结核分枝杆菌γ－干扰素释放试验与人类白细胞分化抗原G联合检测肺结核的诊断效能评价 被引量：11

1

作者 吕秋琼 许文芳 +5 位作者 王琼 尉理梁 陶叶海 杨小林 董惠倩 陶志华 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期852-856,共5页

目的探讨肺结核患者外周血特异性T细胞IFN－γ（TB－IGRA）和人类白细胞分化抗原G（HLA－G）的表达情况及其诊断肺结核的价值。 方法 采用回顾性研究设计方法，病例均来自2015年1月至12月绍兴市立医院呼吸科就诊的肺部疾病患者，根据... 目的探讨肺结核患者外周血特异性T细胞IFN－γ（TB－IGRA）和人类白细胞分化抗原G（HLA－G）的表达情况及其诊断肺结核的价值。 方法 采用回顾性研究设计方法，病例均来自2015年1月至12月绍兴市立医院呼吸科就诊的肺部疾病患者，根据临床和病理诊断分为肺结核组（34例）、肺癌组（25例）及非结核性肺炎组（25例），以及35名健康体检者入选为表观健康组，ELISA法检测结核特异性T细胞IFN－γ和sHLA－G的表达，流式细胞分析法检测mHLA－G的表达，Kruskal－Wallis检验比较组间差异，各项指标诊断肺结核的价值用ROC曲线分析。 结果 肺结核患者TB－IGRA、sHLA－G和mHLA－G表达量的中位数分别为182.5 ng/L、99.44 U/ml和13.63%，高于肺癌（117.0 ng/L、82.3 U/ml和9.12%）、肺炎（80.84 ng/L、34.2 U/ml和10.92%）和健康组（30.5 ng/L、31.28 U/ml和8.18%）（P值〈0.05）。TB－IGRA、sHLA－G和mHLA－G诊断肺结核的ROC曲线下面积分别为0.842（95% CI：0.761～0.922）、0.746（95% CI：0.652～0.840）和0.706（95% CI：0.605～0.806）。当TB－IGRA、sHLA－G和mHLA－G的诊断界值分别为35 ng/L、60 U/ml和10%时，敏感性分别为88.24%、70.59%和67.65%，特异性分别为60%、72.94%和70.59%。3项指标联合检测的敏感性和特异性为88.24%和81.18%。 结论 肺结核患者结核特异性T细胞IFN－γ和HLA－G表达量均增加，虽然外周血中TB－IGRA检测具有较高的诊断价值，但与HLA－G联合检测显著提高诊断特异性，对肺结核的诊断具有一定临床应用价值。 展开更多

关键词 结核 肺 结核分枝杆菌 干扰素γ释放试验 hla-g抗原

原文传递

结直肠癌患者血浆外泌体sHLA-G表达及临床意义 被引量：7

2

作者 赵章生 章霞 +2 位作者 张锐利 颜卫华 林爱芬 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期347-353,共7页

目的检测结直肠癌(CRC)患者血浆外泌体可溶性HLA-G(sHLA-G)水平并评估其临床价值。方法回顾性研究。选取2017年5月至2018年8月浙江省台州医院收治的原发性CRC患者52例,同时选取25名健康体检者,20例良性结直肠息肉患者,20例慢性肠道炎症... 目的检测结直肠癌(CRC)患者血浆外泌体可溶性HLA-G(sHLA-G)水平并评估其临床价值。方法回顾性研究。选取2017年5月至2018年8月浙江省台州医院收治的原发性CRC患者52例,同时选取25名健康体检者,20例良性结直肠息肉患者,20例慢性肠道炎症作为对照。采用exoEasyMaxi试剂盒提取血浆外泌体,纳米颗粒示踪技术(NTA)和免疫印迹法用于鉴定外泌体。流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测外泌体sHLA-G水平,并用ROC曲线和约登指数(Youdenindex)分析其与癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)在CRC诊断中的差异。结果CRC血浆提取的外泌体颗粒大小峰值为101.1nm,表达CD63、CD81和TSG101蛋白。CRC患者外泌体sHLA-G[28.0(21.5~35.1)U/ml]显著高于良性结直肠息肉患者[19.7(16.2~22.5)U/ml,U=180.0,P<0.001]、肠道慢性炎症[19.9(16.7~25.2)U/ml,U=197.0,P<0.001]和健康对照组[19.6(16.8~21.3)U/ml,U=143.0,P<0.001],且术后sHLA-G[19.6(17.8~26.3)U/ml,325.5,P=0.015]显著低于术前水平。CRC患者外泌体sHLA-G在肿瘤分期(U=64.0,P=0.006)、淋巴结转移(U=81.0,P=0.003)及TNM分期(U=105.0,P=0.015)等分组中存在显著性差异。ROC曲线分析表明,FCM和ELISA方法测定外泌体sHLA-G、CEA、CA19-9的曲线下面积(AUC)分别为0.962±0.019、0.899±0.038、0.786±0.058、0.680±0.068。AUC经Z检验表明:在诊断CRC效能上,FCM测定外泌体sHLA-G优于CEA(Z=2.884,P=0.004)和CA19-9(Z=3.994,P<0.001),ELISA测定外泌体sHLA-G优于CA19-9(Z=2.811,P=0.005)。结论血浆外泌体sHLA-G与CRC患者的疾病进展相关,且在诊断效能上优于传统肿瘤标记物CEA和CA19-9。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 外泌体 hla-g抗原 生物标记 肿瘤

