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弗氏志贺菌2a 2457T株蛋白复合体BN/SDS-PAGE电泳方法的建立 被引量：1
1
作者 商娜 朱力 +4 位作者 刘小青 刘先凯 冯尔玲 游松 王恒樑 《军事医学科学院院刊》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期280-283,共4页
目的建立分离弗氏志贺菌2a2457T株胞内可溶性复合物的BN/SDS-PAGE电泳方法 ,并优化分离条件。方法分别比较了不同配胶方式、配胶长度以及胶条平衡方法。结果成功建立了分离弗氏志贺菌2a2457T株胞内可溶性复合物的方法。结论本实验所建... 目的建立分离弗氏志贺菌2a2457T株胞内可溶性复合物的BN/SDS-PAGE电泳方法 ,并优化分离条件。方法分别比较了不同配胶方式、配胶长度以及胶条平衡方法。结果成功建立了分离弗氏志贺菌2a2457T株胞内可溶性复合物的方法。结论本实验所建立及优化的方法 ,可以有效地分离蛋白复合体,为进一步研究志贺菌属蛋白复合体奠定了基础,并对以后的实验具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 志贺菌 弗氏 蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白复合体 蛋白质组学
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蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统在多蛋白质复合体研究中的应用 被引量：1
2
作者 刘金凤 孙志贤 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2010年第2期191-194,共4页
多蛋白质复合体(MPCs)是蛋白质在体内发挥功能的重要形式之一。鉴定MPCs对于整体理解决定蛋白质功能和细胞行为的蛋白质-蛋白质相互作用网络具有至关重要的意义。鉴定MPCs的限制因素之一是MPCs的分离方法。蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳... 多蛋白质复合体(MPCs)是蛋白质在体内发挥功能的重要形式之一。鉴定MPCs对于整体理解决定蛋白质功能和细胞行为的蛋白质-蛋白质相互作用网络具有至关重要的意义。鉴定MPCs的限制因素之一是MPCs的分离方法。蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(BN-PAGE)系统是研究这些复合体的强有效的工具。BN-PAGE系统是一种依赖于染料考马斯亮蓝(CBB)G-250给蛋白质加上负电荷的非变性蛋白分离方法,适用于分离相对分子质量10×103至10×106范围的MPCs。近年来,有关BN-PAGE系统用于哺乳动物细胞MPCs研究的报道有了很大的增长。本文重点对BN-PAGE系统的原理、发展及应用进行综述。 展开更多
关键词 蛋白质类 多蛋白质复合体 蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 分离 原理 应用
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BN-PAGE在棕色脂肪线粒体呼吸链超级复合体分析中的应用
3
作者 许时鸿 王菡颖 +2 位作者 张智炜 王玉刚 刘转转 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第12期1556-1561,共6页
目的建立一种敏感、特异的棕色脂肪线粒体超级复合体(supercomplexes,SCs)分离及活性检测方法,有助于了解棕色脂肪线粒体的功能。方法分离并纯化小鼠棕色脂肪线粒体。采用蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(blue native polya-crylamide gel... 目的建立一种敏感、特异的棕色脂肪线粒体超级复合体(supercomplexes,SCs)分离及活性检测方法,有助于了解棕色脂肪线粒体的功能。方法分离并纯化小鼠棕色脂肪线粒体。采用蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(blue native polya-crylamide gel electrophoresis,BN-PAGE)分离不同大小的线粒体SCs。经考马斯亮蓝染色和免疫印迹分析各组分的表达情况。将凝胶置于不同的底物液孵育,根据显色反应确定线粒体复合物的酶活性。结果成功提取棕色脂肪线粒体。考马斯亮蓝染色和免疫印迹结果显示棕色脂肪线粒体SCs清晰可见,分子量在720~1236 kD之间,与预期相符。棕色脂肪线粒体SCs在复合物Ⅰ或复合物Ⅱ的底物液中呈紫色,在复合物Ⅳ的底物液中呈棕色。结论本研究建立的棕色脂肪线粒体SCs分析方法简便易行、结果直观,为肥胖及其相关代谢性疾病的研究提供了实验基础。 展开更多
关键词 棕色脂肪细胞 蓝色非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 线粒体 超级复合体
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