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转基因玉米研究进展 被引量：29
1
作者 李余良 胡建广 《中国农学通报》 CSCD 2006年第3期71-75,共5页
植物转基因技术开辟了作物遗传改良的新途径。转基因玉米是植物基因工程领域研究的热点之一。近年来,应用转基因技术已经获得抗虫、抗除草剂和其他有用性状的转基因玉米。在此,就玉米转基因在受体系统、目的基因及转化方法方面的研究成... 植物转基因技术开辟了作物遗传改良的新途径。转基因玉米是植物基因工程领域研究的热点之一。近年来,应用转基因技术已经获得抗虫、抗除草剂和其他有用性状的转基因玉米。在此,就玉米转基因在受体系统、目的基因及转化方法方面的研究成果,尤其是近年来玉米转基因研究方面存在的问题、解决途径以及其他类型玉米的转基因研究进展做了综述。 展开更多
关键词 转基因玉米 受体系统 目的基因 转化方法 其他类型玉米
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绿色荧光蛋白及其在植物分子生物学中的应用 被引量：20
2
作者 吴瑞 张树珍 《分子植物育种》 CAS CSCD 2005年第2期240-244,共5页
绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)是源于海洋生物多管水母属(AequoriaVictoria)的一种发光蛋白,能够自身催化形成生色团并在蓝光或紫外光激发下发出绿色荧光,能在活细胞内稳定表达。GFP的荧光反应不需要任何底物及辅助因子,... 绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein,GFP)是源于海洋生物多管水母属(AequoriaVictoria)的一种发光蛋白,能够自身催化形成生色团并在蓝光或紫外光激发下发出绿色荧光,能在活细胞内稳定表达。GFP的荧光反应不需要任何底物及辅助因子,使表达检测非常简单。同时,GFP在细胞中呈自主表达,没有细胞种类、位置和种属的特异性。GFP对受体细胞无毒性,对目的基因没有影响。因而可以很方便的对活体进行观察,来研究GFP基因的表达。由于GFP对光漂白、氧化剂、还原剂、酸、碱以及其它许多化学试剂具有极强的稳定性,因此,GFP作为报告基因可用来监测转基因的表达、信号转导、蛋白运输与定位等。本文对GFP基础理论研究及在植物分子生物学中的应用作了综述。 展开更多
关键词 稳定表达 白及 GFP基因 绿色荧光蛋白 细胞 活体 观察 植物分子生物学 水母 目的基因
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果树核DNA提取、目的基因分离与克隆技术研究进展 被引量：21
3
作者 陈桂信 潘东明 +2 位作者 吕柳新 王凤华 赖钟雄 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第1期44-50,共7页
介绍了果树核 DNA的提取及目的基因分离的研究方法 ,并对核 DNA的几种主要提取方法的优缺点进行比较 。
关键词 果树 核DNA 目的基因 克隆 分离 提取
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HIV-1慢病毒载体的构建及结构改造 被引量：21
4
作者 李振宇 徐开林 +4 位作者 潘秀英 鹿群先 何徐彭 孙海英 主鸿鹄 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期571-572,共2页
关键词 慢病毒载体 HIV-1 转导 逆转录病毒 腺病毒载体 免疫反应 细胞 目的基因 分裂 质粒
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PCR定量方法概述 被引量：4
5
作者 宋敏 胡建民 何孔旺 《上海畜牧兽医通讯》 2005年第2期18-19,共2页
关键词 定量方法 20世纪80年代 聚合酶链式反应 核酸扩增技术 核酸分子 CHAIN DNA片段 PCR技术 目的基因 直接观察 定性方法 定量分析 重复性 自动化
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植物基因分离的图位克隆技术 被引量：8
6
作者 闫其涛 逯慧 +1 位作者 毛万霞 李建粤 《分子植物育种》 CAS CSCD 2005年第4期585-590,共6页
