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中国猪源H5N1和H9N2亚型流感病毒的分离鉴定 被引量:106
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作者 李海燕 于康震 +5 位作者 杨焕良 辛晓光 陈君彦 赵朴 毕英佐 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期1-6,共6页
猪是禽流感病毒"禽_猪_人"传播链中重要的中间宿主,了解猪流感的疫情动态将为动物流感及人流感的疾病预测及防制提供重要依据。1999~2001年间进行的血清学和病毒学监测发现我国猪群存在大范围的H1和H3亚型猪流感感染(李海... 猪是禽流感病毒"禽_猪_人"传播链中重要的中间宿主,了解猪流感的疫情动态将为动物流感及人流感的疾病预测及防制提供重要依据。1999~2001年间进行的血清学和病毒学监测发现我国猪群存在大范围的H1和H3亚型猪流感感染(李海燕等,2002)。2002~2003年,我们进一步对来自全国14个省市的1936份血清进行了H9亚型猪流感的检测,同时在广东、福建等省进行了H5亚型猪流感的检测。2002年辽宁、广东、山东及重庆猪血清中出现H9亚型流感抗体,阳性率分别为7.3%、6.8%、5.1%和1.6%。2003年采集的猪血清H9亚型流感抗体均为阴性,同时发现广东、福建两省2003年出现H5亚型流感阳性猪群,阳性率分别为4.7%和8.2%。从2001~2003年收集和送检的样品中分离鉴定了6株H9N2亚型和2株H5N1亚型猪流感病毒,部分序列分析发现H9和H5亚型猪流感病毒均与我国分离的禽流感病毒高度同源。本研究进一步确证了我国猪群中存在H9N2亚型流感病毒,并且首次发现我国猪群已出现H5N1亚型流感病毒,为人类流感及动物流感的防制敲响了警钟。对这两个亚型流感病毒所具有的公共卫生和兽医公共卫生危害性应予以高度重视。 展开更多
关键词 流感病毒 H5亚型 H9亚型 病毒分离 病毒鉴定 血清学 病毒
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猪流感病毒的分离鉴定 被引量:61
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作者 李海燕 李雁冰 +7 位作者 于康震 毕英佐 辛晓光 秦运安 谷守林 冯菊艳 唐秀英 李维义 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期12-17,共6页
用SPF鸡胚从我国东北地区猪群中分离出 3株H3 N2 猪流感病毒 (SIV) ,分别命名为A/Swine/Heilongjiang/ 1/ 2 0 0 0、A/Swine/Heilogjiang/ 2 / 2 0 0 0和A/Swine/Heilogjiang/ 3/ 2 0 0 0。SIV分离株第 8代病毒液对 0 .5 %豚鼠红血球的... 用SPF鸡胚从我国东北地区猪群中分离出 3株H3 N2 猪流感病毒 (SIV) ,分别命名为A/Swine/Heilongjiang/ 1/ 2 0 0 0、A/Swine/Heilogjiang/ 2 / 2 0 0 0和A/Swine/Heilogjiang/ 3/ 2 0 0 0。SIV分离株第 8代病毒液对 0 .5 %豚鼠红血球的血凝价分别为2 0 48log2 、2 0 48log2 、40 96log2 ;将其制成琼扩 (AGP)抗原与禽流感标准阳性血清均出现清晰白色沉淀线 ;与流感病毒H3 亚型标准阳性血清的血凝抑制 (HI)价分别为 8log2 、7log2 、7log2 ,但不能被鸡新城疫阳性血清抑制。这 3株SIV都为热不稳定型 ;均能凝集驴、绵羊、鸡、兔、豚鼠、小鼠、大鼠、人O型血红血球 ,对马、牛红血球均不凝集 ;感染一个病毒最小致死量的鸡胚平均死亡时间分别为 86 .4、12 9.6和 91.2小时 ;每 0 .2ml病毒液鸡胚半数感染量分别为 4.75lg、4.5lg、和 6 .0lg ;对鸡的静脉内接种致病指数和脑内接种致病指数各为 0 .5 6、0 .32、0 .5 2和 0 .77、0 .38、0 .5 2 ;对小鼠的半数致死量分别为 2 .6lg、2 .0lg和 2 .5lg ;试验感染小鼠、豚鼠和猪均可发病并出现死亡。存活动物接种后第 6天和第 14天的血清 ,其HI价均在 8log2 以上 ,而AGP均为阴性。 展开更多
关键词 流感病毒 分离鉴定 生物学特性
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人感染甲型H1N1流感病毒的研究进展 被引量:48
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作者 陶然 尚世强 《中国循证儿科杂志》 CSCD 2009年第3期250-252,共3页
关键词 流感病毒 H1N1 甲型 感染 INFLUENZA 流感疫情 墨西哥 加拿大
