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黄芪皂甙对培养心肌细胞损伤的影响 被引量:27
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作者 李靖 朱健华 +3 位作者 黄崇勤 顾君一 张天一 林琳 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 1998年第8期7-9,共3页
从蒙古黄芪的根中提取黄芪皂甙(AS),研究AS对培养的新生大鼠心肌细胞损伤的影响。在培养基中加入黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(X-XOD)和丝裂霉素C(MMC),损伤心肌细胞以及用缺氧-复氧的方法造成心肌细胞损伤。实验组加入... 从蒙古黄芪的根中提取黄芪皂甙(AS),研究AS对培养的新生大鼠心肌细胞损伤的影响。在培养基中加入黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶(X-XOD)和丝裂霉素C(MMC),损伤心肌细胞以及用缺氧-复氧的方法造成心肌细胞损伤。实验组加入不同剂量的AS(1~50μg/ml),对照组用培养基代替AS两组加入XOD和MMC以及缺氧3h复氧30min后,对照组心肌细胞内LDH的漏出明显增加,而线粒体活性值明显受抑。AS(1~25μg/ml)可以保护心肌细胞,减轻X-XOD,MMC及缺氧-复氧所致的损伤,使LDH的释放量显著低于对照组,而线粒活性值有较大的恢复(P<0.05)。在1~25μg/ml剂量范围内AS的抗损伤作用呈剂量相关性增加。但使用50μg/ml的AS没有能观察到这种抗损伤作用。结论:AS(1~25μg/ml)对培养的新生大鼠心肌细胞具有抗自由基损伤及MMC损伤的作用。 展开更多
关键词 黄芪皂甙 心肌细胞 自由基 丝裂霉素
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乌头类生物碱对心肌的毒性作用及分子毒理学研究进展 被引量:42
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作者 刘艳 章诗伟 +1 位作者 周兰 刘良 《中国法医学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第6期398-401,共4页
乌头属植物是被子植物亚门毛茛科中一类重要的有毒植物,也是我国最早有记载的药用有毒植物之一;其块根中多含有剧毒的二萜类双酯型生物碱?乌头碱,因个体差异、用法不当以及误服或投毒等原因而发生乌头中毒、甚至死亡的报道屡见不鲜。目... 乌头属植物是被子植物亚门毛茛科中一类重要的有毒植物,也是我国最早有记载的药用有毒植物之一;其块根中多含有剧毒的二萜类双酯型生物碱?乌头碱,因个体差异、用法不当以及误服或投毒等原因而发生乌头中毒、甚至死亡的报道屡见不鲜。目前,对乌头碱的研究多局限在临床救治方面,缺乏对乌头碱毒性作用机制研究。本文参考国内外相关文献资料,对乌头碱的心肌细胞毒性作用机制进行了综述。 展开更多
关键词 法医毒理学 乌头类生物碱 毒性作用机制 心肌细胞
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山楂叶总黄酮对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达影响 被引量:38
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作者 袁芳 《辽宁中医药大学学报》 CAS 2016年第8期42-45,共4页
目的:研究山楂叶总黄酮(Hawthorn leaves favonoids,HLF)对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达的影响。方法:通过夹闭冠状动脉后松夹的方法复制心肌缺血再灌注损伤大鼠模型,取80只模型大鼠随机分为5组... 目的:研究山楂叶总黄酮(Hawthorn leaves favonoids,HLF)对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达的影响。方法:通过夹闭冠状动脉后松夹的方法复制心肌缺血再灌注损伤大鼠模型,取80只模型大鼠随机分为5组:心肌缺血再灌注模型组、山楂叶总黄酮(50、100、200 mg/kg)治疗组和复方丹参片(260 mg/kg)治疗组,并另取16只同龄大鼠作为假手术组;每天灌胃给药1次,疗程4周。治疗完成后,通过原位细胞凋亡检测(TUNEL)的方法观察心肌细胞凋亡状况并计算凋亡指数,并通过TTC染色计算各组大鼠心肌梗死面积;通过免疫组织化学(IHC)方法检测心肌组织中bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达并进行半定量分析。结果:与心肌缺血再灌注模型对照组比较,山楂叶总黄酮(100、200 mg/kg)治疗组大鼠心肌细胞凋亡状况明显好转、凋亡指数显著降低,心肌组织梗死面积显著降低,心肌组织中bcl-2表达上调、Bax表达下调,bcl-2/Bax比值显著升高,caspase-3表达显著下调,上述差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:山楂叶总黄酮具有抑制心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的作用,其作用机制可能与山楂叶总黄酮能够有效上调bcl-2/Bax比值、下调caspase-3表达有关。 展开更多
