期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到198篇文章
< 1 2 … 10 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
链霉菌基因转移的方法 被引量：27
1
作者 吴胜 夏焕章 《生物工程进展》 CAS CSCD 2002年第1期91-94,83,共5页
本文介绍了用于链霉菌基因转移的各种方法 ,涉及原生质体转化、电穿孔、接合转移和噬菌体转导 。
关键词 链霉菌 原生质体转化 电穿孔 接合转移 噬菌体转导 基因转移
下载PDF
中药对细菌R质粒消除作用的研究概况 被引量：20
2
作者 韩伟 张铁 钟秀会 《中国畜牧兽医》 CAS 2006年第8期52-54,共3页
关键词 细菌质粒 R质粒 消除作用 中药 遗传因子 代谢能力 DNA分子 表型特征 共生现象 接合转移
下载PDF
一株高效抗砷喜温硫杆菌工程菌的构建 被引量：10
3
作者 赵清 刘相梅 +4 位作者 詹杨 林建群 颜望明 边疆 刘缨 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期675-679,共5页
利用DNA体外重组技术,将大肠杆菌质粒载体pUM3上的抗砷基因簇片段亚克隆到含有强启动子(tac启动子)并具有广泛寄主范围特性的IncQ族质粒pMMB24上,删除调节基因片段,构建了含有强启动子、可在tra基因诱动下转移的组成型表达的抗砷质粒pSD... 利用DNA体外重组技术,将大肠杆菌质粒载体pUM3上的抗砷基因簇片段亚克隆到含有强启动子(tac启动子)并具有广泛寄主范围特性的IncQ族质粒pMMB24上,删除调节基因片段,构建了含有强启动子、可在tra基因诱动下转移的组成型表达的抗砷质粒pSDRA4。通过接合转移的方式将其导入专性自养极端嗜酸性喜温硫杆菌Acidithiobacillus caldus中,构建了冶金工程菌Acidithiobacillus caldus(pSDRA4),接合转移频率为(1.444±0.797)×10-4。表明在大肠杆菌和喜温硫杆菌之间成功地建立了一个遗传转移系统。经检测,重组质粒在喜温硫杆菌中具有较好的稳定性,在无选择压力条件下传代50次基本保持稳定(重组质粒保留76%以上)。经抗砷性能检测,与野生菌相比,构建的喜温硫杆菌工程菌抗砷能力明显提高,从10mmol/L提高到45mmol/L。 展开更多
关键词 抗砷基因 喜温硫杆菌 接合转移 极端嗜酸性自养细菌
下载PDF
猪霍乱沙门氏菌C78-1株Δcrp缺失株的构建及其生物学特性初步研究 被引量：16
4
作者 郁川 程相朝 +3 位作者 赵战勤 张春杰 李银聚 吴庭才 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期587-593,共7页
通过自杀性质粒介导的等位交换技术构建猪霍乱沙门氏菌C78-1株的crp基因缺失株,并对其生物学特性进行初步研究。首先以猪霍乱沙门氏菌C78-1基因组为模板进行PCR,扩增出crp基因上下游片段(1 048和1 743 bp),并分别将其克隆入自杀性质粒pR... 通过自杀性质粒介导的等位交换技术构建猪霍乱沙门氏菌C78-1株的crp基因缺失株,并对其生物学特性进行初步研究。首先以猪霍乱沙门氏菌C78-1基因组为模板进行PCR,扩增出crp基因上下游片段(1 048和1 743 bp),并分别将其克隆入自杀性质粒pRE112上,构建含缺失320 bpcrp基因的重组自杀性质粒pREΔcrp。运用重组自杀性质粒介导的等位交换技术,两步法筛选C78-1的Δcrp缺失株。进一步的生物学特性研究表明,缺失株的血清型与亲本菌株C78-1一致,且能够稳定遗传缺失的crp基因,但其生化特性和生长速度与C78-1相比发生明显改变,小鼠致死性试验结果表明其毒力较C78-1降低约750倍。以上结果均证实,作者成功构建了猪霍乱沙门氏菌C78-1株的crp基因缺失突变株,缺失株遗传稳定,毒力显著降低,为进一步开发猪霍乱沙门氏菌的弱毒疫苗菌株奠定了基础。 展开更多
