酸性成纤维细胞生长因子在卵巢癌中的表达及其信号传导途径 被引量：16

1

作者 张颐 孙黎光 +4 位作者 尚海 高红 于卉影 高淑梅 刘宁 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期976-980,共5页

目的　探讨酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)在卵巢癌发生发展中的作用及其信号传导机制。方法　应用逆转录 聚合酶链反应技术 (RT PCR)和Western印迹方法对 40例上皮性卵巢癌组织aFGF及其受体FGFR1的表达进行了分析 ;并以不同浓度的aFGF... 目的　探讨酸性成纤维细胞生长因子 (aFGF)在卵巢癌发生发展中的作用及其信号传导机制。方法　应用逆转录 聚合酶链反应技术 (RT PCR)和Western印迹方法对 40例上皮性卵巢癌组织aFGF及其受体FGFR1的表达进行了分析 ;并以不同浓度的aFGF和酪氨酸蛋白激酶 (TPK)抑制剂 genistein诱导卵巢癌细胞株CAOV3细胞 ,利用 [γ 32 P]ATP掺入外源性底物的方法 ,液体闪烁测定蛋白激酶C(PKC)及细胞外信号调节激酶 (ERK)的活性。结果　aFGFmRNA和FGFR1mRNA在上皮性卵巢癌组织中的半定量检测结果分别为 0 981± 0 1 30和 1 0 4 7± 0 1 4 8,与正常卵巢、卵巢瘤样病变及卵巢良性肿瘤相比 ,差异有显著意义 (P <0 0 5) ,且在Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌中的表达水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期 (P <0 0 5) ;Western印迹检测见上皮性卵巢癌组织中aFGF和FGFR1条带均深于正常卵巢组织 ;随着aFGF浓度的增加 ,CAOV3细胞PKC及ERK活性随之升高 ,与aFGF浓度呈剂量依赖效应 ;Genistein抑制细胞内PKC及ERK活性 ,与 genistein浓度亦呈剂量依赖效应。 结论　aFGF与上皮性卵巢癌的发生、发展、浸润呈正相关 ,其受体具有TPK活性 ,TPK激活后可进一步激活PKC和ERK 。 展开更多

关键词 酸性成纤维细胞生长因子 卵巢癌 信号传导途径 逆转录-聚合酶链反应技术 WESTERN印迹法 蛋白激酶C

原文传递

缝隙连接蛋白在心房纤颤患者心房肌的表达及其信号转导途径 被引量：11

2

作者 严卉 陈君柱 +4 位作者 朱建华 倪一鸣 余国伟 胡申江 陶谦民 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期209-213,共5页

目的　探讨缝隙连接蛋白在心房纤颤 (房颤 )心房肌的表达及其信号转导机制。方法　6 3例接受开胸手术患者 (包括慢性房颤、阵发性房颤、窦性心律患者 ) ,手术时取心房组织 ,应用逆转录 聚合酶链反应技术检测心房肌钙调磷酸酶调节亚单位 ... 目的　探讨缝隙连接蛋白在心房纤颤 (房颤 )心房肌的表达及其信号转导机制。方法　6 3例接受开胸手术患者 (包括慢性房颤、阵发性房颤、窦性心律患者 ) ,手术时取心房组织 ,应用逆转录 聚合酶链反应技术检测心房肌钙调磷酸酶调节亚单位 (CalcineurinB)、丝裂原激活的蛋白激酶磷酸酶 1(MKP 1)mRNA表达量 ,采用Western印迹方法 ,检测细胞外调节激酶 1(ERK1)、磷酸化细胞外调节激酶 1(P ERK1)、缝隙连接蛋白 4 0 (Cx4 0 )、缝隙连接蛋白 4 3(Cx4 3)蛋白表达量的改变。结果　慢性房颤、阵发性房颤患者左心房与右心耳组织Cx4 0蛋白表达量 (左心房 :2 2± 0 8,2 2± 0 6 ;右心耳 :2 1± 0 5 ,2 0± 0 8) ,与窦性心律组相比 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 )。慢性房颤、阵发性房颤患者Cx4 3蛋白仅在左房组织表达高于窦性心律瓣膜病组 (3 1± 0 6 ,2 8± 0 7vs 1 0± 0 2 ,P均<0 0 5 )。CalcineurinBmRNA、MKP 1mRNA、P ERK1蛋白在慢性房颤、阵发性房颤患者各组的表达水平均明显高于窦性心律组 (P <0 0 5 )。免疫组化显示慢性房颤、阵发性房颤患者Cx4 0、Cx4 3均分布紊乱 ,聚集于细胞的侧边、胞浆或核周。结论　房颤患者心房肌Cx4 0、Cx4 3蛋白基因表达增高且分布异常 ,可能与ERK1及一些磷酸酶的异? 展开更多