原文传递

胎盘组织中人类主要组织相容性抗原G mRNA的表达变化与特发性胎儿生长受限发病的关系 被引量：4

3

作者 范舒舒 张建平 +3 位作者 邵建永 谭剑平 刘玉昆 王蕴慧 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期249-252,共4页

目的探讨人类主要组织相容性抗原G(HLA G) mRNA在特发性胎儿生长受限(IFGR)产妇胎盘组织中的表达及其与IFGR发病的关系。方法采用原位杂交法,检测20例IFGR产妇(IFGR组)及28例正常产妇(对照组)胎盘组织中HLA GmRNA的表达水平和表达部位,... 目的探讨人类主要组织相容性抗原G(HLA G) mRNA在特发性胎儿生长受限(IFGR)产妇胎盘组织中的表达及其与IFGR发病的关系。方法采用原位杂交法,检测20例IFGR产妇(IFGR组)及28例正常产妇(对照组)胎盘组织中HLA GmRNA的表达水平和表达部位,并对两组产妇的胎盘组织进行病理学观察。结果( 1 )IFGR组产妇胎盘出现病理改变的发生率为75%(15 /20), 主要为慢性绒毛膜炎、胎盘梗死及绒毛发育迟缓;明显高于对照组的18% (5 /28),两组比较,差异有统计学意义(P=0 001)。(2)IFGR组产妇胎盘HLA GmRNA的阳性表达率为45% ( 9 /20),明显低于对照组的79% ( 22 /28 )。两组比较,差异有统计学意义(P= 0 017 )。( 3 )HLA GmRNA的阳性表达部位主要位于胎盘绒毛外细胞滋养细胞及合体滋养细胞的细胞质内,呈紫蓝色的颗粒状沉淀,轮廓清晰。(4)HLA GmRNA表达阴性者,出现胎盘病理改变的例数较HLA GmRNA表达阳性者明显增多(r=-0 638,P=0 008 )。结论IFGR产妇胎盘组织中HLA GmRNA表达水平明显下降,HLA GmRNA的异常表达可能参与了IFGR的发病过程。 展开更多

关键词 人类主要组织相容性抗原 特发性胎儿生长受限 胎盘组织 表达变化 绒毛外细胞滋养细胞 mRNA表达 合体滋养细胞 胎盘病理改变 原位杂交法 病理学观察 阳性表达率 hla-g 对照组 绒毛膜炎 发育迟缓 胎盘梗死 发病过程 异常表达

