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利用正交设计优化水曲柳ISSR-PCR反应体系 被引量：115
1
作者 谢运海 夏德安 +1 位作者 姜静 林萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 2005年第3期445-450,共6页
利用正交设计L16(45)对水曲柳ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)在4个水平上进行优化试验,PCR结果用统计软件MINITAB分析:①各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中Taq酶量影响最大;②筛选出各反应因... 利用正交设计L16(45)对水曲柳ISSR-PCR反应体系的5因素(Taq酶,Mg2+,模板DNA,dNTP,引物)在4个水平上进行优化试验,PCR结果用统计软件MINITAB分析:①各因素的不同水平对PCR反应结果都有显著的影响,其中Taq酶量影响最大;②筛选出各反应因素的最佳水平,建立水曲柳ISSR-PCR反应的最佳体系(20滋l)为:Taq酶1.0U,Mg2+2.0mmol/L,模板DNA50￣200ng,dNTP0.15mmol/L,引物0.3滋mol/L。最后,对水曲柳ISSR-PCR最佳反应体系进行梯度退火,得到最佳退火温度为58.3℃。这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术,研究水曲柳的地理变异提供一个标准化程序。 展开更多
关键词 PCR反应体系 水曲柳 设计优化 ISSR-PCR ISSR标记技术 MINITAB MG^2+ Taq酶 最佳反应体系 模板DNA 标准化程序 正交设计 DNTP 优化试验 统计软件 退火温度 优化系统 地理变异 水平 mol 引物 果用
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杏ISSR反应体系的优化和指纹图谱的构建 被引量：59
2
作者 刘威生 冯晨静 +3 位作者 杨建民 刘冬成 张爱民 李绍华 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期626-629,共4页
以杏品种清密沙为试材,用引物UBC825〔序列为(AC)8T〕研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对杏ISSR扩增结果的影响。结果表明:Primer、Mg2+、Taq酶浓度对扩增效果有明显影响,而模板DNA和dNTPs含量对扩增结果影响不大。优化的反应体系... 以杏品种清密沙为试材,用引物UBC825〔序列为(AC)8T〕研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对杏ISSR扩增结果的影响。结果表明:Primer、Mg2+、Taq酶浓度对扩增效果有明显影响,而模板DNA和dNTPs含量对扩增结果影响不大。优化的反应体系为:20μL的反应体系中含10ng模板DNA、0.1mmol/LdNTP、0.25μmol/LPrimer、2.5mmol/LMg2+,0.5UTaqPolymerase。适宜退火温度为50-52.1℃。用引物UBC825和UBC868〔序列为(GAA)5〕在优化的反应条件下建立了5个种12份杏材料的ISSR指纹图谱。 展开更多
关键词 杏 ISSR(inter—simple SEQUENCE repeat) 反应体系 退火温度 优化
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布朗运动模拟退火算法 被引量：58
3
作者 傅文渊 凌朝东 《计算机学报》 EI CSCD 北大核心 2014年第6期1301-1308,共8页
针对传统模拟退火算法计算效率较低的问题,文中将布朗运动和模拟退火相结合,提出一种智能启发式算法.该算法将布朗运动中粒子运动时间和模拟退火温度联系在一起,布朗运动的粒子运动时间等效于退火温度的倒数,通过理论分析得到基于布朗... 针对传统模拟退火算法计算效率较低的问题,文中将布朗运动和模拟退火相结合,提出一种智能启发式算法.该算法将布朗运动中粒子运动时间和模拟退火温度联系在一起,布朗运动的粒子运动时间等效于退火温度的倒数,通过理论分析得到基于布朗运动的邻域函数模型以及相应的温度下降函数.温度下降函数具有更快的退温特性,保证算法执行过程中具有更高的效率.数值实验结果表明,该算法具有搜索速度快、稳定性高和易于实现的特点,能显著提高求解全局优化问题的计算效率. 展开更多
