GRIM-19表达对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响 被引量：9

1

作者 周颖 卫莹 +5 位作者 李敏 彭程 冯定庆 程勇 肖卫华 凌斌 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期940-943,共4页

目的:通过体内和体外实验探讨GRIM-19表达对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法:采用脂质体转染法将GRIM-19重组质粒转染HeLa细胞,建立稳定表达GRIM-19的细胞株;采用RT-PCR和Western印迹法检测HeLa细胞转染GRIM19重组质粒前后GRIM-19 mRN... 目的:通过体内和体外实验探讨GRIM-19表达对子宫颈癌HeLa细胞增殖的影响。方法:采用脂质体转染法将GRIM-19重组质粒转染HeLa细胞,建立稳定表达GRIM-19的细胞株;采用RT-PCR和Western印迹法检测HeLa细胞转染GRIM19重组质粒前后GRIM-19 mRNA和蛋白水平的表达情况;应用MTT法检测各组细胞增殖水平,并将HeLa/con、HeLa/GRIM-19细胞接种到裸鼠皮下以检测荷瘤情况;同时对移植瘤检测其GRIM-19 mRNA及其下游STAT3 mRNA的表达水平。结果:建立稳定表达GRIM-19基因的HeLa/GRIM-19细胞株。RT-PCR结果显示GRIM-19基因在HeLa/GRIM-19细胞中mRHA表达明显增加,Western印迹法检测同样发现GRIM-19蛋白的表达显著升高,而STAT3的表达明显受到抑制。MTT检测结果显示HeLa/GRIM-19细胞增殖较HeLa/con明显减慢(P<0.05),其接种后肿瘤生长速度亦明显减慢(P<0.01)。移植瘤的RT-PCR结果表明GRIM-19表达升高、STAT3表达降低。结论:GRIM-19的表达可以抑制子宫颈癌细胞的增殖,可能作为子宫颈癌治疗的一个新靶点。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 基因表达 转染 细胞增殖 肿瘤细胞 培养的 小鼠 近交balbc GRIM-19基因

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B16F10黑色素瘤小鼠双阴性T细胞变化及与肿瘤生长关系的研究 被引量：7

2

作者 徐利军 周鸿敏 +2 位作者 陈忠华 张维娜 潘铁成 《中华小儿外科杂志》 CSCD 北大核心 2009年第10期710-713,共4页

目的探讨B16F10黑色素瘤小鼠双阴性T细胞（DNT）数量变化及其与肿瘤生长的关系。方法以B16F10-luc-G5细胞系接种Babl／C小鼠建立移植瘤模型，并以活体成像系统（IVIS）监测其生长动态，流式细胞术检测接种后不同时间外周血中T淋巴细胞... 目的探讨B16F10黑色素瘤小鼠双阴性T细胞（DNT）数量变化及其与肿瘤生长的关系。方法以B16F10-luc-G5细胞系接种Babl／C小鼠建立移植瘤模型，并以活体成像系统（IVIS）监测其生长动态，流式细胞术检测接种后不同时间外周血中T淋巴细胞的比例；流式分选正常小鼠DNT再回输到B16F10黑色素瘤荷瘤小鼠体内，观察DNT对移植瘤生长的作用。结果①荷瘤鼠DNT含量高于正常鼠（P〈0．05）；CD4＋细胞含量与肿瘤大小高度负相关（R2=0．9993）；②以外源性DNT干预移植瘤，DNT干预组移植瘤生长速度较对照组快（P〈0．05）。结论B16F10黑色素瘤小鼠体内DNT的数量升高且与肿瘤大小正相关，且提高体内DNT含量可促进移植瘤生长，提示DNT将是肿瘤免疫治疗的靶点之一。 展开更多

关键词 T淋巴细胞 调节性 黑色素瘤 小鼠 近交balbc

原文传递

过继转移FasL基因修饰的树突细胞对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响 被引量：4

3

作者 熊苗 林其德 +1 位作者 鲍世民 赵爱民 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2007年第12期893-897,I0011,共6页