关键词 山楂叶总黄酮 心肌 缺血再灌注 心肌细胞 凋亡
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人脐带间充质干细胞向心肌样细胞分化的研究 被引量:27
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作者 林晓波 何红燕 +7 位作者 罗敏洁 崔冰琳 冯学永 蒋学武 谢庆东 黄天华 应文娟 马廉 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第13期971-973,977,共4页
目的探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化可能性,为心肌细胞移植探索新细胞来源。方法采用5-氮杂胞苷(5-Aza)和二甲基亚砜(DMSO)诱导人脐带间充质干细胞分化。观察诱导后分化细胞形态变化,用免疫组织化学方法检测分化心肌样... 目的探讨人脐带间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化可能性,为心肌细胞移植探索新细胞来源。方法采用5-氮杂胞苷(5-Aza)和二甲基亚砜(DMSO)诱导人脐带间充质干细胞分化。观察诱导后分化细胞形态变化,用免疫组织化学方法检测分化心肌样细胞的心肌肌钙蛋白I(troponin I)、心肌肌钙蛋白T(troponin T)和心肌结蛋白(desmin),逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定分化的心肌样细胞是否有细胞心肌特异转录因子(Nkx2.5)和心肌细胞desmin的cDNA表达。结果人脐带MSCs经5-Aza和DMSO诱导后可向心肌样细胞分化,分化细胞表达心肌细胞的标记troponinI、troponinT和desmin。RT-PCR检测证实,人脐带MSCs诱导前不表达Nkx2.5和desmin,经5-Aza和DMSO诱导后表达心肌细胞标记Nkx2.5和desmin。结论人脐带间充质干细胞可以分化为心肌样细胞,5-Aza和DMSO可作为心肌细胞诱导剂,人脐带间充质干细胞可以作为心肌细胞的来源。 展开更多
关键词 脐带 间充质干细胞 心肌样细胞 分化
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人参皂苷Rb1对H_2O_2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的保护作用 被引量:30
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作者 许浩 葛亚坤 +2 位作者 邓同乐 王天楠 郑筱祥 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期803-806,共4页
目的观察人参皂苷Rb1对H2O2诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法在培养的新生大鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同剂量组人参皂苷Rb1(20、40、80mg·L-1)对心肌细胞凋亡率、丙二醛(MDA)含量,超... 目的观察人参皂苷Rb1对H2O2诱导的新生大鼠心肌细胞凋亡的保护作用,并探讨其可能作用机制。方法在培养的新生大鼠心肌细胞上建立H2O2损伤模型,观察不同剂量组人参皂苷Rb1(20、40、80mg·L-1)对心肌细胞凋亡率、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及细胞内钙离子变化的影响。结果不同剂量组人参皂苷Rb1可以减少心肌细胞凋亡率、降低MDA含量、增加SOD活性、减少细胞内钙超载。结论人参皂苷Rb1可以抑制H2O2引起的新生大鼠心肌细胞凋亡,其作用机制可能与其抗脂质氧化和减少细胞内钙超载有关。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 心肌细胞 过氧化氢 凋亡 钙离子
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西洋参茎叶总皂苷通过抑制过度内质网应激减轻大鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤 被引量:33
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作者 王琛 李玉珍 +3 位作者 王晓礽 吕振嵘 史大卓 刘秀华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期22-28,共7页