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猪流感病毒核蛋白基因的原核表达及其在诊断中的初步应用 被引量:24
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作者 倪建强 张春玲 +5 位作者 李海燕 崔尚金 仇华吉 王云峰 田志军 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期18-21,共4页
根据GenBank中A/Swine/HongKong/126/82(H3N2)株猪流感病毒(SIV)NP基因核苷酸序列设计合成一对引物,经RT_PCR扩增了我国SIV分离株A/Swine/Heilongjiang/3/2000(H3N2)的核蛋白(NP)基因。将扩增所得NP基因克隆于pMD18_T载体,酶切鉴定后... 根据GenBank中A/Swine/HongKong/126/82(H3N2)株猪流感病毒(SIV)NP基因核苷酸序列设计合成一对引物,经RT_PCR扩增了我国SIV分离株A/Swine/Heilongjiang/3/2000(H3N2)的核蛋白(NP)基因。将扩增所得NP基因克隆于pMD18_T载体,酶切鉴定后对其序列分析表明NP基因与香港分离株同源性高达93.8%,然后定向亚克隆NP基因于原核表达载体pET30(a)的多克隆位点中,经酶切鉴定后,将含有NP基因的重组质粒命名为pET_NP。用pET_NP转化受体菌BL21,用诱导剂IPTG以不同浓度进行诱导,并在不同诱导时间收集样品。经SDS_PAGE电泳分析证实NP基因获得了表达,并在终浓度为1mM的IPTG诱导下,6h其表达量达到高峰,经Westernblot分析证实表达的重组核蛋白具有反应活性,大小约为60kD。用表达产物作琼脂扩散试验,结果表明表达产物与SIV抗血清可形成清晰的反应沉淀线,而与其它9种猪病原阳性血清不发生反应。正常菌体蛋白与SIV阳性血清也不发生反应。通过对40份送检血清样品的检测结果显示其与HI试验的相符率高达95%以上。试验证明利用原核表达系统制备的重组核蛋白作为诊断用抗原,不仅制备过程简单而且所建立的琼扩诊断方法特异、快速、简便,其灵敏度也能满足现地的使用要求。目前正在进行现地的中试试验。 展开更多
关键词 SIV 琼脂扩散试验 流感病毒 核蛋白 基因表达 疾病诊断
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猪流感病毒在世界范围内的流行情况及公共卫生意义 被引量:25
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作者 陈义祥 蒙雪琼 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期582-588,共7页
猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)是引起猪的急性呼吸道疾病的重要原发病原之一,常常与其他病原体混合感染造成更严重的损害。目前,猪流感(Swine influenza,SI)已遍布美洲、亚洲、欧洲和非洲,是规模化养猪场普遍存在且难以根除的... 猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)是引起猪的急性呼吸道疾病的重要原发病原之一,常常与其他病原体混合感染造成更严重的损害。目前,猪流感(Swine influenza,SI)已遍布美洲、亚洲、欧洲和非洲,是规模化养猪场普遍存在且难以根除的群发性疾病。猪在流感病毒的种间传播和遗传进化中起着重要的作用,猪可被禽流感病毒和人流感病毒感染,因此,猪被认为是人、禽和/或猪流感病毒通过基因重排产生新的亚型流感病毒的"混合器"。SIV不仅危害猪群,而且同时具有感染人和禽的潜力。目前世界范围内猪群中流行的SIV亚型主要有3种:H1N1、H3N2和H1N2,其中包括古典H1N1、类禽H1N1、类人H3N2、基因重排的H3N2和多基因型的H1N2亚型。研究表明,禽流感病毒、人H3N2亚型病毒和古典猪H1N1亚型病毒在我国猪群中共存,为产生含有禽流感病毒基因片段的重排病毒创造了条件,这将对养猪业以及人类公共卫生都具有潜在的威胁。 展开更多
关键词 流感病毒 流行病学 公共卫生
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猪流感抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量:20
6
作者 陈艳 辛晓光 +4 位作者 杨焕良 李婷 李海燕 乔传玲 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期308-311,共4页
