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鉴定水稻品种的微卫星标记筛选 被引量:82
1
作者 施勇烽 应杰政 +2 位作者 王磊 朱智伟 庄杰云 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期195-201,共7页
选用58个水稻微卫星标记,对目前应用较广的28份杂交水稻亲本材料进行多态性分析,并比较了其中14个标记应用3.0%琼脂糖凝胶电泳和6.0%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测结果。研究表明,所应用的标记可将所有供试水稻材料区分开,不同标记的... 选用58个水稻微卫星标记,对目前应用较广的28份杂交水稻亲本材料进行多态性分析,并比较了其中14个标记应用3.0%琼脂糖凝胶电泳和6.0%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测结果。研究表明,所应用的标记可将所有供试水稻材料区分开,不同标记的多态性检测能力差异较大;两种检测方法所得结果高度一致,但非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨率较高、带型清晰,能更准确反映水稻材料间的差异。对于一般水稻材料而言,选用12个标记可将不同材料区别开的几率大于99.9%,但要区分遗传相似性较高的材料,则可能需挑选高多态性标记和(或)增加检测的标记数。 展开更多
关键词 变性丙烯酰胺凝胶电泳 标记筛选 水稻品种 鉴定 微卫星标记 多态性分析 琼脂糖凝胶 多态性标记 遗传相似性 亲本材料 杂交水稻 检测结果 检测能力 检测方法 应用 分辨率 选用 挑选
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中国人并多指(趾)畸形家系中HOXD13基因突变及产前诊断 被引量:16
2
作者 赵秀丽 孟金萍 +4 位作者 孙淼 敖杨 吴爱华 罗会元 张学 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期5-9,共5页
目的对中国山东一个并多指(趾),又称型并指(趾),畸形大家系进行致病基因突变的鉴定,确定中国人并多指(趾)畸形家系中是否存在HOXD13基因突变;通过检测突变HOXD13基因对高危胎儿进行产前基因诊断。方法根据家族史、临床体征和手足X线检... 目的对中国山东一个并多指(趾),又称型并指(趾),畸形大家系进行致病基因突变的鉴定,确定中国人并多指(趾)畸形家系中是否存在HOXD13基因突变;通过检测突变HOXD13基因对高危胎儿进行产前基因诊断。方法根据家族史、临床体征和手足X线检查进行临床诊断;采集家系成员外周血标本及受检孕妇羊水和绒毛标本,常规提取基因组DNA;设计并合成1对特异引物,通过PCR扩增HOXD13基因第1外显子内多聚丙氨酸链编码序列;PCR扩增片段经琼脂糖凝胶电泳检测,异常扩增片段经TA克隆后测序鉴定;产前诊断中,通过PCR扩增、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染检查HOXD13基因内及基因两侧共3个微卫星多态标记进行单体型分析。结果本家系4代54人,患者16人(男6人,女10人);手足共同表现为3/4完全并指伴软组织蹼内多指,4/5并趾伴软组织蹼内多趾;外显率为100%,表现度变异明显。上述表现符合典型常染色体显性并多指(趾)的表型特征。对家系中18人(患者9人)进行HOXD13基因分析,结果显示全部患者多聚丙氨酸链中丙氨酸残基数由正常的15个延长为24个。通过HOXD13基因多聚丙氨酸链延展突变检测和单体型分析,对家系中1女性患者两次怀孕进行产前诊断,发现胎儿均携带突变HOXD13基因。结论首次在中国人典型并多指(趾) 展开更多
关键词 家系 基因突变 产前诊断 患者 畸形 胎儿 单体型 PCR扩增 银染 变性丙烯酰胺凝胶电泳
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海马中56kD蛋白诱导人神经干细胞迁移的作用 被引量:13
3
作者 陈蓉 金国华 +4 位作者 田美玲 朱蕙霞 秦建兵 谭雪锋 徐慧君 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期372-376,共5页
为了探讨切割海马伞后的海马和正常海马在蛋白表达方面的差异,获取海马中具有生物活性的特异蛋白,并观察其对人胚神经干细胞迁移的影响,取切割SD大鼠海马伞后10、14、20d及正常海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE)。将用无血... 为了探讨切割海马伞后的海马和正常海马在蛋白表达方面的差异,获取海马中具有生物活性的特异蛋白,并观察其对人胚神经干细胞迁移的影响,取切割SD大鼠海马伞后10、14、20d及正常海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE)。将用无血清培养技术获取的人胚神经干细胞球分别与切割海马伞后14d海马和正常海马的56kD差异蛋白胶条及空白对照胶条共培养,观察神经干细胞球中神经干细胞迁移情况,第3d时计数朝胶条方向1/4扇区内的迁出细胞数。结果显示,切割后各天组和正常组比较见多条差异蛋白条带,其中56kD差异蛋白的密度积分正常组最低,10d组和20d组较高,14d组最高。神经干细胞球中向56kD差异蛋白胶条方向迁移的细胞数在切割组最多,正常组次之,对照组最少。提示切割海马伞后的海马与正常海马间存在多种差异蛋白,其中56kD蛋白在切割海马伞后14d表达量最高,并具有诱导神经干细胞迁移的作用。 展开更多