目的:观察西洋参茎叶总皂苷(PQS)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞的保护作用,并从内质网应激(ERS)的角度探讨其分子机制。方法:建立心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型,以台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶活性以及流式细胞术检测细胞损伤及凋亡情况;以RT... 目的:观察西洋参茎叶总皂苷(PQS)对缺氧/复氧(H/R)心肌细胞的保护作用,并从内质网应激(ERS)的角度探讨其分子机制。方法:建立心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤模型,以台盼蓝染色法、乳酸脱氢酶活性以及流式细胞术检测细胞损伤及凋亡情况;以RT-PCR和Western blotting方法,检测ERS标志分子葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、钙网蛋白(CRT)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、caspase-12及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:和H/R组心肌细胞相比,PQS+H/R组:(1)细胞凋亡率降低4.19%(P<0.05),存活率升高21.2%(P<0.05),LDH活性降低66.58%(P<0.05);(2)Bcl-2 mRNA和蛋白表达分别升高30.9%和48.0%(P<0.05),Bax mRNA和蛋白表达分别降低39.7%和48.4%(P<0.05);(3)GRP78 mRNA和蛋白表达分别降低61.6%和37.7%(P<0.05),CRT mRNA和蛋白表达分别降低35.7%和52.2%(P<0.05);CHOP mRNA和蛋白表达分别降低57.0%和51.7%(P<0.05);剪切后的caspase-12蛋白表达降低34.9%(P<0.05)。结论:PQS可减轻H/R诱导的心肌细胞损伤,其机制是降低H/R诱导的GRP78、CRT mRNA和蛋白表达,抑制CHOP、caspase-12等内质网凋亡通路激活,从而抑制过度ERS介导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 西洋参茎叶总皂苷 缺氧/复氧 内质网应激 心肌细胞
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珠子参总皂苷对H_2O_2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用 被引量:31
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作者 陈良金 石孟琼 +2 位作者 贺海波 熊兴军 卢训丛 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第8期860-867,共8页
目的:观察珠子参总皂苷对H2O2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100,200μg/mL)孵育24h后,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影... 目的:观察珠子参总皂苷对H2O2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H2O2建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100,200μg/mL)孵育24h后,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定心肌细胞Caspase-3、Caspase-9的活性,荧光定量PCR测定心肌细胞Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果:珠子参总皂苷(100,200μg/mL)能显著改善心肌细胞活性,有效保护线粒体膜电位的稳定,抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内活性氧(ROS)含量;下调Bax mRNA表达,上调Bcl-2mRNA表达及Bcl-2与Bax的比值;降低H2O2所致新生大鼠心肌细胞中Caspase-3、Caspase-9的活性。结论:珠子参总皂苷对H2O2诱导心肌细胞凋亡有显著的抑制作用,其机制可能与其稳定心肌细胞膜、清除ROS及调节心肌细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3、Caspase-9表达有关。 展开更多
关键词 珠子参总皂苷 H2O2 心肌细胞 凋亡 Bcl-2 BAX CASPASE-3 CASPASE-9
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淫羊藿苷预适应对乳鼠心肌细胞的保护作用 被引量:25
8
作者 潘志伟 王秋娟 +1 位作者 柳仁民 孔令义 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期73-76,共4页