关键词 缝隙连接蛋白 心房纤颤 心房肌 信号转导 逆转录-聚合酶链反应技术 有丝分裂素激活蛋白激酶

原文传递

N型乙酰胆碱受体α10亚基在大鼠内耳耳蜗及前庭中的表达 被引量：2

3

作者 姚琦 孔维佳 +3 位作者 程华茂 吴婷婷 夏交 朱云 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2006年第3期195-197,210,T0002,共5页

目的研究N型乙酰胆碱受体α10亚基在大鼠前庭终器、Scarpa’s神经节、基底膜、螺旋神经节中的表达。方法运用RT-PCR技术分别检测大鼠前庭终器、Scarpa’s神经节、基底膜、螺旋神经节编码N型乙酰胆碱受体α10亚基的基因表达。以大鼠脑组... 目的研究N型乙酰胆碱受体α10亚基在大鼠前庭终器、Scarpa’s神经节、基底膜、螺旋神经节中的表达。方法运用RT-PCR技术分别检测大鼠前庭终器、Scarpa’s神经节、基底膜、螺旋神经节编码N型乙酰胆碱受体α10亚基的基因表达。以大鼠脑组织RNA为阳性对照。结果N型乙酰胆碱受体α10亚基在大鼠前庭终器、基底膜上有表达,在Scarpa’s神经节、螺旋神经节中无表达。结论在前庭终器和基底膜上扩增出标志N型乙酰胆碱受体α10亚基基因表达的PCR产物,为乙酰胆碱是内耳重要的神经递质之一提供了支持,并为N型乙酰胆碱受体在内耳中的传入-传出调节中的作用提供了依据。 展开更多

关键词 N型乙酰胆碱受体α10 耳蜗 前庭 逆转录-聚合酶链反应技术 大鼠

下载PDF 职称材料

愈肾颗粒小复方对大鼠肾小球系膜细胞MMP-3/TIMP-1 mRNA表达的影响 被引量：4

4

作者 丁晓欢 张君 +2 位作者 杨冠琦 张少卿 岳志军 《中国中西医结合肾病杂志》 2010年第5期394-397,I0001,共5页

目的:从基因水平探讨愈肾颗粒不同小复方对肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达的影响,对具有延缓和防治肾小球硬化进程的有效药味探讨其作用机制。方法:将愈肾颗粒折方,并重组为益气活血通... 目的:从基因水平探讨愈肾颗粒不同小复方对肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达的影响,对具有延缓和防治肾小球硬化进程的有效药味探讨其作用机制。方法:将愈肾颗粒折方,并重组为益气活血通络(复方1号)、益气解毒活血(复方2号)、益气活血止血(复方3号)不同小复方。应用血清药理学方法,制取3组中药小复方及正常组的药理血清。采用体外培养法培养大鼠肾小球系膜细胞;应用ELISA法测定10%FBS组及血管紧张素Ⅱ组纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原的含量;采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)观察各组间MMP-3及TIMP-1的mRNA的表达情况。结果:(1)血管紧张素Ⅱ组FN及Ⅳ型胶原的分泌量显著增加,同时与10%FBS组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(2)复方1号组对MMP-3有显著的促进作用,与病理组比较差异有统计学意义(P<0.05)。其余各组虽有促进MMP-3分泌的趋势,但差异无统计学意义。(3)3组小复方对TIMP-1的影响差异无统计学意义。结论:(1)复方1号组有显著的促进MMP-3基因表达的作用。(2)复方1号组通过促进MMP-3的基因表达,从而发挥延缓和防治肾小球硬化的作用。(3)复方2号组与复方3号组对MMP-3的基因表达有促进趋势。 展开更多

关键词 愈肾颗粒 肾小球系膜细胞 逆转录-聚合酶链反应技术 基质金属蛋白酶3 基质金属蛋白酶抑制物1

下载PDF 职称材料

新福菌素对人鼻咽癌细胞株CNE-2凋亡杀伤作用的研究 被引量：2

5

作者 黄金樵 林伟 +4 位作者 林昶 林功标 程金妹 许元腾 李常春 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2009年第3期161-166,共6页