关键词 海马 56kD蛋白 人神经干细胞 细胞迁移 变性丙烯酰胺凝胶电泳 诱导作用
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几种鲑鳟鱼血清蛋白非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的研究 被引量:11
4
作者 杨贵强 徐绍刚 +2 位作者 王建 高云奇 王占全 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期1068-1072,共5页
采用非变性聚丙烯凝胶电泳的方法分析了硬头鳟、金鳟、虹鳟、北极红点鲑和溪红点鲑血清蛋白的组成成分及其含量。结果显示,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者之间的遗传距离最小,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的遗传距离最大;硬头鳟、金鳟和... 采用非变性聚丙烯凝胶电泳的方法分析了硬头鳟、金鳟、虹鳟、北极红点鲑和溪红点鲑血清蛋白的组成成分及其含量。结果显示,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者之间的遗传距离最小,硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的遗传距离最大;硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与北极红点鲑处于同一亚组,而溪红点鲑独处于另一亚组。研究结果表明硬头鳟、金鳟和虹鳟三者与溪红点鲑的亲缘关系远于与北极红点鲑的关系;同时还表明,以聚丙烯酰胺凝胶电泳分析鲑鳟鱼血清蛋白的方法简单易行、重复性好。本研究结果对鲑鳟鱼的种属鉴定、良种选育、品种改良和遗传结构分析提供了试验依据;虹鳟的繁养殖需进一步规范化和标准化,减少蛋白遗传基因的流失,从根本上预防大规模疾病的暴发。 展开更多
关键词 硬头鳟 金鳟 虹鳟 北极红点鲑 溪红点鲑 血清蛋白 变性丙烯酰胺凝胶电泳
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地衣芽孢杆菌产碱性蛋白酶发酵条件优化 被引量:10
5
作者 孙倩 陈复生 +1 位作者 丁长河 薛静玉 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期174-177,192,共5页
碱性蛋白酶是一类重要的工业用酶,广泛应用于洗涤、制革、酿造等行业,发挥着重要作用。为提高地衣芽孢杆菌的产酶活力,在单因素实验的基础上,采用3因素3水平的响应面分析法,以蛋白酶活力为响应值,对影响地衣芽孢杆菌20203产碱性蛋白酶... 碱性蛋白酶是一类重要的工业用酶,广泛应用于洗涤、制革、酿造等行业,发挥着重要作用。为提高地衣芽孢杆菌的产酶活力,在单因素实验的基础上,采用3因素3水平的响应面分析法,以蛋白酶活力为响应值,对影响地衣芽孢杆菌20203产碱性蛋白酶的因素进行研究分析,得到了最佳发酵条件为:葡萄糖1.5%,豆粕6%,乳糖4%,磷酸铵1.2%,KCl 0.03%,CaCl2 0.07%,MgSO4 0.02%,吐温80 0.05%,初始pH9.0,培养温度37℃,摇瓶转速300r/min,5d后发酵液酶活为2382u/mL。通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法得到该蛋白酶的分子量为35ku。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 碱性蛋白酶 响应面分析法 变性丙烯酰胺凝胶电泳
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切割海马伞海马中56kD差异蛋白的质谱分析 被引量:8
6
作者 朱蕙霞 秦建兵 +2 位作者 田美玲 陈蓉 金国华 《南通大学学报(医学版)》 2006年第6期408-410,413,共4页
目的:探讨切割海马伞海马中具有生物活性的56kD差异蛋白的组成成份及其功能。方法:切割SD大鼠海马伞后14d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对56kD差异蛋白进行检测和功... 目的:探讨切割海马伞海马中具有生物活性的56kD差异蛋白的组成成份及其功能。方法:切割SD大鼠海马伞后14d海马进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(NativePAGE),应用电喷雾质谱分析、蛋白质数据库和文献分析等方法对56kD差异蛋白进行检测和功能分析。结果:质谱分析找到了33组肽段,这些蛋白按照其功能可以分为:细胞骨架蛋白、参与代谢的酶、信号传递、蛋白降解、核酸水解、氧化应激、神经递质运输、突触形成、功能未知蛋白。结论:切割海马伞海马中56kD差异蛋白中含有功能涉及神经干细胞迁移、分化的蛋白质。 展开更多
