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果实专一性启动子驱动ipt基因在番茄中的表达及其对番茄果实发育的影响 被引量:36
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作者 毛自朝 于秋菊 +4 位作者 甄伟 郭俊毅 胡鸢雷 高音 林忠平 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期444-448,T001,共6页
用PCR方法获得了番茄果实专一性启动子(2A12)和农杆菌(C58)Ti质粒上的ipt矿基因.分别构建由2A12驱动下的gus和ipt基因的植物表达载体,并使两种嵌合基因经农杆菌介导转入番茄品种“中蔬4号”的基因组中.GUS组织化学活性分析表明,2A1... 用PCR方法获得了番茄果实专一性启动子(2A12)和农杆菌(C58)Ti质粒上的ipt矿基因.分别构建由2A12驱动下的gus和ipt基因的植物表达载体,并使两种嵌合基因经农杆菌介导转入番茄品种“中蔬4号”的基因组中.GUS组织化学活性分析表明,2A12启动子具有严格的果实表达专一性.2A12驱动ipt基因在番茄中表达,使得果实中细胞分裂素的含量增加,最终导致果实中种子发育的停滞和胎座组织的增厚,并形成无籽番茄果实,同时转基因番茄果实成熟进程受阻且果实采后的储藏保鲜时间延长了1~2周.进一步分析发现,转基因番茄坐果率和产量均有不同程度的增加,虽然可溶性糖含量略有降低,但果实中干物质和粗蛋白含量有所增高. 展开更多
关键词 番茄 果实发育 2A12 果实性启动子 IPT基因 细胞分裂素 基因表达 植物表达载体
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转几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因提高棉花对枯萎病和黄萎病的抗性 被引量:44
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作者 程红梅 简桂良 +7 位作者 倪万潮 杨红华 王志兴 孙文姬 张保龙 王晓峰 马存 贾士荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1160-1166,共7页
枯、黄萎病是世界棉花生产中的两大重要病害。传统育种缺乏抗源,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶是植物防御体系中的两种防卫因子,两者之间存在协同增效作用。据此构建了4个单价和2个双价基因(分别定位于细胞内或细胞外)的植物表达载体,通过... 枯、黄萎病是世界棉花生产中的两大重要病害。传统育种缺乏抗源,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶是植物防御体系中的两种防卫因子,两者之间存在协同增效作用。据此构建了4个单价和2个双价基因(分别定位于细胞内或细胞外)的植物表达载体,通过花粉管通道法转化棉花,经PCR和Southern杂交检测以及1996~2000年温室及病圃多代筛选鉴定,已培育出对枯、黄萎病抗性提高的转基因棉花株系。将抗病基因导入国产抗虫棉品种GK19中,还获得了兼抗病、虫的转基因优系。 展开更多
关键词 几丁质酶 黄萎病 葡聚糖酶基因 β-1 抗性 枯萎病 Southern 3-葡聚糖酶 协同增效作用 植物表达载体 花粉管通道法 2000年 转基因棉花 抗虫棉品种 棉花生产 传统育种 防御体系 双价基因 筛选鉴定 杂交检测 GK19 基因导入
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小麦耐逆基因-TaLEA_2转化拟南芥的研究 被引量:20
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作者 赵咏梅 杨建雄 +1 位作者 俞嘉宁 原江锋 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-6,共6页
研究小麦第3组LEA基因中T aLEA2对耐旱和耐盐性能的影响.将小麦第3组LEA基因T aLEA2连接在双元表达载体pB I121 C aM V 35S启动子下游,构建了能在植物中高效表达的载体pB I121-T aLEA2.通过农杆菌介导的真空渗透法,将其转入野生拟南芥中... 研究小麦第3组LEA基因中T aLEA2对耐旱和耐盐性能的影响.将小麦第3组LEA基因T aLEA2连接在双元表达载体pB I121 C aM V 35S启动子下游,构建了能在植物中高效表达的载体pB I121-T aLEA2.通过农杆菌介导的真空渗透法,将其转入野生拟南芥中,经抗性筛选及PCR验证,获得T0代转基因植株,并用不同浓度的PEG 4000和N aC l对转基因拟南芥的耐逆性进行检测.结果表明,这些转基因植株可明显改进拟南芥在10%PEG及0.8%N aC l培养基上的生长状态.在实验条件下,转基因拟南芥的耐旱性及耐盐性均有所提高,提示T aLEA2基因在植物水分调节方面有重要作用. 展开更多