关键词 布朗运动 模拟退火 启发式算法 退火温度
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一种简便高效的改良降落PCR 被引量：23
4
作者 王天云 张贵星 薛乐勋 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2003年第11期80-82,共3页
降落 (touchdown ,TD)PCR通常涉及 1 5个退火温度 ,程序设计复杂。报道了一种简便高效的改良降落PCR ,只需 5个降落退火温度 ,以杜氏盐藻 (Dunaliellabardawil)基因组为模板 ,设计一对引物扩增胡萝卜素生物合成相关 (carotenebiosynthes... 降落 (touchdown ,TD)PCR通常涉及 1 5个退火温度 ,程序设计复杂。报道了一种简便高效的改良降落PCR ,只需 5个降落退火温度 ,以杜氏盐藻 (Dunaliellabardawil)基因组为模板 ,设计一对引物扩增胡萝卜素生物合成相关 (carotenebiosynthesisrelated ,cbr)基因的第 3外显子。实验证实该方法程序简单 ,比标准降落PCR步骤简化 70 % ,且产物的特异性及效率都有较大提高。 展开更多
关键词 PCR 降落PCR 特异性 产物得率 退火温度 聚合酶链反应
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退火温度对纳米TiO_2薄膜结构和亲水性的影响 被引量：17
5
作者 刘彭义 叶勤 +4 位作者 唐振方 孙汪典 叶海 赵丽特 张丽丽 《真空科学与技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期133-136,共4页
采用射频磁控溅射方法制备出纳米二氧化钛 (TiO2 )薄膜 ,研究了不同退火温度对薄膜微观结构和超亲水性的影响。结果表明 :退火温度升高 ,晶粒长大 ,孔隙率减小 ;常温制备 30 0℃以下退火的TiO2 薄膜为无定形结构 ,亲水性差 ;4 0 0℃～ 6... 采用射频磁控溅射方法制备出纳米二氧化钛 (TiO2 )薄膜 ,研究了不同退火温度对薄膜微观结构和超亲水性的影响。结果表明 :退火温度升高 ,晶粒长大 ,孔隙率减小 ;常温制备 30 0℃以下退火的TiO2 薄膜为无定形结构 ,亲水性差 ;4 0 0℃～ 6 5 0℃退火的薄膜为锐钛矿结构 ,表现出超亲水性 ;80 0℃退火薄膜为金红石结构 。 展开更多
关键词 退火温度 纳米TIO2薄膜 薄膜结构 亲水性 纳米二氧化钛薄膜 锐钛矿 金红石
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一种优化的PCR方法——降落PCR扩增目的基因 被引量：21
6
作者 万兵 闫杰 +3 位作者 季明春 张利宁 申厚凤 陈志琳 《江苏临床医学杂志》 2002年第2期127-129,共3页
目的 :尝试用一种新的PCR方法———降落PCR扩增目的基因。方法 :在构建人CD137-hIgG1Fc - pCDNA3融合蛋白真核表达载体以及在检测HBV多聚酶YMDD变异的过程中运用降落PCR扩增目的基因。结果 :扩增出的特异性条带与目的基因大小一致。结... 目的 :尝试用一种新的PCR方法———降落PCR扩增目的基因。方法 :在构建人CD137-hIgG1Fc - pCDNA3融合蛋白真核表达载体以及在检测HBV多聚酶YMDD变异的过程中运用降落PCR扩增目的基因。结果 :扩增出的特异性条带与目的基因大小一致。结论 :降落PCR省却了常规PCR中摸索最适退火温度的过程 ,对一些Tm值相近的PCR反应可应用一套温度程序扩增 。 展开更多
关键词 优化 降落PCR 退火温度 基因扩增 乙型肝炎病毒 HBV
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射频磁控溅射制备纳米TiO_2薄膜及其光致特性研究 被引量：22
7
作者 沈杰 沃松涛 +2 位作者 崔晓莉 杨锡良 章壮健 《真空科学与技术学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期81-86,共6页
