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转甜菜碱醛脱氢酶基因植物的耐盐性研究 被引量:119
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作者 刘凤华 郭岩 +3 位作者 谷冬梅 肖岗 陈正华 陈受宜 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1997年第1期54-58,共5页
将山菠菜甜菜碱醛脱氢酶(BADH)基因经农杆菌介导转入草莓、烟草,转基因植株中该基因的转录水平、BADH活性及耐盐性均明显高于对照,膜的相对电导率和大分子渗漏值说明在盐胁迫下转基因植株的膜结构所受损伤小于对照。
关键词 菠菜 转基因植株 耐盐性 甜菜碱脱氢酶 基因
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利用改良的CTAB法提取棉花叶片总RNA 被引量:96
2
作者 胡根海 喻树迅 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2007年第1期69-70,共2页
关键词 CTAB法 棉花叶片 总RNA 提取方法 TRIZOL 克隆基因 cdna
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一个新的白血病相关基因LRP16全长cDNA的克隆、序列分析及表达特征 被引量:60
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作者 韩为东 于力 +5 位作者 楼方定 王全顺 赵瑜 史子江 焦宏远 周建军 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期209-214,共6页
克隆一个与白血病复发相关基因 (LRP1 6)的全长 c DNA序列 ,对其进行染色体定位、组织表达谱分析 ,并对该基因编码蛋白质进行原核表达 .首先用获得的一段 3kb DNA片段在 NCBI提供的 h ESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装 ,... 克隆一个与白血病复发相关基因 (LRP1 6)的全长 c DNA序列 ,对其进行染色体定位、组织表达谱分析 ,并对该基因编码蛋白质进行原核表达 .首先用获得的一段 3kb DNA片段在 NCBI提供的 h ESTs数据库中进行电子杂交并对重叠克隆片段组装 ,再设计引物进行 c DNA末端快速扩增(RACE技术 ) .采用 Northern印迹方法进行组织表达分析 .以高通量基因组序列 (HTGS)数据库为基础进行染色体定位 .对构建的克隆菌用 IPTG诱导重组蛋白表达后进行 SDS- PAGE,同时对重组体测序确证 .钓取了该基因全长 c DNA、推导所编码的氨基酸序列 ,并将该基因定位于染色体1 1 q1 2 .2 .原核表达筛选获得了该基因重组子的一个缺失体 .对 LRP1 6基因全长 c DNA的序列分析提示 ,该基因可能编码两种 N端不同的蛋白质 ,且该基因的转录本可能存在一种丰度较低的剪接体 . 展开更多
关键词 白血病 相关基因 LRP16 重组蛋白 原核表达 cdna 克隆 序列分析
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油茶种子EST文库构建及主要表达基因的分析 被引量:59
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作者 谭晓风 胡芳名 +3 位作者 谢禄山 石明旺 张党权 乌云塔娜 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期43-48,共6页
为研究油茶种子在油脂转化高峰期的基因表达并分离克隆与油脂合成等有关的重要基因,以油茶优良无性系湘林1号和湘林4号近成熟种子为材料构建cDNA文库;随机挑取2327个克隆进行3′端测序构建EST文库。将数据完整并无X、N的1979条cDNA序列... 为研究油茶种子在油脂转化高峰期的基因表达并分离克隆与油脂合成等有关的重要基因,以油茶优良无性系湘林1号和湘林4号近成熟种子为材料构建cDNA文库;随机挑取2327个克隆进行3′端测序构建EST文库。将数据完整并无X、N的1979条cDNA序列与NCBI核酸数据库的非冗余序列进行同源性比较,确认763条cDNA序列与核酸数据库中其他物种的DNA序列具有很高或较高的同源性,可确认266种基因;有1216个克隆序列为未知功能的基因序列。各类基因表现出不同的表达丰度,其中贮藏蛋白基因、与基因表达调控相关的基因、抗逆相关基因、种子成熟和胚胎发育相关的基因等为高丰度表达,与脂肪酸代谢相关的基因等为中丰度表达,另外还有大量的其他基因和未知功能基因在种子中表达。各类基因表达的数量和趋势与种子接近发育成熟阶段相吻合。 展开更多