目的探讨新福菌素对人鼻咽癌细胞株CNE-2的体外杀伤效应及作用机制。方法体外培养CNE-2细胞,应用MTT比色法观察新福菌素对CNE-2细胞增殖的抑制作用。倒置显微镜下观察实验组细胞的生长及结构变化,同时采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-P... 目的探讨新福菌素对人鼻咽癌细胞株CNE-2的体外杀伤效应及作用机制。方法体外培养CNE-2细胞,应用MTT比色法观察新福菌素对CNE-2细胞增殖的抑制作用。倒置显微镜下观察实验组细胞的生长及结构变化,同时采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测Bax mRNA基因的表达。结果新福菌素在体外对CNE-2细胞有较强的增殖抑制作用,能诱导CNE-2细胞凋亡;同时进行Bax mRNA基因表达检测发现对照组CNE-2细胞Bax mRNA表达呈弱阳性;实验组CNE-2细胞Bax mRNA表达均呈阳性,且随着新福菌素浓度的增加而逐渐增强。结论新福菌素对CNE-2细胞有明显的杀伤效应,杀伤机制可能是诱导鼻咽癌细胞凋亡,并与凋亡相关基因Bax mRNA表达上调有关。 展开更多

关键词 新福菌素 凋亡 CNE-2细胞 鼻咽肿瘤 Box mRNA 逆转录-聚合酶链反应技术

下载PDF 职称材料

BXSB小鼠肾组织TGFβ的异常表达

6

作者 朱小霞 王美美 +1 位作者 徐雷艇 孙茹蓉 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期445-447,F002,共4页

目的研究转化生长因子β(TGFβ)在狼疮肾炎中的作用。方法比较BXSB狼疮小鼠和BALB/c小鼠24h尿蛋白总量,并用逆转录聚合酶链反应技术(RTPCR)和免疫组织化学方法检测两组小鼠肾组织TGFβmRNA及蛋白表达情况。结果BXSB小鼠24h尿蛋白总量明... 目的研究转化生长因子β(TGFβ)在狼疮肾炎中的作用。方法比较BXSB狼疮小鼠和BALB/c小鼠24h尿蛋白总量,并用逆转录聚合酶链反应技术(RTPCR)和免疫组织化学方法检测两组小鼠肾组织TGFβmRNA及蛋白表达情况。结果BXSB小鼠24h尿蛋白总量明显高于BALB/c小鼠(P<0.01);RT-PCR检测到BXSB小鼠肾组织TGFβmRNA表达较BALB/c小鼠明显升高(P<0.01);免疫组织化学表明BALB/c小鼠仅在少数肾小管有微弱TGFβ表达,而BXSB小鼠肾小球、肾小管及间质均有明显TGFβ蛋白表达。结论TGFβ可能参与介导了狼疮肾炎。 展开更多

关键词 TGFΒ 鼠肾组织 BALB/c小鼠 异常表达 逆转录-聚合酶链反应技术 转化生长因子β(TGF 免疫组织化学方法 RT-PCR检测 24h尿蛋白 BXSB小鼠 mRNA表达 狼疮肾炎 狼疮小鼠 方法比较 表达情况 蛋白表达 肾小管 肾小球

下载PDF 职称材料

NMDA谷氨酸受体NR1亚基在大鼠前庭终器的表达

7

作者 贺海霞 孔维佳 《中华耳科学杂志》 CSCD 2007年第4期442-445,共4页

目的研究NMDA谷氨酸受体NR1亚基在大鼠前庭终器的表达。方法运用RT-PCR技术检测大鼠前庭终器NR1亚基的基因表达。以大鼠脑组织RNA为阳性对照。结果在前庭终器中扩增出标志NMDA谷氨酸受体NR1亚基基因表达的PCR产物,并经测序证实与预计扩... 目的研究NMDA谷氨酸受体NR1亚基在大鼠前庭终器的表达。方法运用RT-PCR技术检测大鼠前庭终器NR1亚基的基因表达。以大鼠脑组织RNA为阳性对照。结果在前庭终器中扩增出标志NMDA谷氨酸受体NR1亚基基因表达的PCR产物,并经测序证实与预计扩增的cDNA片断序列一致。结论NMDA谷氨酸受体NR1亚基在大鼠前庭终器有表达,为谷氨酸作为前庭重要的神经递质之一提供了证据。NMDA谷氨酸受体可能作为自身受体在前庭系统神经信息传递过程中起到正反馈调节作用。 展开更多