在室温下采用射频溅射法制备纳米TiO2 薄膜 ,并用XRD、AFM、Raman谱仪等手段研究了不同溅射气压及不同退火温度处理后薄膜的结构及其相应的亲水性、光催化能力。结果表明 :在室温下制备的薄膜为无定形结构 ,当退火温度超过4 0 0℃时转... 在室温下采用射频溅射法制备纳米TiO2 薄膜 ,并用XRD、AFM、Raman谱仪等手段研究了不同溅射气压及不同退火温度处理后薄膜的结构及其相应的亲水性、光催化能力。结果表明 :在室温下制备的薄膜为无定形结构 ,当退火温度超过4 0 0℃时转化为锐钛矿结构。在 4 0 0℃下退火 展开更多
关键词 射频溅射 磁控溅射 纳米TIO2薄膜 纳米二氧化钛薄膜 光致特性 溅射气压 退火温度
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带夹层材料的爆炸-轧制钛钢复合板工艺研究 被引量：29
8
作者 王敬忠 颜学柏 +3 位作者 王韦琪 闫静亚 容耀 严平 《稀有金属材料与工程》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期309-313,共5页
为扩大钛-钢复合板的尺寸,采用一种新颖的组料方式,这种方法包括两个主要步骤,首先用爆炸焊接的方式将DT4夹层与钛板结合,然后按照对称方式组坯。研究轧制温度、退火温度对复合板剪切强度的影响。利用扫描电镜、光学显微镜和显微硬度试... 为扩大钛-钢复合板的尺寸,采用一种新颖的组料方式,这种方法包括两个主要步骤,首先用爆炸焊接的方式将DT4夹层与钛板结合,然后按照对称方式组坯。研究轧制温度、退火温度对复合板剪切强度的影响。利用扫描电镜、光学显微镜和显微硬度试验机对复合板的微观组织和界面附近硬度进行分析。结果表明:复合板的结合强度取决于轧制温度和轧后退火温度,当轧制温度超过钛的α→β相变温度,并且退火温度超过750℃时,Ti/DT4界面脆性化合物明显增多,剪切强度显著降低;当退火温度超过900℃,Fe在钛中扩散速度快,显微硬度的峰值在钛侧出现;在550～650℃退火,复合板的结合强度略有升高。 展开更多
关键词 爆炸-轧制复合 剪切强度 轧制温度 退火温度
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退火温度对冷轧无取向硅钢组织结构和磁性能的影响 被引量：24
9
作者 张文康 毛卫民 白志浩 《特殊钢》 北大核心 2006年第1期15-17,共3页
研究了成分为0．003％C-1．6％Si的0．5mm无取向冷轧板850～1000℃退火后的晶粒、织构、铁损和磁感应强度。试验结果表明，随退火温度增高，晶粒的平均尺寸由850℃23μm增加至1000oC115μm，铁损由850℃4．36W／kg降低至1000℃3．35W／k... 研究了成分为0．003％C-1．6％Si的0．5mm无取向冷轧板850～1000℃退火后的晶粒、织构、铁损和磁感应强度。试验结果表明，随退火温度增高，晶粒的平均尺寸由850℃23μm增加至1000oC115μm，铁损由850℃4．36W／kg降低至1000℃3．35W／kg，磁感应强度在920℃退火达到最大值1．732T。随退火温度继续升高，磁感应强度逐渐降低至1000℃1．717T。 展开更多
关键词 无取向硅钢 退火温度 磁性能 晶粒 织构
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紫云英ISSR引物的筛选及PCR反应体系的优化 被引量：29
10
作者 孙清信 陈坚 +4 位作者 张辉 祁建民 林忠平 胡鸢雷 林新坚 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期870-878,共9页
以紫云英为研究材料,用哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物和11种株系紫云英品种的DNA为模板进行PCR扩增,筛选出33条扩增条带较好的ISSR引物,对其中的ISSR引物进行梯度PCR,筛选出最佳的退火温度。再采用正交试验和单因素试验相结合... 以紫云英为研究材料,用哥伦比亚大学(UBC)公布的100条ISSR引物和11种株系紫云英品种的DNA为模板进行PCR扩增,筛选出33条扩增条带较好的ISSR引物,对其中的ISSR引物进行梯度PCR,筛选出最佳的退火温度。再采用正交试验和单因素试验相结合的方法对紫云英ISSR-PCR反应体系的5种因素(模板、Mg2+、TaqDNA聚合酶、dNTP及引物)进行优化浓度。确立了适合紫云英的ISSR分析的反应体系。在25μl反应体系中,其反应浓度为:DNA模版50.00ng,Mg2+2.00mol/L,Taq聚合酶1.0 U,dNTP 0.25mmol/L,引物0.20μmol/L,2.5μl 10×buffer。本试验为以后利用ISSR技术进行紫云英遗传多样性分析和物种保护奠定了技术基础。 展开更多