关键词 猪霍乱沙门氏菌C78-1 crp基因 重组自杀性质粒 接合转移 Δcrp缺失株
下载PDF
蓝藻基因转移系统的选择与建立 被引量：11
5
作者 魏兰珍 马为民 +1 位作者 王全喜 施定基 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第1期18-22,共5页
蓝藻是一类进行光合放氧的原核生物 ,因其结构的特殊性 ,已成为表达外源基因的理想宿主之一。然而外源基因转化系统的选择与建立一直影响着蓝藻基因工程的快速发展。总结了各类蓝藻基因转移系统的特点、影响因素、各系统间的优缺点、以... 蓝藻是一类进行光合放氧的原核生物 ,因其结构的特殊性 ,已成为表达外源基因的理想宿主之一。然而外源基因转化系统的选择与建立一直影响着蓝藻基因工程的快速发展。总结了各类蓝藻基因转移系统的特点、影响因素、各系统间的优缺点、以及不同蓝藻株系最适基因转移系统的选择等 ,为利用蓝藻进行遗传操作提供可能 。 展开更多
关键词 蓝藻 基因工程 遗传转化 接合转移
下载PDF
绿色荧光蛋白标记荧光假单胞菌P303及其生存能力检测 被引量：12
6
作者 张霞 张杰 +2 位作者 李国勋 黄大昉 陈中义 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期280-286,共7页
构建了含有荧光假单胞菌自身启动子PP303的中间质粒载体pGFP.然后利用mini-Tn5转座子,通过接合转移,将两个带有不同启动子的绿色荧光蛋白基因分别整合到荧光假单胞菌P303染色体上,获得了在488nm波长下发光稳定的P303m1和P303m3菌株.PCR... 构建了含有荧光假单胞菌自身启动子PP303的中间质粒载体pGFP.然后利用mini-Tn5转座子,通过接合转移,将两个带有不同启动子的绿色荧光蛋白基因分别整合到荧光假单胞菌P303染色体上,获得了在488nm波长下发光稳定的P303m1和P303m3菌株.PCR鉴定和Southern印迹结果均证明绿色荧光蛋白已随机插入P303染色体.SDS-PAGE结果表明,含有PA1/04/03启动子的P303m3菌株GFP表达量低于含有PP303启动子的P303m1菌株,染色体标记的GFP表达量低于质粒标记.室内平板抑菌试验结果表明,P303m1与出发菌株P303抑菌活性相当,对九种植物病原真菌有较强的拮抗作用.定殖、生存竞争能力研究表明,荧光假单胞菌在自然土壤中和大白菜根际都具有较强的定殖能力.P303和P303m1在自然土壤中第60天的菌量分别为1.63×104和3.3×102cfu/g土(湿重),大白菜根际第50天的菌量分别为3.29×106和4.1×104cfu/g根(湿重). 展开更多
关键词 荧光假单胞菌 绿色荧光蛋白 接合转移 SOUTHERN杂交 定殖 绿色荧光蛋白标记 竞争能力 绿色荧光蛋白基因 SOUTHERN 检测
原文传递
质粒在大肠杆菌和链霉菌FR-008之间的属间接合转移 被引量：9
7
作者 邓子新 周秀芬 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 1994年第6期7-10,共4页
tIJ8154是由键枪菌－大肠杆菌双功能穿梭载体pGM160衍生而来的．本文报道这个质粒从携带RP4的大肠杆菌细胞中向革兰氏阳性细菌－链霉菌FR－008中的转移．从两种宿主中分别提取质粒DNA．进行琼脂糖凝胶电泳，发现pIJ8154的结构在两种亲... tIJ8154是由键枪菌－大肠杆菌双功能穿梭载体pGM160衍生而来的．本文报道这个质粒从携带RP4的大肠杆菌细胞中向革兰氏阳性细菌－链霉菌FR－008中的转移．从两种宿主中分别提取质粒DNA．进行琼脂糖凝胶电泳，发现pIJ8154的结构在两种亲缘关系甚远的宿主中均是稳定的，这种接合转移的方法已经成为向链霉菌FR－008个转移基因的一种手段。 展开更多