传统的基因功能克隆、表型克隆方法具有基因表达产物不清楚,难以进行相关基因分离等缺点。目前,图位克隆技术日渐成熟,已成为分离基因的有效方法,并在分离不同的植物基因中得到了广泛的应用。本文简要介绍图位克隆技术原理,并详细阐述... 传统的基因功能克隆、表型克隆方法具有基因表达产物不清楚,难以进行相关基因分离等缺点。目前,图位克隆技术日渐成熟,已成为分离基因的有效方法,并在分离不同的植物基因中得到了广泛的应用。本文简要介绍图位克隆技术原理,并详细阐述图位克隆操作的4个重要技术环节:筛选与目的基因紧密连锁的分子标记、目的基因的定位、构建高质量容易操作的大片段基因组文库和目的基因的筛选和鉴定。本文还概述了近年来利用图位克隆技术分离植物基因的研究成果以及最新研究进展,并对图位技术的应用前景作出展望:在不久的将来,在比较基因组学中统一遗传系统理论的指导下,在具有高多态性水平的以PCR为基础的分子标记日趋饱和的背景下,应用图位克隆技术在植物基因克隆研究中必将取得更加辉煌的成果。 展开更多
关键词 克隆技术 基因分离 基因表达产物 图位克隆 目的基因 比较基因组学 植物基因 分子标记 基因组文库 功能克隆 克隆方法 有效方法 技术原理 技术环节 研究进展 研究成果 技术分离 系统理论 基因克隆 行相关 应用 PCR 多态性
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猪2型圆环病毒核酸疫苗的接种Balb/c小鼠实验免疫研究 被引量：14
7
作者 金宁一 秦晓冰 +4 位作者 郑敏 鲁会军 张洪勇 尹革芬 葛淑敏 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期76-79,共4页
为了筛选得到较理想的核酸疫苗,用pVAX1真核表达载体,以猪白介素18基因、猪2型圆环病毒内蒙株的衣壳蛋白和与复制相关蛋白基因为目的基因,构建了4个重组质粒,分别是pVAX1-ORF2、pVAX1-UL18ORF2、pVAX1-ORF2ORF1和pVAX1-IL18ORF2ORF1。... 为了筛选得到较理想的核酸疫苗,用pVAX1真核表达载体,以猪白介素18基因、猪2型圆环病毒内蒙株的衣壳蛋白和与复制相关蛋白基因为目的基因,构建了4个重组质粒,分别是pVAX1-ORF2、pVAX1-UL18ORF2、pVAX1-ORF2ORF1和pVAX1-IL18ORF2ORF1。用它们免疫6-8周龄Balb/c小鼠,进小鼠后一周首免,每隔19d免1次,共免3次;每10d采血1次,三免后10d杀鼠取脾。用ELISA方法检测小鼠血清抗体效价,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚类CD4+、CD8+数量。统计学分析发现:4个核酸疫苗实验免疫组均是从最后一次采集的小鼠血清中,获得最高的抗体效价,与对照组PBS和空载体pVAX1相比都能产生一定的体液免疫反应,且以pVAx1-IL18ORF2ORF1核酸疫苗免疫小鼠产生的血清抗体效价最高;脾T淋巴细胞亚类数量测定发现,免疫实验组的CD4+与CD8+的T细胞亚类总数显著高于对照组(P<0.05),并以pVAX-1-IL18ORF2ORF1数值较高。结论是核酸疫苗pVAX1-IL18ORF2ORF1既能较好地刺激细胞免疫又能产生一定的体液免疫反应,相对较好,将作为候选核酸疫苗进行下一步本体动物免疫实验研究。 展开更多
关键词 BALB/C小鼠 猪2型圆环病毒 核酸疫苗 免疫研究 血清抗体效价 淋巴细胞亚类 体液免疫反应 ELISA方法 接种 真核表达载体 流式细胞仪 统计学分析 目的基因 蛋白基因 衣壳蛋白 重组质粒 免疫小鼠 数量测定 免疫实验 细胞免疫
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转基因食品及其卫生管理(综述) 被引量：20
8
作者 郑云雁 李小芳 《中国食品卫生杂志》 1998年第5期36-39,共4页
转基因食品及其卫生管理（综述）郑云雁李小芳卫生部食品卫生监督检验所（１０００２１）随着生产技术的发展，食品的种类越来越多。传统的农业生产杂交和诱导突变技术可使作为食品资源的微生物、植物和动物具有所需的特性。但由于遗传... 转基因食品及其卫生管理（综述）郑云雁李小芳卫生部食品卫生监督检验所（１０００２１）随着生产技术的发展，食品的种类越来越多。传统的农业生产杂交和诱导突变技术可使作为食品资源的微生物、植物和动物具有所需的特性。但由于遗传上的巨大差异，使杂交受到限制，〔１... 展开更多