关键词 56 kD蛋白 切割海马伞 海马 变性丙烯酰胺凝胶电泳 质谱分析
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高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的优化 被引量:7
7
作者 许丽 李玥莹 +3 位作者 邹剑秋 林凤 许昕 陶思源 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第2期328-329,共2页
以高粱抗、感丝黑穗病3号生理小种部分品种(S95062B、7050B、2381R、LR625;622A、622B、矮4)为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行抗病基因的引物筛选。通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个高粱微卫星非... 以高粱抗、感丝黑穗病3号生理小种部分品种(S95062B、7050B、2381R、LR625;622A、622B、矮4)为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行抗病基因的引物筛选。通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个高粱微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系:电泳时间为92~105min;银染温度为27.8~29.0℃;显色温度为32℃左右。 展开更多
关键词 高粱 微卫星 变性丙烯酰胺凝胶电泳 银染
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绵羊乳与其他乳种营养成分及乳清蛋白组分差异性分析 被引量:7
8
作者 吴仪凡 葛武鹏 +5 位作者 刘凯茹 宋宇轩 赵丽丽 张文博 王雨馨 梁秀珍 《乳业科学与技术》 2019年第6期1-5,共5页
为研究绵羊乳与其他乳种之间营养成分及乳清蛋白组分的差异性,以山羊乳、牛乳、人乳为对照,分析不同泌乳阶段的湖羊乳、东佛里生羊乳及其杂交一代羊乳的乳清蛋白组成差异,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate... 为研究绵羊乳与其他乳种之间营养成分及乳清蛋白组分的差异性,以山羊乳、牛乳、人乳为对照,分析不同泌乳阶段的湖羊乳、东佛里生羊乳及其杂交一代羊乳的乳清蛋白组成差异,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)和非变性-PAGE(Native-PAGE)分析标志性差异蛋白。结果表明:不同品种、不同泌乳阶段绵羊乳之间以及不同乳种之间的蛋白质、脂肪、乳糖等宏量营养素含量存在显著差异(P<0.05),含量变化呈现趋势性;SDS-PAGE分析表明,绵羊乳和人乳的标志性差异蛋白为β-乳球蛋白和乳铁蛋白,绵羊乳和山羊乳的标志性差异蛋白为α-乳白蛋白,绵羊乳和牛乳的标志性差异蛋白为免疫球蛋白G重链;Native-PAGE分析表明,绵羊乳与山羊乳乳清蛋白之间存在1条差异性条带,绵羊乳与人乳、牛乳乳清蛋白之间存在3条差异性条带。 展开更多
关键词 绵羊乳 营养成分 乳清蛋白 十二烷基硫酸钠-丙烯酰胺凝胶电泳 变性丙烯酰胺凝胶电泳
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非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳在大鼠海马组织蛋白分离中的应用 被引量:5
9
作者 朱蕙霞 陈蓉 +2 位作者 金国华 秦建兵 田美玲 《南通医学院学报》 2003年第4期373-374,共2页
目的 :探索应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离大鼠海马组织蛋白的最佳条件。方法 :选用不同 p H的正极缓冲液和样品蛋白上样量 ,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离大鼠海马组织蛋白质。结果 :在其它条件不变的情况下 ,p H9.0的正极电泳... 目的 :探索应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离大鼠海马组织蛋白的最佳条件。方法 :选用不同 p H的正极缓冲液和样品蛋白上样量 ,应用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离大鼠海马组织蛋白质。结果 :在其它条件不变的情况下 ,p H9.0的正极电泳缓冲液以及 40~ 6 0 μg/孔样品蛋白上样量时 ,可得到分辨率高、条带多而清晰的电泳图谱。结论 :应用 p H9.0的正极电泳缓冲液和样品上样量为 40~ 6 0 μg/孔时 ,进行非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,可成功地分离大鼠海马组织蛋白。 展开更多
