植物PRR免疫受体功能研究进展

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作者 叶红 王玉昆 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1-15,共15页

植物在长期的适应环境过程中进化出大量细胞表面和细胞内免疫受体来感知环境中的各种生物和非生物刺激,进而引发受体依赖的免疫反应。细胞表面模式识别受体(PRR)能够识别病原微生物模式分子并激活基础免疫,从而使植物获得相应的耐受性... 植物在长期的适应环境过程中进化出大量细胞表面和细胞内免疫受体来感知环境中的各种生物和非生物刺激,进而引发受体依赖的免疫反应。细胞表面模式识别受体(PRR)能够识别病原微生物模式分子并激活基础免疫,从而使植物获得相应的耐受性。目前,借助于高效的研究手段,研究者在PRR介导的植物抗病及环境胁迫耐受方面取得了一些进展。本文主要综述近年来在植物PRR种类和结构、配体识别和结合机制、PRR介导的先天性免疫特征和机理以及新PRR受体的鉴定等方面取得的研究进展,同时关注近年来植物PRR受体在赋予植物对盐胁迫抗性等方面的研究成果,以期为深入理解植物与环境互作的免疫基础,并为利用基因工程培育优良抗病和抗逆植物品种提供理论基础和指导。 展开更多

关键词 模式识别受体 类受体激酶 类受体蛋白 受体识别 先天免疫 非生物胁迫 盐胁迫 受体鉴定

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牛冠状病毒S和HE蛋白研究进展

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作者 靳双媛 杜家伟 +2 位作者 王雪妍 郭雪莲 许立华 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3118-3127,共10页

牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)是引起新生犊牛腹泻、牛的呼吸道感染和成年牛冬痢的一种病原,主要通过粪-口感染和呼吸道气溶胶传播。研究表明,BCoV在亚临床感染的成年牛体内可持续存在,这可能是BCoV在牛群中广泛存在且能长期循... 牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)是引起新生犊牛腹泻、牛的呼吸道感染和成年牛冬痢的一种病原,主要通过粪-口感染和呼吸道气溶胶传播。研究表明,BCoV在亚临床感染的成年牛体内可持续存在,这可能是BCoV在牛群中广泛存在且能长期循环的原因。因此,BCoV的流行会对集约化牛场造成巨大的经济损失,BCoV的防控形势极其严峻。BCoV S蛋白包含主要的抗原位点,可与宿主表面的唾液酸(SA)结合,且S蛋白参与病毒与宿主细胞的吸附和膜融合过程,能促进宿主产生有效的中和抗体。BCoV HE蛋白具有乙酰酯酶活性和血凝活性,能与S蛋白协同附着于细胞表面并启动感染。S和HE蛋白均在病毒的组织或宿主嗜性及毒力等方面发挥重要作用,这些作用也为进一步开展BCoV病原研究及后续疫苗和药物的研制提供参考。笔者重点阐述了BCoV S和HE蛋白的分子结构及功能,以及BCoV基于S和HE蛋白的受体识别作用(包括利用N-乙酰-9-O-乙酰神经氨酸为糖结合受体,利用人类白细胞抗原Ⅰ类分子为蛋白结合受体)。受体识别是冠状病毒感染和致病的重要决定因素,也是宿主免疫监视和人类干预策略最重要的靶标之一。因此,充分了解BCoV S和HE蛋白的结构功能和受体识别作用对于了解病毒的致病机制及抗病毒药物、疫苗的研发具有重要意义。 展开更多

关键词 牛冠状病毒(BCoV) S蛋白 HE蛋白 受体识别

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植物NLR免疫受体的识别、免疫激活与信号调控 被引量：3

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作者 覃磊 彭志红 夏石头 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期12-23,共12页

高等植物进化出大量膜表面和胞内免疫受体以感知各种病原信号,抵御病原物入侵。其中,细胞表面的模式识别受体感知模式分子后激活基础免疫反应,核苷酸结合和富亮氨酸重复蛋白(NLRs)则通过感知病原微生物分泌的效应蛋白激活特异免疫反应,... 高等植物进化出大量膜表面和胞内免疫受体以感知各种病原信号,抵御病原物入侵。其中,细胞表面的模式识别受体感知模式分子后激活基础免疫反应,核苷酸结合和富亮氨酸重复蛋白(NLRs)则通过感知病原微生物分泌的效应蛋白激活特异免疫反应,导致超敏反应与细胞死亡。该文主要综述了NLRs对效应蛋白的识别、植物免疫激活及下游信号调控的最新研究进展。 展开更多

关键词 植物免疫 NLRS 受体识别 信号调控

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糖蛋白激素研究进展 被引量：3

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作者 常亮 李晨辉 +2 位作者 马志珺 赵静 高健 《生物技术进展》 2015年第1期22-28,共7页