关键词 接合转移 质粒 链霉菌 大肠杆菌
下载PDF
Avermectin C5-O-甲基转移酶基因的克隆、序列分析及其基因置换 被引量：10
8
作者 朱浩君 郑应华 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期1-5,59,共6页
C5 O 甲基转移酶基因 (aveD)位于阿维链霉菌 (Streptomycesavermitilis)染色体 3 4kbBamHI的片段上 ,通过构建avermectin基因组约 3 4kbBamHI片段的亚基因文库 ,用PCR的方法获得该基因的连锁基因C5 酮基还原酶基因 (aveF) ,并作为... C5 O 甲基转移酶基因 (aveD)位于阿维链霉菌 (Streptomycesavermitilis)染色体 3 4kbBamHI的片段上 ,通过构建avermectin基因组约 3 4kbBamHI片段的亚基因文库 ,用PCR的方法获得该基因的连锁基因C5 酮基还原酶基因 (aveF) ,并作为探针筛出aveD的克隆子。测序后和GenBank做同源比较 ,结果一致。构建基因置换穿梭载体 pHJ5 80 3 (pHZ13 5 8∷aveD&Amr) ,通过ET12 5 67::pUZ80 0 2属间接合转移导入S .avermitilis。放松培养后筛选出双交换重组菌株 ,并用PCR验证重组菌株的aveD已经破坏 ,将重组菌株摇瓶发酵液提取avermectin进行色谱质谱联机分析 ,发现重组菌株仅产生 4个组分 ,与出发菌株的 4个B组分完全一致。 展开更多
关键词 AVERMECTIN C5-O-甲基转移酶 基因置换 接合转移
下载PDF
高耐庆大霉素粪肠球菌质粒接合转移试验的方法探讨 被引量：10
9
作者 刘志远 许淑珍 马纪平 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期608-610,共3页
目的筛选出较好的高耐庆大霉素粪肠球菌质粒接合转移的试验方法。方法使用NCCLS推荐的琼脂稀释法筛选临床分离36株高耐庆大霉素(HLGR)粪肠球菌,质粒接合转移试验采用肉汤接合法和滤膜接合法。结果36株粪肠球菌用普通肉汤(NB)、普通肉汤... 目的筛选出较好的高耐庆大霉素粪肠球菌质粒接合转移的试验方法。方法使用NCCLS推荐的琼脂稀释法筛选临床分离36株高耐庆大霉素(HLGR)粪肠球菌,质粒接合转移试验采用肉汤接合法和滤膜接合法。结果36株粪肠球菌用普通肉汤(NB)、普通肉汤加马血清(NBH)、心脑浸液(BHI)、心脑浸液加马血清(BHIH)4种培养基作为接合前及接合过程培养介质,HLGR接合转移率分别为50%、75%、89%、89%,滤膜接合法转移率达到100%,所形成的HLGR接合子也不同程度的获得了对其他抗菌药物的耐药性。结论采用BHI或BHI加马血清的肉汤培养基接合转移效果较好,结果一致,滤膜接合法可获得更高的转移通过率。 展开更多
关键词 粪肠球菌 耐药性 接合转移 庆大霉素
下载PDF
吸水链霉菌应城变种的四个内源质粒及其逐个消除的研究 被引量：6
10
作者 覃重军 邓子新 +1 位作者 周启 陈华葵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期14-20,共7页
在改良质粒DNA提取方法的基础上,从三种农用抗生素的同一产生菌——吸水链霉菌应城变种中同时发现四个内源质粒,用双向电泳技术确定了它们均为CCC构型,根据分子量从大到小的顺序将它们分别命名为pHZ1、pHZ2、pHZ3和pHZ4,与已知分子量的... 在改良质粒DNA提取方法的基础上,从三种农用抗生素的同一产生菌——吸水链霉菌应城变种中同时发现四个内源质粒,用双向电泳技术确定了它们均为CCC构型,根据分子量从大到小的顺序将它们分别命名为pHZ1、pHZ2、pHZ3和pHZ4,与已知分子量的CCC质粒分子同步电泳估计它们的分子量依次分别为61kb、4.7kb、4.1kb和3.3kb,基于这四个内源质粒中至少部分个体可能为接合性质粒,可在没有某个质粒的衍生菌株的菌坪上形成“麻点”的假设,我们分离和鉴定了三个质粒逐个消除的10-22衍生菌株,并在光学显微镜下确证了二种类型的麻点。 展开更多