目的:探讨淫羊藿苷预适应对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤和氧化损伤的作用及其机制。方法:体外培养原代乳鼠心肌细胞,淫羊藿苷预适应24h后,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤和过氧化氢(H2O2)诱导氧化损伤模型,测... 目的:探讨淫羊藿苷预适应对培养乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤和氧化损伤的作用及其机制。方法:体外培养原代乳鼠心肌细胞,淫羊藿苷预适应24h后,采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)诱导心肌细胞缺氧/复氧损伤和过氧化氢(H2O2)诱导氧化损伤模型,测定细胞存活率(MTT法)、细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放量、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:在缺氧/复氧损伤模型和氧化损伤模型中,淫羊藿苷预适应明显提高细胞存活率,增加胞内SOD活性,降低培养液中LDH释放量和胞内MDA含量。结论:淫羊藿苷预适应对缺氧/复氧损伤以及氧化损伤心肌细胞都具有明显的保护作用,可能与其抑制脂质过氧化作用有关。 展开更多
关键词 淫羊藿苷 心肌细胞 缺氧/复氧 连二亚硫酸钠 过氧化氢
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木犀草苷对阿霉素诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用 被引量:31
9
作者 何玲 孙桂波 +2 位作者 孙潇 孙静 孙晓波 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1229-1234,共6页
目的观察木犀草苷(luteoloside)对阿霉素(adriamy-cin,ADR)诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法采用新生SD大鼠乳鼠,差数分离提取心肌细胞,建立ADR心肌细胞损伤模型,培养48 h后随机分为正常对照组、ADR模型... 目的观察木犀草苷(luteoloside)对阿霉素(adriamy-cin,ADR)诱导大鼠乳鼠心肌细胞损伤的保护作用,并初步探讨其作用机制。方法采用新生SD大鼠乳鼠,差数分离提取心肌细胞,建立ADR心肌细胞损伤模型,培养48 h后随机分为正常对照组、ADR模型组、木犀草苷与ADR同时给药(12.5、6.25和3.125 mg.L-1)各剂量组及木犀草苷预孵育4 h后,与ADR同时给药(12.5、6.25、3.125 mg.L-1)各剂量组。观察木犀草苷对ADR诱导心肌细胞损伤的量效、时效关系,采用MTT法检测细胞活力、试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力。结果与正常对照组相比,模型组细胞存活率降低、细胞内LDH含量降低,漏出量增加、SOD活性降低及细胞上清液中MDA含量增多。与模型组相比,木犀草苷各处理组心肌细胞存活率均明显增加(P<0.05);木犀草苷与ADR同时给药12.5、6.25 mg.L-1组(P<0.05)能明显降低LDH漏出量、增强SOD活力、降低细胞上清中MDA含量;预孵育4 h后,与ADR同时给药各剂量组均能明显降低LDH漏出量(P<0.05)、增强SOD活力、降低MDA含量(P<0.01)。结论木犀草苷对ADR所致的心肌损伤有明显保护作用;且预孵育4 h后对心肌细胞的保护作用优于未孵育组,其初步作用机制可能与抗自由基、减轻脂质过氧化作用有关。 展开更多
关键词 木犀草苷 心肌细胞 阿霉素 抗氧化 LDH MDA SOD
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赤芍总苷对培养乳鼠心肌细胞损伤的抗氧化作用 被引量:22
10
作者 莫晓燕 黄海霞 +3 位作者 洪喻 耿涛 张振强 杜晓阳 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1119-1121,共3页
目的 探讨赤芍总苷对心肌细胞损伤的抗氧化保护作用。方法 以培养的乳鼠心肌细胞加入异丙基肾上腺素造成缺血缺氧损伤模型 ,对比分析正常对照组、药物损伤组、辅酶Q10 阳性对照组、以及不同剂量赤芍总苷保护组培养液中超氧化物歧化酶... 目的 探讨赤芍总苷对心肌细胞损伤的抗氧化保护作用。方法 以培养的乳鼠心肌细胞加入异丙基肾上腺素造成缺血缺氧损伤模型 ,对比分析正常对照组、药物损伤组、辅酶Q10 阳性对照组、以及不同剂量赤芍总苷保护组培养液中超氧化物歧化酶、丙二醛和一氧化氮含量。结果 损伤组总SOD、CuZn SOD和Mn SOD水平均明显下降 ,MDA和NO含量显著升高 ;而辅酶Q10 组和赤芍总苷组上述指标都有不同程度的改善 ,其中大剂量赤芍总苷组的保护作用接近或优于阳性对照组。结论 赤芍总苷对异丙基肾上腺素造成的心肌损伤具有保护作用 ,且呈现剂量依赖关系 ,作用机制与增强细胞抗氧化作用 ,减少自由基和脂质过氧化物导致的细胞膜损伤有关。 展开更多