关键词 变性丙烯酰胺凝胶电泳 海马组织蛋白 正极电泳缓冲液pH 样品蛋白上样量
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木薯SSR标记非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的优化 被引量:6
10
作者 吉家敏 夏志强 +1 位作者 邹枚伶 王文泉 《现代农业科学》 2009年第6期34-36,共3页
以木薯品种为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行木薯重要农艺性状基因的引物筛选。通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个木薯微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系:TEMED用量为80μL,10%AP用量为1 20... 以木薯品种为材料,利用微卫星标记结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行木薯重要农艺性状基因的引物筛选。通过比较各因子对电泳体系的影响,建立了一个木薯微卫星非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的优化体系:TEMED用量为80μL,10%AP用量为1 200μL,电泳时间为60~90 min。 展开更多
关键词 木薯 SSR标记 变性丙烯酰胺凝胶电泳
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三种CRISPR/Cas9基因敲除变异检测方法的比较分析 被引量:6
11
作者 唐国盘 黄安群 +3 位作者 孙志鹏 匡友谊 王胜杰 王大伟 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2019年第2期20-26,共7页
比较三种常用的CRISPR/Cas9基因敲除检测变异方法,从准确性、耗时、成本和应用限制等方面进行评估。采用T7核酸内切酶I、限制性内切酶和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别对利用CRISPR/Cas9方法敲除的fibinb和ngs基因的50尾斑马鱼(Danio r... 比较三种常用的CRISPR/Cas9基因敲除检测变异方法,从准确性、耗时、成本和应用限制等方面进行评估。采用T7核酸内切酶I、限制性内切酶和非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法分别对利用CRISPR/Cas9方法敲除的fibinb和ngs基因的50尾斑马鱼(Danio rerio)突变纯合个体和突变杂合个体进行检测,用野生型个体作对照;同时用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对CRISPR/Cas9方法敲除的ogn和ddb1基因的突变杂合个体进行了检测。结果表明:三种方法均能够区分突变杂合个体,其中T7核酸内切酶I检测法耗时最短,但该方法不能用于鉴定突变纯合个体;限制性内切酶检测法能够用于鉴定纯合个体,但需要有特异性的识别位点;非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法能够区分纯合和杂合个体,对序列无依赖性,能够检测出序列中存在的所有变异。成本上,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法最经济;限制性内切酶的价格存在较大的差异,因此检测成本依赖于酶的价格。三种检测方法各有优缺点,在应用实践中可根据试验需要选择合适的方法。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 T7核酸内切酶Ⅰ 限制性内切酶 变性丙烯酰胺凝胶电泳 检测
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聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴别哈蟆油药材及其伪品 被引量:5
12
作者 黄瑶 常乐 +1 位作者 张思雯 袁丹 《沈阳药科大学学报》 CSCD 北大核心 2017年第12期1049-1054,1083,共7页