猪流感病毒A/Swine/Fujian/668/2001(H3N2)株感染的鸡胚尿囊液,经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯、纯化的猪流感病毒经NP-40处理并反复冻融,作为猪流感间接ELISA抗原,确立了间接ELISA检测方法。对29份HI试验猪流感为阴性的血清... 猪流感病毒A/Swine/Fujian/668/2001(H3N2)株感染的鸡胚尿囊液,经差速离心后,再经蔗糖密度梯度离心,提纯、纯化的猪流感病毒经NP-40处理并反复冻融,作为猪流感间接ELISA抗原,确立了间接ELISA检测方法。对29份HI试验猪流感为阴性的血清进行了检测,经统计学分析,确定间接ELISA判定标准,被检血清OD_(490nm)值≥0.20判定为阳性。该方法对猪瘟等11种猪疫病阳性血清无交叉反应,批内和批间重复试验的吸收变异系数分别在3.34%~8.12%和6.2%~9.04%之间。与HI的符合率达到92.8%,经卡方检验(P<0.01)比HI试验敏感。为猪流感抗体检测提供了快速、准确、简便的方法。 展开更多
关键词 流感 流感病毒 间接ELISA
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猪流感病毒概述 被引量:23
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作者 杨帅 朱闻斐 舒跃龙 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期330-336,共7页
猪流感(Swine influenza,SI)是由甲型流感病毒引起的猪急性呼吸道传染病,不仅给养猪业带来了极大的危害,还严重危害人类健康,因此引起全球公共卫生的关注。猪对哺乳动物流感病毒和禽流感病毒都易感,被认为是二者之间进行基因重配和跨种... 猪流感(Swine influenza,SI)是由甲型流感病毒引起的猪急性呼吸道传染病,不仅给养猪业带来了极大的危害,还严重危害人类健康,因此引起全球公共卫生的关注。猪对哺乳动物流感病毒和禽流感病毒都易感,被认为是二者之间进行基因重配和跨种传播的重要中间宿主,也是产生引起人类流感大流行毒株的重要来源。目前全球猪群中流行的流感病毒以H1N1、H3N2以及H1N2亚型为主,但各地流行的猪流感病毒(Swine influenza viruses,SIVs)谱系或基因节段的来源均有差异。北美地区近期暴发的猪流感三源重配H3N2/H1N2亚型变异株感染人的事件再次提醒我们要密切关注SIV对公共卫生的威胁。因此,监测和研究甲型流感病毒在全球猪群中的流行动态对于大流行应对是非常重要的。 展开更多
关键词 流感病毒 进化 跨种传播
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H1N1亚型猪流感病毒中国分离株血凝素基因分子演化的研究 被引量:20
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作者 陈君彦 李海燕 +3 位作者 申之义 陈化兰 于康震 毕英佐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期13-17,共5页
对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型... 对 2 0 0 1年中国华南及东北地区的 15株H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)分离株的血凝素 (HA)基因进行了序列测定和分析 ,并绘制了进化树。研究结果表明 ,15株H1N1SIV和HA基因核苷酸全长为 1778bp ,共编码 5 6 6个氨基酸 ;而且 ,15株H1N1亚型SIV的HAI蛋白在 10、11、2 3、87、2 87位都存在高度保守的糖基化位点 ,此外 ,在 2 76位多了一个“_NTT_”糖基化位点 ,与参考毒株SW /IW / 93/ 0 1一致 ,这可能是近期H1N1亚型SIV的一个分子特征。本研究进一步发现 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因切割位点氨基酸组成为IPSIQSR↓G ,具有非高致病力毒株分子特征 ;而其受体结合位点在HA蛋白上第 2 2 6位是Q ,第 2 2 8位是G ,可能具有感染禽的潜力。经同源性比较 ,15株H1N1亚型SIV的HA基因与古典型H1N1猪谱系中的WIS/ 4 75 4 / 94的同源性相对最高 ,核苷酸和氨基酸序列同源性分别达到 95 7%~ 96 1%和96 5 %~ 97 2 %。由同源性比较结果和进化树分析可见 。 展开更多
关键词 H1N1亚型 流感病毒 中国分离株 血凝素基因 分子演化 序列分析
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猪流感病毒的种间传播及分子进化 被引量:16
9
作者 李海燕 于康震 华英佐 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期304-306,309,共4页