关键词 赤芍总苷 心肌细胞 抗氧化 超氧化物歧化酶 丙二醛 一氧化氮
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过氧化氢通过线粒体通路和死亡受体通路诱导心肌细胞凋亡 被引量:19
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作者 肖卫民 蒋碧梅 +6 位作者 石永忠 刘梅冬 唐道林 王慷慨 张华莉 邓恭华 肖献忠 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2003年第3期185-188,共4页
为探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡的分子机制 ,采用 0 .5mmol L过氧化氢作用于原代培养的新生大鼠心肌细胞。末端标记发现过氧化氢明显诱导心肌细胞凋亡 ;Caspase活性定量检测及Western blot发现Caspase 3、Caspase 8和Caspase 9同时被激... 为探讨氧化应激诱导心肌细胞凋亡的分子机制 ,采用 0 .5mmol L过氧化氢作用于原代培养的新生大鼠心肌细胞。末端标记发现过氧化氢明显诱导心肌细胞凋亡 ;Caspase活性定量检测及Western blot发现Caspase 3、Caspase 8和Caspase 9同时被激活 ;而Western blot及间接免疫荧光发现细胞色素C从线粒体释放入胞浆。以上结果提示 ,氧化应激通过同时激活线粒体通路与死亡受体通路导致心肌细胞凋亡 。 展开更多
关键词 心肌缺血 心肌再灌注损伤 末端标记 过氧化氢 细胞凋亡 线粒体信号通路 死亡受体通路
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参附注射液对缺氧心肌细胞凋亡的抑制效应 被引量:27
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作者 张晓膺 郑世营 +2 位作者 赵军 王志刚 葛锦峰 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期113-115,i002,共4页
目的 探讨参附注射液对缺氧诱导的培养乳鼠心肌细胞凋亡的作用。方法 将 SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为三组:对照组、缺氧72 h组和参附注射液组。缺氧 72 h前加入1 mmol参附注射液。应用TUNEL法及流式细胞仪分析心肌细胞凋亡的变化,... 目的 探讨参附注射液对缺氧诱导的培养乳鼠心肌细胞凋亡的作用。方法 将 SD乳鼠的培养心肌细胞随机分为三组:对照组、缺氧72 h组和参附注射液组。缺氧 72 h前加入1 mmol参附注射液。应用TUNEL法及流式细胞仪分析心肌细胞凋亡的变化,借助半胱胺酸 天门冬胺酸酶(caspase- 3)荧光分析试剂盒,荧光比色法检测心肌细胞凋亡过程中 caspase -3 活性的变化。结果 TUNEL及流式细胞仪分析显示,参附注射液组 AI值和细胞凋亡百分率分别为(14. 10±2 .56)%和(14. 93±2 .47)%,明显低于缺氧72 h组(46 .49±4 .93)%和(48 .43±4 .18)%(P<0 .01)。caspase -3活性检测显示,参附注射液组的caspase- 3活性比缺氧72 h组降低了 52. 85%(P<0. 01)。结论 参附注射液能明显抑制缺氧诱导的心肌细胞凋亡。caspase- 3蛋白酶活性抑制可能是其机理之一。 展开更多
关键词 参附注射液 缺氧心肌 心肌细胞凋亡 CASPASE-3 乳鼠 诱导 抑制效应 性比 活性检测 酶活性
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干细胞因子对大鼠骨髓间充质干细胞增殖与分化的影响 被引量:29
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作者 郭军 林国生 +4 位作者 鲍翠玉 贾光宏 杨波 汪蕾 刘维新 《中国医师杂志》 CAS 2004年第12期1601-1604,共4页
目的 探讨干细胞因子 (StemCellFactor ,SCF)促进骨髓间充质干细胞 (MSCs)增殖及促进其向心肌细胞分化的作用。方法 SCF对MSCs预处理 ,流式细胞术测定第 4代MSCs的细胞周期 ,DAPI -MSCs在体外模拟的心肌微环境下培养。用数码显微摄像... 目的 探讨干细胞因子 (StemCellFactor ,SCF)促进骨髓间充质干细胞 (MSCs)增殖及促进其向心肌细胞分化的作用。方法 SCF对MSCs预处理 ,流式细胞术测定第 4代MSCs的细胞周期 ,DAPI -MSCs在体外模拟的心肌微环境下培养。用数码显微摄像及免疫荧光技术分别记录和检测心肌特异性肌节肌球蛋白重链 (MHCα/β)、肌钙蛋白T(TroponinT ,TnT)的表达 ,分析MSCs向心肌细胞分化的百分率。结果 实验组的G0 /G1期细胞百分率均显著低于对照组 (P <0 0 1) ,S期、G2 /M期细胞百分率及PI值均显著高于对照组 (P <0 0 1)。在共培养的第 2、3、4、5d ,SCF组表达MHC的DAPI -MSCs阳性百分率分别为 (1 96± 0 3 3 ) %、(4 76±0 3 2 ) %、(5 15± 0 42 ) %、(8 5 2± 0 45 ) % ,显著高于对照组的 (0 5 2± 0 2 1) %、(1 2 5± 0 47) %、(1 75± 0 2 8) %、(3 64± 0 3 2 ) % (P<0 0 1) ;在共培养的第 3、4、5d表达TnT的DAPI -MSCs阳性百分率分别为 (1 10± 0 15 ) %、(2 64± 0 18) %、(5 43± 0 2 4) %均显著高于对照组的 0、(1 2 7± 0 13 ) %、(1 3 2± 0 2 5 ) % (P <0 0 1)。结论 SCF对MSCs具有促增殖、促分化的作用。 展开更多