关键词 NMDA谷氨酸受体NR1 前庭 逆转录-聚合酶链反应技术 大鼠

下载PDF 职称材料

γ-氨基丁酸受体γ_1亚基在大鼠前庭终器的表达

8

作者 程华茂 孔维佳 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期229-230,共2页

目的:研究γ-氨基丁酸受体γ_1亚基在大鼠前庭终器的表达。方法:运用RT-PCR技术检测大鼠前庭终器编码GABA_A受体亚基的基因表达。以大鼠脑组织RNA为阳性对照。结果:扩增出标志GABA_A受体基因表达的PCR产物。结论:GABA受体γ_1亚基在大... 目的:研究γ-氨基丁酸受体γ_1亚基在大鼠前庭终器的表达。方法:运用RT-PCR技术检测大鼠前庭终器编码GABA_A受体亚基的基因表达。以大鼠脑组织RNA为阳性对照。结果:扩增出标志GABA_A受体基因表达的PCR产物。结论:GABA受体γ_1亚基在大鼠前庭终器有表达,为证明GABA是前庭系统重要神经递质之一提供了支持。 展开更多

关键词 前庭 Γ-氨基丁酸受体 逆转录-聚合酶链反应技术 大鼠

原文传递

血清miR-340-5p检测在肺癌诊治中的临床价值研究 被引量：2

9

作者 黄江浩 朱兆均 +3 位作者 刘平 叶佐婉 於艳霞 熊远香 《中国卫生检验杂志》 CAS 2017年第4期508-510,共3页

目的通过检测微小miR-340-5p在肺癌患者血清中的表达,研究其与肺癌患者临床病理特征的相关性,并探讨其能否作为肺癌早期诊断的潜在肿瘤标志物的可能性。方法应用逆转录定量聚合酶链反应(RT-q PCR)分析法对55例肺癌患者、21例健康者、32... 目的通过检测微小miR-340-5p在肺癌患者血清中的表达,研究其与肺癌患者临床病理特征的相关性,并探讨其能否作为肺癌早期诊断的潜在肿瘤标志物的可能性。方法应用逆转录定量聚合酶链反应(RT-q PCR)分析法对55例肺癌患者、21例健康者、32例肺部良性疾病患者血清中的miR-340-5p水平进行检测,采用方差方程的Levene检验及均值方程的t检验进行统计学比较。用ROC曲线对指标的诊断效能进行分析和评价。结果肺癌患者组血清中的miR-340-5p肿瘤标志物水平明显高于健康组和肺部良性疾病患者组,FC值为6.48,差异有统计学意义(F=12.23,P<0.05;t=-4.44,df=83.8,P<0.05)。ROC曲线下面积AUC为0.785,灵敏度为66.3%,特异度为73.7%。结论 miR-340-5p在肿瘤患者中是高表达,在血清中的检测对肺癌的诊断有一定的临床价值,并有较高的灵敏度和特异度,是诊断肺癌较为理想的指标。 展开更多

关键词 肺肿瘤 miR-340-5p 逆转录定量聚合酶链反应技术测定

原文传递

逆转录聚合酶链反应技术用于产前诊断人巨细胞病毒宫内活动性感染的临床价值 被引量：16

10

作者 陈素华 闻良珍 +1 位作者 凌霞珍 姜宏 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期580-583,共4页

目的　探讨逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术用于产前诊断人巨细胞病毒 (HCMV)宫内活动性感染的临床价值。方法　应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、RT PCR及血浆套式聚合酶链反应 (N PCR)法 ,检测 2 0 9例孕妇外周血HCMVmRNA、HCMVIgM及HC... 目的　探讨逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术用于产前诊断人巨细胞病毒 (HCMV)宫内活动性感染的临床价值。方法　应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)、RT PCR及血浆套式聚合酶链反应 (N PCR)法 ,检测 2 0 9例孕妇外周血HCMVmRNA、HCMVIgM及HCMVDNA ,其中任意 2项阳性为HCMV活动性感染 (99例 ,观察组 )、任意 2项均阴性为非活动性感染 (110例 ,对照组 )。应用RT PCR和N PCR技术 ,检测两组孕妇从宫内采集的孕早期绒毛共 78例、孕中期脐血和羊水共 131例 ,并追踪胎儿生长发育及出生后情况。结果　 (1)观察组绒毛、脐血HCMV感染率分别为 5 3 3% (16 30 )、4 7 8% (33 6 9) ;对照组分别为 8 3% (4 4 8)、9 7% (6 6 2 ) ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 0 1)。观察组绒毛、脐血HCMV活动性感染率分别为 30 0 % (9 30 )和 2 9 0 % (2 0 6 9) ;显著高于对照组的 4 2 %(2 4 8)和 4 8% (3 6 2 ) ,两组比较 ,差异有极显著性 (P <0 0 0 1)。 (2 )HCMVDNA阳性胎儿中 ,HCMVmRNA阳性胎儿的流 (早 )产率为 4 1 2 % (14 34) ,显著高于HCMVmRNA阴性胎儿的 8 0 % (2 2 5 )。HCMV活动性感染胎儿中 ,有 10例因胎儿生长发育异常而行终止妊娠术。结论　应用RT PCR技术产前诊断HCMV宫内活动性感染安全可靠 。 展开更多