目的建立哈蟆油与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油水溶性蛋白的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electr... 目的建立哈蟆油与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油水溶性蛋白的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-polyacrylamide gel electrophoresis,Native-PAGE)和十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)鉴别方法,并对2种电泳方法进行比较。方法采用Native-PAGE和SDS-PAGE两种电泳系统,分别对不同产地哈蟆油与其伪品的水溶性蛋白的组成及其分子量分布范围进行比较研究。结果 Native-PAGE实验结果显示:哈蟆油与桓仁林蛙油均具有6条特征谱带,黑龙江林蛙油具有5条特征谱带,而蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的特征谱带数目分别为2条、1条和1条。SDS-PAGE实验结果显示:哈蟆油、黑龙江林蛙油和桓仁林蛙油均具有11条特征谱带,而蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油的特征谱带数目分别为5条、6条和6条。2种电泳图谱中,哈蟆油等正品药材与伪品蟾蜍油、牛蛙油和青蛙油在特征谱带位置等特征上有明显区别。结论 Native-PAGE和SDS-PAGE两种电泳方法均可用于哈蟆油与类似品和伪品的鉴别,为哈蟆油质量评价和控制方法提供了一种简易的鉴别方法。 展开更多
关键词 哈蟆油 鉴别 伪品 变性丙烯酰胺凝胶电泳 十二烷基硫酸钠-丙烯酰胺凝胶电泳
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甜菜SSR扩增产物不同检测方法的比较研究 被引量:5
13
作者 邹奕 刘乃新 +2 位作者 马龙彪 吴则东 李红侠 《中国农学通报》 2018年第35期44-47,共4页
利用16对甜菜SSR引物对12个不同的甜菜品种进行扩增,分别采用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、3%的Metaphor琼脂糖电泳以及3%的普通琼脂糖电泳对SSR扩增产物进行检测,比较不同检测结果的差异性。结果表明:8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶分辨... 利用16对甜菜SSR引物对12个不同的甜菜品种进行扩增,分别采用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、3%的Metaphor琼脂糖电泳以及3%的普通琼脂糖电泳对SSR扩增产物进行检测,比较不同检测结果的差异性。结果表明:8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶分辨细小条带的差异远高于3%的Metaphor琼脂糖和普通琼脂糖,而Metaphor琼脂糖的分辨率高于普通琼脂糖;但对于条带较少的引物,3种凝胶未显现出差异;对于条带数较多的引物,如果条带比较集中,3种检测方法差异显著,如果条带比较分散,3种凝胶之间的差异较小。由于Metaphor琼脂糖价格偏高、胶软不易操作且分辨率低于聚丙烯酰胺凝胶,因此不建议使用。而8%的聚丙烯酰胺凝胶则适合于指纹图谱的构建以及遗传多样性分析等,普通琼脂糖可以应用在品种纯度的鉴定。 展开更多
关键词 甜菜 SSR 琼脂糖凝胶电泳 变性丙烯酰胺凝胶电泳 指纹图谱
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HOXD8基因多态性与先天性髋脱位传递不平衡的初步研究 被引量:3
14
作者 卢瑶 麻宏伟 +4 位作者 李祁伟 吉士俊 姜俊 王岳平 王阳 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期108-109,共2页
目的研究HOXD8基因是否与先天性髋脱位相关联。方法在肢体胚胎发育调控相关的HOXD8基因内选择二核苷酸重复序列多态性作为遗传标记,采用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对101例先天性髋脱位核心家系的303名成员进行基因型检... 目的研究HOXD8基因是否与先天性髋脱位相关联。方法在肢体胚胎发育调控相关的HOXD8基因内选择二核苷酸重复序列多态性作为遗传标记,采用聚合酶链反应及变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对101例先天性髋脱位核心家系的303名成员进行基因型检测和传递不平衡检验。结果在HOXD8基因内的遗传标记位点上共检测出16个等位基因。经传递不平衡检验分析后显示HOXD8基因内的遗传标记位点的第4个等位基因与先天性髋脱位存在传递不平衡(χ2=6.461,P<0.05)。结论HOXD8基因可能与先天性髋脱位存在关联。 展开更多
关键词 先天性髋脱位 传递不平衡检验 基因多态性 等位基因 初步研究 分析后 核心家系 体胚 遗传标记 变性丙烯酰胺凝胶电泳
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良性家族性婴儿惊厥疾病基因的位点异质性研究 被引量:2
15
作者 周军卫 李晓文 +4 位作者 黄希顺 陈辉 宋国英 魏建科 卢宏 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期513-515,共3页