关键词 紫云英 退火温度 ISSR引物 正交试验 体系优化
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a-Si∶H薄膜固相晶化法制备多晶硅薄膜 被引量：17
11
作者 陈城钊 方健文 林璇英 《浙江师范大学学报（自然科学版）》 CAS 2002年第3期246-249,共4页
利用固相晶化法获得多晶硅薄膜 (退火温度 70 0～ 80 0℃ ) ,采用XRD、Raman等分析手段进行了表征与分析 .研究结果表明 :晶粒平均尺寸随着退火温度的降低、掺杂浓度的减少、薄膜厚度的增加而增加 ;并且退火后薄膜暗电导率提高了 2～
关键词 多晶硅薄膜 固相晶化法 α—Si:H薄膜 平均晶粒尺寸 退火温度 掺杂浓度 薄膜厚度
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铝诱导非晶硅薄膜的场致低温快速晶化及其结构表征 被引量：19
12
作者 陈一匡 林揆训 +2 位作者 罗志 梁锐生 周甫方 《物理学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第2期582-586,共5页
铝诱导非晶硅薄膜晶化可以降低退火温度、缩短退火时间 ,是制备多晶硅薄膜的一种重要方法 .在此基础上 ,通过在退火过程中加入电场加速了界面处硅、铝原子间的互扩散 ,实现了非晶硅薄膜的快速低温晶化 .实验结果表明 ,外加电场 ,退火温... 铝诱导非晶硅薄膜晶化可以降低退火温度、缩短退火时间 ,是制备多晶硅薄膜的一种重要方法 .在此基础上 ,通过在退火过程中加入电场加速了界面处硅、铝原子间的互扩散 ,实现了非晶硅薄膜的快速低温晶化 .实验结果表明 ,外加电场 ,退火温度为 4 0 0℃ ,退火时间为 6 0min时 ,薄膜的晶化率大于 6 0 % ;退火温度为 4 5 0℃退火时间为30min时 ,薄膜已经呈现明显的晶化现象 ;退火温度为 5 0 0℃退火时间为 15min时 ,薄膜的x射线多晶峰强度与非晶峰强度之比为未加电场的 3— 展开更多
关键词 非晶硅薄膜 多晶硅薄膜 铝诱导 晶体结构 退火温度 退火时间 外加电场
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TA15合金板材的组织和性能研究 被引量：19
13
作者 刘瑞民 李兴无 沙爱学 《材料开发与应用》 CAS 2005年第4期23-26,共4页
研究了TA15钛合金板材在不同的退火温度下合金组织和性能的变化。结果表明,对于薄板而言提高退火温度材料强度降低、塑性提高,而对厚板这种现象不明显;热处理参数的变化对TA15合金板材的显微组织影响不大;薄板沿纵向和横向强度值较高,... 研究了TA15钛合金板材在不同的退火温度下合金组织和性能的变化。结果表明,对于薄板而言提高退火温度材料强度降低、塑性提高,而对厚板这种现象不明显;热处理参数的变化对TA15合金板材的显微组织影响不大;薄板沿纵向和横向强度值较高,塑性值偏低,而45°方向强度值偏低,塑性较好;厚板横向强度值较纵向、45°方向的要高。 展开更多
关键词 TA15 拉伸性能 显微组织 退火温度
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变形Al-Mg-Sc-Zr合金退火组织的TEM观察 被引量：18
14
作者 赵卫涛 闫德胜 戎利建 《金属学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1150-1154,共5页