原文传递

人白细胞抗原G1及G5在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达 被引量：4

4

作者 赫英东 李雨利 陈倩 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期29-32,共4页

目的 探讨重度子痫前期（sPE）患者胎盘组织中人白细胞抗原（HLA）G1及G5表达的变化.方法 选取早发型及晚发型sPE患者各10例、早产及正常足月妊娠产妇各10例,通过蛋白印迹法及免疫组化方法检测胎盘组织中HLA-G1及G5蛋白的表达.结果 与... 目的 探讨重度子痫前期（sPE）患者胎盘组织中人白细胞抗原（HLA）G1及G5表达的变化.方法 选取早发型及晚发型sPE患者各10例、早产及正常足月妊娠产妇各10例,通过蛋白印迹法及免疫组化方法检测胎盘组织中HLA-G1及G5蛋白的表达.结果 与早产产妇相比,HLA-G1蛋白在早发型sPE患者的胎盘组织中表达量明显减少,分别为2.9±1.1、2.4±0.6,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）；与正常足月妊娠产妇相比,晚发型sPE患者的胎盘组织中HLA-G1蛋白的表 达量明显减少,分别为4.2±2.4、3.5±2.1,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.与正常足月妊娠产妇相比,HLA-G5蛋白在晚发型sPE患者的胎盘组织中表达量增加,分别为1.1±0.9、1.8±1.1,两者比较,差异有统计学意义（P＜0.05）；与早产产妇相比,HLA-G5蛋白在早发型sPE患者胎盘组织中的表达量无明显变化（分别为1.4±0.7、1.6±0.9,P＞0.05）.HLA-G1蛋白在早产产妇胎盘组织中的表达量较正常足月妊娠者减少（P＜0.05）；HLA-G5蛋白在早产及正常足月妊娠产妇胎盘组织中的表达量无明显差异（P＞0.05）.HLA-G1及G5蛋白主要在胎盘的绒毛外细胞滋养细胞中有表达,在血管周围及胚外中胚层中也有高表达.结论（1）HLA-G1在早发型及晚发型sPE患者胎盘组织中的表达均减少.（2）HLA-G5在早发型及晚发型sPE患者胎盘组织中的表达均增加,这一增加趋势在晚发型sPE患者中更为明显.（3）在妊娠晚期,HLA-G1在早产产妇胎盘组织中的表达较少.（4）胎盘组织中能够检测到HLA-G1及G5的表达,其主要位于胎盘的绒毛外细胞滋养细胞中. 展开更多

关键词 先兆子痫 hla抗原 组织相容性抗原Ⅰ类 胎盘

原文传递

HLA-G蛋白及基因在子宫内膜异位症在位和异位内膜中的表达 被引量：4

5

作者 王炎秋 邢福祺 陈士岭 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期117-119,共3页

目的探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)基因及蛋白在子宫内膜异位症(EM)在位和异位内膜组织中的表达及其生物学意义。方法应用免疫组化法和原位杂交法检测38例子宫腺肌症、30例卵巢子宫内膜异位症异位内膜及在位内膜、20例子宫肌瘤患者(对照组... 目的探讨人类白细胞抗原G(HLA-G)基因及蛋白在子宫内膜异位症(EM)在位和异位内膜组织中的表达及其生物学意义。方法应用免疫组化法和原位杂交法检测38例子宫腺肌症、30例卵巢子宫内膜异位症异位内膜及在位内膜、20例子宫肌瘤患者(对照组)在位子宫内膜中HLA-G蛋白和基因的表达。结果HLA-G蛋白和基因在子宫内膜异位症患者异位和在位内膜组织中的表达均明显高于对照组(P<0·01),但在异位内膜和在位内膜的表达无明显差异(P>0·05)。HLA-G蛋白在EM不同临床分期的表达无明显差异(P>0·05),在增生期和分泌期子宫内膜的表达无差异(P>0·05)。结论HLA-G的表达可能与子宫内膜异位症的发病有关。 展开更多

关键词 hla-g抗原 子宫内膜异位症 原位杂交 免疫组织化学

下载PDF 职称材料

HLA-G基因在星形细胞肿瘤中的表达及意义 被引量：1

6

作者 曾而明 袁贤瑞 +3 位作者 姜维喜 罗端午 沈沉浮 钟哲 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期373-376,共4页