关键词 流感病毒 种间传播 分子进化 禽类 海洋哺乳动物
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实时荧光定量PCR检测H1N1亚型猪流感病毒 被引量:21
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作者 段廷云 陈红英 +3 位作者 崔保安 魏战勇 李新生 王学斌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期752-756,共5页
根据GenBank中H1N1亚型猪流感病毒NP基因的序列(DQ889686),利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针,从猪流感病毒HN407株接种的鸡胚尿囊液中提取总RNA,经RT-PCR扩增NP基因。将鉴定正确的NP基因片段克隆入pGEM-T Easy... 根据GenBank中H1N1亚型猪流感病毒NP基因的序列(DQ889686),利用Premier express设计并合成1对引物和相应的TaqMan探针,从猪流感病毒HN407株接种的鸡胚尿囊液中提取总RNA,经RT-PCR扩增NP基因。将鉴定正确的NP基因片段克隆入pGEM-T Easy载体中,转化大肠杆菌JM109,经PCR及测序鉴定后得到阳性重组质粒。以该阳性重组质粒为荧光定量PCR标准品模板建立标准曲线。对探针浓度、引物浓度、镁离子浓度和退火温度进行优化,建立了最佳的荧光定量PCR反应体系和扩增程序。经临床应用表明荧光定量PCR的建立为早期诊断猪流感病毒、定量分析猪流感病毒感染程度奠定了基础。 展开更多
关键词 流感病毒 H1N1亚型 荧光定量PCR
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猪流感病毒分子生物学研究进展 被引量:19
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作者 吴华 郭万柱 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期238-240,共3页
关键词 流感病毒 分子生物学研究 呼吸道疾病 接触传染性 规模化 呼吸困难 群发性 咳嗽
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套式RT-PCR方法检测临床样品中的猪流感病毒 被引量:15
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作者 祁贤 陆承平 +1 位作者 王贵平 宋长绪 《中国病毒学》 CSCD 2005年第2期200-202,共3页
Using two pairs of primer based on conserved sequences of the NP gene of influenza A virus, a RT-nested PCR assay was developed to detect Swine influenza virus in clinical samples. No cross reactions with three other ... Using two pairs of primer based on conserved sequences of the NP gene of influenza A virus, a RT-nested PCR assay was developed to detect Swine influenza virus in clinical samples. No cross reactions with three other swine pathogens of respiratory disease such as Porcine respiratory and reproductive syndrome virus, Porcine circovirus type 2 and Mycoplasma suipneumoniae. With agarose electrophoresis detection, the RT-nested PCR was 100 times more sensitive compared to that of non-nested RT-PCR. 35 clinical samples including 4 blood samples and 31 lung tissues from Southern China were tested by RT-nested PCR, and 28 (80%) out of 35 sample were positive. By propagated in 9-to 10-day-old SPF embryonated chicken eggs, 23 strains of Swine influenza virus were isolated