关键词 宫内活动性感染 巨细胞病毒感染 产前诊断 RT-PCR技术 逆转录聚合酶链反应技术

原文传递

血管内皮生长因子及其受体随增龄在大鼠肾组织内表达的研究 被引量：14

11

作者 张雪光 陈香美 +4 位作者 张利 吕扬 王兆霞 蔡广研 师锁柱 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期25-29,共5页

目的　研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)及其受体Flt 1和Flk 1在大鼠肾组织内的表达及随增龄变化 ,探讨它们在肾脏衰老过程中的作用。　方法　应用 3、12、2 4月龄 (各 7只 )大鼠肾组织石蜡切片进行常规病理及免疫组织化学染色 ,定量分... 目的　研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)及其受体Flt 1和Flk 1在大鼠肾组织内的表达及随增龄变化 ,探讨它们在肾脏衰老过程中的作用。　方法　应用 3、12、2 4月龄 (各 7只 )大鼠肾组织石蜡切片进行常规病理及免疫组织化学染色 ,定量分析肾组织内微血管变化及VEGF、Flt 1和Flk 1表达变化。应用逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)检测肾组织内VEGF AmRNA的表达。　结果　 2 4月龄组与 3月龄组相比肾小球面积增大〔(15 6 35± 10 2 2 ) μm2 vs(72 0 5± 496 ) μm2 ,P <0 0 1〕 ,肾小球内毛细血管袢腔面积与肾小球面积百分比减少 (46 76 %± 4 91%vs 6 3 75 %±6 0 2 % ,P <0 0 1) ,肾小管周围毛细血管数量减少 (9 8± 2 6vs 14 7± 3 1,P <0 0 1) ;肾小球内VEGF阳性细胞数增多 (9 3± 2 4vs 6 4± 1 6 ,P <0 0 5 ) ;集合管中VEGF的表达则明显减少(9 35 %± 2 10 %vs 15 2 3%± 3 2 2 % ,P <0 0 5 ) ;Flk 1在肾小球血管袢上表达增加 (9 17%±2 0 2 %vs 1 0 3%± 0 35 % ,P <0 0 1) ,而Flt 1和Flk 1在肾小管上表达则明显减少 (7 6 4%±3 0 2 %vs 15 36 %± 2 5 4% ,2 48%± 0 86 %vs 9 0 1%± 2 6 3% ,P <0 0 1)。 2 4月龄组VEGF AmRNA较其他两组减少 (P <0 0 5 )。　结论　VEGF。 展开更多

关键词 血管内皮细胞生长因子 衰老 肾 逆转录聚合酶链反应技术 病理生理学 免疫组织化学

原文传递

脂质体生存素反义寡核苷酸抑制胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的作用 被引量：11

12

作者 付广 王国斌 +1 位作者 卢晓明 杨春 《中华外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第22期1367-1371,共5页

目的　探讨脂质体生存素反义寡核苷酸 (ASODN)对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及机理。方法　将 2 4只裸鼠建立人胃癌细胞系HS 74 6T皮下移植瘤模型 ,用不同的转染液处理后随机分成 6组 :空白对照组 ,脂质体组 ,正义链组 ,10 0、2... 目的　探讨脂质体生存素反义寡核苷酸 (ASODN)对人胃癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及机理。方法　将 2 4只裸鼠建立人胃癌细胞系HS 74 6T皮下移植瘤模型 ,用不同的转染液处理后随机分成 6组 :空白对照组 ,脂质体组 ,正义链组 ,10 0、2 0 0和 4 0 0nmol/L反义链组 (ASODN组 )。于注射相应试剂后 2 ,4 ,8,12 ,16 ,2 0d观测裸鼠移植瘤体积 ,计算抑瘤率和肿瘤缩小率 ,观察移植瘤细胞形态变化 ,免疫组化SP法检测生存素的表达 ,并用逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)和Westernblot蛋白免疫印迹法比较治疗后不同时间各组肿瘤组织中生存素mRNA和蛋白表达的变化。结果注射后 2 0d空白组、脂质体组和正义链组裸鼠的抑瘤率无明显差异 ,而ASODN组移植瘤的体积随着时间和浓度的增加而减小 ,肿瘤缩小率则增大 ,抑瘤率均大于对照组 ,4 0 0nmol/LASODN组抑瘤率最大为 93%。光镜下见ASODN组移植瘤凋亡细胞数增多 ,生存素表达减弱 ,6例 ( 6 /12 )肿瘤组织有坏死液化灶。各ASODN组均能够下调移植瘤细胞生存素mRNA含量 ,抑制生存素蛋白表达 ,注射 2 0d后4 0 0nmol/LASODN组蛋白表达为空白对照组的 36 8%。结论　生存素基因反义寡核苷酸能够通过诱导人胃癌裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡 ,下调生存素mRNA和蛋白的表达 ,抑制裸鼠皮? 展开更多