关键词 吸水链霉菌 质粒 接合转移 应城变种 农用抗菌素
下载PDF
绛红色小单孢菌G1008接合转移体系的构建 被引量：10
11
作者 严凌斌 洪文荣 +1 位作者 方志锴 封成军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期899-904,共6页
目的构建绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)的接合转移体系,并对该体系进行优化。方法以绛红色小单孢菌G1008染色体DNA为模板,经PCR扩增甲基化酶基因gntK的上下游序列各2000bp左右作为同源交换臂,并将红霉素抗性基因作为筛选标... 目的构建绛红色小单孢菌(Micromonospora purpurea)的接合转移体系,并对该体系进行优化。方法以绛红色小单孢菌G1008染色体DNA为模板,经PCR扩增甲基化酶基因gntK的上下游序列各2000bp左右作为同源交换臂,并将红霉素抗性基因作为筛选标记插入两交换臂之间。以温敏型质粒pKC1139作为基本载体,构建重组质粒pFD306。借助接合转移技术,将该质粒导入绛红色小单孢菌G1008。结果经抗性筛选,得到一株阳性菌株,命名为GK1008,经PCR鉴定和测序,验证了重组质粒已整合到染色体上。GK1008菌株对红霉素和安普霉素的抗性均超过500μg/mL。结论绛红色小单孢菌接合转移体系的构建达到了预期目的,并实现了对该体系的优化,这为其它小单孢菌的分子遗传学操作提供了借鉴。 展开更多
关键词 绛红色小单孢菌 接合转移 庆大霉素
下载PDF
斑贝链霉菌接合转移系统的构建及透明颤菌血红蛋白基因的表达对其次级代谢的影响 被引量：4
12
作者 凌华云 闵勇 +3 位作者 熊伟 吕和平 喻子牛 郑应华 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期59-64,共6页
以pSET152和pHZ1358为出发质粒,通过供体大肠杆菌ET12567(pUZ8002)和S17-1接合转移斑贝链霉菌(Streptomycesbambergiensis),构建和优化了接合转移体系。采用OOE-PCR技术构建含ermEp*与vhb结构基因融合片段的整合型表达载体pBIB2005,转化... 以pSET152和pHZ1358为出发质粒,通过供体大肠杆菌ET12567(pUZ8002)和S17-1接合转移斑贝链霉菌(Streptomycesbambergiensis),构建和优化了接合转移体系。采用OOE-PCR技术构建含ermEp*与vhb结构基因融合片段的整合型表达载体pBIB2005,转化ET12567(pUZ8002)后,属间接合转移至斑贝链霉菌。通过PCR、CO结合差光谱验证vhb基因在斑贝链霉菌中整合表达。摇瓶发酵显示VHb蛋白能改善菌体对氧的需求,一定程度上促进细胞生长,提高抗生素产量。 展开更多
关键词 斑贝链霉菌 接合转移 VHB基因 OOE-PCR CO结合差光谱
下载PDF
抗生素的胁迫与抗生素抗性基因产生与传播关系的研究 被引量：9
13
作者 卢文强 孙昊宇 +2 位作者 王雅娟 林志芬 张饮江 《生态毒理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期129-138,共10页
