特征及其空间布局形式对研究石塘聚落具有较大意义。对此,文章通过实地调研和测绘,观察石塘碉楼现状;同时结合文献资料,对比国内其他聚落...
在浙江温岭石塘的石屋聚落中分布着数量众多的碉楼,碉楼是聚落防御体系的重要组成部分。探析碉楼特征及其空间布局形式对研究石塘聚落具有较大意义。对此,文章通过实地调研和测绘,观察石塘碉楼现状;同时结合文献资料,对比国内其他聚落的碉楼,分析总结石塘碉楼的特征,将碉楼分为纯防御性碉楼与宅碉一体碉楼,并在此基础上进一步探索石塘碉楼空间布局特征以及与聚落的关系。
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关键词
石塘镇
石屋聚落
碉楼
空间布局
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职称材料
题名
湖羊瘤胃微生物来源的低温葡聚糖酶的表达与功能表征
1
作者
丁
钰
杰
徐晓锋
韩俊彦
周叶波
麻子莹
沈桢祎
钱国英
王佳堃
徐洁皓
王谦
机构
浙江万里学院生物与环境学院
浙江大学奶业科学研究所
出处
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第4期531-541,共11页
基金
浙江省“尖兵”“领雁”研发攻关计划项目(2022C02043)
浙江省教育厅一般科研项目(Y202353501)
浙江省“生物工程”一流学科(A类)学生创新计划项目(CX2023001)。
文摘
葡聚糖酶作为添加剂在饲料、食品和纺织工业中具有重要的应用价值。本研究从湖羊瘤胃微生物c DNA中扩增IDSGH5-50基因,通过大肠埃希菌BL21(DE3)进行异源表达,研究重组蛋白rIDSGH5-50的酶学性质和水解产物。结果表明:IDSGH5-50编码690个氨基酸,蛋白质分子量为75.78 kDa,等电点为4.75;重组蛋白rIDSGH5-50的最适反应条件为温度30℃、pH 6.0,且能在4~20℃下保持较高活性(>70%),在pH 5.0~8.0范围内稳定性较高。rIDSGH5-50的活性底物谱分析显示,rIDSGH5-50能催化大麦β-葡聚糖、地衣多糖、罗望子木葡聚糖和魔芋胶,对应的比活性分别为(10.42±0.16)、(7.12±0.08)、(7.03±0.38)、(5.94±0.65) U/mg。薄层色谱分析表明,在rIDSGH5-50催化下,大麦β-葡聚糖主要降解成纤维四糖和纤维五糖,地衣多糖主要降解成纤维三糖和纤维五糖,魔芋胶主要降解成纤维五糖,罗望子木葡聚糖主要降解成聚合度>5的寡糖。本研究报道了一种来自瘤胃球菌属的低温内切β-1,4-葡聚糖酶IDSGH5-50,为饲料、食品酶制剂开发奠定了基础。
关键词
湖羊瘤胃
葡聚糖酶
低温
冷适应
底物水解
Keywords
Hu sheep rumen
glucanase
low temperature
cold adaptation
substrate hydrolysis
分类号
Q814.4 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
湖羊瘤胃微生物GH9家族葡聚糖酶基因IDSGLUC9-25的表达与功能表征
2
作者
徐晓锋
韩俊彦
丁
钰
杰
廖静
高德英
张骥
王佳堃
尹尚军
王谦
徐洁皓
机构
浙江万里学院生物与环境学院
浙江大学动物科学学院奶业科学研究所
杭州云心质力生物科技有限公司
出处
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第3期755-766,共12页
基金
浙江省研发攻关计划(2022C02043)
浙江省“生物工程”一流学科自设课题(ZS2023008)。
文摘