关键词 生存素 ASODN 裸鼠皮下移植瘤 抑瘤率 脂质体 反义寡核苷酸 瘤细胞 RNA 组蛋白 逆转录聚合酶链反应技术

原文传递

左旋多巴诱发异动症大鼠模型纹状体神经元可塑性的研究 被引量：12

13

作者 徐岩 孙圣刚 曹学兵 《中国神经科学杂志》 SCIE CAS CSCD 2004年第3期252-256,共5页

目的　 研究左旋多巴诱发异动症 (LID)大鼠模型纹状体区FosB和特异性神经肽基因表达的变化 ,探讨LID时纹状体神经元的可塑性。方法　分别用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)检测大鼠纹状体区FosB和前脑啡肽原 (PPE)... 目的　 研究左旋多巴诱发异动症 (LID)大鼠模型纹状体区FosB和特异性神经肽基因表达的变化 ,探讨LID时纹状体神经元的可塑性。方法　分别用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应技术 (RT PCR)检测大鼠纹状体区FosB和前脑啡肽原 (PPE)及前强啡肽原 (PDyn)基因的表达情况。用辣根过氧化物酶 (HRP)逆行示踪与免疫组织化学相结合的双重反应技术观测FosB的细胞分布状况。 结果 　帕金森病 (PD)大鼠较正常大鼠损毁侧纹状体PPEmRNA表达明显增多而PDynmRNA表达减少。LID大鼠较PD大鼠PPEmRNA无明显增多 ,但PDynmRNA显著性增多。LID大鼠损毁侧纹状体区FosB阳性神经元明显增多 ,并且主要分布于纹状体黑质神经元内。结论　纹状体黑质神经元内即早基因FosB及其下游靶基因强啡肽的表达异常与大鼠LID的发生有关 ,表明LID的发生与直接通路的活动异常密切相关。 展开更多

关键词 异动症 左旋多巴 即早基因 强啡肽 免疫组织化学 逆转录聚合酶链反应技术

下载PDF 职称材料

NKx2.5、GATA-4基因表达对骨髓间充质干细胞分化为心肌细胞的影响 被引量：9

14

作者 吕铁伟 田杰 +2 位作者 邓兵 朱静 陈沅 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2005年第1期40-43,共4页

观察NKx2.5、GATA-4基因在骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCs)分化为心肌细胞过程中表达时序性及表达强度的变化 ,初步阐明两基因对MSCs分化为心肌细胞的影响。以MSCs植入后的Wistar大鼠为研究对象 ,在移植后不同的时间点取... 观察NKx2.5、GATA-4基因在骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSCs)分化为心肌细胞过程中表达时序性及表达强度的变化 ,初步阐明两基因对MSCs分化为心肌细胞的影响。以MSCs植入后的Wistar大鼠为研究对象 ,在移植后不同的时间点取心肌标本 ,采用逆转录聚合酶链反应技术 ,提取心肌组织的总RNA ,逆转录 ,加入特异性引物扩增目的基因 ,观察基因表达的时序性 ,并应用凝胶图像分析系统检测这两个基因表达强度的动态变化。显示在MSCs移植后 1d两个基因即出现弱的表达 ,1d～ 1周表达较低 ,2周～ 3周表达强度最高 ,达到高峰期 ,以后表达强度则逐渐降低。NKx2.5、GATA 展开更多