抗生素的环境残留和抗生素抗性基因(antibiotic resistance genes,ARGs)污染日益增加,对全球公共卫生构成重大威胁。目前,关于环境中抗生素与ARGs产生与传播的关系的研究较多,但结果却不尽相同。为了确定抗生素的胁迫与ARGs产生与传播... 抗生素的环境残留和抗生素抗性基因(antibiotic resistance genes,ARGs)污染日益增加,对全球公共卫生构成重大威胁。目前,关于环境中抗生素与ARGs产生与传播的关系的研究较多,但结果却不尽相同。为了确定抗生素的胁迫与ARGs产生与传播的关系,用磺胺类抗生素(SAs)对大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)毒性作用表征SAs的胁迫作用,用突变和接合转移表征ARGs的产生与传播,测定了SAs对大肠杆菌的毒性、突变频率和结合转移频率的影响,根据剂量-效应曲线,计算了毒性参数(无观察效应浓度(NOEC)、抑制率为50%的化合物浓度(EC50)、抑制率为80%的化合物浓度(EC80)),突变效应参数(促进率为1%时最低可观测突变促进效应浓度(MC0-1)、促进率为50%时突变促进效应浓度(MC50)、促进率最大时突变促进效应浓度(MCmax))和接合转移效应参数(促进率为1%时最低可观测接合转移促进效应浓度(RC0-1)、促进率最大时接合转移促进效应浓度(RCmax)和促进率为1%时最高可观测接合转移促进效应浓度(RC0-2)),利用线性回归分析的方法探究SAs的胁迫与大肠杆菌突变频率和结合转移频率之间的关系,并分析其可能的机制。结果表明,磺胺的高胁迫作用导致核苷酸碱基的大量减少,在DNA复制与转录时,碱基对错配的概率大大增加,从而开始促进突变频率。SAs的低胁迫作用可能引起大肠杆菌的SOS反应,SOS反应可以上调质粒编码的基因以及控制细胞膜的通透性基因,从而提高其接合转移频率。此外,真实环境中存在许多其他的因素也会影响ARGs的产生和传播,据此,本文建议在探索真实环境中ARGs的产生和传播时,应考虑真实环境中其他影响因素和抗生素胁迫的综合作用。上述研究为探索抗生素胁迫对ARGs产生与传播的影响提供了新的思路。 展开更多
关键词 抗生素 磺胺 抗生素抗性基因 突变 接合转移
下载PDF
细菌整合性接合元件SXT／R391研究进展 被引量：8
14
作者 罗鹏 何香燕 胡超群 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期471-479,共9页
SXT/R391家族是整合性接合元件中多样性最为丰富、成员最多的一个家族。SXT/R391包括保守的核基因以及可变区基因,SXT/R391保守的核心基因主要涉及SXT/R391的整合/剪切、自我接合转移、元件表达的调节。SXT/R391可变区基因的编码产物主... SXT/R391家族是整合性接合元件中多样性最为丰富、成员最多的一个家族。SXT/R391包括保守的核基因以及可变区基因,SXT/R391保守的核心基因主要涉及SXT/R391的整合/剪切、自我接合转移、元件表达的调节。SXT/R391可变区基因的编码产物主要负责宿主对抗生素的耐药性、重金属离子抗性、生物膜形成和细菌运动能力的调节,编码毒素-抗毒素系统以阻止SXT/R391从宿主丢失。一些SXT/R391也编码限制性修饰系统、解旋酶、核酸内切酶。SXT/R391受SetCD正性调控,受SetR负性调控。SXT/R391接合转移过程不会导致其在原供体菌基因组丢失。SXT/R391可以阻止细胞获得其它密切相关的同类SXT/R391但不排斥异质性ICE获得,在SXT/R391自身编码的重组系统作用下获得的异质性ICE导致杂合ICE的产生。SXT/R391具有相当高的转移频率和宽广宿主范围,目前已经有超过40个不同类型的SXT/R391在不同种属的细菌中被发现,以弧菌为最多。已知的SXT/R391集中出现在非洲和亚洲沿海地区,且来源多为海洋细菌,表明海洋环境很可能是SXT/R391主要的贮藏库,并且经由海洋环境株向临床株扩散。日益增加的选择压力很可能加速了SXT/R391的传播。鉴于SXT/R391的转移和盛行带来的风险,卫生部门以及医学微生物科学家应对其扩散保持充分警惕。 展开更多
