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RF克隆结合巢式PCR构建金黄色葡萄球菌组氨酸蛋白激酶AgrC表达载体 被引量：3
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作者 陆路 熊文 +3 位作者 张钰琨 王丽娜 权春善 范圣第 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期55-60,共6页
AgrC蛋白是位于金黄色葡萄球菌细胞膜上的组氨酸激酶,能够感受细胞外的化学信号并将信号传递到细胞内,进而调控细胞内与致病性相关的一系列基因的表达。利用无限制克隆法(RF克隆),并结合巢式PCR成功构建了AgrC表达载体pET-28a-AgrC。将... AgrC蛋白是位于金黄色葡萄球菌细胞膜上的组氨酸激酶,能够感受细胞外的化学信号并将信号传递到细胞内,进而调控细胞内与致病性相关的一系列基因的表达。利用无限制克隆法(RF克隆),并结合巢式PCR成功构建了AgrC表达载体pET-28a-AgrC。将表达载体电转入大肠杆菌中,并利用IPTG进行诱导表达AgrC蛋白。再经过低温超高压破碎、超高速离心、金属螯合层析与尺寸排阻层析等过程,分离纯化得到AgrC蛋白。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 AgrC 无限制克隆法 巢式PCR
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