目的：观察过继转移FasL基因修饰的树突细胞（DC）对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响，探讨它在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法：构建鼠源FasL（mFasL）真核表达载体pcDNA3．1-mFasL，用电转染法将它转染给DBA／2雄鼠骨髓来源的DC，将... 目的：观察过继转移FasL基因修饰的树突细胞（DC）对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响，探讨它在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法：构建鼠源FasL（mFasL）真核表达载体pcDNA3．1-mFasL，用电转染法将它转染给DBA／2雄鼠骨髓来源的DC，将转染成功的mFasL-DC于交配前经腹腔注射给CBA／J母鼠。实验动物分为6组：（1）正常妊娠模型组（CBA／J×BALB／c）；（2）未添加干预的流产模型组（CBA／J×DBA／2）；（3）转输DC培养基（DCCM）的流产模型组；（4）转输单纯DC（DC）的流产模型组；（5）转输转染空质粒DC的流产模型组；（6）转输转染mFasL质粒DC的流产模型组，于妊娠第12～14天观察孕鼠胚胎丢失率。结果：转输mFasL—DC后孕鼠胚胎丢失率明显低于未添加干预或转输DC培养基的流产模型组（P〈0．01），与转输单纯DC或带空质粒的DC组相比，其胚胎丢失率也明显下降（P〈0．05），它与正常妊娠组相比胚胎丢失率无显著差异（P〉0．05）；转输单纯DC或空质粒的DC组与未添加干预流产模型组相比胚胎丢失率有所下降，但没有统计学差异；转输DC培养基组与未加干预组之间胚胎丢失率无统计学差异（P〉0．05）。结论：过继转移mFasL-DC能诱导妊娠免疫耐受，降低小鼠自然流产模型孕鼠胚胎丢失率。 展开更多

关键词 基因 FasL 树突细胞 过继转移 流产 自然 胚胎丢失 小鼠 近交CBA 小鼠 近交DBA 小鼠 近交balbc

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白眉蝮蛇蛇毒中L-氨基酸氧化酶的分离及其诱导急性肺损伤的作用 被引量：5

4

作者 魏晓龙 魏继福 +3 位作者 黄阗 陈秋玉 刘岳宁 何韶衡 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第22期2096-2099,共4页

目的:从白眉蝮蛇蛇毒分离纯化L-氨基酸氧化酶,并研究其对肺组织的影响.方法:通过Heparin-Sepharose FF及Q-Sepharose HP从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化得到一个L-氨基酸氧化酶,命名为ABU-LAO.给Balb/c小鼠静脉注射50,5,0.5μg药物或生理盐水... 目的:从白眉蝮蛇蛇毒分离纯化L-氨基酸氧化酶,并研究其对肺组织的影响.方法:通过Heparin-Sepharose FF及Q-Sepharose HP从白眉蝮蛇蛇毒中分离纯化得到一个L-氨基酸氧化酶,命名为ABU-LAO.给Balb/c小鼠静脉注射50,5,0.5μg药物或生理盐水100μL,每组6只,6 h或24 h后取材,肺组织常规切片,HE染色.高倍镜视野下计算平均红细胞数(RBCs)、平均肺泡内多形核白细胞数(IAPLs)、平均肺泡隔多形核白细胞数(ASPLs);用图像分析仪测平均肺泡面积(MACA).结果:纯化ABU-LAO并在SDS-PAGE上测定其表观M r约为60000.与生理盐水组相比RBCs,IAPLs,ASPLs,MACA在注射ABU-LAO后有显著改变(P<0.0125).结论:通过两步层析法分离纯化得到ABU-LAO,它能诱导小鼠发生严重的急性肺损伤. 展开更多

关键词 L-氨基酸氧化酶 白眉蝮蛇 急性病 肺/损伤 小鼠 近交balbc

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核因子κB抑制剂与多烯紫杉醇联合治疗未分化甲状腺癌的体内研究 被引量：6

5

作者 张富海 孟召伟 谭建 《天津医药》 CAS 北大核心 2010年第8期686-688,737,共4页

目的：研究核因子κB（NF-κB）抑制剂DHMEQ和多烯紫杉醇联合治疗未分化甲状腺癌（ATC）的效果。方法：将裸鼠随机分为多烯紫杉醇组、DHMEQ组、联合用药组和对照组,每组6只,于两髋外侧皮下分别接种细胞数目为5×106的ATC细胞系FRO,... 目的：研究核因子κB（NF-κB）抑制剂DHMEQ和多烯紫杉醇联合治疗未分化甲状腺癌（ATC）的效果。方法：将裸鼠随机分为多烯紫杉醇组、DHMEQ组、联合用药组和对照组,每组6只,于两髋外侧皮下分别接种细胞数目为5×106的ATC细胞系FRO,在2周时间内将药物进行腹腔内注射,多烯紫杉醇用量为每天5mg/kg（第5和12天腹腔内注射）,DHMEQ用量为每天6mg/kg（第5~18天腹腔内注射）,动物实验的整个观察周期为32d。在第19天从不同治疗组中抽取1只裸鼠处死,取下瘤体做TUNEL凋亡染色。结果：在接受不同方案治疗后,4组裸鼠的荷瘤体积均随着接种天数的增加而增加,不同处理因素、不同处理时间及交互作用差异具有统计学意义（F处理=54.05,F时间=300.18,F交互=70.06,均P〈0.01）。染色结果显示联合用药较单独用药的染色阳性凋亡细胞数多。4组细胞凋亡指数差异有统计学意义,多烯紫杉醇组和DHMEQ组的凋亡指数皆高于对照组,联合用药组的凋亡指数高于多烯紫杉醇组和DHMEQ组,差别均有统计学意义（均P〈0.01）。结论：联合应用NF-κB抑制剂和多烯紫杉醇治疗ATC肿瘤可以更有效地抑制瘤体的增长,获得协同治疗的效果。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 癌 NF-κB 紫杉烷类 抗肿瘤联合化疗方案 原位缺口末端标记 细胞凋亡 疾病模型 动物 小鼠 近交balbc