关键词 TnLEA2基因 植物表达载体 转基因 耐逆性
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昆虫抗冻蛋白基因转化烟草的抗寒性 被引量:27
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作者 王艳 邱立明 +4 位作者 谢文娟 黄薇 叶锋 张富春 马纪 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期397-402,共6页
将准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPAFP149亚克隆至pCAMBIA1302中,构建成单价植物表达载体pCAMBIA1302-MPAFP149,转化至农杆菌EHA105中,利用叶圆盘法转化烟草。通过PCR、PCR-Southern及RT-PCR检测表明,抗冻蛋白基因已整合至烟草基因组中,... 将准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白基因MPAFP149亚克隆至pCAMBIA1302中,构建成单价植物表达载体pCAMBIA1302-MPAFP149,转化至农杆菌EHA105中,利用叶圆盘法转化烟草。通过PCR、PCR-Southern及RT-PCR检测表明,抗冻蛋白基因已整合至烟草基因组中,并发生了转录。对T0代转基因烟草以-1℃处理48h,转基因烟草的相对电导率和表型明显优于野生型烟草。室温恢复试验验证,转基因烟草可存活并恢复生长,而野生型烟草受到了不可逆的低温冻害。研究证明,转化后携带昆虫抗冻蛋白基因的烟草比野生型烟草具有明显的抗寒能力,该结果为减轻冷敏感经济作物在春季遭受霜害提供了理论依据和应用基础。 展开更多
关键词 昆虫抗冻蛋白 植物表达载体 烟草 抗寒性
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甘蓝型油菜BcNA1基因启动子在转基因烟草中对GUS基因表达的调控 被引量:5
5
作者 石东乔 周奕华 +3 位作者 万里红 刘桂珍 胡赞民 陈正华 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2001年第4期313-320,共8页
通过PCR扩增 ,从甘蓝型油菜 (Brassicanapus)品种H16 5中克隆了种子贮藏蛋白基因BcNA1的启动子 ,将此启动子与GUS基因相连构建了植物表达载体 ,利用农杆菌介导法将其导入烟草。对转基因烟草GUS基因检测分析表明 ,BcNA1基因启动子能特异... 通过PCR扩增 ,从甘蓝型油菜 (Brassicanapus)品种H16 5中克隆了种子贮藏蛋白基因BcNA1的启动子 ,将此启动子与GUS基因相连构建了植物表达载体 ,利用农杆菌介导法将其导入烟草。对转基因烟草GUS基因检测分析表明 ,BcNA1基因启动子能特异地启动GUS基因在种子中的表达 ;而且GUS酶的活性随着转基因烟草种子的发育而变化 。 展开更多
关键词 油菜 BcNA1启动子 植物表达载体 农杆菌介导 烟草
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phbB、phbC基因克隆、序列分析及植物表达载体的构建 被引量:21
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作者 谢安勇 崔晓江 宋艳茹 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1995年第8期581-588,共8页
利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从真养产碱杆菌Alcaligenes eutrophus H16 染色体DNA 中扩增并克隆了调控聚-β-羟基丁酸(poly-β-hydroxybutyrate, PHB)生物合成的两个... 利用聚合酶链式反应(PCR)技术,从真养产碱杆菌Alcaligenes eutrophus H16 染色体DNA 中扩增并克隆了调控聚-β-羟基丁酸(poly-β-hydroxybutyrate, PHB)生物合成的两个关键酶基因:依赖NADPH 的乙酰乙酰CoA 还原酶基因(phbB)和PHB合成酶基因(phbC)。限制性内切酶图谱和核苷酸序列分析证实了克隆结果,并表明所克隆的基因与国外报道的有很高的同源性。经过基因拼接,构建了块茎特异性表达的高等植物表达载体pPSAGB(嵌合phbB)、pBIBGC(嵌合phbC)和pPSAGCB(嵌合phbB和phbC双基因) 展开更多
关键词 聚β羧基丁酸 PHBB phbC 基因克隆 植物表达载体
