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题名骨质疏松骨组织差异表达基因消减cDNA文库的构建
被引量：1
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作者
胡素云
李卓成
樊冰
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机构
深圳市宝安区公明人民医院检验科
深圳市第二人民医院检验科
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出处
《国际医药卫生导报》
2006年第11期6-7,共2页
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文摘
目的构建抑制差减文库,为克隆、筛选骨质疏松骨组织中失活或低表达的致骨质疏松相关基因奠定基础。方法分别从小鼠正常骨和骨质疏松骨组织分离mRNA,合成双链cDNA,酶切后骨质疏松cDNA分成两组,分别与不同的接头连接。应用抑制性削减杂交(SSH)技术,分别以正常骨组织与骨质疏松小鼠cDNA作为检测子(tester)与驱赶子(driver),在通过两轮差减杂交和两次抑制性PCR得到两者之间的差异表达的cDNA,将所获得差减cDNA片段克隆入质粒表达载体(PointTMXa-1T-Vector),转化大肠杆菌JM109,挑取克隆进行PCR扩增鉴定插入片段。结果成功地构建了骨质疏松相关的的差减cDNA文库,获得的正、反向差减文库分别含576、322个重组子;插入片段的平均大小为530bp。结论该差减cDNA文库的建立为进一步筛选、鉴定骨质疏松发生过程中的相关调控基因奠定了基础。
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关键词
骨质疏松
差减CDNA文库
抑制性差减杂交
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分类号
R580
[医药卫生—内分泌]
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题名人骨质疏松cDNA表达文库的构建及分析
被引量：1
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作者
胡素云
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机构
深圳市宝安区公明人民医院检验科
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出处
《国际医药卫生导报》
2006年第10期106-108,共3页
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文摘
目的构建人骨质疏松骨组织cDNA文库,为筛选与骨质疏松的发生特异相关的基因及探讨骨质疏松发病机制奠定基础。方法以Trizol一步法从骨质疏松小鼠长骨中提取总RNA,分离纯化mRNA,LD-PCR法反转录合成双链cDNA,以λTripEX2为载体,构建骨质疏松小鼠cDNA文库,对随机挑取的噬菌斑进行PCR鉴定。结果原始文库的滴度为4.8×105pfu/ml,总克隆数为4.6×105,重组率为96.2%,扩增后文库总滴度为6.1×109pfu/ml,插入片段多分布在0.5～2.6kb之间,绝大部分在1.4～1.9kb左右,文库质量鉴定结果表明,构建的骨质疏松小鼠cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。结论构建cDNA文库为克隆骨质疏松相关功能基因的研究奠定了基础。
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关键词
骨质疏松
CDNA
文库构建
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Keywords
Human osteporosis tissue eDNA Library construction
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分类号
R346
[医药卫生—基础医学]
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题名基因检测的伦理、社会学思考
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作者
胡素云
崔天盆
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机构
广东省深圳市宝安区公明人民医院检验科
华中科技大学同济医学院协和医院检验科
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出处
《江西医学检验》
CAS
2005年第4期351-352,300,共3页
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文摘
人类基因组研究在过去十年取得了重要成果,推动了生命科学的迅猛发展,基因检测逐步用于临床诊断基因病和基因相关疾病,随之而来社会、法律和伦理学问题,促使我们检验工作者与社会、法律工作者一起探讨并寻找解决办法,我们在此探索解决问题的可能途径。
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关键词
基因检测
伦理学
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分类号
R394
[医药卫生—医学遗传学]
Q343.17
[医药卫生—基础医学]
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