目的分析HLA-GmRNA在星形细胞肿瘤的表达情况,探讨其表达是否与肿瘤的恶性转化有关。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测49例星形细胞肿瘤、11例脑膜瘤、7例脑损伤组织中HLA-GmRNA表达。结果7例正常脑组织均为阴性,而11例脑膜... 目的分析HLA-GmRNA在星形细胞肿瘤的表达情况,探讨其表达是否与肿瘤的恶性转化有关。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测49例星形细胞肿瘤、11例脑膜瘤、7例脑损伤组织中HLA-GmRNA表达。结果7例正常脑组织均为阴性,而11例脑膜瘤中仅有2例表达HLA-GmRNA,其中1例为非典型脑膜瘤。49例星形细胞肿瘤中.6例Ⅰ级病例中,未检测到有HLA-GmRNA表达;20例Ⅱ级病例中阳性表达HLA-GmRNA有6例(30%);16例Ⅲ级病例中有14例(87.5%)阳性表达;7例Ⅳ级有6例(85.7%)阳性表达。HLA-G在星形细胞肿瘤中以HLA-G3mRNA表达为主。星形细胞肿瘤HLA-GmRNA阳性表达率明显高于脑膜瘤(P<0.05)和正常脑组织(P<0.01),高度恶性星形细胞肿瘤HLA-GmRNA阳性表达率高于脑膜瘤(P<0.01)。结论HLA-G基因在星形细胞肿瘤有表达,且表达情况与病理分级有关。HLA-G基因表达可能参与胶质瘤的免疫耐受。 展开更多

关键词 胶质瘤 hla抗原 hla—g 免疫耐受

下载PDF 职称材料

NK细胞在重度子痫前期发病中的作用 被引量：2

7

作者 张展 贾莉婷 +7 位作者 侯磊 王雪梅 常彩红 杨如镜 张曦 刘胜洪 郑芳 龚非力 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期2457-2461,共5页

目的:探讨NK细胞在重度子痫前期发病中的作用及其机制。方法:采集重度子痫前期晚孕、正常晚孕孕妇外周血及其新生儿脐血,PERCOLL分离NK细胞,SAP法计数,MTT法检测其增殖活性,[51CR]释放法检测其杀伤活性,免疫组织化学法检测胎盘蜕膜组织N... 目的:探讨NK细胞在重度子痫前期发病中的作用及其机制。方法:采集重度子痫前期晚孕、正常晚孕孕妇外周血及其新生儿脐血,PERCOLL分离NK细胞,SAP法计数,MTT法检测其增殖活性,[51CR]释放法检测其杀伤活性,免疫组织化学法检测胎盘蜕膜组织NK细胞数量及HLA-G蛋白表达水平。结果:①重度子痫前期患者外周血、蜕膜组织及其新生儿脐血中NK细胞数量均显著高于正常晚孕组(P<0．05);②重度子痫前期患者外周血及其新生儿脐血NK细胞增殖和杀伤活性均高于正常晚孕组(P<0．05);③重度子痫前期患者胎盘蜕膜HLA-G蛋白表达水平显著低于正常晚孕组(P<0．05)。结论:重度子痫前期患者NK细胞功能异常增强,可能参与疾病发生。 展开更多

关键词 子痫 杀伤细胞 天然 HIA—g抗原 蜕膜

下载PDF 职称材料

HLA-G在卵巢癌细胞株SKOV-3中表达的实验性研究 被引量：1

8

作者 王琳 董建春 +2 位作者 汪运山 栾英姿 徐淑媛 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2008年第2期125-127,共3页

目的:检测卵巢癌细胞株SKOV-3中人白细胞抗原G(human leucocyte antigen-G,HLA-G)的表达。方法:用逆转录酶聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)、免疫细胞化学法及流式细胞术检测卵巢癌细胞株SKOV-... 目的:检测卵巢癌细胞株SKOV-3中人白细胞抗原G(human leucocyte antigen-G,HLA-G)的表达。方法:用逆转录酶聚合酶链式反应(reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-PCR)、免疫细胞化学法及流式细胞术检测卵巢癌细胞株SKOV-3中HLA-G的表达,以绒毛膜癌细胞株JEG-3中HLA-G的表达为阳性对照。结果:(1)免疫细胞化学显色显示SKOV-3细胞膜及细胞浆内均有HLA-G的表达;(2)RT-PCR结果表明,SKOV-3细胞中有HLA-G mRNA表达;(3)流式细胞术结果提示,SKOV-3细胞中HLA-G阳性率是33.77%。结论:卵巢癌细胞株SKOV-3中HLA-G mRNA及HLA-G蛋白表达为阳性。 展开更多

关键词 抗原 hla—g SKOV-3细胞株 JEg-3细胞株 卵巢肿瘤

下载PDF 职称材料

HLA—G蛋白在肿瘤组织及患者血清中的表达及其在肿瘤免疫逃逸中的作用 被引量：1

9

作者 刘玮 凌志强 毛伟敏 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2012年第11期831-833,共3页