糖蛋白激素是人体内一类重要激素家族,由4个成员构成—促卵泡激素(FSH)、促黄体素(LH)、促甲状腺激素(TSH)和绒毛膜促性腺激素(CG)。这些激素结构相似,但功能各异。主要从结构方面对糖蛋白激素的亚基装配、受体识别及长效化改造进行分... 糖蛋白激素是人体内一类重要激素家族,由4个成员构成—促卵泡激素(FSH)、促黄体素(LH)、促甲状腺激素(TSH)和绒毛膜促性腺激素(CG)。这些激素结构相似,但功能各异。主要从结构方面对糖蛋白激素的亚基装配、受体识别及长效化改造进行分析综述。 展开更多

关键词 糖蛋白激素 结构 受体识别 长效化改造

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HLA-G α1结构域Met^(76)和Gln^(79)在KIR2DL4特异性识别中的作用研究 被引量：2

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作者 颜卫华 林爱芬 范丽安 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期875-878,共4页

目的探讨HLA-Gα1结构域中特异的Met^(76)和Gln^(79)两个位点在HLA-G特异性受体KIR2DL4识别中的作用。方法采用真核表达载体CD51neg1,克隆表达KIR2DL4胞外区与IgG Fc段的可溶性融合蛋白；利用“桥式”PCR和“点突变”方法,将位于HLA-G... 目的探讨HLA-Gα1结构域中特异的Met^(76)和Gln^(79)两个位点在HLA-G特异性受体KIR2DL4识别中的作用。方法采用真核表达载体CD51neg1,克隆表达KIR2DL4胞外区与IgG Fc段的可溶性融合蛋白；利用“桥式”PCR和“点突变”方法,将位于HLA-G目的基因α1结构域中编码Met^(76)和Gln^(79)的密码子突变为Ala^(76,79)(HLA-mG),通过逆转录病毒表达载体分别使野生型HLA-G及其突变体在HLAI分子阴性的K562细胞上表达。流式细胞术分别测定KIR2DL4-IgG Fc融合蛋白与野生型HLA-G及Met^(76)、Gln^(79)→Ala^(76,79)HLA-G突变体结合的荧光强度,通过比较两者的平均荧光强度分析HLA-G分子Mel^(76)、Gln^(79)残基在HLA-G与其受体KIR2DL4识别过程中的作用。结果Western blot结果显示,本实验成功表达KIR2DL4-IgG Fc融合蛋白。FACS结果表明,野生型HLA-G及Met^(76)、Gln^(79)→Ala^(76,79)HLA-G突变体在K562细胞上高表达。Met^(76)、Gln^(79)突变为Ala^(76,79)后能显著影响KIR2DL4对HLA-G分子的识别。结论HLA-Gα1结构域中Met^(76)和Gln^(79)可能是其特异性受体KIR2DL4识别的关键位点。 展开更多

关键词 KIR2DL4 HLA-G 受体识别

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甲型流感病毒对巨噬细胞的侵染及对干扰素表达的影响 被引量：1

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作者 徐琦 杨新燕 +2 位作者 杨灿 沃恩康 郭潮潭 《国际流行病学传染病学杂志》 CAS 2022年第1期17-21,共5页

目的探讨甲型流感病毒对缺少唾液酸残基巨噬细胞的侵染情况,并初步分析其对IFN表达的影响。方法将PR8、Memphis、Aichi三种甲型流感病毒株以相同的病毒滴度分别侵染MHS肺泡巨噬细胞,对照组(NC)加等量PBS,24 h收集上清及细胞样本。采用RT... 目的探讨甲型流感病毒对缺少唾液酸残基巨噬细胞的侵染情况,并初步分析其对IFN表达的影响。方法将PR8、Memphis、Aichi三种甲型流感病毒株以相同的病毒滴度分别侵染MHS肺泡巨噬细胞,对照组(NC)加等量PBS,24 h收集上清及细胞样本。采用RT-PCR法检测实验组病毒的负载量;普通倒置光学显微镜镜下观察实验组及NC细胞病变;实时荧光定量RCR法检测实验组及NC巨噬细胞样本中IFN-β、IFN-γ及Toll样受体3(TLR3)的表达水平,并进行统计学分析。结果MHS巨噬细胞被3株甲型流感病毒株侵染后,镜下均观察到细胞病变,Aichi病变程度最强、Memphis次之、PR8最弱。在细胞和上清样本中检测到Aichi和Memphis核酸拷贝数较高(Aichi:胞内Ct=14.93,上清Ct=19.05;Memphis:胞内Ct=17.15,上清Ct=21.39),PR8拷贝数较低(胞内Ct=26.86,上清Ct=29.31)。与NC比较,3株病毒均诱导IFN-β高表达(Aichi/NC=210、Memphis/NC=93、PR8/NC=33),同时抑制IFN-γ表达,差异均有统计学意义(F=224.00和2637.00,P均<0.001)。此外,Aichi诱导TLR3表达量升高(Aichi/NC=5.03),与NC比较,差异有统计学意义(t=6.40,P=0.031)。结论尽管巨噬细胞表面缺少甲型流感病毒唾液酸受体,但仍可通过其他途径被病毒侵染,并影响其胞内病毒RNA识别受体和IFN的表达,不同毒株之间的侵染能力存在较大差异。 展开更多