目的 研究 5个良性家族性婴儿惊厥 (benign familial infantile convulsion,BFIC)家系的疾病基因与BFIC位点的连锁关系以及是否存在疾病基因位点异质性。方法 选择 D19S2 45、D19S2 50、D16S3 13 1、D16S3 13 3、D2 S3 99、D2 S2 3 3 ... 目的 研究 5个良性家族性婴儿惊厥 (benign familial infantile convulsion,BFIC)家系的疾病基因与BFIC位点的连锁关系以及是否存在疾病基因位点异质性。方法 选择 D19S2 45、D19S2 50、D16S3 13 1、D16S3 13 3、D2 S3 99、D2 S2 3 3 0等 6个 STR作为 DNA标记 ,应用聚合酶链反应 (PCR)、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)和银染技术 ,采用 L INKAGE软件包中的 ML INK程序及遗传分析程序 HOMOGM对 5个 BFIC家系进行连锁分析和位点异质性检测。结果 连锁分析结果显示 ,在 AD模式下 ,标记位点 D19S2 50处 ,家系 2、3、5在重组率为 0 .0 0 0 ,外显率为 90 %时 ,获得最大两点 L OD值总和为 2 .151;标记位点 D16S3 13 1处 ,家系 2、5在重组率为 0 .0 85,外显率为 70 %、60 %时 ,获得最大两点 L OD值分别为 1.0 56、1.155,提示这两个位点与疾病基因可能存在连锁关系。在其它位点处未获得提示连锁关系的信息。异质性检测显示 ,BFIC家系之间存在位点异质性。结论  BFIC致病基因可能与 D19S2 50或 D16S3 13 1存在连锁关系 ,BFIC存在位点异质性。 展开更多
关键词 良性家族性婴儿惊厥 基因 位点异质性 合酶链反应 变性丙烯酰胺凝胶电泳 银染技术
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采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化PCR产物的观察 被引量:3
16
作者 张海添 陆云飞 +5 位作者 李卫 李辰生 唐卫中 林伟雄 陈剑锋 金琪 《广西医科大学学报》 CAS 2003年第6期894-896,共3页
目的 :观察采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化目的 PCR产物的效果。方法 :使用不同的 31对引物 ,4 5例标本行 PCR扩增出不同的目的 DNA片段 ,将每一份 PCR产物分为 2份 ,其中 1份直接测序 ,为对照组 ;另 1份则做非变性聚丙烯酰胺凝胶电... 目的 :观察采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化目的 PCR产物的效果。方法 :使用不同的 31对引物 ,4 5例标本行 PCR扩增出不同的目的 DNA片段 ,将每一份 PCR产物分为 2份 ,其中 1份直接测序 ,为对照组 ;另 1份则做非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,以分离出的目的 DNA片段单链为模板行 2次 PCR,对 2次 PCR产物测序 ,此为实验组。结果 :实验组只有 4例不能被测序仪判读 (4 / 4 5 ) ,而对照组有 2 4例不能被测序仪判读 (2 4 / 4 5 ) ,两组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1 )结论 :根据单链DNA片段形成构象的不同来纯化 展开更多
关键词 变性丙烯酰胺凝胶电泳 纯化 PCR产物 测序 癌组织
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半胱氨酸合成酶与β-氰基丙氨酸合成酶活性检测 被引量:4
17
作者 焦成瑾 赵菲佚 +2 位作者 谢尚强 袁毅君 杨玲娟 《氨基酸和生物资源》 CAS 2014年第4期66-72,共7页
植物半胱氨酸合成酶(Cysteine synthase,CSase)和β-氰基丙氨酸合成酶(β-cyanoalanine synthase,β-CAS)分别催化合成半胱氨酸(Cysteine,Cys)和β-氰基丙氨酸(β-Cyanoalanine,β-CA),它们在功能上冗余。本研究以山黧豆、苜蓿和玉米为... 植物半胱氨酸合成酶(Cysteine synthase,CSase)和β-氰基丙氨酸合成酶(β-cyanoalanine synthase,β-CAS)分别催化合成半胱氨酸(Cysteine,Cys)和β-氰基丙氨酸(β-Cyanoalanine,β-CA),它们在功能上冗余。本研究以山黧豆、苜蓿和玉米为主要材料,结合电泳对8种常见植物CSase和β-CAS粗酶活性进行了分析。结果表明,检测CSase活性时,8种植物两类粗酶的最适反应时间均为10min,最适pH均为8.0,底物O-乙酰-丝氨酸和Na2S最适浓度分别是10和5 mmol·L-1。检测β-CAS活性时,8种植物两类粗酶的最适反应时间均为30min,最适pH均在9~10范围内,底物Cys最适浓度均为3mmol·L-1,而底物KCN最适浓度前者为80mmol·L-1,后者为3mmol·L-1。8种植物中,CSase活性在种、种内组织间差别不是很大,但β-CAS活性则相反,尤其在茎叶和根中差别较大。 展开更多