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山药提取物联合替加氟对结肠癌HT-29细胞株体内外杀伤作用的研究 被引量：6

6

作者 孙雯雯 宋林 +2 位作者 李宏峰 范玉强 李国琪 《天津医药》 CAS 北大核心 2018年第3期230-234,共5页

目的观察山药提取物联合替加氟对结肠癌HT-29细胞的体内外杀伤作用。方法采用2×2析因设计的方法,用含二甲基亚砜的生理盐水(空白对照)、替加氟(36 mg/L)、山药提取物(125 mg/L)、山药提取物(125 mg/L)联合替加氟(36 mg/L)作用于结... 目的观察山药提取物联合替加氟对结肠癌HT-29细胞的体内外杀伤作用。方法采用2×2析因设计的方法,用含二甲基亚砜的生理盐水(空白对照)、替加氟(36 mg/L)、山药提取物(125 mg/L)、山药提取物(125 mg/L)联合替加氟(36 mg/L)作用于结肠癌HT-29细胞后,观察细胞形态的变化,用MTT法检测对结肠癌HT-29细胞增殖抑制的情况,用流式细胞仪检测肿瘤干细胞(CD133+细胞)表达的情况。建立荷结肠癌HT-29细胞裸鼠模型,按上述方法给予治疗,计算抑瘤率。用免疫组化法检测瘤体组织的血管内皮生长因子(VEGF)阳性率。结果联合治疗组(山药提取物联合替加氟治疗组)对结肠癌HT-29增殖的抑制明显高于单独使用山药提取物组及替加氟组,3个给药组均高于空白对照组;联合治疗组作用于HT-29细胞后,细胞中CD133+细胞的比例明显低于山药提取物组及替加氟组,3个给药组均低于空白对照组。3个给药组治疗结束后,荷瘤鼠的瘤质量及VEGF阳性率明显低于空白对照组,联合治疗组低于山药提取物组及替加氟组。结论山药提取物联合替加氟对结肠癌体内外均有杀伤作用。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 HT-29细胞 山药△ 小鼠 近交balbc 肿瘤 实验性 血管内皮生长因子类 替加氟

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黄芪对小鼠哮喘模型肺组织α-SMA及FN的抑制作用 被引量：6

7

作者 王莉 王芬 +2 位作者 刘毅 马卫霞 李怀臣 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第11期42-45,共4页

目的探讨黄芪对哮喘平滑肌肌动蛋白-α及纤维连接蛋白的影响。方法随机将BALB/C小鼠60只分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、黄芪治疗组(C组)各20只。以腹腔注射0.02%鸡卵清蛋白(OVA)和1%OVA雾化吸入建立慢性哮喘模型。治疗组在每次激发前... 目的探讨黄芪对哮喘平滑肌肌动蛋白-α及纤维连接蛋白的影响。方法随机将BALB/C小鼠60只分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、黄芪治疗组(C组)各20只。以腹腔注射0.02%鸡卵清蛋白(OVA)和1%OVA雾化吸入建立慢性哮喘模型。治疗组在每次激发前给予黄芪干预。将右肺分离固定,用石蜡包埋切片,并用免疫组化染色技术染色,用LEICAQWINV3分析系统,计算表达阳性结果,把左肺置于液氮中保存,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织中平滑肌肌动蛋白-α(α-SMA)及纤维连接蛋白(FN)中信使核糖核酸(mRNA)含量,用Al-phaImager 2 200半定量分析系统分析。结果哮喘组α-SMA及FN阳性表达结果显著高于对照组(P<0.01),α-SMA mRNA及FN mRNA的表达上调(P<0.01);黄芪治疗组的α-SMA及FN的阳性表达、α-SMA mRNA及FN mRNA的表达均显著低于哮喘组(P<0.01)。结论FN及α-SMA为气道重构的重要标志物,黄芪可抑制慢性哮喘模型小鼠肺组织中α-SMA及FN表达,推测抑制α-SMA及FN的表达可能是黄芪抑制哮喘气道重构的重要机制之一。 展开更多