关键词 油茶 cdna EST 文库 表达基因
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中国不同地区蛇床的rDNA ITS序列分析 被引量:47
5
作者 蔡金娜 周开亚 +4 位作者 徐珞珊 王峥涛 沈曦 王义权 李晓波 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期56-59,共4页
目的:探讨不同分布区的蛇床Cnidium monnieri 的ITS序列变异与其地理分布和化学成分的相关性。方法:设计2 对引物,Pf+ Pb 及P5-8SITS1+ P5-8SITS2 ,PCR扩增产物纯化后用银染法或A... 目的:探讨不同分布区的蛇床Cnidium monnieri 的ITS序列变异与其地理分布和化学成分的相关性。方法:设计2 对引物,Pf+ Pb 及P5-8SITS1+ P5-8SITS2 ,PCR扩增产物纯化后用银染法或ABI310 测序。结果:得到核糖体DNA中的ITS及5-8SrDNA 完全序列,18S和26SrDNA 部分序列,共约700 bp 。5 个地点样品的ITS1及ITS2 的序列大小分别为210~217 bp 和219 ~224 bp。ITS1 碱基序列的遗传距离0-00 ~1-93% ,ITS2 碱基序列的遗传距离0-46 ~2-34% ,ITS1 较为保守。以NJ法根据ITS2 序列数据重建系统发生树。哈尔滨样品聚为一组,衡水与德州样品和郑州与高淳样品各自聚为一组。结论:ITS2 序列的变异与中国产蛇床的纬度分布相关,而其与蛇床化学型的关系尚需作进一步研究。 展开更多
关键词 蛇床 cdna 内转录间隔区 序列分析 ITS
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三个品种家鸡催乳素基因cDNA的克隆及序列分析 被引量:41
6
作者 周敏 张细权 +1 位作者 施振旦 曹永长 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第7期614-620,共7页
从粤黄鸡、丝毛乌骨鸡及伊莎蛋鸡的垂体中快速抽提总RNA,根据国外已发表的肉用仔鸡催乳素基因cDNA的序列,设计并合成了能与特定载体末端互补的1对引物,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增获得了特异性片段。... 从粤黄鸡、丝毛乌骨鸡及伊莎蛋鸡的垂体中快速抽提总RNA,根据国外已发表的肉用仔鸡催乳素基因cDNA的序列,设计并合成了能与特定载体末端互补的1对引物,经反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增获得了特异性片段。将扩增片段与线性化质粒 pBSSK连接,克隆后进行序列分析,与已报道的肉用仔鸡、矮脚鸡和火鸡催乳素基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列进行了比较。结果表明,不同品种间核苷酸同源性介于93.97%~99.87%之间,其中丝毛乌骨鸡与矮脚鸡间的同源性最高,为99.87%。推导的相应氨基酸序列的同源性在98.25%~100%之间,也是丝毛乌骨鸡与矮脚鸡间的同源性最高,为100%。在粤黄鸡、丝毛乌骨鸡和伊莎蛋鸡中,发现前两者的催乳素前体的cDNA片段推导的氨基酸序列中信号肽裂解位点跟肉用仔鸡、矮脚鸡及火鸡的一样,为 Leu-Pro-Ile-Cys,而伊莎蛋鸡的信号肽裂解位点则不一样,为Pro-Pro-Ile-Cys。此位点的差异可能导致催乳素前体翻译加工的不同,使伊莎蛋鸡无就巢性。这3个家鸡品种与国外的肉用仔鸡、矮脚鸡催乳素氨基酸序列还在以下位置出现差异:71、141、150、175。在肉用仔鸡、丝毛乌骨鸡? 展开更多
关键词 家鸡 催乳素 基因克隆 序列分析 cdna
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粉尘螨Ⅰ类变应原(Der fⅠ)的cDNA克隆及序列分析 被引量:45
7
作者 郝敏麒 徐军 钟南山 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期213-215,共3页