关键词 流感病毒A型 巨噬细胞 侵染 生物学功能 高表达 诱导 受体识别

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大肠杆菌噬菌体P88尾丝蛋白受体识别关键氨基酸位点的确定

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作者 石冬琳 李艳秀 +3 位作者 钟黄欣 陈正阳 张子博 张炜 《畜牧与兽医》 北大核心 2019年第7期60-66,共7页

温和噬菌体P88由溶原性大肠杆菌K88诱导得来,前期研究结果表明其尾丝蛋白的716-746位氨基酸为其受体识别的关键区域。本研究旨在确定该关键区域内的关键氨基酸位点。采用大肠杆菌无痕缺失的方法以溶源大肠杆菌K88的基因组为操作对象,将... 温和噬菌体P88由溶原性大肠杆菌K88诱导得来,前期研究结果表明其尾丝蛋白的716-746位氨基酸为其受体识别的关键区域。本研究旨在确定该关键区域内的关键氨基酸位点。采用大肠杆菌无痕缺失的方法以溶源大肠杆菌K88的基因组为操作对象,将P88尾丝蛋白中的第716、719、721、722、725、730、734、736、744和746位的氨基酸分别定点突变为丙氨酸,丝裂霉素C诱导定点突变溶原菌K88,之后用P88的宿主菌DE048筛选和纯化定点突变噬菌体,并测定定点突变噬菌体宿主谱。在构建的10株大肠杆菌K88定点突变株中,有5株可以诱导出与亲本噬菌体P88具有相同宿主谱的噬菌体突变株,然而尾丝蛋白第719、721、730、734和736位氨基酸定点突变的K88突变株无法用DE048筛选出突变噬菌体粒子,因此推测噬菌体尾丝蛋白第719、721、730、734和736位氨基酸为其受体识别的关键氨基酸位点。本研究为温和噬菌体基因和宿主谱的改造提供了理论基础。 展开更多

关键词 温和噬菌体 受体识别 定点突变 关键氨基酸位点

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Asia1型口蹄疫病毒受体结合位点多样性 被引量：5

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作者 李平花 白兴文 +5 位作者 孙普 卢曾军 曹伟军 吴润 殷宏 刘在新 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期423-428,共6页

【目的】口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)通过结构蛋白VP1 G-H环上高度保守的精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)基序与整联蛋白结合起始病毒的感染,但FMDV是RNA病毒,在环境条件变化时,FMDV能够以非RGD的途径起... 【目的】口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)通过结构蛋白VP1 G-H环上高度保守的精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸(Arg-Gly-Asp,RGD)基序与整联蛋白结合起始病毒的感染,但FMDV是RNA病毒,在环境条件变化时,FMDV能够以非RGD的途径起始病毒的感染。为了研究FMDV Asia1/JS/China/05田间舌皮毒经两种不同的途径短期传代后细胞受体结合基序RGD的变异。【方法】采用RT-PCR方法扩增FMDV Asia1/JS/China/05田间毒、田间毒的乳鼠适应毒第四代(MF4)和接种田间毒的牛同居感染的猪水泡病料适应细胞的第八代毒(PBF8)结构蛋白VP1基因,并对不同病毒VP1基因的PCR产物测序和cDNA文库测序。【结果】以含RGD受体结合基序为优势的田间毒在乳鼠上短期传代后出现了含精氨酸-丝氨酸-天门冬氨酸(Arg-Ser-Asp,RSD)和RGD受体结合基序的混合种群,而同居感染后的细胞传代病毒种群则以含精氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(Arg-Asp-Asp,RDD)受体结合基序为优势种群。【结论】发现了含RGD受体结合位点为优势的FMDV种群,经不同的宿主短期传代后产了含RSD或RDD受体结合基序的优势种群,该发现不仅增加了保守基序RGD发生替换的FMDV变异株的数量,而且为FMDV的细胞识别和宿主嗜性的改变等进一步研究奠定了物质基础。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 受体结合位点 多样性