from 28 positive samples. The result of RT-nested PCR was 82% in agreement with that of virus isolation, and the RT-nested PCR were more sensitive than the virus isolation. No Swine influenza virus was isolated from the all RT-nested PCR negative samples. On the basis of characterization of HA gene sequences, 5 out of 23 strains had H3 and H9 subtypes. It suggested that the RT-nested PCR assay was rapid,specific and sensitive, and it was is advantageous to detect influenza virus in latent infections. 展开更多
关键词 流感病毒 套式RT—PCr 病毒分离 病毒监测
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广西规模猪场猪呼吸道疾病综合征的病原学调查 被引量:14
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作者 刘翠权 梁媛 +4 位作者 陈义祥 谭福林 郑敏 刘棋 陆承平 《畜牧与兽医》 北大核心 2010年第10期29-33,共5页
为了解猪呼吸道疾病综合征(PRDC)在广西规模场猪群中的感染状况,采用PCR和RT-PCR方法,对2007~2009年期间采自广西13个市65个规模猪场的281份疑似PRDC感染组织样品进行了12种病原体检测。结果显示:73.85%(48/65)的猪场和71.87%(202/281... 为了解猪呼吸道疾病综合征(PRDC)在广西规模场猪群中的感染状况,采用PCR和RT-PCR方法,对2007~2009年期间采自广西13个市65个规模猪场的281份疑似PRDC感染组织样品进行了12种病原体检测。结果显示:73.85%(48/65)的猪场和71.87%(202/281)的组织样品为PRDC感染,其中,被猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪链球菌(SS)、猪伪狂犬病毒(PRV)、败血性波氏杆菌(Bb)、猪附红细胞体(E-su is)、猪流感病毒(SIV)、产毒素多杀性巴氏杆菌(T+PM)、副猪嗜血杆菌(HP)、猪细小病毒(PPV)和猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP)感染(包括混合感染)的阳性样品分别占49.11%(138/281)、34.52%(97/281)、9.60%(27/281)、8.19%(23/281)、6.41%(18/281)、6.41%(18/281)、6.05%(17/281)、6.14%(15/281)、4.63%(13/281)、3.91%(11/281)、0.36%(1/281)和0.00%(0/281);单纯感染占28.11%(79/281);混和感染占43.77%(123/281)。二重、三重和四重混合感染分别占28.11%(79/281)、12.46%(35/281)和3.20%(9/281)。其中,以PRRSV+PCV2(+其他)混合感染形式较多见,占所有混合感染样品的52.03%(64/123)。细菌性病原体感染样品占20.28%(57/281),其中19.22%(54/281)为混合感染。可见:广西地区规模猪场普遍存在PRDC感染,其中PRRSV和PCV2是引起PRDC的主要病原;感染类型复杂多样,以PRRSV+PCV2(+其他)混合感染最为常见。 展开更多
关键词 广西地区 规模 呼吸道疾病 呼吸综合 病原学 调查 pig disease complex 混合感染 传染性胸膜肺炎放线杆菌 伪狂犬病毒 组织样品 产毒素多杀性巴氏杆菌 PRRSV PCV2 附红细胞体 嗜血杆菌 圆环病毒 细小病毒 流感病毒
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6株猪流感病毒分离株HA部分基因的克隆和序列分析 被引量:14
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作者 王连想 毕英佐 曹永长 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期438-441,共4页