目的获得我国广州地区粉尘螨 类变应原 (Der f ) c DNA片段 ,为构建 DNA疫苗或表达重组蛋白打下基础。方法挑取经选择鉴定的活粉尘螨 ,提取总 RNA,采用 RT- PCR的方法扩增 Der f 片断 ,进行克隆、测序和分析。结果获得长度为 6 32个碱... 目的获得我国广州地区粉尘螨 类变应原 (Der f ) c DNA片段 ,为构建 DNA疫苗或表达重组蛋白打下基础。方法挑取经选择鉴定的活粉尘螨 ,提取总 RNA,采用 RT- PCR的方法扩增 Der f 片断 ,进行克隆、测序和分析。结果获得长度为 6 32个碱基对的核苷酸片断 ,序列分析结果和 Genebank上去除内含子后的基因序列 (em b| X6 5 196 .1| )同源性为99% ,其中有 6个碱基不同 ,推导的编码氨基酸序列同源性为 10 0 %。结论我们首次获得广州地区的 Der f 的 c DNA克隆 ,该克隆 c DNA序列与 Genebank上已公布的 Der f 序列高度同源。 展开更多
关键词 粉尘螨 变应原 cdna 克隆 序列分析
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油茶种子cDNA文库的构建 被引量:44
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作者 胡芳名 谭晓风 +1 位作者 石明旺 乌云塔娜 《中南林学院学报》 CSCD 2004年第5期1-4,共4页
 以湘林1号和湘林4号油茶优良无性系近成熟种子为材料,采用裂解法和改良的CTAB法提取总RAN;用磁珠法分离得到纯化的mRNA;在反转录酶和其他酶的作用下合成一链cDNA和二链cDNA;经与质料载体重组和转化大肠杆菌,成功地构建了世界上第一个...  以湘林1号和湘林4号油茶优良无性系近成熟种子为材料,采用裂解法和改良的CTAB法提取总RAN;用磁珠法分离得到纯化的mRNA;在反转录酶和其他酶的作用下合成一链cDNA和二链cDNA;经与质料载体重组和转化大肠杆菌,成功地构建了世界上第一个油茶种子cDNA文库.经检测,文库存容量达106,重组率为88.21%.测序结果表明:克隆片段长度一般都大于600bp,说明构建的文库质量较高,能够满足ESTs文库构建及从文库中分离筛选重要基因等研究工作的需要,为进一步研究奠定了很好的物质和技术基础. 展开更多
关键词 林学 经济林 油茶 cdna 文库构建
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小金海棠总RNA提取方法比较及cDNA的LD-PCR扩增 被引量:49
9
作者 张玉刚 成建红 +2 位作者 韩振海 许雪峰 李天忠 《生物技术通报》 CAS CSCD 2005年第4期50-53,共4页
用CTAB和SDS-酚两种方法提取了小金海棠根的总RNA,以CTAB法提取的总RNA为模板,用长距离PCR(LD-PCR)的方法合成了双链cDNA并进行了扩增。结果表明,CTAB法比SDS-酚法提取的总RNA纯度高、完整性好,宜于进行RT-PCR和cDNA文库的构建,SDS-酚... 用CTAB和SDS-酚两种方法提取了小金海棠根的总RNA,以CTAB法提取的总RNA为模板,用长距离PCR(LD-PCR)的方法合成了双链cDNA并进行了扩增。结果表明,CTAB法比SDS-酚法提取的总RNA纯度高、完整性好,宜于进行RT-PCR和cDNA文库的构建,SDS-酚法操作简单易行,提取产物可以直接用于转膜进行Northern杂交。 展开更多
关键词 小金海棠 总RNA 提取方法 cdna LD-PCR扩增 酶活性
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水稻雄性不育与可育花药的mRNA差别显示和cDNA差别片段的分析 被引量:28
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作者 王学德 朱英国 《中国科学(C辑)》 CSCD 1998年第3期257-263,共7页
用mRNA差别显示 ,对水稻细胞质雄性不育系、保持系和F1杂种的花药mRNA和叶片mRNA进行了比较和分析 ,以研究雄性不育花药在花粉败育时期的基因表达方式 .花药在不育与可育间显示的cDNA差别带数多于叶片 ,表明在花药中育性基因的表达比叶... 用mRNA差别显示 ,对水稻细胞质雄性不育系、保持系和F1杂种的花药mRNA和叶片mRNA进行了比较和分析 ,以研究雄性不育花药在花粉败育时期的基因表达方式 .花药在不育与可育间显示的cDNA差别带数多于叶片 ,表明在花药中育性基因的表达比叶片中活跃和充分 .不同类型花药的基因转录方式既与花药育性程度有关也与花药败育早晚有关 ,不育、部分不育和早期败育的花药所显示的cDNA差别带数多于可育和晚期败育的花药 .在回收的 1 2个cDNA差别片段中 ,有2个可能与雄性不育相关 ,AB4A5 片段只在不育花药中专一表达 ,另一片段AB3 B2 含有与线粒体基因coxⅡ同源的序列 。 展开更多
关键词 水稻 细胞质雄性不育 可育花药 cdna MRNA