关键词 对照组 增殖 干细胞因子 分化 骨髓间充质干细胞 MSC 表达 SCF 共培养 百分率
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黄芩苷对缺氧缺糖性心肌细胞的保护作用 被引量:17
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作者 刘桦 吴晓冬 +2 位作者 闫倩 许德义 贾红彬 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期55-57,共3页
目的 :探讨黄芩苷对缺氧缺糖性心肌细胞的影响。方法 :取SD乳鼠的心脏 ,经消化 ,分离及纯化制成心肌细胞悬液并接种至 2 4孔培养板中 ,通过缺氧缺糖 ,建立心肌细胞“缺血性”损伤的实验病理模型 ,在此基础上观察黄芩苷对缺氧缺糖心肌细... 目的 :探讨黄芩苷对缺氧缺糖性心肌细胞的影响。方法 :取SD乳鼠的心脏 ,经消化 ,分离及纯化制成心肌细胞悬液并接种至 2 4孔培养板中 ,通过缺氧缺糖 ,建立心肌细胞“缺血性”损伤的实验病理模型 ,在此基础上观察黄芩苷对缺氧缺糖心肌细胞形态及细胞内SOD、MDA水平及NO分泌的影响。结果 :0 1~ 10 μg/ml的黄芩苷可显著提高缺氧性心肌细胞中SOD活性 ,10 μg/ml的黄芩苷显著抑制MDA的生成 ,1μg/ml黄芩苷显著增加NO分泌 ,10 μg/ml黄芩苷又抑制NO分泌。 结论 :黄芩苷对缺氧缺糖性心肌细胞损伤具有一定的保护作用。 展开更多
关键词 黄芩苷 缺氧缺糖性心肌细胞 保护作用 丙二醛 一氧化氮 实验研究
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参附注射液对体外缺氧复氧心肌细胞的影响 被引量:27
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作者 柯剑娟 王焱林 +2 位作者 张本静 王成天 张宗泽 《中华急诊医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期810-813,共4页
目的观察参附注射液对体外缺氧复氧损伤乳鼠心肌细胞凋亡率及Bcl-2、Caspase-3蛋白的影响,探讨其对缺氧复氧损伤心肌细胞保护作用机制。方法在协和医科大学阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学重点实验室进行以下实验:取出生1~... 目的观察参附注射液对体外缺氧复氧损伤乳鼠心肌细胞凋亡率及Bcl-2、Caspase-3蛋白的影响,探讨其对缺氧复氧损伤心肌细胞保护作用机制。方法在协和医科大学阜外心血管病医院卫生部心血管疾病再生医学重点实验室进行以下实验:取出生1~2dSD乳鼠,采用培养乳鼠心肌细胞建立缺氧复氧损伤模型。将培养的心肌细胞随机分为四组:(1)正常对照组(Con组)37℃、5%CO2孵箱中持续孵育20h,未经缺氧复氧处理;(2)缺氧复氧组(H/R组)给予培养的心肌细胞单纯缺氧4h,复氧16h;(3)低剂量参附注射液组(L-SFI组)在缺氧前30min加入终质量浓度为50μL/mL的参附注射液,余同缺氧复氧组;(4)高剂量参附注射液组(H—SFI组)在缺氧前30min加入终质量浓度为100μL/mL的参附注射液,余同缺氧复氧组。采用异硫氰酸荧光素(F1TC)标记的Annexin V(Annexin V-FTTC)及碘化丙锭(PI)双染流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用增强化学发光免疫印记技术(ECL-Westem blot)检测心肌细胞Bcl-2,Caspase.3蛋白水平。采用SPSS11.5统计软件进行分析,均数计量资料以均数±标准差(x±s)表示,组间比较单因素方差分析,P〈0.05为差异有统计学意义。结果与Con组比较,H/R组细胞凋亡的各个阶段的凋亡率显著增加(P〈0.01);与H/R组比较,L-SFI组和H-SFI组凋亡率明显下降(P〈0.01)。免疫印迹检测结果显示,与Con组比较,H/R组Bcl-2蛋白表达水平显著降低,出现Caspase-3相对分子质量17000的裂解片断;与H/R组比较,不同浓度的参附注射液组Bcl-2蛋白的表达明显升高,伴随Caspase-3相对分子质量17000片断的表达减少。结论参附注射液可以减少缺氧复氧诱导的细胞凋亡,其机制可能通过上调Bcl-2蛋白表达,抑制Caspase-3蛋白的激活,发挥其抗凋亡的作用。 展开更多
关键词 参附注射液 心肌细胞 凋亡 BCL-2 CASPASE-3