采用真空感应熔炼制备Al-6Mg-0.4Mn-0.2Sc-0.1Zr-0.1Cr(质量分数,%)合金,研究了冷变形态合金分别在350,400,450和500℃退火1h后傲观组织和力学性能的变化. TEM观察表明.冷变形态的合金组织为交错缠结的位错胞经过350℃退火后位错在晶界... 采用真空感应熔炼制备Al-6Mg-0.4Mn-0.2Sc-0.1Zr-0.1Cr(质量分数,%)合金,研究了冷变形态合金分别在350,400,450和500℃退火1h后傲观组织和力学性能的变化. TEM观察表明.冷变形态的合金组织为交错缠结的位错胞经过350℃退火后位错在晶界规律排列,密度大大降低,发生回复,晶粒保持在500 nm以下.在400-500℃的退火过程中再结晶过程缓慢进行,由于Al3(Sc,Zr)相的Zener拖曳作用,合金的再结晶温度区间宽化.力学性能在350℃退火时发生明显变化,随退火温度的进一步升高变化不明显. 展开更多
关键词 Al-Mg基合金 退火温度 Al3(Sc Zr) 亚晶界 位错 再结晶
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三类整合酶基因(intⅠ)的简并引物PCR方法建立及应用 被引量：18
15
作者 李心晖 石磊 +4 位作者 杨维青 曹以诚 张宏梅 尹晓琳 郑美萍 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期156-160,共5页
目的　建立一种筛选第一、二和三类整合酶基因 (intⅠ )的简并引物PCR方法 ,并对临床菌株进行整合子筛选和分类。方法　用梯度PCR方法确定PCR反应的最适退火温度 ,并对 1 6株临床标本进行PCR扩增 ,通过对阳性PCR扩增产物的限制性内切酶... 目的　建立一种筛选第一、二和三类整合酶基因 (intⅠ )的简并引物PCR方法 ,并对临床菌株进行整合子筛选和分类。方法　用梯度PCR方法确定PCR反应的最适退火温度 ,并对 1 6株临床标本进行PCR扩增 ,通过对阳性PCR扩增产物的限制性内切酶分析进行整合子分类。结果　根据梯度PCR结果确定最适退火温度为 4 6℃。应用简并引物PCR法检测 1 6株临床分离株 ,其中 8株阳性 ,经酶切分类后确定其中 4株只含有第一类整合酶基因 ,有 3株含有第二类整合酶基因 ,1株同时含有第一类和第二类整合酶基因。结论　建立了一种同时筛选第一、二和三类整合子的方法 ,实际检测显示其可行性 ,为全面细致研究整合子介导的细菌耐药提供了一种快速、简便的方法。 展开更多
关键词 简并引物PCR 酶基因 方法建立 限制性内切酶分析 PCR扩增产物 PCR方法 PCR法检测 退火温度 PCR反应 梯度PCR 临床分离株 整合子 临床菌株 临床标本 细菌耐药 筛选 阳性
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退火温度对单向纤维晶纯铜线材组织性能影响 被引量：14
16
作者 张鸿 谢建新 +2 位作者 任克刚 覃强 王自东 《北京科技大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第3期237-240,共4页
对退火前后单向纤维晶纯铜线材组织进行了观察,测试了其力学与导电性能,结果表明:在300℃以下退火时,线材的金相显微组织与退火前相比没有明显变化,仍然保持为连续纤维晶,其抗拉强度有所下降,延伸率有所增加;在400℃退火时,线材发生完... 对退火前后单向纤维晶纯铜线材组织进行了观察,测试了其力学与导电性能,结果表明:在300℃以下退火时,线材的金相显微组织与退火前相比没有明显变化,仍然保持为连续纤维晶,其抗拉强度有所下降,延伸率有所增加;在400℃退火时,线材发生完全再结晶,且有孪晶生成;500℃退火时,再结晶晶粒长大;在400℃以上退火时,抗拉强度大幅度下降,延伸率显著增加;在200～400℃的范围退火时,电导率增加,但增幅较小. 展开更多
关键词 纯铜线材 组织性能 单向纤维晶 退火温度 力学性能 导电性能 连续定向凝固 再结晶
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退火温度及平整量对03Al钢板组织性能的影响 被引量：17
17
作者 唐荻 谷春阳 +1 位作者 王先进 田德新 《钢铁》 CAS CSCD 北大核心 1999年第12期47-51,共5页