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商陆抗病毒蛋白cDNA的克隆、测序及其植物表达载体的构建 被引量:12
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作者 张海燕 刘桂珍 陈正华 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1999年第2期226-228,共3页
商陆抗病毒重【'1(m)卜。。)(1。Ill'l-。l。。111。。。""。'',NP)是从美洲商陆叶片。I。分或Utoot件如VR,分子量约30hi)L'。PAP属典型的中链核栩然大活主l'I,对动物病毒和植物病;每均计... 商陆抗病毒重【'1(m)卜。。)(1。Ill'l-。l。。111。。。""。'',NP)是从美洲商陆叶片。I。分或Utoot件如VR,分子量约30hi)L'。PAP属典型的中链核栩然大活主l'I,对动物病毒和植物病;每均计)'们的抗病;沙作用','-。在国外,PAP达国已被川于如N...加'1物从因?.. 展开更多
关键词 商陆 抗病毒蛋白 CDNA克隆 植物表达载体
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香石竹ACC氧化酶基因的克隆与植物表达载体构建 被引量:15
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作者 余义勋 张俊卫 +1 位作者 孙振元 包满珠 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2002年第3期256-260,共5页
根据已发表的ACO核苷酸序列 ,设计一对引物 ,以香石竹品种‘American’基因组DNA为模板 ,扩增出香石竹ACC氧化酶基因 ,将其连接到pMD18加T质粒载体上 ,通过中间载体pBluescriptSK ,构建了ACO基因正向和反向插入的植物表达载体 ,并将其... 根据已发表的ACO核苷酸序列 ,设计一对引物 ,以香石竹品种‘American’基因组DNA为模板 ,扩增出香石竹ACC氧化酶基因 ,将其连接到pMD18加T质粒载体上 ,通过中间载体pBluescriptSK ,构建了ACO基因正向和反向插入的植物表达载体 ,并将其导入了农杆菌。酶切检测表明该片段已插入表达载体 ,序列测定结果显示所克隆基因片段含 3个外显子 ,2个内含子 ,其中 展开更多
关键词 植物表达载体 香石竹 ACC氧化酶 基因克隆 重组载体
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DREB1A基因植物表达载体的构建 被引量:23
9
作者 李杰 李晶 +4 位作者 朱延明 张晶 代翠红 纪巍 才华 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第2期199-204,共6页
以 p Bch质粒为基础 ,构建了分别由 35 s启动子、 rd2 9A启动子调控的 DREB1A基因双子叶植物表达载体p BD35 s、p BD2 9A,其植物选择标记为新霉素磷酸转移酶基因 (N PT ) ,适用于双子叶植物的遗传转化。以 p CU质粒为基础 ,构建了分别由... 以 p Bch质粒为基础 ,构建了分别由 35 s启动子、 rd2 9A启动子调控的 DREB1A基因双子叶植物表达载体p BD35 s、p BD2 9A,其植物选择标记为新霉素磷酸转移酶基因 (N PT ) ,适用于双子叶植物的遗传转化。以 p CU质粒为基础 ,构建了分别由 E12启动子、 rd2 9A启动子调控的 DREB1A基因单子叶植物表达载体 p CDE12、p CD2 9A,其植物选择标记为乙酰 Co A转移酶基因 (bar) ,适用于单子叶植物的遗传转化。并分别通过三亲本杂交法和冻融法将重组质粒导入根癌农杆菌 L BA4 4 0 4中 ,为通过农杆菌介导法将 展开更多
关键词 DREBlA基因 植物表达载体 基因构建 生长发育 水分胁迫 植株表现
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Prd29A及DREB1A的克隆和干旱诱导型植物表达载体的构建与鉴定 被引量:14
10
作者 押辉远 秦广雍 霍裕平 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期371-375,共5页
从拟南芥中克隆了RD29A 基因的启动子(Prd29A)及DREB1A 基因的DNA 片段,构建Prd29A:DREB1A 融合基因,采用合成的接头将该融合基因插入到植物表达载体pBI121 中,经鉴定,确认正确。
关键词 植物表达载体 鉴定 构建 克隆 诱导型 干旱 DNA片段 融合基因 基因插入 启动子 拟南芥
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NtSKP1-GFP植物表达载体的构建及亚细胞定位 被引量:17