关键词 心肌细胞 基因表达 GATA-4 骨髓间充质干细胞 移植后 分化 NK 凝胶图像分析 目的基因 逆转录聚合酶链反应技术

下载PDF 职称材料

新型冠状病毒检测技术的应用研究进展 被引量：2

15

作者 黄象娟 黄象艳 《山东医药》 CAS 2022年第21期90-94,共5页

新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染的准确诊断对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的临床管理和流行遏制至关重要。SARS-CoV-2的检测方法主要分为分子生物学方法和免疫学方法两大类。分子生物学方法是基于SARSCoV-2 RNA的检测方法,包括逆转录聚合... 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染的准确诊断对新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的临床管理和流行遏制至关重要。SARS-CoV-2的检测方法主要分为分子生物学方法和免疫学方法两大类。分子生物学方法是基于SARSCoV-2 RNA的检测方法,包括逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术、环介导等温扩增检测技术、成簇的规律间隔短回文重复序列技术和基因测序技术,灵敏度和特异度较高,其中RT-PCR技术是检测SARS-CoV-2感染的金标准。免疫学方法包括抗原检测技术、抗体检测技术、抗原抗体快速检测技术等,可以检测呼吸道分泌物中的病毒抗原,也可以检测血液中的抗体,操作简单、检测速度快,是分子生物学方法的有效补充。同时,基于生物识别和电化学信号的新型检测技术也在研发过程中。 展开更多

关键词 新型冠状病毒 逆转录聚合酶链反应技术 抗原检测技术 抗体检测技术 新型冠状病毒肺炎

下载PDF 职称材料

血管内皮生长因子及受体在大鼠衰老肾脏的表达 被引量：1

16

作者 何凤屏 李山 +3 位作者 曾志羽 陈宇明 冼苏 尹瑞兴 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期443-445,共3页

【目的】研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)在大鼠衰老肾脏的表达及探讨它们在肾脏衰老中的作用。【方法】取3月龄、12月龄大鼠作为对照组,24月龄大鼠作为观察组各6只,提取其肾脏组织的RNA,应用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR... 【目的】研究血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)在大鼠衰老肾脏的表达及探讨它们在肾脏衰老中的作用。【方法】取3月龄、12月龄大鼠作为对照组,24月龄大鼠作为观察组各6只,提取其肾脏组织的RNA,应用逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测肾脏组织内VEGFmRNA转录水平,以及应用免疫组化技术检测肾小球VEGF和VEGFR蛋白的表达;应用酶联免疫法检测肾组织培养液的VEGF总含量。【结果】3、12、24月龄的大鼠VEGF总的含量(g/L)分别为126.49±32.29,95.14±49.17,79.21±61.17,P=0.048。3、12、24月龄的大鼠VEGFmRNA表达量(g/L)分别是0.821±0.132,0.713±0.143,0.678±0.126,P=0.012。24月龄组VEGFmRNA和VEGF总含量较3、12月龄两组减少(P<0.05);24月龄大鼠肾小球VEGF和VEGFR-2的表达较3、12月龄两组减弱。【结论】证实了随着增龄大鼠肾组织VEGFmRNA转录水平和VEGF含量减少,肾小球VEGF-VEGFR的表达量也随着增龄而减少。肾小球VEGF-VEGFR系统在肾脏衰老过程中起到重要的作用。 展开更多

关键词 衰老肾脏 大鼠 血管内皮生长因子(VEGF) 逆转录聚合酶链反应技术 受体 mRNA表达量 VEGFR-2 12月龄 EGFR蛋白 转录水平 4月龄 组织培养液 免疫法检测 肾小球 肾脏组织 技术检测 免疫组化 鼠肾组织 衰老过程 总含量 表达及

下载PDF 职称材料

MK801对左旋多巴诱导异动症大鼠行为的影响及其机制研究

17

作者 徐岩 孙圣刚 曹学兵 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期45-48,共4页

目的探讨MK801对左旋多巴诱导异动症(LID)大鼠模型行为的影响及其可能作用机制。方法观察MK801治疗LID大鼠的行为变化,并用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应技术(RTPCR)检测大鼠纹状体区FosB和前脑啡肽原(PPE)及前脑强啡肽原(PDyn... 目的探讨MK801对左旋多巴诱导异动症(LID)大鼠模型行为的影响及其可能作用机制。方法观察MK801治疗LID大鼠的行为变化,并用免疫组织化学方法和逆转录聚合酶链反应技术(RTPCR)检测大鼠纹状体区FosB和前脑啡肽原(PPE)及前脑强啡肽原(PDyn)基因的表达情况。用辣根过氧化物酶(HRP)逆行示踪与免疫组织化学相结合的双重反应技术观测FosB的细胞分布状况。结果帕金森病(PD)大鼠慢性间断性应用左旋多巴后出现明显的异常不自主运动,与人类LID具有相似特征。LID大鼠损毁侧纹状体区FosB阳性神经元增多,PPEmRNA和PDynmRNA表达明显增加,MK801治疗使LID大鼠异常不自主运动评分减少,分别为(419±156)和(72±30)分;伴随纹状体区FosB和PDynmRNA表达减少,而PPEmRNA表达无明显改变。FosB主要分布于纹状体黑质神经元内。结论MK801能阻止大鼠LID的发生,其机制可能与阻断了直接通路上即早基因FosB及其下游靶基因强啡肽的产生有关,表明LID的发生与直接通路的活动异常密切相关。 展开更多