关键词 哮喘 膜荚黄芪 肌 平滑 连接蛋白类 气道重构 小鼠 近交balbc

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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体 被引量：4

8

作者 刘丽梅 陈宗涛 +5 位作者 高娜 田衍平 陈炜 张俊磊 王嘉丽 安静 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期327-330,共4页

目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染... 目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。 展开更多

关键词 登革热病毒 病毒非结构蛋白质类 NS2B 小鼠 近交balbc

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血管生成抑制剂SU6668联合5-Fu对人结肠癌裸鼠移植瘤肝转移的影响 被引量：4

9

作者 丁印鲁 付勤烨 +4 位作者 唐思锋 王静源 张建良 李占元 李兆亭 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第2期168-170,174,共4页

目的:探讨血管生成抑制剂SU6668联合5-Fu对人结肠癌肝转移的抑制作用。方法:将结肠癌HT-29细胞注入裸鼠脾脏,建立结肠癌肝转移模型。将裸鼠随机分为联合治疗组、SU6668组、5-Fu组和对照组4组。治疗6周后,处死裸鼠,计数肝转移率和肝转移... 目的:探讨血管生成抑制剂SU6668联合5-Fu对人结肠癌肝转移的抑制作用。方法:将结肠癌HT-29细胞注入裸鼠脾脏,建立结肠癌肝转移模型。将裸鼠随机分为联合治疗组、SU6668组、5-Fu组和对照组4组。治疗6周后,处死裸鼠,计数肝转移率和肝转移结节数。采用免疫组化SABC法和图像分析系统对肝转移肿瘤组织的微血管密度(microvessel density,MVD)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(base fibroblast growth factor,bFGF)的表达进行定量分析。结果:各组转移率依次下降,差异有统计学意义(P<0.01);在肝转移结节数目比较上,对照组结节数大于20个时各组裸鼠所占比例差异有统计学意义(P<0.01)。联合治疗组和SU6668组分别与5-Fu组及对照组相比,MVD均显著减少(P<0.05)。联合治疗组、SU6668组、5-Fu组与对照组比较,VEGF、bFGF均显著降低,且联合治疗组、SU6668组、5-Fu组3组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SU6668通过抗血管生成抑制结肠癌的肝转移,与5-Fu联合应用具有协同效应,为安全有效的抗肿瘤策略。 展开更多

关键词 新生血管化 病理性 5-氟尿嘧啶 结肠肿瘤 肝转移 小鼠 近交balbc

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淋病奈瑟球菌表面蛋白A基因疫苗的构建及其诱导小鼠的免疫应答 被引量：5

10

作者 谢良伊 胡四海 +3 位作者 唐湘云 杨胜辉 余敏君 韩福郎 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期392-397,共6页

目的构建淋病奈瑟球菌表面蛋白A(NspA)基因疫苗,并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法将NspA基因插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/NspA,并经PCR、双酶切及测序鉴定。反转录-聚合酶链反应(... 目的构建淋病奈瑟球菌表面蛋白A(NspA)基因疫苗,并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法将NspA基因插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/NspA,并经PCR、双酶切及测序鉴定。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法分别检测NspA基因转染细胞后mRNA和蛋白的表达。以pcDNA3.1(+)/NspA重组质粒免疫45只雄性BALB/c小鼠,试管凝集法检测免疫小鼠抗体滴度,EIASA检测IFN-γ水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测脾淋巴细胞增殖。提取接种部位股四头肌总DNA,PCR检测BALB/c小鼠肌细胞内NspA基因。结果成功构建pcDNA3.1(+)/NspA基因疫苗,能在真核细胞中转录和表达。pcDNA3.1(+)/NspA免疫组的抗体滴度达1:640,pcDNA3.1(+)和PBS免疫组均无特异性抗体检出。空载体pcDNA3.1(+)组IFN-γ为(23.79±11.85)pg/mL,pcDNA3.1(+)/ NspA免疫组为(169.71±30.52)pg/mL(P<0.01);脾淋巴细胞增殖的刺激指数(SI)分别为1.05±0.30和1.94±0.74(P<0.01)。并证实NspA基因可在小鼠肌细胞中稳定存在。结论构建淋病奈瑟球菌NspA基因疫苗,将其免疫BALB/c小鼠可诱导特异性体液和细胞免疫应答,为进一步用于淋病预防奠定了基础。 展开更多