随着对人类白细胞抗原G（HLA—G）蛋白作用机制的深入了解，越来越多的研究发现HLA—G与肿瘤的免疫逃逸密切相关。大量研究显示在肿瘤患者的血浆、肿瘤组织中均可检测到HLA—G蛋白、mRNA的表达。

关键词 肿瘤 人类白细胞抗原g 免疫逃逸 肿瘤

原文传递

人类组织相容性抗原-GmRNA表达与不明原因习惯性流产关系的初步研究 被引量：1

10

作者 张小滢 范丽安 +3 位作者 许玲娣 李伟毅 杨珏琴 刘伯宁 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第10期597-599,I014,共3页

目的　探讨人类组织相容性抗原Ｇ（ＨＬＡＧ） ｍＲＮＡ 的表达与不明原因习惯性流产（ＲＳＡ） 的关系。方法　用原位杂交的方法检测正常妊娠早期、晚期孕妇胎盘和ＲＳＡ患者经免疫治疗并成功分娩的胎盘母胎界面处的ＨＬＡＧｍ... 目的　探讨人类组织相容性抗原Ｇ（ＨＬＡＧ） ｍＲＮＡ 的表达与不明原因习惯性流产（ＲＳＡ） 的关系。方法　用原位杂交的方法检测正常妊娠早期、晚期孕妇胎盘和ＲＳＡ患者经免疫治疗并成功分娩的胎盘母胎界面处的ＨＬＡＧｍＲＮＡ的表达。结果　正常妊娠早期、晚期孕妇胎盘母胎界面均有ＨＬＡＧｍＲＮＡ的阳性表达，阳性表达位于绒毛内（ 或） 外细胞滋养细胞，以及合体滋养细胞的胞浆内。ＲＳＡ患者免疫治疗后的胎盘均不表达ＨＬＡＧｍＲＮＡ，免疫治疗没有调节ＨＬＡＧ ｍＲＮＡ 表达的作用。结论　ＨＬＡＧ 可能与ＲＳＡ的发病原因没有直接的关系；与胎儿存活也无直接关系。 展开更多

关键词 组织相容性抗原 流产 习惯性流产 mRNA hla-g

原文传递

HOTAIR上调miR-152靶向调控HLA-G的生物信息作用预测与验证

11

作者 李晓娟 周芝熠 +1 位作者 王珏 钱源 《天津医药》 CAS 北大核心 2019年第10期1014-1019,共6页

目的预测并验证HOX转录反义RNA(HOTAIR)通过上调miR-152-3p对人类白细胞抗原-G(HLA-G)靶向调控作用。方法利用生物信息学网站及软件预测miR-152-3p与HOTAIR和HLA-G基因3′非翻译区(UTR)的结合位点,设计合成含有与miR-152-3p结合位点的HO... 目的预测并验证HOX转录反义RNA(HOTAIR)通过上调miR-152-3p对人类白细胞抗原-G(HLA-G)靶向调控作用。方法利用生物信息学网站及软件预测miR-152-3p与HOTAIR和HLA-G基因3′非翻译区(UTR)的结合位点,设计合成含有与miR-152-3p结合位点的HOTAIR和HLA-G基因3′-UTR序列及其突变序列,并构建HOTAIR和HLA-G野生型和突变型双荧光素酶报告基因载体。经双酶切电泳和测序鉴定后,HOTAIR和HLA-G野生型与突变型双荧光素酶报告基因载体分别与miR-152-3p模拟物(mimics)和miRNA无义序列阴性对照(mimicsNC)共转染HTR-8/SVneo细胞,检测荧光素酶活性,观察miR-152-3p对HOTAIR和HLA-G表达的影响。结果双酶切电泳和测序结果显示,野生型和突变型的HOTAIR和HLA-G基因载体片段大小、序列与实验预期一致,载体构建成功。转染miR-152-3pmimics后的HOTAIR及HLA-G野生型荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而对突变型HOTAIR和HLA-G载体的荧光素酶表达无明显抑制作用(P>0.05)。结论HOTAIR通过上调miRNA-152-3p靶向调控HLA-G。 展开更多