微碳深冲钢板（０３Ａｌ），是国内为适应汽车工业发展的需要，开发研制的新一代深冲钢板。在试制生产中发现有时屈服强度σｓ 偏高，ｎ 值偏低，游离渗碳体析出超标等现象。针对在实际生产中出现的问题，在实验室中对试样进行不同的退... 微碳深冲钢板（０３Ａｌ），是国内为适应汽车工业发展的需要，开发研制的新一代深冲钢板。在试制生产中发现有时屈服强度σｓ 偏高，ｎ 值偏低，游离渗碳体析出超标等现象。针对在实际生产中出现的问题，在实验室中对试样进行不同的退火温度（６００～７５０ ℃）和不同压下量的平整（０．４ ％ ～２．４ ％ ）试验，对组织和力学性能进行观察和测量，分析各种工艺参数对渗碳体析出、晶粒尺寸和性能的影响。结果表明：６８０～７１０ ℃退火和０．９ ％ ～１．２ ％ 的平整量是保证性能的关键因素之一。 展开更多
关键词 深冲板 成形性 汽车 退火温度 平整量
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教师科研与实验教学相结合的成功尝试 被引量：19
18
作者 陈瑾 董世瑞 王素英 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2016年第11期166-169,共4页
结合天津市高校创新团队承担的国家自然科学基金项目,以更新生物技术及其相关专业综合实验项目为切入点,以节旋藻TJSD091藻株基因组的CRISPR位点引物为例,阐述了如何通过Touchdown PCR与梯度PCR技术结合确定PCR扩增最佳退火温度这一实验... 结合天津市高校创新团队承担的国家自然科学基金项目,以更新生物技术及其相关专业综合实验项目为切入点,以节旋藻TJSD091藻株基因组的CRISPR位点引物为例,阐述了如何通过Touchdown PCR与梯度PCR技术结合确定PCR扩增最佳退火温度这一实验,激发学生的探究心理和学习兴趣,引导学生主动学习的做法,分析了将科研与实验教学相结合的优越性,认为该教学模式不仅培养了学生的科研思维、提高了学生解决实际问题的能力,而且可为应用型高校本科生实践教学体系的完善提供新思路。 展开更多
关键词 聚合酶链式反应 退火温度 实验教学
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退火温度对硅基溅射铜膜应力的影响 被引量：16
19
作者 吴桂芳 史守华 +3 位作者 何玉平 王磊 陈良 孙兆奇 《真空科学与技术》 CSCD 北大核心 2002年第2期139-142,共4页
采用光学相移法 ,对Si基片上Cu膜应力随退火温度的变化进行了研究。研究表明 :随退火温度的升高 ,Cu膜应力减小 ,2 0 0℃时平均应力减小为 - 0 2 6 1× 10 8Pa,且应力分布均匀 ,在选区范围内应力差仅为 2 2 4 4× 10 8Pa。同... 采用光学相移法 ,对Si基片上Cu膜应力随退火温度的变化进行了研究。研究表明 :随退火温度的升高 ,Cu膜应力减小 ,2 0 0℃时平均应力减小为 - 0 2 6 1× 10 8Pa,且应力分布均匀 ,在选区范围内应力差仅为 2 2 4 4× 10 8Pa。同时用X射线衍射技术测量分析了Cu膜经过不同退火温度热处理后的微结构组织 。 展开更多
关键词 溅射Cu膜 退火温度 微结构 应力 光学相移法 硅基片 集成电路 铜薄膜 微电子技术
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烟草RAPD反应体系的建立与优化研究 被引量：13
20
作者 杨友才 周清明 尹晗琪 《中国农学通报》 CSCD 2005年第5期97-100,共4页
以烤烟品种为材料,研究了烟草RAPD分析过程中的影响因素,包括模板浓度、Mg2+、dNTP、引物、Taq酶、循环次数、退火温度等,建立了适于烟草RAPD分析的PCR反应体系:即在25μl反应体系中,模板用量为40ng;引物浓度为0.4μM;Mg2+浓度为2.5mM;d... 以烤烟品种为材料,研究了烟草RAPD分析过程中的影响因素,包括模板浓度、Mg2+、dNTP、引物、Taq酶、循环次数、退火温度等,建立了适于烟草RAPD分析的PCR反应体系:即在25μl反应体系中,模板用量为40ng;引物浓度为0.4μM;Mg2+浓度为2.5mM;dNTP浓度为0.2mM;TaqDNA聚合酶用量为1U。扩增程序为94℃预变性5min;然后94℃变性1min,38℃复性1min,72℃延伸1.5min,39个循环;最后72℃延伸5min。 展开更多
关键词 RAPD反应体系 优化研究 烟草 PCR反应体系 Mg^2+浓度 RAPD分析 dNTP浓度 烤烟品种 分析过程 模板浓度 Taq酶 循环次数 退火温度 引物浓度 扩增程序 酶用量 DNA 变性 延伸
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