关键词 奈瑟球菌 淋病 膜蛋白质类 疫苗 DNA 小鼠 近交balbc 抗体生成 免疫 细胞

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小鼠腹水IgG类单克隆抗体的制备及活性研究 被引量：1

11

作者 李涛 刘代成 《食品与药品》 CAS 2007年第12A期8-10,共3页

目的探讨小鼠腹水IgG类单克隆抗体制备及盐析法纯化的最佳条件。方法依次研究诱导剂、小鼠鼠龄及性别对小鼠腹水抗体产量和活性的影响;分别用辛酸-硫酸铵法(CA-AS)、硫酸铵沉淀法(AS)粗提小鼠腹水,比较两种方法所得粗提抗体的活性及IgG... 目的探讨小鼠腹水IgG类单克隆抗体制备及盐析法纯化的最佳条件。方法依次研究诱导剂、小鼠鼠龄及性别对小鼠腹水抗体产量和活性的影响;分别用辛酸-硫酸铵法(CA-AS)、硫酸铵沉淀法(AS)粗提小鼠腹水,比较两种方法所得粗提抗体的活性及IgG回收率。结果弗氏不完全佐剂(Freund’s incomplete adjuvant,FIA)预处理10～12周龄Balb/c小鼠可显著提高小鼠腹水产量;腹水经CA-AS法纯化后抗体效价为1:3.2×104,IgG回收率为50%～60%,优于AS法。结论弗氏不完全佐剂预处理10～12周龄Balb/c小鼠制备腹水,然后用CA-AS法纯化。 展开更多

关键词 单克隆抗体 腹水 诱导剂 小鼠 近交balbc

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Dectin-1和TLR2/TLR3/TLR4受体在免疫缺陷小鼠侵袭性肺曲霉菌病的表达 被引量：4

12

作者 栗方 曹彬 +3 位作者 曲久鑫 沈鸿 刘振嘉 王鹏 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2015年第9期116-120,共5页

目的本研究利用小鼠动物模型,探讨烟曲霉感染免疫缺陷小鼠TLR2/TLR3/TLR4对树突状细胞植物血凝素-1(Dectin-1)表达的影响。通过检测TLRs和CLRs受体在不同免疫状态下的表达,揭示介导侵袭性肺曲霉菌病(IPA)肺损伤的关键受体。方法小鼠随... 目的本研究利用小鼠动物模型,探讨烟曲霉感染免疫缺陷小鼠TLR2/TLR3/TLR4对树突状细胞植物血凝素-1(Dectin-1)表达的影响。通过检测TLRs和CLRs受体在不同免疫状态下的表达,揭示介导侵袭性肺曲霉菌病(IPA)肺损伤的关键受体。方法小鼠随机分成四组,A组为正常对照组;B组为环磷酰胺免疫抑制+未接种烟曲霉菌;C组正常状态小鼠+烟曲霉菌接种;D组为IPA感染组,免疫抑制+烟曲霉菌接种。采用real-time PCR方法进行小鼠肺组织各个时相点的TLR2、TLR3、TLR4、Dectin-1和β-actin m RNA的表达,检测受体间的相互表达调控。结果正常状态感染组(C组N+AF),TLR4/TLR2、Dectin-1 m RNA比正常对照组表达上调;IPA模型组(D组CP+AF),Dectin-1和TLR4、TLR2 m RNA比正常状态感染组表达下调;但TLR3 m RNA 48 h、72 h表达没有明显不同(P>0.05)。病理切片模型组小鼠72 h可见较严重的出血和充血;96 h时肺内有菌丝,肺泡间隔增宽,支气管壁破坏。正常状态感染烟曲霉小鼠72 h可见充血,肺泡弹性纤维破坏。结论成功建立了小鼠IPA动物模型,Dectin-1受体表达下调可能是环磷酰胺免疫抑制引起IPA的机制之一。Dectin-1的表达可能是建立在TLR2/TLR4对烟曲霉早期识别的基础上,TLR3可能起协同作用。 展开更多

关键词 小鼠 近交balbc 烟曲霉菌 免疫抑制 侵袭性肺曲霉菌病

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黄芪注射液对同种移植小鼠糖皮质激素受体及移植物生存的影响 被引量：4

13

作者 苏玉玲 曲莉莉 侯桂华 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第7期86-89,99,共5页