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牛催乳素基因组及其cDNA全长序列的分子克隆和分析 被引量:30
11
作者 曹新 王强 +3 位作者 颜景斌 阳飞昆 黄淑帧 曾溢滔 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第9期768-773,共6页
通过LongPCR等技术首次克隆得到全长 9388bp的牛催乳素 (bPRL)基因组序列 (GenBank登录号AF4 2 6 315 ) ,其中包括bPRL基因全部 5个外显子和 4个内含子 ,5′端 85 4bp的上游调控区以及 3′端 6 9bp的UTR。AF4 2 6 315基因编码的蛋白质在... 通过LongPCR等技术首次克隆得到全长 9388bp的牛催乳素 (bPRL)基因组序列 (GenBank登录号AF4 2 6 315 ) ,其中包括bPRL基因全部 5个外显子和 4个内含子 ,5′端 85 4bp的上游调控区以及 3′端 6 9bp的UTR。AF4 2 6 315基因编码的蛋白质在GenBank中的序号为AAL2 80 75 ,由 2 2 9个氨基酸残基组成 ,1~ 30位氨基酸残基为信号肽序列 ,成熟的多肽含有 199个氨基酸残基。将bPRL基因组DNA真核表达载体转染COS 7细胞后通过RT PCR得到长度为80 4bp的bPRLcDNA序列 ,该序列涵盖了bPRL基因的全部ORF区 ,证明本研究所获得的bPRL基因组DNA具有转录的生物学功能。Blast搜索结果显示 ,GenBank数据库中收集有多条bPRL基因的mRNA和EST序列 ,各序列间存在多个SNP位点 ,主要分布于下游编码区和 3′端的UTR ,这些位点均未改变相应的氨基酸残基的性质 ,此外 。 展开更多
关键词 分子克隆 全长序列 长距离PCR 序列分析 牛催乳素基因组 cdna
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一个新的水稻C2H2型锌指蛋白cDNA的克隆与序列分析 被引量:28
12
作者 黄骥 张红生 +3 位作者 曹雅君 王东 王建飞 杨金水 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期110-112,共3页
关键词 水稻 C2H2 锌指蛋白 cdna 克隆 序列分析
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盐地碱蓬(Suaedasalsa)APX基因的克隆及盐胁迫下的表达 被引量:28
13
作者 马长乐 王萍萍 +2 位作者 曹子谊 赵彦修 张慧 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2002年第4期261-266,共6页
从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠... 从盐地碱蓬 (Suaedasalsa)中克隆了抗坏血酸过氧化物酶 (ascorbateperoxidase ,APX)的全长cDNA(SsAPX) ,基因注册号为AY0 34 893。SsAPX全长 1.1kb ,推导的氨基酸序列长为 2 5 0个氨基酸残基。BLAST同源性分析表明 ,该cDNA与已报告的菠菜(Spinaciaoleracea)细胞质抗坏血酸过氧化物酶基因同源性最高 ,在核苷酸水平上一致性为 87% ,在氨基酸水平上一致性为 89%。Southern杂交表明APX基因在盐地碱蓬基因组中只有 1个拷贝。盐 (NaCl 40 0mmol/L)处理不同时间后的Northern杂交分析表明盐地碱蓬中SsAPX基因在盐胁迫下表达量增加 ,而且在盐胁迫下抗坏血酸过氧化物酶的活性也显著地增加 ,说明该基因受盐诱导。 展开更多
关键词 盐地碱蓬 cdna APX 活性氧 盐胁迫
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水稻葡萄糖-6-磷酸脱氢酶cDNA的电子克隆 被引量:35
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作者 黄骥 王建飞 +4 位作者 张红生 曹雅君 林长发 王东 杨金水 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1012-1016,共5页