11
作者 张付云 陈士云 +2 位作者 赵小明 白雪芳 杜昱光 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期144-148,共5页
用PCR技术扩增NtSKP1基因的编码区,定向克隆至表达载体pCAMBIA1302上构建用于瞬时表达NtSKP1蛋白的重组质粒。重组质粒经PCR和测序鉴定后用冻融法转入农杆菌LBA4404,进而经农杆菌LBA4404介导转入烟草悬浮细胞,激光共聚焦显微镜观察确定... 用PCR技术扩增NtSKP1基因的编码区,定向克隆至表达载体pCAMBIA1302上构建用于瞬时表达NtSKP1蛋白的重组质粒。重组质粒经PCR和测序鉴定后用冻融法转入农杆菌LBA4404,进而经农杆菌LBA4404介导转入烟草悬浮细胞,激光共聚焦显微镜观察确定其亚细胞定位。测序结果表明,插入片段与预期序列完全一致,与载体形成了一个完整的基因表达盒;亚细胞定位结果表明NtSKP1蛋白在胞浆和核部位均有分布。 展开更多
关键词 NtSKP1基因 植物表达载体 亚细胞定位
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双价抗虫基因植物表达载体的构建 被引量:16
12
作者 张志云 张虎生 +1 位作者 孙毅 梁爱华 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第8期1402-1408,共7页
将蝎毒基因BmKITS和几丁质酶基因chitinase2个抗虫基因采用不同的启动子ubi或35S,连到2个高效的植物表达载体pWM101和pBI101中,2个重组表达质粒分别经过限制性酶切分析和PCR鉴定,实验结果表明2个含有双价抗虫基因的植物重组表达质粒均... 将蝎毒基因BmKITS和几丁质酶基因chitinase2个抗虫基因采用不同的启动子ubi或35S,连到2个高效的植物表达载体pWM101和pBI101中,2个重组表达质粒分别经过限制性酶切分析和PCR鉴定,实验结果表明2个含有双价抗虫基因的植物重组表达质粒均已构建成功. 展开更多
关键词 蝎毒基因 几丁质酶基因 植物表达载体 PGR鉴定
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反义CYP86MF基因植物表达载体的构建及其对白菜的转化 被引量:10
13
作者 余小林 曹家树 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期179-184,共6页
在获得一个与白菜核雄性不育相关的编码细胞色素P450(CYP450)的基因CYP86MF的基础上,采用PCR技术在该基因的内部第901个碱基至第1338个碱基之间设计引物,扩增出438bp序列作为反义基因片段.把该反义片段连接至pBI121双元载体质粒上得到Ca... 在获得一个与白菜核雄性不育相关的编码细胞色素P450(CYP450)的基因CYP86MF的基础上,采用PCR技术在该基因的内部第901个碱基至第1338个碱基之间设计引物,扩增出438bp序列作为反义基因片段.把该反义片段连接至pBI121双元载体质粒上得到CaMV35S组成型启动子的表达载体pBI35S-AMF,随后利用"三亲杂交"法将pBI35S-AMF质粒转入农杆菌LBA4404和EHA105两个菌株中.PCR扩增和酶切鉴定结果表明,所构建的反义CYP86MF基因植物表达载体pBI35S-AMF是正确的,并已成功导入了根癌农杆菌中.随后,按照已建立的遗传转化体系对'上海青'白菜进行了转化,并获得130了多株转化再生植株. 展开更多
关键词 CY86MF基因 植物表达载体 白菜 遗传转化 反义RNA技术 根癌农杆菌 核雄性不育
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抗旱基因HDCS1的植物表达载体构建 被引量:9
14
作者 郭卫东 饶景萍 +2 位作者 徐炎 李嘉瑞 郑学勤 《西北植物学报》 CAS CSCD 1999年第3期371-375,共5页
在克隆了二棱大麦第 3 组 L E A c D N A,抗旱基因 H D C S1 的基础上,将其连接于p B I121 的 Ca M V35 S 启动子和 N O S终止子之间,构建了 H D C S1 的植物表达载体 p B H C,并进... 在克隆了二棱大麦第 3 组 L E A c D N A,抗旱基因 H D C S1 的基础上,将其连接于p B I121 的 Ca M V35 S 启动子和 N O S终止子之间,构建了 H D C S1 的植物表达载体 p B H C,并进行了 P C R 和酶切鉴定。 展开更多
关键词 抗旱 LEA CDNA 植物表达载体
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转录因子DREB1A基因的克隆与植物表达载体的构建 被引量:9