目的探讨黄芪注射液(AMI)是否通过调节糖皮质激素代谢影响同种移植物生存。方法体内应用AMI后,逐日观察同种移植小鼠移植物生存状况;应用受体放射配基结合分析测定脾细胞糖皮质激素受体(GR)结合位点;利用放射免疫分析检测血清皮质醇水... 目的探讨黄芪注射液(AMI)是否通过调节糖皮质激素代谢影响同种移植物生存。方法体内应用AMI后,逐日观察同种移植小鼠移植物生存状况;应用受体放射配基结合分析测定脾细胞糖皮质激素受体(GR)结合位点;利用放射免疫分析检测血清皮质醇水平。结果同种移植早期小鼠脾细胞GR结合位点数和血清皮质醇明显升高,此后逐渐下降,在排斥高峰期(第14天)达到最低值。单用AMI(60 g/kg)或环磷酰胺(CTX,100 mg/kg)及二者联合应用均可显著延长同种移植物的生存时间。AMI单独或与CTX联合应用可以明显上调排斥高峰期受体小鼠脾细胞GR位点数和血清皮质醇水平,AMI可以逆转CTX引起的GR结合位点数的下降(P<0.05)。结论 AMI可明显抑制同种移植排斥反应,与CTX联用可明显提高移植物存活率,其作用机制可能与上调GR结合位点数和血清皮质醇水平,促进内源性糖皮质激素发挥作用有关。 展开更多

关键词 黄芪注射液 糖皮质激素受体 皮质醇 同种皮肤移植 小鼠 近交balbc

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活化态肝星状细胞对小鼠肝细胞肝癌血管形成、肿瘤生长及转移的作用 被引量：4

14

作者 陈之巨 林楠 +2 位作者 潘楚芝 卢逸 许瑞云 《中华肝脏外科手术学电子杂志》 CAS 2013年第3期44-49,共6页

目的探讨活化态的肝星状细胞（HSC）对小鼠肝细胞肝癌（肝癌）血管形成、肿瘤生长及转移的作用。方法将30只BALB／c．nu雌性裸鼠按随机数字表法分成3组，每组各10只，单纯组将1×10^6个H22肝癌细胞注射于裸鼠肝脏，低浓度组将1×... 目的探讨活化态的肝星状细胞（HSC）对小鼠肝细胞肝癌（肝癌）血管形成、肿瘤生长及转移的作用。方法将30只BALB／c．nu雌性裸鼠按随机数字表法分成3组，每组各10只，单纯组将1×10^6个H22肝癌细胞注射于裸鼠肝脏，低浓度组将1×10^6个H22肝癌细胞及1×10^5个羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯（CFSE）标记的HSC-T6细胞注射于裸鼠肝脏，高浓度组将1×10^6个H22肝癌细胞及4×10^5个CFSE标记的HSC-T6细胞注射于裸鼠肝脏；各组裸鼠生长50d后处死，观察肝原位肿瘤、肝转移瘤、肺转移瘤的数量和体积。应用免疫组织化学方法（免疫组化法）检测肝原发肿瘤组织、肝转移瘤组织及肺转移瘤α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、分化群抗原（CD）34、血管内皮生长因子（VEGF）及增殖细胞核抗原（PCNA）的表达水平；用蛋白质印迹法检测VEGF蛋白含量。观察HSC对肝癌血管形成、增殖作用影响。两组实验数据比较采用t检验，3组实验数据比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验。结果免疫荧光法检测显示HSC—T6细胞株中HSC细胞纯度〉95％，CFSE标记的HSC为绿色荧光细胞，细胞培养8周，CFSE染色的荧光强度稳定。单纯组肝癌成瘤率70％，低浓度组成瘤率70％，高浓度组成瘤率为80％。高浓度组肝内原位肿瘤体积明显大于低浓度组及单纯肝癌细胞组，差异有统计学意义（LSD—t=0．04，0．04；P〈0．05）。高浓度组裸鼠肝内转移瘤及肺转移瘤数目明显多于低浓度组及单纯组（LSD-t=0．33，0．57；P〈0．05）。单纯组、低浓度组及高浓度组原发肿瘤组织中仪．SMA数密度分别为（19±4）、（42±4）及（62±6）个／高倍镜视野，高浓度组α—SMA数密度明显多于低浓度组及单纯肝癌细胞组，差异有统计学意义（LSD—t=2．12，2．12；P〈0．05）；单纯组、低浓度� 展开更多

关键词 癌 肝细胞 肝星形细胞 微血管 疾病模型 动物 小鼠 近交balbc

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沙眼衣原体感染对树突状细胞功能的影响 被引量：1

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作者 赵红梅 赵蔚明 +7 位作者 于修平 赵蕾 王红 郑燕 吕慧 李靖 刘娟 于晗 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2007年第10期973-976,980,共5页