【目的】葡聚糖酶是饲用添加剂的重要成分,本研究旨在从湖羊消化道微生物中挖掘性质优良的GH9家族葡聚糖酶基因,用于研发新型饲用酶制剂。【方法】从湖羊瘤胃微生物cDNA中扩增IDSGLUC9-25基因,在大肠杆菌中进行异源表达,对重组蛋白进行诱导表达和纯化,研究重组蛋白的酶学性质和底物水解模式。【结果】IDSGLUC9-25基因编码527个氨基酸,包含一个CelD_N结构和一个GH9家族催化结构域;重组蛋白rIDSGLUC9-25分子量约为62.7 kDa,最适反应温度和pH分别为40℃和6.0,在30–50℃下活性较高,在pH 4.0–8.0范围内能够保持较高的稳定性,经pH4.0–8.0缓冲液处理1h后残余活性均大于90%;底物谱分析表明,rIDSGLUC9-25能催化大麦β-葡聚糖、苔藓地衣多糖、魔芋胶和木葡聚糖,比活性分别为(443.55±24.48)、(65.56±5.98)、(122.37±2.85)和(159.16±7.73)U/mg;利用薄层色谱法(thinlayer chromatography,TLC)和高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)分析水解产物发现,rIDSGLUC9-25降解大麦葡聚糖主要生成纤维三糖(占总还原糖64.19%±1.19%)和纤维四糖(占总还原糖26.24%±0.12%),催化地衣多糖主要生成纤维三糖(占总还原糖78.46%±0.89%)。【结论】本研究报道了一种来自密螺旋体属细菌的内切β-1,4-葡聚糖酶IDSGLUC9-25(EC3.2.1.4),能高效催化多糖底物生成纤维三糖和纤维四糖,为研发饲用酶制剂和制备低聚寡糖建立基础。
关键词
湖羊
消化道微生物
葡聚糖酶
IDSGLUC9-25
纤维寡糖
Keywords
Hu sheep
gastrointestinal microbiota
glucanase
IDSGLUC9-25
cellooligosaccharides
分类号
S852.6 [农业科学—基础兽医学]
原文传递
题名
莫若
3
作者
丁
钰
杰
出处
《作文与考试(初中版)》
2012年第10期11-12,共2页
文摘
岁月流逝,再回首,往往会叹道:“若……”而只此一字,就可令人双眸朦胧。人的一生中太多的若是,抑或,若不是,万千伤感,都逃不脱一个“若”字。
关键词
中学生
作文
语文学习
阅读知识
分类号
G633.34 [文化科学—教育学]
原文传递
题名
石塘碉楼特征及其空间布局形式初探
4
作者
丁
钰
杰
宣建华
机构
浙江大学建筑工程学院
浙江大学平衡建筑研究中心
出处
《建筑与文化》
2024年第1期199-201,共3页
文摘
在浙江温岭石塘的石屋聚落中分布着数量众多的碉楼,碉楼是聚落防御体系的重要组成部分。探析碉楼特征及其空间布局形式对研究石塘聚落具有较大意义。对此,文章通过实地调研和测绘,观察石塘碉楼现状;同时结合文献资料,对比国内其他聚落的碉楼,分析总结石塘碉楼的特征,将碉楼分为纯防御性碉楼与宅碉一体碉楼,并在此基础上进一步探索石塘碉楼空间布局特征以及与聚落的关系。
关键词
石塘镇
石屋聚落
碉楼
空间布局
Keywords
Shitang Town
stone house settlement
Diao Lou
spatial distribution
分类号
TU-86 [艺术—艺术设计]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
湖羊瘤胃微生物来源的低温葡聚糖酶的表达与功能表征
丁
钰
杰
徐晓锋
韩俊彦
周叶波
麻子莹
沈桢祎
钱国英
王佳堃
徐洁皓
王谦
《浙江大学学报(农业与生命科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
2
湖羊瘤胃微生物GH9家族葡聚糖酶基因IDSGLUC9-25的表达与功能表征
徐晓锋
韩俊彦
丁
钰
杰
廖静
高德英
张骥
王佳堃
尹尚军
王谦
徐洁皓
《微生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
原文传递
3
莫若
丁
钰
杰
《作文与考试(初中版)》
2012
0
原文传递
4
石塘碉楼特征及其空间布局形式初探
丁
钰
杰
宣建华
《建筑与文化》
2024
0
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职称材料
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