从 6株 H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)中提取 RNA,用 RT- PCR法扩增了其 HA基因的部分 c DNA片段 ,克隆后测定其核苷酸序列 ,并推导出相应的氨基酸序列。结果表明 ,扩增的 6株 SIV HA部分基因长度均为 10 0 5个核苷酸 ,共编码 335个氨基酸 ... 从 6株 H1N1亚型猪流感病毒 (SIV)中提取 RNA,用 RT- PCR法扩增了其 HA基因的部分 c DNA片段 ,克隆后测定其核苷酸序列 ,并推导出相应的氨基酸序列。结果表明 ,扩增的 6株 SIV HA部分基因长度均为 10 0 5个核苷酸 ,共编码 335个氨基酸 ,氨基酸序列同源性在 98.2 %~ 10 0 %之间。HA部分基因核苷酸序列与已发表的中国香港、中国大陆、美国及欧洲分离的经典 H1亚型毒株相近 ,核苷酸和氨基酸序列同源性均在 95 %以上 ,同属 H1亚型 ,系统发育分析表明 6个 SIV分离株均属于经典 H1亚型 ,与欧洲类禽 SIV分离株亲缘关系较远 ,其 HA1、HA2之间切割位点序列均为 PSIQSR↓ G,从分子水平推论 ,均属于非高致病力毒株 ;其 HA2氨基端的 14个氨基酸残基均为 GL FGAIAG-FIEGGW,且高度保守。从分子流行病学角度证实经典 H1亚型 SIV毒株在广东多个猪场猪群存在。 展开更多
关键词 流感病毒 分离株 HA基因 基因克隆 序列分析 RT-PCR 经典H1亚型
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一株人源H1N1亚型猪流感病毒的进化分析与生物学特性研究 被引量:16
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作者 唐续 杨焕良 +8 位作者 鄢明华 李秀丽 陈艳 孟沙沙 尹航 辛晓光 步志高 乔传玲 陈化兰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期270-273,336,共5页
为了解猪流感病毒(SIV)的变异情况,我们2009年11月从河北某养殖场采集呈流感症状的猪鼻拭子40份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株猪流感病毒,通过RT-PCR和血凝抑制试验鉴定为H1N1亚型,命名为A/swine/Hebei/15/2009(H1N1),其全基因序列测... 为了解猪流感病毒(SIV)的变异情况,我们2009年11月从河北某养殖场采集呈流感症状的猪鼻拭子40份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到一株猪流感病毒,通过RT-PCR和血凝抑制试验鉴定为H1N1亚型,命名为A/swine/Hebei/15/2009(H1N1),其全基因序列测定及同源性分析发现,8个基因片段均与2000年左右H1N1人流感病毒有较高的同源性。系统遗传演化显示,该病毒分离株是由2000年人源H1N1流感病毒A/Dunedin/2/2000(H1N1)进化而来。抗原性分析显示该株与甲型H1N1流感病毒和经典H1N1病毒株抗原性差异较大。对小鼠致病性试验表明该病毒株可以直接感染小鼠并导致小鼠轻微临床症状和组织病理学变化,但不致死小鼠,表现为低致病性。 展开更多
关键词 流感病毒 人源H1N1亚型 遗传演化分析 抗原性分析 致病性
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猪流感病毒分型基因芯片的建立和初步应用 被引量:15
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作者 陈红军 侯义宏 +5 位作者 白华 陈桂来 吴时友 尹燕博 钱永华 田振宇 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期708-712,共5页
根据流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)亚型基因序列间的差异性,分别设计H1、H3、H9、N1和N2的特异分型引物,并根据M基因设计A型流感病毒的通用引物。RT-PCR扩增猪流感病毒各亚型HA、NA和M基因的特异片段,克隆至pMD18-T构建重组质粒,... 根据流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)亚型基因序列间的差异性,分别设计H1、H3、H9、N1和N2的特异分型引物,并根据M基因设计A型流感病毒的通用引物。RT-PCR扩增猪流感病毒各亚型HA、NA和M基因的特异片段,克隆至pMD18-T构建重组质粒,制备探针。将各探针按一定的阵列点加到硝酸纤维素膜上,制成基因芯片。并对217份不同地区的样品进行检测。结果表明:该芯片可以同时检测待检样品中5种亚型A型流感病毒,并显示了较高的灵敏度和特异性,灵敏度比PCR高1个稀释度,比病毒分离高2个稀释度。该方法的建立为猪流感的检测及猪流感病毒各亚型在猪群中的流行病学调查提供了一种快速、灵敏和高通量的手段。 展开更多
关键词 流感病毒 基因芯片 多重PCR 核酸杂交