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葡萄糖受体靶向型超支化功能聚合物的合成及荧光标记和抗菌应用 被引量：1

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作者 朱韵 徐惠琳 +1 位作者 沈舒扬 张东岳 《高分子材料科学与工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2021年第11期149-157,共9页

传统的小分子抗菌剂受限于其易挥发、化学稳定性差、使用剂量大,且有不易于实现对细菌的选择性标记和杀灭性能等的缺点,在实际应用中具有一定的局限性。文中以聚乙二醇双丙烯酸酯(A_(2))、1-(2-氨基乙基)哌嗪(B_(3))为功能单体,氨基葡... 传统的小分子抗菌剂受限于其易挥发、化学稳定性差、使用剂量大,且有不易于实现对细菌的选择性标记和杀灭性能等的缺点,在实际应用中具有一定的局限性。文中以聚乙二醇双丙烯酸酯(A_(2))、1-(2-氨基乙基)哌嗪(B_(3))为功能单体,氨基葡萄糖为封端剂,通过Micheal加成反应得到了一类具有葡萄糖受体识别功能的超支化聚合物。这类聚合物因分子内富含叔胺结构,故具有良好的自发荧光性。通过研究其在不同外界环境中的荧光性能,揭示了聚合物浓度、温度、溶剂均会在一定程度上影响其荧光强度。实验结果表明,最佳荧光发光条件为温度20℃,聚合物浓度为0.1 mg/mL,pH=3,最佳激发波长为λ_(EX.)=350nm。合理调节外部条件可使其获得良好的荧光性质,故该类含糖超支化聚合物有望成为一种高效的基于细菌胞外葡萄糖受体的检测型抗菌剂。 展开更多

关键词 葡萄糖受体识别 超支化聚合物 自发荧光 检测抗菌

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含RGD受体结合位点口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株的拯救及初步鉴定

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作者 李平花 白兴文 +4 位作者 曹伟军 卢曾军 孙普 殷宏 刘在新 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期943-948,共6页

【目的】构建含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)受体结合位点口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株的全长感染性cDNA克隆。【方法】采用定点突变方法,构建Asia1型FMDV含有预期突变的全长cDNA克隆pFMDV-RGD。pFMDV-RGD重组质粒经NotI线... 【目的】构建含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)受体结合位点口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株的全长感染性cDNA克隆。【方法】采用定点突变方法,构建Asia1型FMDV含有预期突变的全长cDNA克隆pFMDV-RGD。pFMDV-RGD重组质粒经NotI线化后,与表达T7 RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,进行FMDV-RGD病毒拯救。【结果】序列测定结果表明成功构建了FMDV含有RGD受体位点的Asia1/JS/China/2005全长cDNA克隆。共转染试验获得拯救病毒,对拯救的病毒分别进行序列测定、间接免疫荧光、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析,表明成功拯救了含有RGD受体结合位点的Asia1/JS/China/2005株FMDV。【结论】该试验为进一步研究含有RGD和RDD受体结合位点2个拯救病毒生物学特性的差异奠定了基础。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 RGD受体结合位点 感染性cDNA克隆 病毒拯救

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靶向核受体RXRα的淫羊藿抗炎活性成分的快速精准鉴定 被引量：4

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作者 方慧 鄢庆枇 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第23期3245-3248,共4页

目的建立从中药中高效精准鉴定靶向核受体RXRα的天然活性成分的方法。方法通过受体-配体识别结合的原理,将中药淫羊藿抗炎活性馏分与核受体RXRα蛋白共同孵育,捕获配体小分子,利用高效液相色谱仪、核磁和质谱识别并鉴定配体化合物,生... 目的建立从中药中高效精准鉴定靶向核受体RXRα的天然活性成分的方法。方法通过受体-配体识别结合的原理,将中药淫羊藿抗炎活性馏分与核受体RXRα蛋白共同孵育,捕获配体小分子,利用高效液相色谱仪、核磁和质谱识别并鉴定配体化合物,生物学技术手段进行化合物活性验证。结果从淫羊藿抗炎馏分中快速筛选出核受体蛋白RXRα的小分子配体宝藿苷Ⅰ,生物学活性测试显示该配体化合物能够有效抑制细胞炎症反应,且具有RXRα依赖性。结论受体-配体识别法能够有效鉴定淫羊藿抗炎馏分中靶向核受体RXRα的活性小分子,该法为天然产物和中药活性成分的精准鉴定提供新的思路,为新型RXRα天然小分子调节剂的快速筛选起到促进作用。 展开更多

关键词 RXRα 受体-配体识别 淫羊藿 宝藿苷Ⅰ 抗炎

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