电子克隆是基因克隆的新策略。以小麦胞质葡萄糖 6 磷酸脱氢酶cDNA (Tagpdl克隆 )序列为信息探针 ,在GenBank水稻nr数据库中找到高度同源的水稻基因组序列 ,通过人工序列拼接及RT PCR确认得到了水稻该基因的全长cDNA序列 ,命名为OsG6PD... 电子克隆是基因克隆的新策略。以小麦胞质葡萄糖 6 磷酸脱氢酶cDNA (Tagpdl克隆 )序列为信息探针 ,在GenBank水稻nr数据库中找到高度同源的水稻基因组序列 ,通过人工序列拼接及RT PCR确认得到了水稻该基因的全长cDNA序列 ,命名为OsG6PDH。OsG6PDH与小麦Tagpdl克隆的DNA一致率为 88% ,推导的氨基酸序列与小麦、番茄、烟草的胞质葡萄糖 6 磷酸脱氢酶基因的一致率分别为 89%、79%、80 %。经RT PCR表达谱分析 ,OsG6PDH在水稻幼穗、胚、根、叶中都有表达 ,在幼穗与根中表达略高。另外 。 展开更多
关键词 水稻 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 cdna 电子克隆
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冬小麦春化作用相关基因的cDNA分子克隆研究 被引量:20
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作者 种康 谭克辉 +1 位作者 黄华樑 梁厚果 《中国科学(B辑)》 CSCD 北大核心 1994年第9期964-970,共7页
以春化处理冬小麦幼苗cDNA为起始材料,通过与对照冬小麦幼苗mRNA进行减法杂交构建富集冬小麦低温诱导cDNA文库,以对照和脱春化幼苗cDNA及春化幼苗cDNA为探针,采用差异杂交技术筛选得到春化相关cDNA克隆,将插入片段用PCR方法扩增后亚克隆... 以春化处理冬小麦幼苗cDNA为起始材料,通过与对照冬小麦幼苗mRNA进行减法杂交构建富集冬小麦低温诱导cDNA文库,以对照和脱春化幼苗cDNA及春化幼苗cDNA为探针,采用差异杂交技术筛选得到春化相关cDNA克隆,将插入片段用PCR方法扩增后亚克隆于pUC19载体的BamHⅠ和HindⅢ位点,用此插入cDNA作探针,与对照和春化组mRNA作Northern blotting分析表明为冬小麦春化作用相关基因的cDNA克隆,包含verc203序列的mRNA大约为2.6kb。 展开更多
关键词 冬小麦 春化作用 基因 cdna 克隆
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人食管癌相关基因cDNA片段的克隆与初步鉴定 被引量:39
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作者 苏涛 刘海玲 +3 位作者 陆士新 赵新吉 周春晓 金顺钱 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期254-257,共4页
目的分离人原发性食管组织中新的相关基因,揭示食管癌的易感性与癌变原理。方法用高效、灵敏的mRNA差异显示技术,以2例正常食管上皮、1例癌旁上皮、2例高癌家族的食管癌组织互为对照,通过对其基因表达的比较,找出差异条带,... 目的分离人原发性食管组织中新的相关基因,揭示食管癌的易感性与癌变原理。方法用高效、灵敏的mRNA差异显示技术,以2例正常食管上皮、1例癌旁上皮、2例高癌家族的食管癌组织互为对照,通过对其基因表达的比较,找出差异条带,进行RTPCR鉴定和DNA序列分析。结果(1)在实验中,分离、鉴定了18个差异片段,其中包括正常组织表达而肿瘤不表达的正常食管基因(normalesophagealgene,NEG)13个,肿瘤表达而正常组织不表达的突变食管基因(mutatedesophagealgene,MEG)5个。(2)4个NEG片段在GenBank数据库中没有发现同源的已知基因或片段,将其分别命名为食管癌相关基因1~4(esophagealcancerrelatedgene,ECRG1~4)。(3)其他14个cDNA片段分别与GenBank中的12个已知基因或片段同源,这些基因在食管癌中的作用还有待于进一步研究。(4)通过RTPCR鉴定,已初步证明上述4个ECRG片段在正常食管上皮组织和食管癌中的表达有差异。(5)通过对7个人正常组织的cDNA文库检测表明,这4个ECRG片段在胎脑、成人脑、肝、肾、睾丸、骨髓及骨胳肌? 展开更多
关键词 食管肿瘤 基因表达 cdna MRNA 聚合酶链反应
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豇豆胰蛋白酶抑制剂cDNA在大肠杆菌中的克隆与表达 被引量:38
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作者 刘春明 朱祯 +2 位作者 周兆斓 孙宝林 李向辉 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期152-157,共6页