关键词 SXT/R391 整合性接合元件 接合转移
原文传递
黑暗链霉菌DNA转移系统的建立 被引量：4
15
作者 夏焕章 吴胜 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期181-185,共5页
研究了黑暗链霉菌的基因转移系统 ,探索了通过PEG 介导的原生质体转化、接合转移向黑暗链霉菌中转入外源DNA的可能性。多次尝试用质粒pIJ70 2转化黑暗链霉菌 990 4原生质体均未成功。对原生质体进行“热处理”后转化、利用单链DNA转化... 研究了黑暗链霉菌的基因转移系统 ,探索了通过PEG 介导的原生质体转化、接合转移向黑暗链霉菌中转入外源DNA的可能性。多次尝试用质粒pIJ70 2转化黑暗链霉菌 990 4原生质体均未成功。对原生质体进行“热处理”后转化、利用单链DNA转化等都不能将质粒导入黑暗链霉菌中 ,表明黑暗链霉菌对外源DNA有很强的限制修饰作用。利用接合转移将具有oriT的大肠杆菌 链霉菌穿梭质粒pHZ1 3 2转入大肠杆菌ET1 2 5 6 7(pUZ80 0 2 )中 ,获得供体菌ET1 2 5 6 7(pUZ80 0 2 ,pHZ1 3 2 )。将供体菌与预萌发的黑暗链霉菌 990 4的孢子进行接合转移 ,成功地将pHZ1 3 2转入黑暗链霉菌 990 4中。质粒pHZ1 3 2经黑暗链霉菌自身修饰后也可转入黑暗链霉菌 990 4菌株的原生质体中 ,转化率约为 1 0 3 μgDNA(pHZ1 3 2 )。 展开更多
关键词 黑暗链霉菌 转化 接合转移 DNA转移系统
下载PDF
雷帕霉素产生菌吸水链霉菌NRRL5491接合转移系统的建立 被引量：7
16
作者 杨旻 陶美凤 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期637-641,共5页
对标准的链霉菌接合转移方法进行优化建立起适用于吸水链霉菌NRRL5491的接合转移系统。40℃温浴20 min为孢子的最佳热激处理条件;整合型质粒pSET152的接合转移效率是穿梭型质粒pOJ446的3-6倍;当阿泊拉霉素覆盖浓度为1μg/mL时,pSET152... 对标准的链霉菌接合转移方法进行优化建立起适用于吸水链霉菌NRRL5491的接合转移系统。40℃温浴20 min为孢子的最佳热激处理条件;整合型质粒pSET152的接合转移效率是穿梭型质粒pOJ446的3-6倍;当阿泊拉霉素覆盖浓度为1μg/mL时,pSET152的接合转移效率是50μg/mL时的4.6倍,而pOJ446接合转移效率相应提高了2.4倍;MS培养基上接合转移效率是SY琼脂培养基上的3.4倍。采用最适优化条件时,接合转移频率可达到2×10^-6,足够用于基因置换等遗传操作。 展开更多
关键词 吸水链霉菌NRRL5491 雷帕霉素 接合转移
下载PDF
无机盐对阿维链霉菌接合转移及异源表达放线紫红素的影响 被引量：7
17
作者 余姣姣 陶美凤 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1556-1561,共6页
【目的】阿维链霉菌可作为异源表达抗生素生物合成基因簇的良好宿主,但是需要优化含有大片段DNA质粒的接合转移效率。【方法】我们选取MgCl2、NaCl、Ca(NO3)2和CaCl2等4种无机盐,在0-200mmol/L浓度范围内分别研究其对大质粒向阿维链霉... 【目的】阿维链霉菌可作为异源表达抗生素生物合成基因簇的良好宿主,但是需要优化含有大片段DNA质粒的接合转移效率。【方法】我们选取MgCl2、NaCl、Ca(NO3)2和CaCl2等4种无机盐,在0-200mmol/L浓度范围内分别研究其对大质粒向阿维链霉菌接合转移的影响,再设计完全随机试验筛选最佳条件。【结果】CaCl2对阿维链霉菌接合转移有极明显的促进作用,MgCl2也有一定提高作用。通过完全随机试验筛选出最佳的CaCl2和MgCl2浓度组合,使大质粒的接合转移效率提高11倍。同时,本研究还发现阿维链霉菌异源表达放线紫红素的最适培养基,成功表达放线紫红素。【结论】特定无机盐对阿维链霉菌接合转移效率有明显提高作用,并且能促进放线紫红素在阿维链霉菌中的表达。 展开更多