关键词 hla-g抗原 基因 报告 HOTAIR miR-152-3p HTR-8/SVneo 双荧光素酶报告基因

下载PDF 职称材料

HLA—G与肾移植术后巨细胞病毒活动性感染的相关性研究 被引量：4

12

作者 肖漓 石炳毅 +5 位作者 高钰 何秀云 许晓光 黄海燕 周文强 韩永 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期534-538,共5页

目的研究HLA-G与肾移植术后巨细胞病毒（CMV）活动性感染的相关性，分析其作用机制及意义。方法初次。肾移植受者215例，按照术后是否发生CMV活动性感染将受者分为CMV阳性组和CMV阴性组，采用流式细胞术检测膜结合型HLA-G1（mHLA-G1）... 目的研究HLA-G与肾移植术后巨细胞病毒（CMV）活动性感染的相关性，分析其作用机制及意义。方法初次。肾移植受者215例，按照术后是否发生CMV活动性感染将受者分为CMV阳性组和CMV阴性组，采用流式细胞术检测膜结合型HLA-G1（mHLA-G1）的表达，采用酶联免疫吸附试验检测可溶性HLA-G5（sHLA-G5）的表达，采用逆转录聚合酶链法检测HLA-GmRNA的表达，采用蛋白质印迹法验证sHLA-G5的表达，采用免疫组织化学法和HE染色观察移植肾组织中HLA-G的表达，采用ROC曲线分析sHLA-G5水平预测CMV活动性感染的Cutoff值。结果术前两组间HLA-G表达的差异无统计学意义（P〉0．05）。术后两组间外周血淋巴细胞表面mHLA-G1均呈低表达，CMVpp65阳性时亦无明显变化。CMV阳性组外周血中CDl4^＋mHLA-G1^＋细胞显著升高（P〈0．05），达到（45．53±17．32）％，转阴后下降至（10．22±5．78）％。CMV阳性组外周血中sHLA-G5表达水平明显升高（P〈0．05），其预测CMV活动性感染的最适Cutoff值为202．9μg／L，具有很高的诊断准确性。CMV阳性组受者外周血中HLA-GmRNA的表达水平均显著高于CMV阴性组（P〈0．05）。12例CMV活动性感染受者移植肾活检样本中，10例肾小管上皮细胞HLA-G表达呈阳性。结论HLA-G在外周血中的表达显著升高和移植肾肾小管上皮细胞的阳性表达可能是保护移植肾功能的机制之一。以sHLA-G5表达水平202．9μg／L作为Cutoff阈值，具有很好的判断CMV活动性感染的价值。 展开更多

关键词 肾移植 hla抗原g 巨细胞病毒

原文传递

新生猪胰岛细胞的HLA-G_1基因转染

13

作者 曹荣华 韩军艳 +5 位作者 吴雄文 王树森 陈栋 祁洪刚 夏振雄 陈实 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期233-235,共3页

目的探讨HLA-G1基因转染新生猪胰岛细胞的可行性,检测其表达和功能状况。方法体外分离纯化新生猪胰岛细胞,脂质体载体转染HLA-G1基因。免疫荧光法检测HLA-G1基因在胰岛细胞上的表达状况;51Cr释放实验分析其对人NK细胞细胞毒的抑制作用... 目的探讨HLA-G1基因转染新生猪胰岛细胞的可行性,检测其表达和功能状况。方法体外分离纯化新生猪胰岛细胞,脂质体载体转染HLA-G1基因。免疫荧光法检测HLA-G1基因在胰岛细胞上的表达状况;51Cr释放实验分析其对人NK细胞细胞毒的抑制作用。结果新生猪胰岛细胞HLA-G1基因表达率大约为50%,体外转染24-48 h达高峰;混合淋巴细胞培养(胰岛细胞+ NK细胞)后,空质粒转染组的胰岛细胞溶解率为71.57%,而转染组胰岛细胞溶解率为53.5%。结论利用脂质体Genejammer转染体外培养的新生猪胰岛细胞,可以获得靶基因的瞬时高效表达; HLA-G1基因转染可以有效抑制NK细胞对异种胰岛的细胞毒作用。 展开更多

关键词 猪胰岛细胞 基因转染 新生 hla-g1基因 混合淋巴细胞培养 脂质体载体 免疫荧光法 人NK细胞 细胞毒作用 功能状况 分离纯化 表达状况 抑制作用 实验分析 体外转染 体外培养 高效表达 异种胰岛 溶解率 表达率 靶基因 检测

原文传递