目的探讨鼠型沙眼衣原体(Chlamydia muridarum,C.muridarum)在树突状细胞(Dendritic Cell,DC)内的存活情况以及对DC功能的影响,为衣原体致病机制的研究提供实验依据。方法诱导培养BALB/c小鼠骨髓来源的DC。用C.muridarum感染DC,分别在24... 目的探讨鼠型沙眼衣原体(Chlamydia muridarum,C.muridarum)在树突状细胞(Dendritic Cell,DC)内的存活情况以及对DC功能的影响,为衣原体致病机制的研究提供实验依据。方法诱导培养BALB/c小鼠骨髓来源的DC。用C.muridarum感染DC,分别在247、2 h固定细胞进行衣原体包涵体染色;采用ELISA方法检测感染DC上清中的细胞因子;感染DC与T细胞共孵育48 h,CCK-8检测T细胞增殖。结果C.muri-darum能够感染骨髓来源DC,衣原体在DC中生长缓慢,形成非典型的包涵体;感染后的DC分泌较高水平的IL-12和低水平的IL-10;并且能够刺激T细胞增殖,说明衣原体感染的DC仍然具有抗原递呈能力。结论成功建立C.muridarum感染DC的体外细胞模型,且沙眼衣原体感染对DC抗原递呈功能没有造成明显影响。 展开更多

关键词 衣原体 沙眼 树突细胞 小鼠 近交balbc

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内皮抑素基因治疗裸鼠子宫内膜异位症对Ang-2/Tie-2的影响 被引量：2

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作者 宋洁 尹利荣 +1 位作者 马洪达 孙俊杰 《天津医药》 CAS 北大核心 2010年第2期124-126,163,共4页

目的:探讨内皮抑素对裸鼠子宫内膜异位病灶中血管生成素2(Ang-2)/酪氨酸蛋白激酶受体2(Tie-2)系统表达的影响。方法:采用腹膜种植方法建立子宫内膜异位症(EMs)裸鼠模型共60只。造模1周后,随机分成内皮抑素组、空病毒组和磷酸盐缓冲液(P... 目的:探讨内皮抑素对裸鼠子宫内膜异位病灶中血管生成素2(Ang-2)/酪氨酸蛋白激酶受体2(Tie-2)系统表达的影响。方法:采用腹膜种植方法建立子宫内膜异位症(EMs)裸鼠模型共60只。造模1周后,随机分成内皮抑素组、空病毒组和磷酸盐缓冲液(PBS)对照3组,每组各20只,观察各组镜下子宫内膜组织学变化,并采用免疫组化法检测各组异位内膜组织Ang-2及Tie-2的表达情况。结果:成功建立裸鼠EMs模型。空病毒组和PBS组腺体增生明显,间质血管丰富;内皮抑素组腺体萎缩,间质血管减少。Ang-2、Tie-2均在子宫内膜腺上皮细胞、间质细胞中表达,定位于细胞质。Ang-2在内皮抑素组的阳性率(40%)显著低于空病毒组(75%)和PBS组(80%)(均P<0.05);Tie-2在内皮抑素组的阳性率(45%)显著低于空病毒组(80%)和PBS组(85%)(均P<0.05)。结论:内皮抑素对裸鼠EMs模型异位病灶中Ang-2/Tie-2血管生成途径有抑制作用,为其抗血管生成治疗EMs的临床应用奠定基础。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 血管生成素-2 内皮抑素类 小鼠 近交balbc

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单纯疱疹病毒Ⅱ型gD糖蛋白核酸疫苗的构建及免疫观察 被引量：2

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作者 邵文爱 李晓眠 李梅 《天津医药》 CAS 北大核心 2006年第1期42-44,共3页

目的:构建用于防治单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)引起的生殖器疱疹的DNA疫苗,并探讨其免疫保护作用。方法:利用PCR法从HSV-ⅡSav株中扩增出gD糖蛋白基因的全部编码序列,将其插入pcDNA3中,构建HSV-IIgD核酸疫苗,用PCR法、酶切法和测序法进行... 目的:构建用于防治单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)引起的生殖器疱疹的DNA疫苗,并探讨其免疫保护作用。方法:利用PCR法从HSV-ⅡSav株中扩增出gD糖蛋白基因的全部编码序列,将其插入pcDNA3中,构建HSV-IIgD核酸疫苗,用PCR法、酶切法和测序法进行鉴定;将重组质粒转染COS-7细胞,用原位ELISA检测表达产物;对BALB/c小鼠进行肌肉免疫,用微量细胞中和试验、ELISA、脾T淋巴细胞增殖反应和病毒攻击试验检测免疫效果。结果:构建的HSV-ⅡgD核酸疫苗具有良好的免疫原性,对小鼠具有保护作用。结论:本实验成功构建出了具有免疫防御效应的HSV-ⅡgD核酸疫苗。 展开更多