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体外模拟心肌微环境中人骨髓间充质干细胞向心肌细胞的分化 被引量:24
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作者 邓方阁 张秀英 +2 位作者 王心蕊 马英智 李玉林 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期257-259,共3页
目的:研究在体外模拟心肌微环境中人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向心肌细胞(CM)的分化。方法:体外分离培养扩增hMSCs,进行流式细胞仪分析鉴定其免疫学表型CD34、CD44和CD45,以未加一抗只加二抗的hMSCs作为平行对照组;同时原代培养SD乳鼠的C... 目的:研究在体外模拟心肌微环境中人骨髓间充质干细胞(hMSCs)向心肌细胞(CM)的分化。方法:体外分离培养扩增hMSCs,进行流式细胞仪分析鉴定其免疫学表型CD34、CD44和CD45,以未加一抗只加二抗的hMSCs作为平行对照组;同时原代培养SD乳鼠的CM以模拟体外心肌微环境。选用生长良好、纯度达到95%的第5代hMSCs,与乳鼠原代培养的CM共培养,并进行心肌特异性标志cTnI的免疫组化鉴定。结果:体外分离纯化培养扩增出的hMSCs,不表达CD34及CD45,高表达CD44,其CD44阳性率平均为(93.26±2.48)%,与平行对照组[(3.42±1.09)%]比较差异有显著性(P<0.01)。hMSCs与CM共培养后,其形态逐渐向CM形态过渡,并表达心肌特异性抗体cTnI。结论:hMSCs在体外模拟的心肌微环境中可分化为CM,干细胞的分化具有环境依赖性。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 心肌细胞 体外微环境
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骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞的实验研究 被引量:15
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作者 朱洪生 连锋 +3 位作者 朱伟 钟竑 郑林 朱平 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2002年第5期391-395,共5页
目的采用骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞 ,为心衰的干细胞移植治疗提供新的细胞材料。 方法抽取贵州香猪骨髓液 3ml,按照Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞 ,经 5 -氮胞苷刺激 2 4h后 ,进行结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙... 目的采用骨髓间质干细胞体外转化为心肌细胞 ,为心衰的干细胞移植治疗提供新的细胞材料。 方法抽取贵州香猪骨髓液 3ml,按照Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞 ,经 5 -氮胞苷刺激 2 4h后 ,进行结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ、连接蛋白 - 4 3免疫组化 ,电镜鉴定。 结果骨髓间质干细胞经 5 -氮胞苷刺激后 ,部分细胞呈梭形 ,结蛋白、肌球蛋白重链、心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ、连接蛋白 - 4 3免疫组化阳性 ,电镜示梭形细胞有明显的肌丝 ,细胞核呈单椭圆形 ,位于细胞中央。 结论骨髓间质干细胞可在体外的环境下向心肌细胞转化 。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 体外转化 心肌细胞 实验研究 肌球蛋白重链 心肌特异性肌钙蛋白I 连接蛋白-43
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人参多糖通过抑制ROS水平和凋亡保护H_2O_2诱导的心肌细胞氧化应激损伤 被引量:24
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作者 田耀博 赵大庆 +2 位作者 李香艳 孙立伟 陈雪楠 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第2期240-247,共8页