关键词 L-半胱氨酸合成酶 β-氰基丙氨酸合成酶 酶活性 变性丙烯酰胺凝胶电泳
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鸡柔嫩艾美耳球虫石家庄多重耐药虫株差异基因的表达 被引量:3
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作者 李佩国 张艳英 +3 位作者 贾青辉 张香斋 李蕴玉 张文香 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1373-1377,共5页
采用Trizol试剂法提取鸡柔嫩艾美耳球虫石家庄多重耐药虫株的总RNA,利用3种锚定引物和20种随机引物进行RT-PCR,产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染,共回收10条差异条带,进行2次PCR扩增,产物回收后与pMDTM18-T Vector连接转化,再进行斑... 采用Trizol试剂法提取鸡柔嫩艾美耳球虫石家庄多重耐药虫株的总RNA,利用3种锚定引物和20种随机引物进行RT-PCR,产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染,共回收10条差异条带,进行2次PCR扩增,产物回收后与pMDTM18-T Vector连接转化,再进行斑点杂交试验、序列分析和同源性比较。结果表明,石家庄多重耐药性虫株的mRNA的S116序列与GenBank和Sanger上已发表的柔嫩艾美耳球虫第1段染色体上882bp长的序列同源性达99%,为未知蛋白。这为克隆全长cDNA和探索球虫耐药性产生的分子机理奠定了基础。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 差异显示PCR 变性丙烯酰胺凝胶电泳 基因克隆
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SSR标记小麦抗白粉病基因变性凝胶电泳体系的优化 被引量:3
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作者 孙现军 郑炜君 +2 位作者 徐军飞 柴守诚 瞿利英 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期49-53,共5页
为寻找适合SSR标记定位小麦抗白粉病基因的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的理想体系。主要研究Arc+Bis占凝胶的质量浓度、Arc/Bis质量比、上样量、电泳电压及染色等因素对变性聚丙烯酰胺凝胶电泳效果的影响。结果表明电泳效果较好的体系为:凝... 为寻找适合SSR标记定位小麦抗白粉病基因的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的理想体系。主要研究Arc+Bis占凝胶的质量浓度、Arc/Bis质量比、上样量、电泳电压及染色等因素对变性聚丙烯酰胺凝胶电泳效果的影响。结果表明电泳效果较好的体系为:凝胶中Arc+Bis 60g/L、m(Arc)∶m(Bis)=29∶1、上样量5μL(含φ=20%的6×loading dye)、1 500V恒压、强碱法染色。此变性凝胶电泳体系下得到的图谱较为清晰。 展开更多
关键词 变性丙烯酰胺凝胶电泳 SSR 银染
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单链DNA纯化对变性PAGE凝胶银染片段回收效率的提高 被引量:3
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作者 史金铭 孙野青 《生物学杂志》 CAS CSCD 2009年第5期74-76,共3页
为了提高变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染后片段回收的效率,本实验在传统的煮沸法的基础上加入单链DNA纯化的步骤对水稻基因组CCGG为点甲基化敏感限制性酶切多态性(MSAP)分析片段进行回收,并对加入该步骤后的再扩增的效率与传统煮沸... 为了提高变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染后片段回收的效率,本实验在传统的煮沸法的基础上加入单链DNA纯化的步骤对水稻基因组CCGG为点甲基化敏感限制性酶切多态性(MSAP)分析片段进行回收,并对加入该步骤后的再扩增的效率与传统煮沸法进行了比较。实验结果显示,加入单链DNA纯化步骤后的回收效率比传统煮沸法提高了约6倍。改进后的方法可以有效地用于扩增片段长度多态性(AFLP)以及MSAP等差异显示PAGE凝胶银染DNA片段的回收。 展开更多
关键词 变性丙烯酰胺凝胶电泳 条带回收 银染 MSAP
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