关键词 转基因食品 卫生管理 安全性评价 食品的安全性 营养成分 食品添加剂 微生物 传统食品 蕃茄 目的基因
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实时荧光定量PCR技术及在结核病诊断实验室的研究和应用 被引量：21
9
作者 李国利 《临床肺科杂志》 2008年第10期1315-1317,共3页
关键词 荧光定量PCR技术 结核病诊断 实验室 选择性扩增 临床基因诊断 基因片断 基因片段 目的基因
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用开苞导入法将抗旱耐盐基因导入玉米自交系的初步研究 被引量：13
10
作者 刘祥久 姜敏 +3 位作者 张喜华 杨立国 郭延玲 郝楠 《杂粮作物》 CAS 2005年第3期134-135,共2页
2003年夏季利用开苞导入法经花粉管通道,将抗旱耐盐基因HVA1和碱蓬、芦苇的DNA导入到稳定的玉米自交系中,获得2096粒种子,2003年冬至2004年夏,通过苗期反复干旱法及田间标记性状抗旱鉴定,对后代材料进行了详细的观察和分析。结果表明应... 2003年夏季利用开苞导入法经花粉管通道,将抗旱耐盐基因HVA1和碱蓬、芦苇的DNA导入到稳定的玉米自交系中,获得2096粒种子,2003年冬至2004年夏,通过苗期反复干旱法及田间标记性状抗旱鉴定,对后代材料进行了详细的观察和分析。结果表明应用这种方法导入抗旱目的基因和含抗旱性状种质的总DNA可以得到玉米抗旱新资源,是一条切实可行、有效的抗旱育种新方法。 展开更多
关键词 玉米自交系 导入法 基因导入 2003年夏季 花粉管通道 DNA导入 2004年 耐盐基因 抗旱鉴定 标记性状 反复干旱 总DNA 抗旱性状 目的基因 抗旱育种 新资源 种子 田间 苗期 后代 种质
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超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒的制备及其作为基因载体的可行性研究 被引量：13
11
作者 曹正国 周四维 +3 位作者 孙凯 鲁雄兵 罗刚 刘继红 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1105-1109,共5页
背景与目的:磁性纳米颗粒作为基因载体在肿瘤基因治疗中的应用得到了迅速发展。为了能获得驱动目的基因高效稳定表达、安全无害、靶向性高、简便的新型非病毒型基因导入和治疗系统,本研究探讨超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒(superparamag... 背景与目的:磁性纳米颗粒作为基因载体在肿瘤基因治疗中的应用得到了迅速发展。为了能获得驱动目的基因高效稳定表达、安全无害、靶向性高、简便的新型非病毒型基因导入和治疗系统,本研究探讨超顺磁性葡聚糖氧化铁纳米颗粒(superparamagneticdextranironoxidenanoparticles,SDION)的制备及其作为体外基因载体的可行性。方法:采用化学共沉淀法制作SDION,通过丙烯葡聚糖凝胶S-300HR色谱和离心法分离SDION,用透射电镜、粒度分析仪和磁力计对SDION进行分析。以绿色荧光蛋白(GFP-C2)质粒为靶基因,通过氧化还原法构建SDION-GFP-C2复合物,用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测两者的结合率。以脂质体转染作为对照,荧光显微镜分别观察SDION和脂质体体外转染GFP-C2入膀胱癌细胞BIU-87的转染效率。结果:SDION直径在3～8nm之间,有效粒径为59.2nm,比饱和磁化强度为0.23emu/g。分别经10mmol/L的高碘酸钠氧化、0.5mol/L的硼氢化钠还原作用后的SDION和GFP的结合比例最大,SDION对GFPDNA的转染效率为45%左右,明显高于脂质体的转染效率(30%左右)。结论:SDION可通过氧化还原反应与GFP质粒相连,在体外可将GFP基因成功转染入人膀胱癌BIU-87细胞。 展开更多
关键词 基因载体 转染效率 体外 脂质体 质粒 治疗系统 肿瘤基因治疗 GFP基因 目的基因 超顺磁性
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家蝇幼虫天蚕素基因的克隆与序列分析 被引量：15