15
作者 李晶 朱延明 李杰 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期211-214,共4页
根据GenBank中已发表的转录因子DREB1A基因的cDNA序列设计并合成了一对引物 ,通过RT PCR的方法从低温处理的拟南芥总RNA中扩增出DREB1A基因的全长cDNA片段。将其克隆到 pMD1 8T vector中。经测序证明该片段与GenBank上报道的序列具有 99... 根据GenBank中已发表的转录因子DREB1A基因的cDNA序列设计并合成了一对引物 ,通过RT PCR的方法从低温处理的拟南芥总RNA中扩增出DREB1A基因的全长cDNA片段。将其克隆到 pMD1 8T vector中。经测序证明该片段与GenBank上报道的序列具有 99.8%的同源性。 2个碱基的置换导致了一处氨基酸的差异 ,但这一氨基酸并不在基因的功能结构域上 ,推测其不会影响基因功能。以植物表达载体pBch为基础 ,构建了由组成型启动子 35S调控的DREB1A基因的植物表达载体pBDR35S 。 展开更多
关键词 转录因子 DREB1A基因 克隆 植物表达载体 CDNA序列 拟南芥
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中国葡萄属野生种抗白粉病抗逆基因植物表达载体的构建 被引量:8
16
作者 徐伟荣 王跃进 +2 位作者 王西平 郝炜 孙马 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期851-857,共7页
将质粒pSB166中包含ED35s启动子、Omega元件及TNOS终止子的一段核苷酸序列定向克隆到质粒pCAMBIA1303,构建了中间表达载体pWR306;以中国野生葡萄华东葡萄白河35-1cDNA为模板,通过PCR扩增出葡萄芪合成酶基因(STS)、醛脱氢酶基因(ALDH),与... 将质粒pSB166中包含ED35s启动子、Omega元件及TNOS终止子的一段核苷酸序列定向克隆到质粒pCAMBIA1303,构建了中间表达载体pWR306;以中国野生葡萄华东葡萄白河35-1cDNA为模板,通过PCR扩增出葡萄芪合成酶基因(STS)、醛脱氢酶基因(ALDH),与pGEM-TEasy克隆载体连接,获得重组质粒pGEM-TEasy-STS和pGEM-TEasy-ALDH;双酶切重组质粒及表达载体pWR306,将STS、ALDH基因片段与线性表达载体pWR306进行定向连接,构建了葡萄芪合成酶基因及醛脱氢酶基因的植物表达载体pWR-STS、pWR-ALDH,并用改进冻融法导入农杆菌GV3101。 展开更多
关键词 中国野生葡萄 葡萄芪合成酶基因 葡萄醛脱氢酶基因 植物表达载体
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ubi启动子驱动的花生芪合酶基因表达载体的构建及玉米遗传转化初报 被引量:11
17
作者 郭志鸿 王汉宁 +3 位作者 陶玲 张金文 白斌 陈正华 《甘肃农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第2期117-123,共7页
研究克隆了玉米的ubi启动子,以pBI 121为基本载体,构建了含有ubi启动子的中间载体pBI UB及ubi启动子驱动的GFP基因的植物表达载体pBI UG;采用基因枪法将载体pBI UG转入洋葱表皮细胞对启动子活性进行检测,结果表明GFP基因在洋葱表皮细胞... 研究克隆了玉米的ubi启动子,以pBI 121为基本载体,构建了含有ubi启动子的中间载体pBI UB及ubi启动子驱动的GFP基因的植物表达载体pBI UG;采用基因枪法将载体pBI UG转入洋葱表皮细胞对启动子活性进行检测,结果表明GFP基因在洋葱表皮细胞中得到了表达。本实验同时采用RT-PCR技术克隆了花生的芪合酶基因(Res),该基因编码的蛋白质的氨基酸序列与已公布的芪合酶的氨基酸序列的同源性为99.49 %,并且164位的活性中心Cys没有发生突变;将该Res基因插入载体pBI UB构建了ubi启动子控制下的花生芪合酶基因植物表达载体pBI UA,并对玉米进行了遗传转化,得到了转化苗。 展开更多
关键词 花生芪合酶基因 玉米ubi启动子 植物表达载体 玉米 遗传转化
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人白介素-12植物表达载体的构建 被引量:14
18
作者 邵敏 周鹤峰 葛正龙 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2007年第10期868-870,共3页