关键词 疱疹病毒2型 人 糖蛋白类 疫苗 DNA 小鼠 近交balbc

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内分泌—免疫系统相互关系的研究——Ⅰ.甲状腺素对荷瘤鼠及免疫损伤鼠免疫功能的调节 被引量：2

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作者 孙汶生 曹英林 +4 位作者 王维岳 王东方 潘沛恩 谷艳萍 张宝珠 《山东医科大学学报》 1991年第4期292-295,297-298,共4页

本研究证实,S_(130)肉瘤(腹水型)、肝癌及CCl_4慢性中毒致免疫功能损伤的BALB/C小鼠均伴有血清T_3,T_4明显降低。用小剂量甲状腺片1.2(μg·g)/d治疗后,见血清T_3,T_4逐渐恢复,并伴有巨噬细胞-胸腺淋巴细胞受体活性变化、吞噬活性升... 本研究证实,S_(130)肉瘤(腹水型)、肝癌及CCl_4慢性中毒致免疫功能损伤的BALB/C小鼠均伴有血清T_3,T_4明显降低。用小剂量甲状腺片1.2(μg·g)/d治疗后,见血清T_3,T_4逐渐恢复,并伴有巨噬细胞-胸腺淋巴细胞受体活性变化、吞噬活性升高,脾NK细胞自然杀伤效应增强及溶血素抗体测定OD值增高等免疫指标的改变。表明小剂量甲状腺素对免疫损伤鼠及荷瘤鼠有免疫调节的生物活性作用。 展开更多

关键词 甲状腺素 免疫学试验 小鼠 近交balbc

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免疫磁珠分离法分选提纯骨髓造血干细胞CD117 被引量：1

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作者 任玮 左丽 钟志强 《贵阳医学院学报》 CAS 2009年第2期167-169,共3页

目的:探讨用免疫磁珠分离法(magnetic activated cell sorting,MACS)从小鼠股骨、胫骨分离纯化骨髓造血干细胞CD117的方法。方法:收集小鼠骨髓细胞,台盼蓝染色观察其活力,用免疫磁珠分离法分选CD117细胞,流式细胞仪检测荧光标记CD117表... 目的:探讨用免疫磁珠分离法(magnetic activated cell sorting,MACS)从小鼠股骨、胫骨分离纯化骨髓造血干细胞CD117的方法。方法:收集小鼠骨髓细胞,台盼蓝染色观察其活力,用免疫磁珠分离法分选CD117细胞,流式细胞仪检测荧光标记CD117表达阳性率。结果;未分选前CD117细胞纯度为(41.56±18.77)%,MACS分选CD117细胞纯度(88.68±4.74)%,纯化前后有明显差异(P<0.05)。结论:MACS阳性选择法分选系统能有效分选骨髓造血干细胞CD117。 展开更多

关键词 造血干细胞 CD117+细胞 免疫磁珠分离法 小鼠 近交balbc

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高表达IDO的树突状细胞抑制T细胞增殖的实验研究 被引量：2

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作者 赵智成 刘彤 +4 位作者 戴向晨 赵娜 邱宇杰 朱理玮 王鹏志 《天津医药》 CAS 北大核心 2010年第6期496-498,547,共4页

目的:研究基因转染后高表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的树突状细胞(DC)对T细胞增殖的抑制作用,以探讨其在器官移植中排斥反应的作用。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从腹膜炎小鼠的小肠组织中获取IDO全长cDNA片段,将其克隆至真... 目的:研究基因转染后高表达吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的树突状细胞(DC)对T细胞增殖的抑制作用,以探讨其在器官移植中排斥反应的作用。方法:采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从腹膜炎小鼠的小肠组织中获取IDO全长cDNA片段,将其克隆至真核表达质粒pTracer中,构建真核表达质粒IDO-pTracer,随后用LipofectamineTM2000介导转染小鼠脾脏DC,分为未转染组、空载体转染组、IDO基因转染组和IDO基因转染并添加1-甲基色氨酸(1-MT)组,以混合淋巴细胞反应的方法检测转染后DC对同种异系T细胞增殖的作用。结果:克隆的小鼠IDO基因全长cDNA大小约1.3kb,无碱基突变,以构建的重组真核表达质粒IDO-pTracer转染DC后,混合淋巴细胞反应结果显示IDO基因转染组的刺激指数(SI)低于未转染组、空载体转染组及IDO基因转染并添加1-MT组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建了IDO基因的真核表达载体IDO-pTracer,且IDO基因转染DC具有抑制异系T细胞增殖的作用。 展开更多

关键词 吲哚胺-吡咯2 3-双加氧酶 树突细胞 T淋巴细胞亚群 细胞增殖 小鼠 近交C57BL 小鼠 近交balbc

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