12
作者 金小宝 许琴英 +1 位作者 徐建华 朱家勇 《中国热带医学》 CAS 2004年第6期903-906,共4页
目的　对家蝇幼虫天蚕素基因进行克隆和序列分析。　方法　根据Genbank公布的家蝇成虫天蚕素Ce cropin基因序列设计一对引物 ,以家蝇幼虫cDNA文库液为模板 ,PCR扩增该基因的编码区序列。　结果　家蝇幼虫天蚕素cDNA目的基因的长度为 2 2... 目的　对家蝇幼虫天蚕素基因进行克隆和序列分析。　方法　根据Genbank公布的家蝇成虫天蚕素Ce cropin基因序列设计一对引物 ,以家蝇幼虫cDNA文库液为模板 ,PCR扩增该基因的编码区序列。　结果　家蝇幼虫天蚕素cDNA目的基因的长度为 2 2 9bp ,与成虫防御素基因一致性为 96% ;最大的ORF位于 2 0bp～ 2 11bp ,含 192bp ,编码 63个氨基酸。　结论　初步预测了该基因编码蛋白的化学性质和二级结构 ,为该基因的重组表达研究打下基础。 展开更多
关键词 目的基因 家蝇幼虫 天蚕素 克隆 序列分析 防御素 重组表达 二级结构 编码区 CDNA文库
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转基因植物的研究与开发利用 被引量：7
13
作者 雷秉乾 王仁祥 《作物研究》 2006年第1期9-12,共4页
从目的基因性状的类型、转化方法两方面综述了转基因植物的研究现状,并简述了转基因植物的研究发展历程及在全球和中国的应用概况。
关键词 转基因植物 目的基因 转化方法 研究现状 开发利用
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反义技术研究进展 被引量：10
14
作者 王波 陈梅红 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第12期43-47,共5页
反义技术利用DNA或RNA分子通过Watson Crick碱基配对原则与目的基因的mRNA互补结合 ,通过各种机制使其降解或抑制其编码蛋白的翻译 ,从而抑制目的基因的表达。与基因敲除(geneknockout)等功能缺失性研究方法相比 ,反义技术具有投入少 ,... 反义技术利用DNA或RNA分子通过Watson Crick碱基配对原则与目的基因的mRNA互补结合 ,通过各种机制使其降解或抑制其编码蛋白的翻译 ,从而抑制目的基因的表达。与基因敲除(geneknockout)等功能缺失性研究方法相比 ,反义技术具有投入少 ,周期短 ,操作简单等优点 ,因此受到了广泛的关注。对几种常用反义技术的研究进展及存在的问题进行概述。 展开更多
关键词 反义技术 研究进展 抑制 目的基因 表达 碱基配对 基因敲除 RNA分子 DNA 编码蛋白
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血管内皮生长因子基因改善大鼠腹壁下动脉皮瓣成活的实验研究 被引量：10
15
作者 熊兵 易传勋 +3 位作者 过健俐 张一鸣 冯晓玲 周文东 《中华整形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期211-213,共3页
目的　通过血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因对腹壁下动脉皮瓣的转染 ,探讨应用VEGF基因对皮瓣成活的影响。方法　以SD大鼠为实验模型制作腹壁下动脉皮瓣 ,并分别注入脂质体包裹的PCD VEGF1 6 5(目的基因组... 目的　通过血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因对腹壁下动脉皮瓣的转染 ,探讨应用VEGF基因对皮瓣成活的影响。方法　以SD大鼠为实验模型制作腹壁下动脉皮瓣 ,并分别注入脂质体包裹的PCD VEGF1 6 5(目的基因组 ) ,PCD(空白质粒组 )和生理盐水 (生理盐水组 )。术后 ,①通过腹腔注射荧光素钠估计皮瓣的血流量 ;②计算断蒂后各组大鼠皮瓣的成活面积 ;③取大鼠皮肤标本行常规染色检测平均血管数目及内径 ;④皮肤标本行VEGF免疫组化染色检测VEGF表达情况。结果　目的基因组、空白质粒组和生理盐水组的平均荧光染色面积分别为6 0 6 4%、30 15 %、2 9 89%(P <0 0 5 ) ,大鼠断蒂后的平均成活面积分别为 92 3%、30 5 %、31 8%(P<0 0 5 ) ,平均血管数目分别为 10 1 72、91 35、89 85 (P <0 0 5 ) ,平均血管内径分别为 2 6、31 0 9、32 5 1μm(P <0 0 5 ) ,免疫组化染色示目的基因组染色深度明显高于空白质粒组和生理盐水组 (P <0 0 5 )。结论　PCD VEGF1 6 5转染能够改善皮瓣的成活 ,且通过转染表达了丰富的VEGF1 6 5。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子 皮瓣 腹壁 大鼠 动脉 VEGF165 白质 目的基因 质粒 转染