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多重PCR检测猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流感病毒 被引量:13
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作者 黄良宗 顾万军 +1 位作者 王淑敏 冼琼珍 《动物医学进展》 CSCD 2006年第7期62-65,共4页
应用Primer3.0和Omega2.0,根据猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪流感病毒(SIV)保守基因设计了3对多重PCR引物,建立PRRSV,SIV和PRV单项PCR检测方法,并在优化单项PCR反应条件(引物浓度、Mg2+浓度、退火温度等)基础上... 应用Primer3.0和Omega2.0,根据猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪流感病毒(SIV)保守基因设计了3对多重PCR引物,建立PRRSV,SIV和PRV单项PCR检测方法,并在优化单项PCR反应条件(引物浓度、Mg2+浓度、退火温度等)基础上,初步建立了PRRSV-PRV-SIV多重PCR检测方法,并分别用多重PCR和单项PCR/RT-PCR检测10份临床病料,两者符合率为96.6%,表明该多重PCR检测方法有较高的敏感度,可以用于临床病料的检测。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒 繁殖与呼吸综合征病毒 流感病毒 多重PCR
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中国“人-猪-禽”基因重排H1N2亚型猪流感病毒全基因克隆及遗传进化的研究 被引量:15
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作者 陈义祥 蒙雪琼 +7 位作者 刘棋 黄夏 黄胜斌 刘翠权 施开创 郭建刚 陈芳芳 胡丽萍 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期466-472,共7页
【目的】为了研究2006年从广西病猪肺组织中分离的H1N2亚型猪流感病毒(SIV)A/Swine/Guangxi/13/2006(H1N2)(Sw/GX/13/06)的遗传学特性和8个基因的来源。【方法】运用RT-PCR方法对其全基因进行了克隆并运用分子生物学软件对其基因序列进... 【目的】为了研究2006年从广西病猪肺组织中分离的H1N2亚型猪流感病毒(SIV)A/Swine/Guangxi/13/2006(H1N2)(Sw/GX/13/06)的遗传学特性和8个基因的来源。【方法】运用RT-PCR方法对其全基因进行了克隆并运用分子生物学软件对其基因序列进行了遗传进化分析。【结果】血凝素(HA)、核蛋白(NP)、基质蛋白(M)和非结构蛋白(NS)基因来源于猪古典H1N1亚型流感病毒;神经氨酸酶(NA)和聚合酶蛋白(PB1)基因来源于人的H3N2亚型流感病毒;聚合酶蛋白(PA)和聚合酶蛋白(PB2)基因来自于禽流感病毒。【结论】可见Sw/GX/13/06是一株"人-猪-禽"三源基因重排H1N2亚型SIV,且与美国(1999?2001年)和韩国(2002年)分离到该型病毒的有明显的亲缘关系。据我们所知,这是中国首次报道含有禽流感病毒基因片段的重排H1N2SIV,该病毒是否对养猪业和人类公共卫生健康具有潜在的威胁,有待于进一步研究。 展开更多
关键词 流感病毒 H1N2亚型 基因重排 遗传进化
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猪流感病毒的分离鉴定及毒力检测 被引量:12
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作者 程珏益 徐军 +6 位作者 徐成刚 张海梁 任涛 罗开健 辛朝安 江经纬 廖明 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第1期28-29,共2页
关键词 流感病毒 分离鉴定 毒力检测 A型流感病毒 呼吸道传染病 正粘病毒 生物学特性 流行情况
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猪流感病毒和新型甲型流感H1N1病毒 被引量:15
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作者 张拥军 严延生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期581-585,共5页
关键词 甲型流感病毒 流感病毒 H1N1 流感样病例 流感大流行 核酸序列分析 流行病学调查 世界卫生组织
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