关键词 大鼠 MK801 左旋多巴 纹状体 PD 治疗 mRNA表达 异动症 逆转录聚合酶链反应技术 强啡肽

原文传递

检测结直肠癌外周血微转移对预测潜在性肝转移的意义 被引量：1

18

作者 程伏林 魏正专 +2 位作者 袁宏银 杨国樑 陈家宽 《中华普通外科杂志》 CSCD 北大核心 2008年第1期66-67,共2页

结直肠癌在西方国家占肿瘤死亡的第二位，发病率为50／10万，癌转移是患者死亡的主要原因。在整个病程过程中，约有60％-71％的结直肠癌患者最终发生肝转移，结直肠癌首诊时约有10％-20％的患者发生了肝转移。微小的、存在于血循环、淋... 结直肠癌在西方国家占肿瘤死亡的第二位，发病率为50／10万，癌转移是患者死亡的主要原因。在整个病程过程中，约有60％-71％的结直肠癌患者最终发生肝转移，结直肠癌首诊时约有10％-20％的患者发生了肝转移。微小的、存在于血循环、淋巴道、骨髓和其他各组织脏器中的、临床常规检查难以发现的转移灶称为微转移灶。尽管使用逆转录聚合酶链反应技术（RT—PCR）准确地检测到了大肠癌微转移灶的存在， 展开更多

关键词 结直肠癌 肝转移 外周血微转移 逆转录聚合酶链反应技术 检测 潜在性 预测 微转移灶

原文传递

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤中单核细胞趋化蛋白-1及其受体CCR2 mRNA的动态变化

19

作者 冯雪 姚裕家 《中华围产医学杂志》 CAS 2007年第5期346-348,I0003,共4页

近年研究表明，多种免疫细胞及细胞因子参与了缺氧缺血性脑损伤（hypoxic—ischemic brain damage，HIBD）的发生。趋化性细胞因子在炎症反应中起核心作用，越来越受到关注。为进一步探讨HIBD后趋化因子单核细胞趋化蛋白-1（monoeyte ch... 近年研究表明，多种免疫细胞及细胞因子参与了缺氧缺血性脑损伤（hypoxic—ischemic brain damage，HIBD）的发生。趋化性细胞因子在炎症反应中起核心作用，越来越受到关注。为进一步探讨HIBD后趋化因子单核细胞趋化蛋白-1（monoeyte chemoattractant protein-1，MCP-1）及其受体CCR2转录水平的变化，本研究采用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术对新生HIBD大鼠脑组织中MCP-1和CCR2 mRNA水平的变化进行动态研究。 展开更多

关键词 单核细胞趋化蛋白-1 缺氧缺血性脑损伤 MRNA水平 CCR2 新生大鼠 动态变化 逆转录聚合酶链反应技术 受体

原文传递

VEGF-D及其受体VEGFR-3在非小细胞肺癌中的表达与淋巴结转移的关系

20

作者 李杰 韩毅 +6 位作者 刘志东 张海青 张宗德 岳文涛 贾红彦 许绍发 李宝兰 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期1796-1799,共4页

目的:对VEGF-D及其受体VEGFR-3在良性疾病肺组织和非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达进行研究,探寻其相互之间的关系,从而进一步探讨VEGF-D、VEGFR-3在肺癌发生及NSCLC淋巴管生成和淋巴结早期转移中的作用。方法:收集非小细胞肺癌患者术... 目的:对VEGF-D及其受体VEGFR-3在良性疾病肺组织和非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达进行研究,探寻其相互之间的关系,从而进一步探讨VEGF-D、VEGFR-3在肺癌发生及NSCLC淋巴管生成和淋巴结早期转移中的作用。方法:收集非小细胞肺癌患者术后肺组织标本52例,良性疾病肺组织30例,应用半定量逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测良性疾病肺组织及肺癌组织中VEGF-D、VEGFR-3 mRNA的表达量。结果:VEGF-D mRNA、VEGFR-3 mRNA在肺癌组织中的表达水平较良性疾病肺组织表达水平明显升高(P<0.05)。VEGF-D、VEGFR-3 mRNA在肺癌组织中的表达与淋巴结转移无显著相关。结论:VEGF-D、VEGFR-3 mRNA的表达与肺癌发生有显著的相关性。 展开更多

关键词 非小细胞肺癌血管内皮生长因子D 血管内皮生长因子受体-3 半定量逆转录聚合酶链反应技术

下载PDF 职称材料