原文传递
基于Cre-loxP系统条件性基因敲除小鼠的构建及其应用进展 被引量：14
16
作者 孔维健 常宇鑫 +2 位作者 昝春芳 郑爽 杨小玉 《中国实验诊断学》 2017年第12期2208-2211,共4页
随着科研技术水平的不断提高,转基因技术在基础实验研究中得到了广泛的应用,基因敲除技术是转基因技术中不可替代的组成部分,而条件性基因敲除技术作为新一代基因敲除技术,与第一代基因敲除技术相比显然有着明显的优势和更为广泛的应用... 随着科研技术水平的不断提高,转基因技术在基础实验研究中得到了广泛的应用,基因敲除技术是转基因技术中不可替代的组成部分,而条件性基因敲除技术作为新一代基因敲除技术,与第一代基因敲除技术相比显然有着明显的优势和更为广泛的应用前景。 展开更多
关键词 基因敲除小鼠 CRE-LOXP 基因敲除技术 条件性 转基因小鼠模型 重组酶 同源重组 突变基因 目的基因 疾病模型
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亚麻转基因中抗生素应用效果的研究 被引量：12
17
作者 康庆华 《中国麻业》 2005年第2期94-97,共4页
在利用农杆菌介导法进行亚麻抗除草剂草丁膦(Basta)目的基因(Bar)导入工作中;对选择培养基内加入500mg/l克拉维酸钾(timentin进口)+200mg/l头孢噻肟(claforan进口)的抗菌素来取代500mg/l头孢噻肟(Cefotaxime国产)不仅脱菌效果彻底,期效... 在利用农杆菌介导法进行亚麻抗除草剂草丁膦(Basta)目的基因(Bar)导入工作中;对选择培养基内加入500mg/l克拉维酸钾(timentin进口)+200mg/l头孢噻肟(claforan进口)的抗菌素来取代500mg/l头孢噻肟(Cefotaxime国产)不仅脱菌效果彻底,期效长,且不影响亚麻愈伤形成和芽的分化;同时对再生植株进行了盆栽Basta抗性筛选试验,获得不同抗性的植株和种子。 展开更多
关键词 亚麻 抗生素 转基因 应用 农杆菌介导法 抗性筛选试验 头孢噻肟 选择培养基 Basta 目的基因 抗除草剂 克拉维酸 再生植株 草丁膦 抗菌素 进口 导入 脱菌 愈伤 盆栽 种子
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甘薯遗传转化研究现状、问题及展望 被引量：10
18
作者 李强 刘庆昌 +1 位作者 马代夫 臧宁 《分子植物育种》 CAS CSCD 2005年第1期99-106,共8页
甘薯是世界上重要的粮食、饲料和工业原料作物,由于遗传改良进展缓慢,转基因技术逐渐成为研究的热点,并应用于常规育种中去。到目前为止,甘薯已利用叶片、叶柄、茎、原生质体、愈伤组织、新鲜块根、胚性愈伤组织和胚性悬浮细胞系作为遗... 甘薯是世界上重要的粮食、饲料和工业原料作物,由于遗传改良进展缓慢,转基因技术逐渐成为研究的热点,并应用于常规育种中去。到目前为止,甘薯已利用叶片、叶柄、茎、原生质体、愈伤组织、新鲜块根、胚性愈伤组织和胚性悬浮细胞系作为遗传转化受体材料,其中早期以叶片、叶柄为主,目前利用胚性愈伤组织和胚性悬浮细胞系作为转化受体的研究越来越多。用于甘薯遗传转化的方法有农杆菌介导法、电击法和基因枪法,其中以根癌农杆菌介导法为主。最初甘薯遗传转化外源基因表达频率很低,随着转化条件研究的深入,转化频率得到较大的提高,越来越多的目的基因被应用到甘薯遗传转化中去。到目前已有抗虫、抗病毒、抗病、抗除草剂和品质改良等五大类基因转入甘薯基因组中,并且获得了转基因植株。尽管甘薯遗传转化取得了一定的进展,但目前仍缺乏一个有效的遗传转化体系,获得的转基因植株数量有限,还不能应用于生产。存在转化基因型有限、外源基因匮乏、转化方法单一、标记基因存留的问题,以及还不清楚外源基因在转基因植株中的遗传规律等。因此,本文从甘薯遗传转化受体系统、主要转化方法、转化系统以及有益农艺性状基因的应用等对甘薯遗传转化现状进行了综述,分析了目前存在的问题,以及未来甘薯遗传转化研究方向和发展? 展开更多