从即将成熟的豇豆子叶中分离出总RNA,逆转录合成cDNA第一条链。参照已知的几种Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂基因序列,设计并合成了两段寡核苷酸引物,以单链cDNA为模板,进行PCR扩增,得到320bp的均一扩增产物,克隆到pBluescrip SK(+)的Ec... 从即将成熟的豇豆子叶中分离出总RNA,逆转录合成cDNA第一条链。参照已知的几种Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂基因序列,设计并合成了两段寡核苷酸引物,以单链cDNA为模板,进行PCR扩增,得到320bp的均一扩增产物,克隆到pBluescrip SK(+)的EcoRV位点上并转化大肠杆菌JM101。酶切图谱及DNA序列分析表明克隆到的片段含有编码完整80个aa的豇豆胰蛋白酶抑制剂结构基因和一段编码27aa的前导序列。利用限制酶NcoI对其前导序列进行缺失,只保留成熟蛋白结构基因上游第一个ATG密码子并克隆到大肠杆菌表达载体pKK233-2中进行表达研究,从转化细菌的提取物中检测到了外源CpTI基因表达产物对胰蛋白酶的抑制活力。 展开更多
关键词 豇豆 胰蛋白酶 抑制剂
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利用Lfy cDNA转化猕猴桃的研究 被引量:22
18
作者 郭卫东 沈向 +1 位作者 李嘉瑞 郑学勤 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期116-117,共2页
利用促进早实性状的LfycDNA转化猕猴桃,建立了猕猴桃遗传转化体系。经过点杂交检测初步证实,采用农杆菌菌株LBA4404介导的叶盘法转化猕猴桃,将LfycDNA导入猕猴桃基因组中。
关键词 猕猴桃 LFY cdna 遗传转化
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肝再生增强因子的cDNA克隆、表达及表达产物的生物活性研究 被引量:32
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作者 杨晓明 谢玲 +3 位作者 邱兆华 宫锋 吴祖泽 贺福初 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第2期130-135,共6页
以肝部分切除后再生肝组织为起始材料,利用RT-PCR扩增出大鼠肝再生增强因子(ALR),亚克隆于pGEM-T载体,核苷酸序列测定证实为大鼠ALR;将ALRcDNA亚克隆于pBV220质粒,构建了原核表达栽体,并获高效表达菌株,特异表达蛋白占细菌总... 以肝部分切除后再生肝组织为起始材料,利用RT-PCR扩增出大鼠肝再生增强因子(ALR),亚克隆于pGEM-T载体,核苷酸序列测定证实为大鼠ALR;将ALRcDNA亚克隆于pBV220质粒,构建了原核表达栽体,并获高效表达菌株,特异表达蛋白占细菌总蛋白的15%,原核表达的ALR在体外缺乏促进大鼠原代培养肝细胞及SMMC-7721肝癌细胞DNA合成的活性,但在体内1/3肝部分切除模型中可刺激肝细胞DNA合成;ALR在生物学活性方面与肝脏刺激物(HSS)存在一定差别,ALR和HSS应是两种不同的活性因子.ALR还具有促肝损伤修复的作用,对其深入研究可能为临床治疗严重肝病提供有效的药物. 展开更多
关键词 肝再生增强因子 cdna 克隆 表达 表达产物
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中国人庚型肝炎病毒全基因cDNA克隆及序列测定 被引量:33
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作者 周育森 陈薇 +4 位作者 赵秋敏 赵惠柳 张京生 徐静 王海涛 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 1996年第4期249-254,共6页
首次报道了中国人庚型肝炎病毒(HGV)全基因cDNA的克隆及序列测定。中国庚型肝炎病毒(HGVC964)基因全长为9128个核苷酸,编码一个长度为2870个氨基酸残基的多聚前体蛋白。5端有一个367bp的非翻译区,3... 首次报道了中国人庚型肝炎病毒(HGV)全基因cDNA的克隆及序列测定。中国庚型肝炎病毒(HGVC964)基因全长为9128个核苷酸,编码一个长度为2870个氨基酸残基的多聚前体蛋白。5端有一个367bp的非翻译区,3端长度为147个核苷酸。基因组中G+C占59.93%。该株病毒(HGVC964)与国外报道的3株HGV序列比较,核苷酸同源性为84.0%~89.9%,氨基酸同源性均大于91%。 展开更多
关键词 庚型肝炎 病毒 cdna 克隆 序列测定
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