关键词 阿维链霉菌 接合转移 异源表达 放线紫红素
原文传递
金色链霉菌接合转移体系的构建 被引量：7
18
作者 方志锴 洪文荣 +2 位作者 严凌斌 潘成奇 朱宝泉 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2011年第5期521-524,共4页
以金色链霉菌J13基因组DNA为模板,扩增金霉素C6甲基化酶基因ctcF上下游序列作为两端同源交换臂,在两臂之间添加抗性筛选标记neo基因,并在该基因上游加入组成型强启动子ermE*,以强化筛选标记.将该外源DNA序列插入到质粒pSET152,构建重组... 以金色链霉菌J13基因组DNA为模板,扩增金霉素C6甲基化酶基因ctcF上下游序列作为两端同源交换臂,在两臂之间添加抗性筛选标记neo基因,并在该基因上游加入组成型强启动子ermE*,以强化筛选标记.将该外源DNA序列插入到质粒pSET152,构建重组质粒pFD106.转化大肠杆菌ET12567后,经接合转移导入金色链霉菌J13中,MS平板上筛选阳性接合子.PCR检测表明,重组质粒已整合到染色体DNA上. 展开更多
关键词 金色链霉菌 去甲基金霉素 接合转移
下载PDF
抗砷载体的构建及在喜温硫杆菌中的接合转移 被引量：4
19
作者 赵清 刘相梅 +4 位作者 边疆 詹杨 刘缨 林建群 颜望明 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第3期19-21,共3页
利用DNA体外重组技术,将质粒载体pUM3上的抗砷基因片段亚克隆到含有强启动子(tac启动子)并具有广泛寄主范围特性的IncQ族质粒pMMB24上,成功构建了含有强启动子的抗砷质粒pSDRA3,以及删除调节基因片段的组成型表达的抗砷质粒pSDRA4。通... 利用DNA体外重组技术,将质粒载体pUM3上的抗砷基因片段亚克隆到含有强启动子(tac启动子)并具有广泛寄主范围特性的IncQ族质粒pMMB24上,成功构建了含有强启动子的抗砷质粒pSDRA3,以及删除调节基因片段的组成型表达的抗砷质粒pSDRA4。通过接合转移的方式将其导入专性自养极端嗜酸性的喜温硫杆菌中,首次成功地建立了喜温硫杆菌的遗传转移系统,构建了冶金工程菌T.caldus(pSDRA3)和T.caldus(pSDRA4)。与野生菌相比,重组菌抗砷性能明显提高。 展开更多
关键词 抗砷基因 喜温硫杆菌 接合转移
下载PDF
抗砷质粒pSDR941的构建及其在专性自养极端嗜酸性氧化硫硫杆菌中的表达 被引量：4
20
作者 邵群 颜望明 +1 位作者 刘振盈 姚敦义 《山东大学学报（自然科学版）》 CSCD 1997年第3期348-353,共6页
将具有广泛寄主范围的ＩｎｃＱ质粒ｐＪＲＤ２１５的Ｋｍｒ基因片段删掉，置换进大肠杆菌抗砷质粒ｐＵＭ３上的抗砷基因及Ｐ１启动子片段，构建成新的抗砷质粒ｐＳＤＲ９４１，为１２．４ｋｂ，通过接合的方式将其转移到氧化硫硫杆菌中... 将具有广泛寄主范围的ＩｎｃＱ质粒ｐＪＲＤ２１５的Ｋｍｒ基因片段删掉，置换进大肠杆菌抗砷质粒ｐＵＭ３上的抗砷基因及Ｐ１启动子片段，构建成新的抗砷质粒ｐＳＤＲ９４１，为１２．４ｋｂ，通过接合的方式将其转移到氧化硫硫杆菌中并获得了表达，与对照菌相比，含质粒ｐＳＤＲ９４１的氧化硫硫杆菌的抗砷水平从１５ｍｍｏｌ／Ｌ提高到３０ｍｍｏｌ／Ｌ． 展开更多
关键词 抗砷基因 噬酸性 氧化硫杆菌 接合转移 质粒构建
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 10 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部