关键词 甘薯 遗传转化 转基因植株 胚性悬浮细胞 胚性愈伤组织 叶柄 株数 外源基因表达 目的基因 标记基因
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外源性PTEN基因诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡 被引量：12
19
作者 陈庆永 王春友 +1 位作者 吴河水 陈道达 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期33-36,共4页
目的　研究外源性PTEN基因依赖其磷酸酶活性诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡。方法　应用分子克隆技术构建重组质粒pcDNA3 .1 PTEN,以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株MDA468,对照组为pcDNA3 1( -)空载体质粒转染组和未转染组。应用RT -PCR、... 目的　研究外源性PTEN基因依赖其磷酸酶活性诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡。方法　应用分子克隆技术构建重组质粒pcDNA3 .1 PTEN,以脂质体转染法转染人乳腺癌细胞株MDA468,对照组为pcDNA3 1( -)空载体质粒转染组和未转染组。应用RT -PCR、Western印迹法分析目的基因的表达;在表皮生长因子(EGF)的诱导下,采用Western印迹方法检测转染后磷酸化蛋白激酶B(PKB/Akt)的表达及细胞在黏附和失黏附状态下的黏着斑激酶的表达;膜联蛋白V- FITC和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。结果　RT- PCR、Western印迹显示pcDNA3. 1 -PTEN转染组有PTENmRNA及PTEN蛋白表达,且在EGF的诱导下,p -Akt及p- FAK蛋白表达下调。流式细胞术则显示其凋亡率达21. 68%。结论　外源性PTEN基因依赖其磷酸酶活性可诱导人乳腺癌MDA468细胞凋亡。 展开更多
关键词 人乳腺癌 诱导 细胞凋亡 MDA PTEN基因 外源性 转染 PCDNA3 PKB/AKT 目的基因
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RNA-seq技术开发油茶目的基因SSR标记 被引量：13
20
作者 闫蕊 阮成江 +3 位作者 杜维 丁健 吴波 刘祾悦 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期2540-2548,共9页
油茶是中国南方重要的木本油料。利用MISA软件从油茶(Camellia oleifera)果实和叶转录组测序获得的25 297条Unigenes中共搜索挖掘出30 899个SSR标记。在这些SSR标记中,除单核酸苷酸(36.02%)外,主要重复类型是二核苷酸重复(45.79%),其次... 油茶是中国南方重要的木本油料。利用MISA软件从油茶(Camellia oleifera)果实和叶转录组测序获得的25 297条Unigenes中共搜索挖掘出30 899个SSR标记。在这些SSR标记中,除单核酸苷酸(36.02%)外,主要重复类型是二核苷酸重复(45.79%),其次是三核苷酸重复(16.37%),四以上核苷酸重复占1.81%。Unigenes功能注释中,共648条涉及调控油茶油脂合成和脂肪酸形成积累、产量、花芽分化、生长发育及抗病虫害等目的性状,从这些Unigenes中共搜索挖掘到163个SSR标记,以民玉1号油茶基因组DNA为模板对这些SSR标记的有效性进行初步验证,共筛选出56对具有清晰扩增条带的SSR标记。以选取的5份二倍体油茶种质为材料,对初筛的56对SSR引物进行多态性检测,获得48对具有多态性的SSR标记引物。这些基于高通量数据新开发的油茶目的基因SSR标记可为油茶的指纹图谱构建、遗传多样性分析和分子标记辅助选择育种等奠定基础。 展开更多
关键词 油茶 RNA-SEQ 目的基因 SSR标记
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