为探讨人参多糖缓解心肌氧化损伤的功效,利用过氧化氢(H_2O_2)诱导的H9c2大鼠心肌细胞建立体外心肌氧化损伤模型,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞存活率,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),流式细胞术检测... 为探讨人参多糖缓解心肌氧化损伤的功效,利用过氧化氢(H_2O_2)诱导的H9c2大鼠心肌细胞建立体外心肌氧化损伤模型,利用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞存活率,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),流式细胞术检测活性氧(ROS)和细胞凋亡,Western Blot法检测细胞凋亡相关蛋白.结果表明:与对照组(Con)比较,H_2O_2能够使细胞存活率显著下降(P<0.001);与H_2O_2诱导组(模型组,Mod)比较,6.25μg/mL人参多糖预防治疗24h将细胞存活率由(57.47±5.08)%提高到(85.65±4.28)%(P<0.001),说明人参多糖能够对抗H_2O_2诱导的细胞毒性作用.流式细胞术DCFH-DA染色结果显示:与Con组比较,H_2O_2显著升高细胞ROS水平;而人参多糖预防治疗24h后细胞ROS水平降低,提示人参多糖能够抑制H_2O_2诱导的H9c2细胞活性氧水平升高,并通过降低MDA含量及提高SOD活性缓解氧化应激损伤.同时,人参多糖可通过增加H_2O_2诱导损伤引起的Bcl-2/Bax比值,降低凋亡相关蛋白表达来缓解氧化应激导致的细胞凋亡.总之,人参多糖通过抑制ROS水平和细胞凋亡保护心肌细胞氧化应激损伤,为阐述人参保护心脏功效机制及产品研发提供了实验依据. 展开更多
关键词 人参多糖 心肌细胞 氧化应激 凋亡 活性氧
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从凋亡信号通路探讨热休克蛋白保护过氧化氢所致心肌细胞凋亡的机制 被引量:15
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作者 肖卫民 蒋碧梅 +7 位作者 石永忠 刘梅冬 唐道林 夏珂 王慷慨 张华莉 邓恭华 肖献忠 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2003年第4期283-286,共4页
为探讨热休克蛋白保护过氧化氢所致心肌细胞凋亡的分子机制 ,采用热休克对原代培养的新生大鼠心肌细胞进行预处理 ,以诱导热休克蛋白的表达 ,观察热休克蛋白对过氧化氢所致心肌细胞凋亡的保护作用。结果发现 ,热休克预处理导致心肌细胞... 为探讨热休克蛋白保护过氧化氢所致心肌细胞凋亡的分子机制 ,采用热休克对原代培养的新生大鼠心肌细胞进行预处理 ,以诱导热休克蛋白的表达 ,观察热休克蛋白对过氧化氢所致心肌细胞凋亡的保护作用。结果发现 ,热休克预处理导致心肌细胞热休克蛋白 70及αB 晶状体蛋白表达明显增加 ,同时显著抑制过氧化氢所致细胞色素C从线粒体释放 ,抑制Caspase 8、Caspase 9和Caspase 3活化及随后的心肌细胞凋亡。以上结果提示 ,热休克蛋白通过抑制线粒体信号通路与死亡受体通路的活化保护过氧化氢导致的心肌细胞凋亡 。 展开更多
关键词 病理生理学 心肌细胞内源性保护机制 Westem-blot 热休克蛋白 过氧化氢 细胞凋亡 线粒体信号通路
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永生型骨髓间质干细胞体外诱导为心肌样细胞的实验研究 被引量:19
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作者 朱洪生 连锋 +2 位作者 王彦婷 朱伟 许文荣 《中华心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期59-63,共5页
目的 采用骨髓间质干细胞体外诱导为心肌细胞 ,为心力衰竭的干细胞移植治疗提供新的细胞材料。方法 抽取贵州香猪骨髓液 3ml,按照Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞 ,连续传代 4个月 ,得到永生型细胞 ,经 5 氮胞苷 (5 azacytidine... 目的 采用骨髓间质干细胞体外诱导为心肌细胞 ,为心力衰竭的干细胞移植治疗提供新的细胞材料。方法 抽取贵州香猪骨髓液 3ml,按照Wakitani的方法培养出骨髓间质干细胞 ,连续传代 4个月 ,得到永生型细胞 ,经 5 氮胞苷 (5 azacytidine)刺激后 ,进行RT PCR ,基因测序 ,免疫组化 ,电镜超微结构鉴定。结果 骨髓间质干细胞经 5 氮胞苷刺激后 ,部分细胞呈梭形。RT PCR ,基因测序结果表明细胞有心房利钠肽 (ANP) ,脑利钠肽 (BNP) ,心肌特异性肌球蛋白重链 (cardiac MHC) ,β肌球蛋白重链 (beta MHC) ,α骨骼肌肌动蛋白 (α skeletalactin)表达 ,结蛋白 (desmin) ,肌球蛋白重链 (MHC) ,心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ (cTnTⅠ )免疫组化阳性。电镜示梭形细胞有明显的肌丝 ,细胞核呈单椭圆形 ,位于细胞中央。结论 骨髓间质干细胞经 5 氮胞苷刺激后 ,从基因 ,蛋白 ,超微形态上已有心肌细胞特点 ,表明在体外环境下可向心肌细胞转化 。 展开更多
关键词 永生型骨髓间质干细胞 体外诱导 心肌样细胞 实验研究 细胞移植治疗
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