目的构建人白介素-12(hIL-12)基因的植物表达载体.方法采用PCR技术从质粒pCA13-hIL-12中扩增hIL-12基因,SmaI,SacI分别酶切hIL-12基因和植物表达载体pBI121,回收,T4DNA连接酶连接得到重组质粒pBI121-hIL-12,双酶切和DNA测序鉴定后,通过... 目的构建人白介素-12(hIL-12)基因的植物表达载体.方法采用PCR技术从质粒pCA13-hIL-12中扩增hIL-12基因,SmaI,SacI分别酶切hIL-12基因和植物表达载体pBI121,回收,T4DNA连接酶连接得到重组质粒pBI121-hIL-12,双酶切和DNA测序鉴定后,通过三亲杂交法将表达载体pBI121-hIL-12分别导入根癌农杆菌EHA105和GV3101,用PCR法进行鉴定.结果双酶切及DNA序列测定证实hIL-12已插入到表达载体pBI121中,PCR扩增表明构建的重组表达载体pBI121-hIL-12成功转入根癌农杆菌EHA105和GV3101中.结论成功构建了植物表达载体pBI121-hIL-12,为进一步利用转基因植物生产hIL-12奠定了实验基础. 展开更多
关键词 人白细胞介素-12 植物表达载体 载体构建 根瘤菌属
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DREB基因双T-DNA植物表达载体的构建及验证 被引量:10
19
作者 韩兆雪 曹墨菊 +1 位作者 朱祯 荣廷昭 《分子植物育种》 CAS CSCD 2004年第1期7-12,共6页
W 34基因经 pGEM T EASY载体 ,克隆到 pBDREB载体EcoRI位点 ,得到在Amp平板上生长的转化子 pBW 34-DREB质粒 ;质粒pBW 34-DREB、pSPROK、pBlueks分别经PstI/KpnI、KpnI/EcoRI、PstI/EcoRI双酶切 ,三片段连接构建成中间表达载体 pBWD Tn... W 34基因经 pGEM T EASY载体 ,克隆到 pBDREB载体EcoRI位点 ,得到在Amp平板上生长的转化子 pBW 34-DREB质粒 ;质粒pBW 34-DREB、pSPROK、pBlueks分别经PstI/KpnI、KpnI/EcoRI、PstI/EcoRI双酶切 ,三片段连接构建成中间表达载体 pBWD Tnos;再用SmaI/EcoRV双酶切 pBWD Tnos,将回收的DREB基因的完整的表达结构元插入到经SmaI酶切的质粒载体 pCDMAR Hyg中 ,构建成双T DNA植物表达载体 pCDMAR pWDT Hyg ,大小为 13 5 9kb ,经酶切鉴定 ,证明构建的载体与预期设计的一致。将此双T载体用农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织 ,期望得到无选择标记的安全的转基因植物。 展开更多
关键词 DREB基因 双T-DNA 植物表达载体 无选择标记 中间载体
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转基因高γ-亚麻酸大豆油抗肿瘤作用的研究 被引量:11
20
作者 卜云萍 王光凤 陈竺 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期92-97,共6页
γ-亚麻酸(GLA)是人体和动物饮食中具有营养作用的重要的多烯不饱和脂肪酸,在大多数油料作物种子中不含有GLA,而含有其前体物亚油酸。△6-脂肪酸脱氢酶可将亚油酸转化为γ-亚麻酸,为了能够在传统的油料作物大豆中产生GLA,将从深黄被孢... γ-亚麻酸(GLA)是人体和动物饮食中具有营养作用的重要的多烯不饱和脂肪酸,在大多数油料作物种子中不含有GLA,而含有其前体物亚油酸。△6-脂肪酸脱氢酶可将亚油酸转化为γ-亚麻酸,为了能够在传统的油料作物大豆中产生GLA,将从深黄被孢霉中克隆的△6-脂肪酸脱氢酶基因,与植物表达载体pBIl21连接,构建了重组质粒pBIM16,采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统,成功地将该基因导入到栽培大豆吉林47品种中,获得一批转基因植株。经PCR检测和Southern杂交分析,证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组中。通过气相色谱(GC)对大豆种子进行脂肪酸成分分析,结果表明,产生了GLA,其含量最高可达36.585%。将高GLA的转基因大豆油口服给药,结果表明,其对小鼠S180肉瘤、肝癌H22和Ehrlich癌实体型的抑瘤率分别为32.63%、31.91%和34.34%。其肿瘤抑制率均>30%,与对照组比较有显著差异(p<0.01),表现初步的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 Γ-亚麻酸 抗肿瘤作用 大豆油 △^6-脂肪酸脱氢酶基因 不饱和脂肪酸 植物表达载体 S180肉瘤 深黄被孢霉 农杆菌介导 转基因植株 PCR检测 GLA 营养作用 作物种子 油料作物 重组质粒 转化系统 栽培大豆 基因导入 杂交分析
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